CD4+CD25+调节性T细胞在类风湿关节炎患者免疫耐受失衡中的变化

目的 检测CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺ 调节性T细胞（Treg）在类风湿关节炎（RA）患者外周血和关节液中的变化,探讨该细胞亚群在RA免疫耐受失衡中的作用。方法 采用流式细胞术检测活动期RA患者关节液、外周血和健康对照外周血CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺ Treg细胞比例;实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测外周血和关节液单个核细胞FoxP3基因的表达。分析外周血CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg细胞比例与病情活动指标的相关性。结果 活动期RA患者关节液CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺ Treg细胞比例（7.56%±2.89%）高于外周血（1.84%±0.97%）和健康对照外周血（2.19%±0.54%）,差异均有统计学意义（P<0.01）;RA患者抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体（ACPA）阴性组外周血CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg细胞水平（2.85%±0.87%）高于ACPA阳性组（1.40%±0.63%,P<0.01）。活动期RA患者关节液单个核细胞FoxP3基因表达水平高于RA患者外周血和健康对照外周血（P<0.01）;活动期RA患者外周血CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺ Treg细胞比例与疾病活动指标无相关性（P>0. 05）。结论 RA患者关节液CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺ Treg细胞的变化更能反映RA炎症部位免疫耐受失衡机制。     

HIV/AIDS患者CD4+T淋巴细胞检测结果与抗病毒治疗效果

目的 探讨某地区HIV/AIDS患者CD4⁺T淋巴细胞检测结果与抗病毒治疗效果,同时进行相关性分析。方法 2013年2月~2016年1月选择在笔者医院诊治的HIV/AIDS患者60例作为观察组,同期选择在笔者医院进行健康体检的健康人60例作为对照组,观察组都给予HAART标准治疗方案,观察组在治疗前后、对照组在入院时都进行CD4⁺T淋巴细胞与细胞因子表达的检测。结果 观察组外周血的CD4⁺CD45RA⁺、CD4⁺CD28⁺、CD4⁺CD45RO⁺的细胞比例明显低于对照组（P<0.05）,两组CD4⁺CD25⁺的细胞比例对比,差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,观察组的血浆IL-10和TGF-β1含量都显著升高（P<0.05）。治疗后观察组的CD4⁺CD45RA⁺、CD4⁺CD28⁺、CD4⁺CD45RO⁺的细胞比例都明显上升（P<0.05）,而血浆IL-10和TGF-β1含量明显降低（P<0.05）。在观察组中,Spearman秩相关分析显示CD4⁺CD45RA⁺、CD4⁺CD28⁺、CD4⁺CD45RO⁺的细胞比例与IL-10、TGF-β1水平均呈负相关（P<0.05）。结论 HIV/AIDS患者只有较低的免疫功能,具有较低的CD4⁺T淋巴细胞亚群比例和较高的IL-10和TGF-β1水平,HAART治疗能改善免疫功能,为此通过CD4⁺T淋巴细胞就能判断HIV/AIDS患者的治疗效果和病情。     

胸腺五肽对新辅助化疗的乳腺癌患者局部组织中浸润淋巴细胞的影响

目的 探讨胸腺五肽对新辅助化疗的乳腺癌组织微环境中浸润淋巴细胞的影响。方法 自2012年1月~2014年1月,前瞻性收集笔者医院收治的接受新辅助化疗的乳腺癌患者80例,将患者随机分为研究组和对照组,所有患者均行新辅助化疗,研究组在新辅助化疗期间给予胸腺五肽,化疗结束后进行手术切除肿瘤组织,留取乳腺癌组织标本,观察乳腺癌组织中和外周血中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺T细胞比例、外周血中IL-6、IL-10、TGF-β1水平。结果 与对照组比较,研究组患者乳腺癌组织中CD4⁺T细胞显著降低（21.47%±3.29% vs 23.88%±3.43%,P=0.002）;CD8⁺T细胞显著增高（30.36%±4.38% vs 28.43%±4.16%,P=0.047）;CD4⁺/CD8⁺T细胞显著降低（0.71±0.14 vs 0.84±0.18,P=0.001）。两组患者治疗前外周血CD4⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺T细胞、IL-6、IL-10、TGF-β1等比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较,研究组患者术后外周血CD4⁺T细胞水平显著增加（27.67%±4.24% vs 25.09%±3.68%,P=0.005）;CD4⁺/CD8⁺T显著增加（0.83±0.14 vs 0.75±0.18,P=0.029）;IL-6水平显著增高（12.39±2.87 vs 9.24±3.38ng/L,P=0.000）;IL-10水平显著降低（8.49±2.59 vs 12.59±3.65ng/L,P=0.006）;TGF-β1水平显著降低（12.47±3.88 vs 17.76±4.12ng/ml,P=0.000）。两组患者住院时间、切口感染、手术部位出血、复发率和病死率等比较,差异均无统计学意义（P > 0.05）。结论 胸腺五肽联合新辅助化疗可能有助于改善乳腺癌组织微环境中免疫状态和全身免疫功能。     

CD19+ CD24high CD27+调节性B细胞在儿童传染性单核细胞增多症中的表达及意义

目的 探讨调节性B细胞（Breg）在儿童传染性单核细胞增多症（IM）中的作用。方法 应用流式细胞术检测53例IM患儿外周血T淋巴细胞亚群,CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达情况。用荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA。同时用ELISA方法分析血清IL-10、TGF-β分泌水平。以50例健康儿童为对照。结果 IM急性期组与对照组比较CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显降低（t=19.99,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显增高（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值降低（t=16.79,P<0.01）。IM恢复期组与急性期组比较,CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显增高（t=21.54,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显降低（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值增高（t=16.68,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平13.4%±1.87%,与对照组比较显著降低,差异有统计学意义（t=14.61,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平与EBV-DNA病毒载量呈负相关（r=-0.52,P<0.01）。经治疗后IM恢复期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平18.3%±2.11%与IM急性期组比较显著增高,差异有统计学意义（t=12.61,P<0.01）。IM急性期组血清IL-10较对照组明显降低,差异有统计学意义（t=11.50,P<0.01）。治疗后IM恢复期组IL-10较IM急性期组明显增高,差异有统计学意义（t=9.40,P<0.01）。结论 IM急性期存在明显免疫失衡,即CD3⁺ CD8⁺ T细胞增多,CD4/CD8比值降低,可能与Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关。     

高效抗反转录病毒治疗(HAART)对艾滋病患者血清炎性标志物水平影响研究

目的 观察艾滋病患者高效抗反转录病毒治疗（HAART）对其血清炎性标志物（TNF-α、Ang-Ⅱ、hs-CRP）水平影响,并与正常人水平比较。方法 监测36例HIV/AIDS患者（观察组）接受高效抗反转录病毒治疗（HAART）前和治疗后（6、12个月）的血清高敏C反应蛋白（high sensitive C-reactive protein,hs-CRP）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF-α）、血管紧张素-Ⅱ（angiotensin Ⅱ,Ang-Ⅱ）水平,并与36例健康体检者（对照组）相应血清炎性标志物比较。以流式细胞计数法检测CD4⁺ T细胞数、CD4⁺ T/CD8⁺ T值。结果 AIDS接受HAART组治疗前、治疗后6、12个月及正常人静脉hs-CRP、TNF-α、Ang-Ⅱ水平分别为7.37±1.55ml/L,0.75±0.24ng/L,97.2±7.6pg/L、4.65±1.48ml/L,0.48±0.20ng/L,90.0±8.2pg/L、3.82±1.45ml/L,0.40±0.16ng/L,87.2±7.4pg/L和2.68±1.08ml/L,0.32±0.16ng/L,64.2±10.5pg/L。与治疗前比较,治疗6、12个月后的hs-CRP、TNF-α、Ang-Ⅱ水平均有明显降低（P均<0.05）;CD4⁺ T细胞数、CD4⁺ T/CD8⁺ T比值升高。结论 高效抗反转录病毒治疗可以降低艾滋病患者血清hs-CRP、TNF-α、Ang-Ⅱ等炎性指标水平,提高机体免疫系统功能,控制艾滋病疾病发展。     

支气管哮喘患者外周血CD3+T细胞趋化因子受体表达的研究

目的 探讨支气管哮喘患者外周血CD3⁺T细胞趋化因子受体表达情况。方法 选取2017年1月—2017年12月山东省立第三医院就诊的40例支气管哮喘患者及同期该院体检的27例健康志愿者，采用流式细胞仪检测所有受试者外周血CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上趋化因子受体CXCR1、CXCR2、CXCR3、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR8的表达。比较轻、中度支气管哮喘患者、重度支气管哮喘患者及健康志愿者，以及不同剂量糖皮质激素使用者趋化因子受体表达的差异。结果 轻、中度支气管哮喘组、重度支气管哮喘组、对照组受试者CD3⁺CD8⁺T细胞上CXCR1、CCR7阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8⁺T细胞上CXCR1阳性表达率低于轻、中度支气管哮喘组和对照组（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8⁺T细胞上CCR7阳性表达率低于对照组（P <0.05）。轻、中度支气管哮喘组、重度支气管哮喘组、对照组受试者CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1、CXCR2阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1、CXCR2阳性表达率低于轻、中度支气管哮喘组和对照组（P <0.05）。3组吸入不同剂量糖皮质激素患者CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1的阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。每天吸入>800 μg/g布地奈德组的患者CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1阳性表达率低于每天吸入< 400 μg/g布地奈德组的患者（P <0.05）。结论 重度支气管哮喘组患者外周血CD3⁺T细胞部分趋化因子表达减少，轻、中度哮喘患者Th1和Th2相关的趋化因子受体参与免疫应答，而重度支气管哮喘患者Th1/Th2应答下降。     

经皮125I植入联合化疗在中晚期非小细胞肺癌治疗中的应用及对CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的影响

目的 探讨经皮放射性碘125粒子（¹²⁵I）植入联合化疗在中晚期非小细胞肺癌（NSCLC）治疗中的应用及对CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺的影响。方法 选取2017年1月-2019年1月咸阳市中心医院收治的120例中晚期NSCLC患者,根据治疗方案分为研究组78例（经皮¹²⁵I植入联合化疗）和对照组42例（同步放化疗）。统计两组基线资料,并记录粒子植入情况及并发症情况,治疗6个月后评估两组临床疗效。比较两组外周血T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺占比及CD4⁺/CD8⁺治疗前后的变化。统计治疗期间不良反应发生情况。结果 两组性别、年龄、病灶部位、肿瘤直径、病理类型、临床分期及治疗前卡氏评分比较,差异无统计学意义（P >0.05）。研究组91.03%（71/78）患者植入粒子的分布符合术前模拟剂量分布;术后气胸30.77%（24/78）,肺内渗血28.21%（22/78）,发热19.23%（15/78）,粒子移位2.56%（2/78）,围术期均无死亡病例。两组临床疗效比较,差异有统计学意义（P <0.05）,研究组有效率高于对照组。两组治疗后外周血CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺及治疗前后的差值比较,差异有统计学意义（P <0.05）,研究组高于对照组;两组治疗后外周血CD8⁺及治疗前后的差值比较,差异无统计学意义（P >0.05）。两组不良反应（胃肠道反应、粒细胞减少及放射性食管炎发生率）比较,差异无统计学意义（P >0.05）;两组放射性肺炎发生率比较,差异有统计学意义（P <0.05）,研究组低于对照组。结论 经皮¹²⁵I植入联合化疗可有效治疗中晚期NSCLC,可明显改善患者免疫功能,减少不良反应。     

ITP 病人外周血CD4+ CD25+ CD127－ 调节T 细胞的检测及临床意义

目的: 探讨特发性血小板减少性紫癜( ITP) 病人外周血CD 4⁺ CD 25⁺ CD 127^－调节T 细胞( T
regulatory cells,Treg) 表达水平的变化及意义。方法: 观察32 例ITP 病人及20 例正常对照,应用流式细胞仪检
测外周血CD 4⁺CD 25⁺CD 127^－Treg 细胞的表达水平。结果: ITP 病人治疗前CD 4⁺ CD 25⁺ CD 127^－ Treg 细胞表
达水平明显降低( 2． 90±1． 00) ,与治疗恢复期( 7． 36±1． 46) 及正常对照组( 4． 52±0． 94) 比较,差异均有统计学意
义( P＜0． 05) 。治疗恢复期病人CD 4+CD 25+CD 127－Treg 细胞表达水平明显高于正常对照组( P＜0． 05) 。结论:
ITP 病人外周血CD 4⁺CD 25⁺CD 127^－Treg 细胞表达水平下降,激素的有效治疗能提高病人机体内CD 4⁺CD 25⁺
CD 127^－Treg 细胞表达水平。     

探讨CRTh2、CysLT1R及H1R在支气管哮喘患者外周血CD3+CD56+NKT细胞中的表达

目的：　探讨Th2细胞趋化因子同源分子（chemoattractant receptor homologous molecule expressed on Th2 cells,CRTh2）、半胱氨酸白三烯受体1（cysteinyl leukotriene 1 receptor,CysLT1R）及组胺1型受体（histamine 1 receptor,H1R）在支气管哮喘（bronchial asthma,BA）患者外周血CD3⁺CD56⁺自然杀伤T细胞（natural killer T cells,NKT）中的表达情况及临床意义。方法：　收集2020年9月至2021年9月锦州医科大学附属医院BA患者（BA组,n=40）和健康对照组（healthy control,HC组,n=38）的外周血,流式细胞仪检测BA组和HC组外周血中CRTh2、CysLT1R及H1R在CD3⁺CD56⁺标记的NKT细胞上的表达,同时对其与血清总IgE（total immunoglobulin E,TIgE）、呼出气一氧化氮（fractional exhaled nitric oxide,FeNO）及肺功能第一秒用力呼气量/用力肺活量%（forced expiratory volume in the first second/forced vital capacity%,FEV1/FVC%）的相关性分析。结果：　BA组[22.50（15.78,29.20）]外周血CD3⁺CD56⁺NKT细胞百分比较HC组[27.90（21.50,32.45）]降低（P=0.024）;进一步比较BA组[70.05（63.20,78.45）]CD3⁺淋巴细胞百分比低于HC组[73.70（69.88,79.38）]（P=0.035）。BA组[0.08（0.05,0.17）]CysLT1R百分比较HC组[0.16（0.10,0.34）]降低（P=0.004）;BA组CRTH2、H1R百分比[1.12（0.53,1.88）;5.21（1.41,10.10）]与HC组[1.17（0.60,4.25）;4.61（1.42,8.53）]比较,无统计学差异（P=0.234;P=0.697）。进一步对比CRTh2、H1R的平均荧光强度（mean fluorescence intensity,MFI）,BA组[925.52（623.50,1 279.25）]CRTh2 MFI较HC组[1 345.50（891.00,1 977.75）]降低（P=0.002）;BA组[769（657.50,975.00）]H1R MFI与HC组[835.00（560.00,959.25）]无统计学差异（P=0.834）。CD3⁺CD56⁺NKT细胞与血清TIgE、FeNO无明显相关性（r=-0.052、r=0.014）,与FEV1/FVC%水平呈正相关（r=0.402,P=0.01）。CRTH2（r=0.166、r=-0.040）、CysLT1R（r=0.114、r=-0.150）及H1R（r=0.103、r=-0.096）与血清TIgE、FeNO无明显相关性。结论：　CD3⁺CD56⁺NKT细胞可能在支气管哮喘发病过程中起重要作用,H1R在CD3⁺CD56⁺NKT细胞上可能不表达,CRTh2与CysLT1R在BA患者CD3⁺CD56⁺NKT细胞上表达减少可能会为临床精准诊疗提供依据。     

乳腺癌组织CD44+CD24-/LowESA+Lin-干细胞比例及影响因素分析

目的 研究乳腺浸润性导管癌组织CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^-乳腺癌干细胞比例及其相关影响因素。方法 收集四川大学华西医院甲状腺乳腺外科2011年4月至2011年12月经病理诊断为浸润性导管癌的新鲜标本40例进行流式细胞学检测,分析患者年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学分级、腋窝Ⅰ-Ⅱ水平淋巴结转移状况、免疫组化指标 〔雌激素受体（ER)、孕激素受体(PR)、上皮因子生长受体-2(C-erbB-2)、Ki-67〕等与CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^-乳腺癌干细胞比例的关系。结果 在乳腺浸润性导管癌组织中,CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^-乳腺癌干细胞全部为阳性表达 （干细胞比例0.5%～16.8%）,平均值为4.38%,其中,低表达 （≤4.38%)20例,高表达 （＞4.38%）20例。单因素分析显示CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^-细胞比例与患者的年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学分级、腋窝淋巴结转移状态、ER、PR以及C-erbB-2均无相关性。而以32.0%为界,把Ki-67分为高表达组 (＞32.0%)和低表达组 (≤32.0%),两组间干细胞比例差异有统计学意义 (P=0.008)。多因素logistic回归发现,Ki-67表达强度是CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^- 表达比例的独立影响因素 (P=0.012,OR=6.926, 95%可信区间1.529～31.377）。结论 乳腺癌组织中,Ki-67表达强度是CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^- 表达比例的独立影响因素。但干细胞比例与临床疗效和预后的关系仍需进一步研究。     

Toll样受体4在乙型肝炎相关性肝癌患者外周血CD14+单核细胞表面的表达及意义

目的 通过观察TLR4在乙型肝炎相关性肝癌患者外周血CD14⁺单核细胞表面的表达,探讨其在疾病发生、发展中的作用。方法 实验共选取慢性乙型肝炎患者25例（慢性乙型肝炎组）、乙型肝炎并肝癌23例（乙型肝炎相关性肝癌组）、健康对照16例（对照组）,利用流式细胞术检测研究对象外周血CD14⁺单核细胞表面TLR4阳性细胞表达百分率和平均荧光强度的几何均数（GMF）,并分析TLR4阳性细胞表达百分率和GMF与内毒素水平及CRP、PCT的相关性。结果 乙型肝炎相关性肝癌组TLR4阳性细胞表达百分率和GMF分别为79.56%±8.12%、54.14±12.28,较慢性乙型肝炎组（46.15%±5.35%、32.27±6.46）及正常对照组（14.89%±8.21%、15.21±6.87）显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）。乙型肝炎相关性肝癌患者TLR4阳性细胞百分率和TLR4 GMF与内毒素水平呈正相关（P<0.05）,与临床指标PCT、CRP无显著相关性（均P>0.05）。结论 TLR4在乙型肝炎相关性肝癌患者外周血CD14⁺单核细胞表面表达有显著升高,提示TLR4可能在乙型肝炎相关性肝癌的发生和发展中具有促进作用。     

131I和甲巯咪唑对Graves病患者外周血Treg细胞及IL-10水平的影响

目的 观察¹³¹I和甲巯咪唑治疗Graves病（GD）前后调节性T细胞（Treg）和白细胞介素-10（IL-10）的变化,并探讨其相关的临床意义。方法 选取2013年4月~2015年11月笔者医院收治的GD患者88例,随机分为¹³¹I治疗组和甲巯咪唑治疗组,每组44例。选择同期笔者医院健康体检者40例作为正常对照。血清IL-10的检测使用ELISA法,流式细胞仪检测Treg细胞。比较两组治疗前后FT₃、FT₄和TSH。结果 GD患者Treg细胞比例为3.25%±0.84%,显著低于正常对照组的7.14%±2.13%（P<0.01）,GD患者IL-10因子表达为8.22±1.73μmol/L,也显著低于正常对照组的15.64±3.17μmol/L（P<0.01）。¹³¹I和甲巯咪唑组治疗前GD患者Treg细胞比例和IL-10因子表达差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后¹³¹I组Treg细胞比例和IL-10因子表达出现显著升高（P<0.05）,但甲巯咪唑组上述指标治疗前后无显著性差异（P>0.05）。¹³¹I和甲巯咪唑组治疗前GD患者FT₃、FT₄和TSH差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后两组FT₃和FT₄均显著减低（P<0.01）,TSH均显著升高（P<0.05）。但¹³¹I组对FT₃和FT₄的减低作用以及对TSH的升高作用显著优于甲巯咪唑组（P<0.05）。结论 ¹³¹I可提高Graves病患者Treg细胞比例和IL-10因子表达,临床疗效显著。     

Breg Tfh Tfr细胞在免疫性血小板减少症患者中的表达及意义

目的 探讨调节性B细胞（Breg）、滤泡辅助性T细胞（Tfh）、滤泡调节性T细胞（Tfr）在免疫性血小板减少症（ITP）中的作用和临床意义。方法 选择2017年10月至2019年10月安徽医科大学第一附属医院收治的初次诊断的30例ITP患者为ITP组,同期选择健康对照组25例,应用流式细胞术（FCM）检测外周血Breg、Tfh、Tfr细胞的表达水平并统计分析。结果 ITP组患者外周血CD19⁺B细胞中Breg[（1.93±1.21）%]、IL-10⁺Breg[（28.64±10.31）%]水平低于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;外周血CD4⁺T细胞中Tfh细胞比例高于健康对照组[（12.18±5.26）% vs（6.21±1.78）%],Tfr细胞比例[（1.64±1.01）%]、Tfr/Tfh比值（0.21±0.13）低于健康对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 Breg细胞降低,IL-10分泌减少,Tfr/Tfh比值失衡,在ITP发病过程中可能起到重要的作用。     

CKD3~5期患者外周血T淋巴细胞CD154表达能力的变化

目的 探讨了CKD 3~5期患者外周血T淋巴细胞CD154表达能力的变化。 方法 以健康人外周血为对照组,以未接受血透析治疗的慢性肾脏病(CKD)3~5期(未透析组)及CKD 5期维持性血液净化治疗的患者(透析组)外周血为实验组,检测各组受试者外周血T淋巴细胞表达频率、CD3⁺CD8^-T细胞CD154的表达比例。 结果 与对照组相比,CKD 3~5期未透析患者外周血淋巴细胞中T细胞所占频率下降,差异有统计学意义(P<0.05);CKD5期透析组与对照组比较差异无统计学意义(对照组为72.05%±2.65%;未透析组为63.06%±3.37%;透析组为68.92%±3.22%)。离子霉素联合佛波酯刺激全血后,各组表达CD154的CD3⁺CD8^- T细胞占CD3⁺CD8^- T细胞比例:未血液净化组(73.61%±1.91%)较对照组(79.78%±2.00%)及血液净化组(78.94%±2.47%)明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);提取PBMC后用离子霉素联合佛波酯刺激,各组间CD154表达差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 CKD 3~5患者存在CD3⁺CD8^- T细胞CD154表达能力下降,可能影响患者的免疫功能。     

20-羟基蜕皮甾酮通过Akt/NF-κB通路调节小胶质细胞活化

目的 观察20-羟基蜕皮甾酮对脂多糖诱导的体外原代培养小胶质细胞活化的影响,并探讨其相关机制。方法 脂多糖处理原代培养的SD大鼠小胶质细胞,构建其活化模型。实验分为正常组,脂多糖处理组和脂多糖+20-羟基蜕皮甾酮组。酶联免疫法测定各组细胞培养基中IL-1β和TNF-α的浓度,Western blot法检测各组细胞胞质内p-IκBα、细胞核内p-NF-κB以及细胞内p-Akt水平。结果 10ng/ml LPS孵育小胶质细胞8h,细胞培养基中IL-1β和TNF-α浓度分别从33.73±6.42pg/ml和43.67±7.17pg/ml上升至87.16±12.78pg/ml和96.55±13.76pg/ml （P<0.01）。50μmol/L 20-羟基蜕皮甾酮和LPS一起处理细胞8h后,笔者观察到细胞上清中IL-1β和TNF-α浓度分别降低至59.37±9.24和72.81±12.69pg/ml （P<0.05）。进一步增加20-羟基蜕皮甾酮浓度至100μmol/L,细胞上清中IL-1β和TNF-α浓度进一步降低至48.11±8.42pg/ml和61.44±9.38pg/ml （P<0.01）。此外,脂多糖导致小胶质细胞胞质内p-IκBα、细胞核内p-NF-κB和细胞内p-Akt水平明显升高（P<0.01）,20-羟基蜕皮甾酮抑制上述蛋白水平的升高。结论 20-羟基蜕皮甾酮经Akt信号通路,失活NF-κB,抑制LPS诱导的小胶质细胞IL-1β和TNF-α分泌,最终改善小胶质细胞介导的炎症。     

β1受体阻滞剂上调肠道上皮细胞HO-1对脓毒症大鼠肠道功能的保护作用

目的 探讨β₁受体阻滞剂艾司洛尔（Esmolol）能否上调血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）起到对脓毒症大鼠肠道功能的保护作用。方法 本实验于哈尔滨医科大学附属第一医院外科中心实验室完成。40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为4组：假手术组（sham组,n=10）、脓毒症组（CLP组,n=10）、艾司洛尔干预组（Esmolol+CLP组,n=10）、HO-1抑制剂组（Esmolol+ZnPP+CLP组,n=10）。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症大鼠模型,Esmolol组通过静脉输注艾司洛尔注射液,速度为15mg/（kg·h）,Esmolol+ZnPP+CLP组术前1h腹腔内注射ZnPP溶液（40μmol/kg）,术后同速静脉输注艾司洛尔注射液。其余各组大鼠腹腔注射等体积生理盐水,并且静脉输注等渗盐水,速度2ml/（kg·h）。术后12h处死大鼠,ELISA法检测各组血清肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素（IL-1β）水平,采用蛋白印迹法及免疫组化法检测大鼠肠组织HO-1表达水平,光学显微镜观察大鼠肠组织病理变化情况。结果 与Sham组相比,CLP组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平均明显升高（43.71±6.24pg/ml vs 2742.69±221.71pg/ml,52.69±14.15pg/ml vs 482.73±125.49pg/ml,P<0.05）;肠组织中HO-1水平表达升高（P<0.05）;肠组织病理损伤明显。与CLP组相比,Esmolol+CLP组血清TNF-α、IL-1β水平均明显下降（2742.69±221.71pg/ml vs 968.81±99.46pg/ml,482.73±125.49pg/ml vs 156.15±38.29pg/ml,P<0.05）;肠组织HO-1水平表达明显升高（P<0.05）;肠组织病理损伤程度减轻。与CLP组相比,Esmolol+ZnPP+CLP组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平无明显差异（2742.69±221.71pg/ml vs 2545.18±173.74pg/ml,482.73±125.49pg/ml vs 474.43±113.98pg/ml,P>0.05）;肠组织病理损伤程度无明显差异。结论 Esmolol能改善脓毒症诱发的肠道损伤,其可能是通过上调HO-1通路来减轻肠组织炎性反应,继而减轻肠道损伤。     

骨髓间充质干细胞源性外泌体促进小胶质细胞/巨噬细胞M2极化抑制急性期脑缺血大鼠炎症反应

为探究骨髓间充质干细胞（bone marrow meaenchymal stem cells, BMSCs）源性外泌体（exosomes, Exos）对急性期脑缺血大鼠小胶质细胞/巨噬细胞M1/M2极化的影响,采用超高速离心法分离提取外泌体并鉴定;采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion, MCAO）模型;采用Longa评分和角实验评价大鼠神经功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyltetrazole chloride, TTC）染色检测大鼠脑梗死体积;采用CD16/32/Iba1、CD206/Iba1免疫荧光双标法检测小胶质细胞/巨噬细胞M1/M2表型;采用RT-qPCR检测大鼠脑缺血周边区CD86、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitricoxide synthase, iNOS）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor, TNF-α）、精氨酸酶1（arginase-1, Arg-1）、白细胞介素-10（interleukin-10, IL-10）和转化生长因子β（transforming growth factor beta, TGF-β）的mRNA表达。实验结果表明,BMSC-Exos减少缺血周边区CD16/32⁺/Iba1⁺阳性细胞数量（P < 0.01）,增加CD206⁺/Iba1⁺阳性细胞数量（P < 0.01）,减少iNOS、CD86和TNF-α的mRNA表达,增加Arg-1、TGF-β和IL-10的mRNA表达（P < 0.05或P < 0.01）。本研究提示BMSC-Exos调控急性期脑缺血大鼠小胶质细胞/巨噬细胞M1/M2极化,减轻神经炎症,改善脑缺血损伤。     

血清糖皮质激素受体在难治性肺炎支原体肺炎患儿中的变化及临床意义

目的 通过检测难治性肺炎支原体肺炎（RMPP）患儿血清GRα及GRβ蛋白表达水平的变化,为临床合理应用糖皮质激素（GC）提供理论依据。方法 2014年1月~2015年5月在笔者医院儿内科住院的226例年龄在3~12岁肺炎患儿,按临床症状和实验室检查分为肺炎组和肺炎支原体肺炎（MPP）组,采用ELISA法检测血清GRα及GRβ蛋白表达水平;同时对MPP组按照诊断标准分为普通MPP组和RMPP组,观察两组血清GRα及GRβ水平变化。结果 MPP组血清GRα水平（19.73±5.05ng/ml）明显高于肺炎组（11.76±3.46ng/ml）和对照组（9.41±3.31ng/ml）（P<0.01）,后两组比较差异有统计学意义（P<0.01）;GRβ水平在MPP组（9.40±2.37ng/ml）和肺炎组（9.67±2.13ng/ml）则明显高于对照组（7.71±1.98ng/ml）（P<0.01）,而前两组比较差异无统计学意义（P>0.05）;MPP组GRα/GRβ比值（2.29±0.94）明显高于肺炎组（1.31±0.57）和对照组（1.36±0.73）（P<0.01）,而后两组之间比较差异无统计学意义（P>0.05）;RMPP患儿中血清GRα水平和GRα/GRβ比值显著高于普通MPP组（24.49±3.16ng/ml vs 16.49±3.17ng/ml,P<0.01;9.58±2.49 vs 2.90±0.99,P<0.01）,GRβ水平（9.13±3.19ng/ml vs 9.58±2.49ng/ml,P>0.05）两组差异无统计学意义。结论 在MPP和RMPP中存在着GRα的优势表达,GRα/GRβ比值增大,尤其在RMPP中表现更为明显。     

肺炎支原体肺炎患儿血清microRNA-21和microRNA-221水平变化及与炎症因子、T淋巴细胞亚群的相关性

目的 探讨肺炎支原体肺炎（MPP）患儿血清microRNA-21（miR-21）和microRNA-221（miR-221）的水平变化及与炎症因子、T淋巴细胞亚群的关系。方法 选取2017年1月—2019年1月邯郸市中心医院就诊的MPP患儿120例为研究对象（MPP组），另选取本院同期体检的健康儿童100例为对照组（CON组）。比较两组研究对象血清miR-21和miR-221的水平差异，并分析二者与患儿外周血中炎症因子［白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）］和T淋巴细胞亚群（CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺）之间的相关性。结果 MPP组血清miR-21和miR-221水平高于CON组（P <0.05）。MPP组外周血CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺低于CON组，而IL-6、IL-8、TNF-α的水平高于CON组（均P <0.05）。MPP组血清miR-21和miR-221与患者外周血CD3⁺（r =-0.494和-0.656，P =0.037和0.014）、CD4⁺（r =-0.621和-0.554，P =0.015和0.031）、CD8⁺（r =-0.772和-0.476，P =0.003和0.043）、CD4⁺/CD8⁺（r =-0.545和-0.660，P =0.023和0.014）均呈负相关，而与TNF-α（r =0.787和0.619，P =0.000和0.015）、IL-6（r =0.530和0.598，P =0.035和0.029）、IL-8（r =0.665和0.614，P =0.012和0.017）均呈正相关。结论 MPP患儿血清miR-21和miR-221水平升高，且与患儿T淋巴细胞亚群水平的降低、炎症因子水平的升高有一定的相关性，监测两者的水平变化有助于评估MPP患儿的免疫状态和炎症反应，并为合理制订治疗方案提供帮助。     

树突状细胞、Treg细胞在SLE伴血小板计数减少患者外周血中的表达

目的 探讨树突状细胞（DC）及CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺调节性T细胞（Treg）在系统性红斑狼疮（SLE）伴中重度血小板计数减少患者外周血中的表达及临床意义。方法 选取SLE伴中、重度血小板计数减少患者32例,SLE伴血小板计数正常患者28例,正常健康人30例,应用流式细胞术检测各组外周血中髓系DC（mDC）、浆细胞样DC（pDC）治疗前后比率变化及与Treg细胞的相关性,酶联免疫吸附法（ELISA法）检测外周血IL-12、IFN-α、TGF-β水平。结果 SLE伴血小板计数减少组外周血pDC比率显著低于SLE伴血小板计数正常组患者（P<0.05）。SLE伴血小板计数减少组激素治疗后pDC比率较治疗前减少,Treg细胞比率较治疗前增加,pDC与Treg细胞呈负相关（r=-0.537, P<0.05）。SLE伴血小板计数减少组患者外周血DC表面协同刺激分子CD86表达的MFI明显高于SLE伴血小板计数正常组及健康对照组。SLE患者外周血IL-12、IFN-α水平与健康对照组比较显著升高,TGF-β水平显著降低（P<0.05）。结论 pDC可能参与了SLE伴中重度血小板计数减少的免疫发病机制,并与Treg细胞有一定的相关性。