酶联免疫吸附法在沙门氏菌检测中临床应用

目的为了探讨酶联免疫吸附法在沙门氏菌检测中临床应用效果。方法本研究于2012年1月～2012年6月对我院接受的临床样本应用沙门氏菌特异性单抗3～47～26建立竞争ELISA法来进行沙门氏菌检测,通过与国标法对样品进行比较检测,分析该方法在沙门氏菌检测中的敏感性、特异性和准确性。结果国标法的检测限为4.9×101CFU/g粪便;C～ELISA为5.0×104CFU/g粪便。ELISA法检测的敏感性为94.4%,特异性为97.7%,准确性为97.1%。结论酶联免疫吸附法在沙门氏菌的临床检测中具有良好的特异性、准确性和敏感性,值得推广使用。     

两种甲胎蛋白血清学检测方法比较

目的：对甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）与甲胎蛋白（AFP）化学发光法检测方法的敏感性和特异性进行对比,评价两种方法在甲胎蛋白检测中的应用效果。方法：用甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）与甲胎蛋白（AFP）化学发光法检测法同时对100份肝硬化患者血清标本进行AFP检测。结果：在甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）检测出37例阳性标本中,甲胎蛋白（AFP）化学发光法检测方法同样检出阳性38例,敏感性为94.29%;酶联法检出阳性20例,敏感性为57.14%。（AFP）检测试纸（胶体金法）检出的37例阳性中,有1例确证为阴性,特异性为99.9%;酶联法检出的22例阳性中,2例确证为阴性,特异性为99.32%。两种方法同为阳性的38例标本,经确证均为阳性。有1例经确证为阳性的标本为甲胎蛋白（AFP）化学发光法检出而甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）法未能检,结论：甲胎蛋白（AFP）化学发光法方法的敏感性远远大于甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）法,而特异性差别不大,甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）方法更适合于血液的甲胎蛋白（AFP）筛查。     

两种梅毒检测方法比较

目的：分析研究酶联免疫吸附实验(ELISA)与免疫胶体金法在梅毒检测中各自的优劣和适用性。方法选取该院门诊及住院患者8600例,采取静脉血液5 mL,待血清析出后,3000 r/min离心5 min,取血清分析;所有患者均先用ELISA法进行梅毒检测,再用免疫胶体金法复检;比较两种方法检测出的阳性数、阴性数。结果8600例患者经ELISA检测,阳性155例(1.8%);经免疫胶体金法检测,阳性105例(1.22%);两种梅毒检测方法结果比较2=9.763,P<0.01,差异具有统计学意义。结论梅毒检测中ELISA与免疫胶体金法比较,ELISA阳性检出率更高。同时,为确保梅毒确诊率,还应充分结合患者各方面资料以及其他检测方法综合判断。     

两种不同方法测定乙肝表面抗原结果分析

随着医学科技的不断发展，临床检验诊断技术正朝着应用范围广、符合率高、取材少，简便、快速、灵敏、重复性好、无放射性污染等要求发展，来满足临床需要。如用胶体金试纸法检测乙肝表面抗原（HBsAg）就得到临床上的好评，它已在幼儿体检和胃肠镜检查等方面开展。为了了解胶体金试纸法检测结果的可靠性，我科同时用酶联免疫吸附试验（ELISA）法进行测定，共测定448份标本，报道如下：[第一段]     

3种方法检测乙型肝炎病毒表面抗原的敏感性比较

目的 :通过比较检测乙型肝炎病毒表面抗原 (HBs Ag)的 3种方法 ,即胶体金免疫层析法 (GICA)、酶联免疫吸附法 (EL ISA)和时间分辨免疫荧光法 (TRFIA) ,观察敏感性。方法 :用上述 3种方法同步检测 1 0 3例患者血样本和质控品 ,经χ2 检验 ,对测定结果进行分析。结果 :3种检测方法对 HBs Ag的阳性检出率分别为 TRFIA 6 6 .99% ,GICA6 5 .0 5 % ,EL ISA6 4 .0 8%。结论 :3种方法检测敏感性 TRFIA>GICA>EL ISA。     

3种方法检测HBsAg弱阳性结果比较

目的了解时间分辨荧光（TRFIA）法、酶联免疫吸附试验（ELISA）法及胶体金免疫层析试验（GICA）等检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）弱阳性标本结果的差异。方法用TRFIA法检测HBsAg为弱阳性的血清标本100份和阴性血清标本101份,分别用ELISA及GICA方法检测HBsAg含量,对检测结果进行比较分析。结果TRFIA法HBsAg弱阳性标本100份中,ELISA法检测阳性97例,符合率97．0％,特异性96．0％;GICA法检测阳性83例,阳性符合率83．0％,特异性95．0％OELISA法与TRFIA法检测阳性率间差异无统计学意义（P〉0．05）,但GICA检测阳性率分别低于ELISA法及TRFIA法（P〈0．05）。结论ELISA法检测低浓度HBsAg标本灵敏度与TRFIA法相似,但GICA法灵敏度低于TRFIA法及ELISA法,GICA法检测存在一定的漏捡率。     

抗双链DNA抗体检测方法的比较

1 材料和方法。1．1 检材 本院住院及门诊确诊患者送检血清96例。其中系统红斑狼疮(SLE)41例，干燥综合征(SS)21例，非结缔组织病(non—MTCD)17例，正常人17名。     

ELISA GICA两种方法检测低水平乙型肝炎病毒表面抗原的结果分析

目的 比较酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金免疫层析法(GICA)两种方法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)低值阳性标本的结果符合率.方法 用ELISA、GICA两种方法对192例标本进行乙型肝炎病毒表面抗原检测,以时间分辨荧光免疫法(IMFA)结果为考察对象,将192例患者分为A组、B组、C组3组,分别统计ELISA、GICA方法在各组的阳性率.结果 A组、B组、C组的GICA法检测HBsAg阳性符合率分别为9.09%,56.79%,96.43%,A组显著低于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05);A组、B组、C组ELISA法检测HBsAg阳性符合率分别为54.55%,98.77%,98.21%,A组显著低于B组、C组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 GICA和ELISA检测各有优缺点,在临床实际工作中应科学合理选择.     

一种快速定量检测人血清载脂蛋白J的方法

Desilva等 [1 ]于 1996年运用免疫吸附层析结合反向高效液相层析技术从人血清中分离提纯出一种新的载脂蛋白 ,命名为 apo J。结构分析揭示 apo J和 sp40 ,40、CL I、PADHC、NAI/ A 2、PTB16及 K6 11等为同一蛋白。 apo J在人体不同组织广泛存在 ,提示其基本而重要的生理功能。已知 apo J参与多种生理过程 ,如脂质的转运 ,补体功能的调节 ,精子的成熟、组织的再生及生物活性肽的转运等。 apo J在许多病理过程中有所表达 ,如肾小球肾炎、囊性肾病、肾小管损伤、动脉粥样硬化、心肌梗死、神经退行性疾病等。为对 apo J进行深入广泛的…     

对比3种不同免疫检验方法检测HIV抗体结果的可靠性

目的 对比酶联免疫吸附试验、胶体金免疫层析法、化学发光法检测人体免疫缺陷病毒(HIV)抗体的可靠性.方法 选取2018年9月至2020年9月于本院检测确诊为HIV的143例患者,采集血液样本,分别行酶联免疫吸附试验、胶体金免疫层析法、化学发光法检测,对比HIV抗体的检测结果.结果 酶联免疫吸附试验检测HIV抗体灵敏度为92.78％,特异度为93.48％,准确率为93.01％;胶体金免疫层析法检测HIV抗体灵敏度为91.75％,特异度为84.78％,准确率为89.51％;化学发光法检测HIV抗体灵敏度为98.97％,特异度为95.65％,准确率为97.90％;化学发光法检测HIV抗体的灵敏度高于酶联免疫吸附试验和胶体金免疫层析法,差异有统计学意义(P<0.05);酶联免疫吸附试验、化学发光法检测HIV抗体的特异度、准确率均高于胶体金免疫层析法,差异有统计学意义(P<0.05).结论 化学发光法检测HIV抗体效能更高,疾病筛查时可有效避免漏检发生,值得临床推广运用.     

三种方法检测沙门氏菌的比较研究

目的探讨建立快速、准确的沙门氏茵检测方法。方法采用常规方法、Vitek免疫诊断分析系统（VI-DAS）和荧光RT—PCR对沙门氏茵进行检测，并对其灵敏性和特异性进行比较。结果荧光RT—PCR的灵敏度最高。VIDAS及荧光RT—PCR检测沙门氏茵的特异性均达100％。结论VIDAS及荧光RT—PCR均能对沙门氏茵进行快速检测，在应对突发公共卫生事件中将能发挥重要作用。     

结核病实验室3种快速检测方法的评价

用聚合酶链反应技术建立的扩增结核杆菌复合体特异重复序列ＩＳ９８６基因的方法和用单克隆抗体ＴＢ１５－Ｃ３经酶联免疫吸附测定夹心法检测结核杆菌特异性抗原决定簇，以及用抗酸染色的方法，对１０种抗酸杆菌，２种非分枝杆菌进行检测。     

547例患者流感病毒胶体金法快速检测结果及临床分析

目的总结胶体金免疫层析法(GICA)快速检测流感样病例的结果并对其临床情况进行分析。方法对2013年1月11～31日547例流感样病例进行GICA快速病原学检测,分为阳性组与阴性组,对比分析两组患者一般情况、临床特点及疗效。60例同时进行GICA和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,评价两种检测方法的符合率。结果 547例患者GICA检测总阳性率为40.8%。阳性组的流行病学史、咳嗽、咽痛、全身酸痛、奥司他韦和抗菌药物使用情况与阴性组比较,差异有统计学意义(P﹤0.05);两组一般情况,临床症状中的咯痰、头痛、腹泻、鼻塞、流涕,白细胞检查结果的差异均无统计学意义(P﹥0.05)。RT-PCR与GICA快速检测流感结果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对流感样病例的诊疗中除了重视临床表现、流行病学史外,结合GICA快速检测流感技术,可更有针对性地对患者进行临床诊治。     

胶体金法检测HBsAg漏检原因分析

目的:采用酶联免疫方法对胶体金试纸法检测HBsAg的结果进行复检,以防漏检而造成医源性传播。方法:采用卫生部临检中心已明确预期阴、阳结果的HBsAg质控血清,经酶联免疫吸附试验(ELISA)对胶体金试纸条检测5 970份阴性血清进行复检。结果:5 970份胶体金试纸条阴性标本,经ELISA法检测,其中有47份血清为阳性结果,漏检率为0.79%。再次用胶体金试纸条对47份阳性血清(ELISA)进行检测,检出7份标本为阳性,占漏检数的14.89%,其中10~20 min内检出6份阳性标本,25 min检出1份阳性标本。41份两种方法检测结果不符的样本中,3份样本ELISA法结果OD值≥3.0,占漏检数的7.32%,29份样本OD≤0.5,占漏检数的70.73%,经统计学分析,两种方法检出率有显著性差异。P<0.05,χ2=43.57。结论:胶体金试纸检测法受环境和人为因素影响较大,灵敏度较ELISA法低。     

双重PCR检测沙门氏菌和变形杆菌方法的建立

目的:建立快速鉴定腹泻患者粪便标本中和变形杆菌的双重聚合酶链式反应（PCR）方法。方法:针对沙门氏菌属特异基因invA和变形杆菌属特异基因tuf分别设计特异性引物,2013年5月-10月天津某医院肠道门诊腹泻患者粪便标本经SS培养基分离培养后,对可疑菌株同时进行invA-tuf基因双重PCR鉴定和生化鉴定,比较两种方法结果的一致性;对沙门氏菌进一步行血清学分型。结果:双重PCR和生化反应都各自鉴定得到沙门氏菌31株和变形杆菌62株,而且二者鉴定结果完全一致;31株沙门氏菌包括鼠伤寒、肠炎等常见血清型和格兰扁、菲尔摩雷等罕见血清型,均能扩增出283 bp长度片段,62株变形杆菌包括48株奇异变形杆菌、8株普通变形杆菌、2株潘氏变形杆菌、4株产黏液变形杆菌,均能扩增出541bp长度片段。 结论:invA-tuf基因双重PCR方法能够快速可靠地鉴定SS培养基上生长的沙门氏菌和变形杆菌。     

梅毒螺旋体抗体三种检测方法的价值比较

目的比较三种血清梅毒螺旋体抗体（TPHA）检测方法,优选一种简便、准确的TPHA检测方法。方法采用临床上常用的胶体金法、酶联免疫吸附试验法（ELISA法）、化学发光微粒子免疫分析法（CMIA法）对400例标本进行TPHA检测,分别计算ELISA法、CMIA法、胶体金法检测结果的阳性率、灵敏度和特异度。结果 CMIA法检测TPHA的阳性率、灵敏度和特异度分别为74.50%、99.67%和100%;胶体金法的阳性率、灵敏度和特异度分别为41.25%、55.18%和100%;ELISA法的阳性率、灵敏度和特异度分别为60.25%、80.60%和93.46%。CMIA法检测阳性率和敏感性明显高于ELISA法和胶体金法（P〈0.05）,而特异性高于ELISA法（P〈0.05）。结论CMIA法检测TPHA特异性强、灵敏度高,具有很高的临床应用价值。     

三种沙门菌分离培养基的性能评价

目的对XLD琼脂、SS琼脂、HE琼脂3种沙门菌分离培养基的性能进行评价。方法选取3个不同批次的待测样品,以生长率、选择性和特异性为测试指标,分别重复测定20次。结果标准菌株鼠伤寒沙门菌CMCC(B)50115和福氏志贺菌CMCC(B)51572在SS琼脂、XLD琼脂、HE琼脂上三批次培养基中的生长率均大于0.5,且三批次间差异无统计学意义(P>0.05);亚利桑那沙门菌CMCC(B)47001在XLD琼脂上三批次培养基中的生长率均在0.9以上,三批次间差异亦无统计学意义(P>0.05)。3株目标菌在受试三批次培养基上均呈现正常的生理生化特性,形成具特征性的菌落。粪肠球菌ATCC29212在3种培养基上生长均受抑制。结论根据ISO/TS11133.2-2003培养基的性能评价标准判断,XLD琼脂、SS琼脂、HE琼脂培养基均符合标准要求,整体性能稳定、一致。     

ELISA法检测乙肝标志物的临床应用

目的探讨ELISA法检测健康体检者血清中HBsAg的临床效果。方法用三个不同公司生产的乙肝表面抗原（HBsAg）检测试剂盒,通过ELISA法检测220例健康体检患者血清中HBsAg水平,检测出的阳性标本再用免疫胶体金试纸条检测,比较三个不同公司生产试剂盒检测阳性率及与金标试纸条法检测的一致性。结果江莱、万泰、新创三家厂家生产的试剂盒检测HBsAg阳性率分别为12.3%（27/220）、9.5%（21/220）、13.6%（30/220）。新创阳性率最高。阳性血清经金标试纸条检测阳性结果分别为24、18、27例。新创试剂盒ELISA法检测抗原包被浓度为1.25 IU/L时,仍可检出阳性标本。其他两个试剂盒最低检出浓度为2.5 IU/L,差异无统计学意义（χ2=1.25,P〉0.05）。结论不同厂家ELISA试剂盒检测结果存在差异,临床检测时需综合几个试剂盒结果及其他试验进行印证。     

实时荧光PCR同时检测丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌方法的建立和应用

目的建立丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的实时荧光PCR快速检测方法,用于沙门菌属内的分型鉴定。方法根据GenBank公布的丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,建立实时PCR检测方法。结果检测体系灵敏度高,纯DNA和菌液的最低检出限分别可达10fg和20CFU/反应体系;特异性好,对71株细菌的检测符合率达100%。20株沙门菌采取盲号模拟血培养标本进行血培养检测及鉴定,检出5株丙型副伤寒沙门菌和4株猪霍乱沙门菌,与试验的菌株相符。70份食品中用实时荧光PCR同时检测丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌均为阴性,而用传统方法分离培养未检出。结论建立的实时PCR检测方法可以快速、特异、灵敏地检测出丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌。     

Enrichment-ELISA for detection of Salmonella typhi from food and water samples

Objective Development of monoclonal antibody based sandwich enzyme linked immunosorbant assay （sELISA） for rapid detection of Salmonella enterica serovar typhi （S. typhi） from food and water samples and optimization of enrichment procedures for use with the developed sELISA to increase the detection sensitivity of the assay. Methods Spleen cells from BALB/c mice immunized with flagellin （H=d） antigen of S. typhi were fused with Sp2/0 myeloma cells. The hybridoma cell line specific to H=d antigen was established, characterized and ascites raised against one of these clones. The hyperimmune serum to flagellin antigen was raised in New Zealand White rabbits. An sELISA was developed using polyclonal antibody as capture and monoclonal antibody as detection antibody. To design the efficient culture strategies for use with the sELISA, different pre-enrichment and enrichment broths were evaluated. The media included buffered peptone water （BPW） and brain heart infusion broth for pre-enrichment and selenite F broth and Rappaport-Vassiliadis broth as enrichment broths. The developed sELISA with preceding enrichment step in BPW （Enrichment-ELISA） was evaluated in various food samples artificially inoculated with S. typhi bacteria. Various food （30） and water （35） samples collected from field were also tested by Enrichment-ELISA and culture method. Results Out of four specific clones to H=d antigen, one clone （# 2/56, IgG2a isotype） was used in sELISA. The sELISA had the detection limit of 10^4-10^5 cfu of S. typhi. Of the various broths used with sELISA, BPW was found to yield maximum ELISA values. Enrichment-ELISA, when tested in artificially inoculated food samples, generally, could detect 10^2 S. typhi cfu/mL within 10 h from various food rinses （meat, vegetable） and milk samples. After overnight enrichment in BPW, as less as 2 bacteria per 10 mL of milk, meat rinse, and chicken rinse could be detected. Only one of the field samples （water） gave false positive result by Enrichment-