从“瘀”论治激素性股骨头坏死与OPG/RANK/RANKL信号通路相关性研究进展

目前,大剂量糖皮质激素的使用是造成我国非创伤性股骨头坏死的主要原因,严重影响患者的健康和生活质量.根据临床治疗与现代实验研究,中医药治疗激素性股骨头坏死疗效确切,备受学界关注.OPG/RANK/RANKL信号通路的发现成为激素性股骨头坏死防治的突破口,激素性股骨头坏死“脾虚生痰-由痰致瘀-因瘀致痹”的病机与该信号通路密...     

RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松

目的分析RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松研究现状,并对两者的研究进行展望。方法从中国知网上下载RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松方面的论文,运用文献计量学和知识图谱的方法,分析RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松的关系的研究现状。结果 RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松方面的研究可归纳为RANK/RANKL/OPG系统与骨重建、RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松、RANK/RANKL/OPG系统与类风湿关节炎和其它等4个主流知识群。从知识图谱分析来看,RANK/RANKL/OPG系统与骨重建、RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松是研究的热点,OPG在骨吸收中起重要作用。结论 RANK/RANKL/OPG系统在阐明骨质疏松发生机制中有重要作用,OPG及其系统其他组分有可能作为以高骨吸收为特征的许多疾病的治疗药物。     

基于RANKL/RANK/OPG信号轴探讨骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用

目的 观察骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用,并从核因子-κB受体活化因子配体/核因子-κB受体活化因子/骨保护素（RANKL/RANK/OPG）信号轴探讨其作用机制。方法 采取腹腔注射脂多糖和臀肌注射醋酸泼尼松龙复制激素性股骨头缺血坏死（SONFH）动物模型,经核磁共振鉴定后,将模型复制成功的60只小鼠分成模型（MC）组、骨痹通消颗粒（GBTX）组及通络生骨胶囊（PC）组,每组20只,另设12只正常小鼠作为空白对照（NC）组。分别予以对应组灌胃相应药物12周后麻醉状态下取材,观察各组小鼠治疗前后的一般行为;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组小鼠的骨碱性磷酸酶（BALP）和I型氨基端延长肽（PINP）含量;Western blotting和实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-qPCR）检测各组RANK、RANKL、OPG、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cγ2（PLCγ2）、组织蛋白酶K（CTSK）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）的蛋白和基因表达。结果 核磁共振显示,模型复制成功后的小鼠左侧髋部呈高信号状态。与NC组比较,MC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均降低（P <0.05）,RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均升高（P <0.05）;与MC组比较,GBTX组和PC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均升高（P <0.05）,RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均下降（P <0.05）;与GBTX组比较,PC组OPG、RANK、RANKL、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量,以及PLCγ2蛋白相对表达量差异均无统计学意义（P >0.05）,而PC组PLCγ2基因相对表达量较GBTX组下降（P <0.05）。结论 骨痹通消颗粒可能通过上调OPG表达,抑制RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK和TRAP表达,从而改善股骨头坏死情况。     

类风湿关节炎患者OPG、瘦素表达水平与骨质疏松相关性研究

目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血的骨保护素(OPG)、瘦素水平变化及其对RA患者骨质疏松的影响。方法:选择我院收入的类风湿关节炎患者共72例,另外选择60例正常人作为健康对照组,对72例患者给予治疗,评估患者血清OPG、瘦素水平,并对比不同骨质疏松程度下患者的OPG、瘦素水平差异。结果:本组72例类风湿关节炎患者均给予治疗,其中缓解44例,未缓解28例,未缓解的28例患者中16例治疗有效,12例治疗无效。RA组治疗前OPG显著低于对照组及治疗后,瘦素显著高于对照组及治疗后,差异有统计学意义(P<0.05)。缓解组OPG水平显著高于有效组及无效组,瘦素水平显著低于有效组及无效组,差异有统计学意义(P<0.05),有效组OPG水平显著高于无效组,瘦素水平低于无效组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组骨质疏松发生情况对比显示,RA组骨质疏松率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),RA组及对照组骨质疏松患者的OPG表达显著低于骨量正常及骨量减少患者(P<0.05),瘦素表达显著高于骨量正常及骨量减少患者(P<0.05)。结论:RA患者外周血OPG水平明显降低,RA患者较易发生骨质疏松,OPG水平越低,患者骨质疏松越严重。RA患者外周血瘦素显著升高,RA水平与患者骨质水平呈负相关。     

拉莫德对类风湿关节炎继发骨质疏松的治疗作用及相关机制

目的探讨艾拉莫德对类风湿关节炎（RA）继发骨质疏松（OP）的治疗作用及相关机制。方法选取诊断明确的RA患者90例,按随机数字表法,将患者随机分为对照组45例和观察组45例,对照组采用甲氨蝶呤片（MTX）联合羟氯喹片(HCQ)治疗,观察组采用在MTX、HCQ基础上加用艾拉莫德治疗,两组患者药物治疗观察期均为24周,比较两组患者治疗前后的关节压痛数（TJC）、关节肿胀数（SJC）、血沉（ESR）、C反应蛋白（CRP）、视觉模拟评分法（VAS）(患者总体评价)、28个关节疾病活动度（DAS28）、骨密度（BMD）、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽（TPINP）、β-胶原降解产物（β-CTX）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、骨保护素（OPG）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）,观察两组患者不良反应发生率。结果（1）两组治疗24周后,ESR、CRP、VAS、DAS28均较治疗前改善（P<0.05）,但观察组较对照组改善更显著（P<0.05）;（2）治疗24周后,各部位骨密度值观察组均高于对照组,但两组骨密度水平差异无统计学意义（P>0.05）,观察组较对照组TPINP升高、β-CTX降低更显著（P<0.05）;（3）治疗24周后,IL-6、TNF-α均降低,且观察组均低于对照组（P<0.05）,OPG均较治疗前升高,RANKL均较治疗前降低,但观察组OPG水平高于对照组,RANKL水平低于对照组（P<0.05）;（4）未有患者发生严重不良事件,两组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义（P>0.05)。结论（1）艾拉莫德联合用药能够更有效地减轻RA患者的疾病活动,改善临床症状,而且未增加不良反应;（2）艾拉莫德联合用药能够更显著地调节骨代谢、改善骨密度,可能通过影响OPG/RANK/RANKL系统。     

类风湿关节炎患者Th17细胞膜上RANKL的表达及意义

目的探讨类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者外周血和关节液中Th17细胞膜上RANKL的表达水平与RA病情活动程度指标CRP、ESR、RF及DAS28评分的关系。方法用流式细胞术及RT-PCR方法检测RA患者外周血和关节液中Th17细胞膜上RANKL的表达水平。结果 RA患者外周血Th17细胞膜上RANKL表达明显高于健康对照组（P〈0.05）,RA患者关节液中Th17细胞膜上RANKL表达高于RA外周血（P〈0.05）,RA患者外周血Th17细胞膜上RANKL表达与DAS28评分呈正相关性（r=0.36,P〈0.05）。RTPCR结果提示RA患者CD4~＋T上RANKL表达较健康对照组升高（P〈0.05）。CD4~＋T细胞RANKL mRNA水平与IL-17mRNA水平呈显著正相关（r=0.63,P〈0.001）。结论 Th17细胞膜上RANKL表达明显升高,且与病情活动程度显著相关,提示Th17细胞可能参与RA骨破坏过程,在RA的破骨免疫致病机制中可能起重要作用。     

吸烟对慢性牙周炎患者体液中RANKL/OPG系统的影响

目的 分析吸烟对慢性牙周炎患者体液中核因子κB 受体活化因子配体/骨保护素(RANKL/OPG)系统的影响,评价吸烟对牙周病骨代谢的影响.方法 无全身性疾病的慢性牙周炎患者60例,其中吸烟组30例,男女各半,非吸烟组30例,男女各半.经受试者知情同意后,取受试者血清、唾液及龈沟液标本,采用ELISA法分析其中RANKL/OPG水平.结果 各组受试者血清RANKL/OPG值及RANKL:OPG值均无明显差异,吸烟组受试者龈沟液及唾液中OPG值明显低于其他组别(P<0.05).结论 吸烟可降低慢性牙周炎患者龈沟液中OPG的含量,从而加重牙周病骨吸收.     

CTGF通过调控OPG/RANK/RANKL信号通路在血管钙化中的作用

目的 探究结缔组织生长因子(CTGF)在主动脉血管钙化过程中的作用和机制。方法 体外培养大鼠胸大动脉平滑肌细胞(A7r5)进行血管钙化模型构建,通过茜素红染色结果确定最佳钙化时间。细胞转染CTGF-siRNA质粒,采用RT-PCR和Western blot检测细胞中CTGF的表达量。为确定CTGF对细胞钙化的作用,将细胞随机分为7组。采用茜素红染色观察CTGF对A7r5细胞钙化的影响,采用ELISA法检测A7r5细胞中碱性磷酸酶(ALP)的活性变化,采用RT-PCR测定A7r5细胞中OPG、RANK和RANKL的表达情况。结果 A7r5的最佳钙化时间为48 h。与对照组相比,CTGF-siRNA组细胞中CTGF的表达量降低,说明细胞成功转染CTGF-siRNA质粒。与模型组比较,CTGF-siRNA组A7r5细胞中的钙化结节表达量减少,ALP的活性降低(P<0.05),OPG、RANK和RANKL的表达也下调(P<0.05)。结论 沉默CTGF能够减少高磷高钙所诱导的A7r5细胞钙化和降低ALP的活性,调控OPG/RANK/RANKL信号通路,从而在主动脉血管钙化中的发挥作...     

RANKL/RANK/OPG系统与绝经后骨质疏松模型的研究

<正>绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)是指绝经后的妇女由于卵巢功能减退,雌激素不分泌或者分泌过少,骨吸收大于骨形成,形成高转化型的骨质疏松特点。临床研究[1-2]发现:60岁的女性发病率高达24%,中老年女性诊断为骨质疏松是男性的3倍。绝经后骨质疏松模型是通过切除动物的卵巢,造成雌激素分泌减少,来模拟PMOP。雌激素的减少破坏了骨吸收和骨形成的平衡,而     

石藤胶囊对佐剂性关节炎大鼠OPG、RANKL表达的影响

[目的]观察石藤胶囊对佐剂性关节炎(A A)大鼠血清及关节组织核因子κB受体激活配体(RANKL)、骨保护素(OPG)的影响。[方法]采用弗氏完全佐剂诱导的大鼠A A模型。Wistar大鼠32只,随机分为模型组、石藤胶囊组、雷公藤组,正常对照组各8只。酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法测定大鼠血清中核因子KB受体激活配体(RANKL)、骨保护素(OPG)的水平,免疫组织化学法检测大鼠关节中OPG、RANKL的表达。[结果]石藤胶囊可以明显降低A A大鼠血清和关节中的RANKL水平,提高血清和关节中的OPG水平。[结论]石藤胶囊能够通过抑制破骨细胞通道对AA发挥防治作用。     

外周血核因子κB受体激活剂配体/护骨素比值在类风湿关节炎患者骨质疏松性骨折中的意义

目的 探讨外周血核因子κB受体激活剂配体(RANKL)和护骨素(OPG)水平的变化在类风湿关节炎(RA)患者合并骨质疏松性骨折(OPF)中的意义.方法 选择2010-2012年安徽医科大学第一附属医院风湿科住院的RA患者384例为RA组,年龄16 ～ 82岁,平均(49±14)岁;并根据RA组年龄和性别构成匹配入选158名健康人为对照组,年龄24 ～ 76岁,平均(50±11)岁.严格按照OPF定义并参考X线片判断两组OPF发生情况,以双能X线骨密度吸收法测定其骨密度(股骨区+腰椎2～4),酶联免疫法检测外周血RANKL和OPG水平.比较两组发生OPF的情况、外周血RANKL和OPG水平、骨密度值及其骨质疏松发生率.结果 384例RA患者OPF发生率21.35％(82例),明显高于对照组的3.80％ (6/158)(x2=25.371,P ＜0.01).与健康对照组比较,RA患者外周血RANKL水平(0.150±0.143比0.1叭±0.066,t=4.178,P＜0.000 1)、OPG水平(0.457±0.293比0.359 ±0.216,t=3.347,P=0.001)和RANKL/OPG比值(0.41 ±0.35比0.34±0.20,t=2.111,P=0.036)均明显升高.327例RA患者在各测定部位的骨密度均明显低于正常组(P＜0.01),骨质疏松发生率为37.00％(121/327),明显高于健康对照组的13.92％(22/158)(x2=27.291,P＜0.01).发生OPF的RA患者组较无OPF组具有更高的骨质疏松发生率(x2=38.186,P＜0.01)、更大的年龄(t=4.377,P＜0.01)、更长的病程(t=2.612,P=0.009)、更高的RANKL水平(t =3.554,P=0.01)、更高的RANKL/OPG比值(t=2.651,P=0.010)、更高的健康问卷评分(t=2.418,P=0.016)、更低的血清游离钙水平(=2.183,P=0.030)、更低的血红蛋白水平(=2.125,P =0.036)、更高的双手X线Sharp评分(t=2.747,P=0.007)、更差的X线分期构成(x2=7.856,P =0.049)、更高的糖皮质激素使用率(x2 =9.066,P =0.003).服用糖皮质激素的RA患者具有更高的骨质疏松发生率(x2=7.489,P=0.006)和OPF发生率(x2=9.066,P=0.003).logistic Regression (Backward LR法)分析显示,年龄(OR=1.029,P=0.039,95％ CI:1.001 ～1.057)和骨质疏松的发生(OR=3.159,P=0.001,95％ CI:1.562～6.385)、RANKL/OPG比值(OR =3.516,P =0.013,95％ CI:1.305 ～9.647)为RA患者发生OPF的危险因素.结论 RA患者OPF发生率为21.35％,约是正常对照组的5.6倍,年龄、病程和外周血RANKL/OPG比值是RA发生OPF的危险因素,也与糖皮质激素的使用有关.     

类风湿关节炎患者外周血白细胞介素-22的表达及临床意义

目的 测定类风湿关节炎(RA)患者血清中IL-22的水平并分析其临床意义。方法 采用ELISA法检测70例初诊的RA患者(RA组)和18例健康体检者(健康对照组)血清中IL-22的水平,其中RA组患者进一步分为RA活动组和RA非活动组,有骨侵蚀组和无骨侵蚀组,类风湿因子(RF)阳性组和RF阴性组,抗环瓜氨酸肽(抗CCP)抗体阳性组和抗CCP抗体阴性组。分析IL-22在不同组别的表达及其与RA患者临床及炎性指标的相关性。结果 1RA组患者血清IL-22水平[(80.30±37.73)pg/mL]较健康对照组[(29.29±7.38)pg/mL]明显升高,差异有高度统计学意义(P<0.01);其中RA活动组[(86.58±41.21)pg/mL]与RA非活动组[(63.24±17.98)pg/mL]及健康对照组[(29.29±7.38)pg/mL]比较,差异均有统计学意义(P<0.05);RA组患者有骨侵蚀组[(94.71±42.20)pg/mL]与RA无骨侵蚀组[(56.03±18.16)pg/mL]比较,差异有统计学意义(P<0.05);2IL-22在RF阳性组、抗CCP抗体阳性组[(84.65±38.47)、(100.3±43.68)pg/mL]明显高于RF阴性组及抗CCP抗体阴性组[(59.48±39.01)、(64.12±18.32)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05);3RA组患者血清IL-22中水平与DAS28、RF呈正相关性(r=0.2883,P=0.0382;r=0.3670,P=0.0074)。结论 RA患者血清IL-22水平明显升高,可能参与了RA的发病机制,可作为RA病情活动及骨侵蚀的预测指标。     

结核分枝杆菌裂解物诱导破骨细胞及OPG／RANKL表达变化实验研究

目的探讨结核分枝杆菌超声裂解产物（Mt sonicate）体外诱导小鼠破骨细胞的形成及 OPG/RANKL表达变化与裂解物的浓度、时间的依赖性,研究结核杆菌引起骨破坏的相关机制。方法原代培养的 BALB/c小鼠骨髓基质细胞以高、中、低浓度的 Mt sonicate进行干预,在1、3、7、14 d进行 TRAP染色,观察破骨细胞的形成,并采用 Realtime RT-PCR检测各浓度、时间的骨保护素（OPG）/核因子Kappa B受体活化因子配基（RANKL）mR-NA表达。结果 Mt sonicate在体外可诱导小鼠骨髓基质细胞向破骨细胞的转化;破骨细胞数量与 Mt sonicate浓度在3、7 d时呈显著的正相关（3 d：r＝0．417,P ＜0．05;7 d：r＝0．463,P ＜0．05）;3个浓度干预下,破骨细胞数量在1～7 d逐渐增多,7～14 d则逐渐减少。7 d时,高、中、低浓度 Mt sonicate干预下 OPG/RANKL mRNA表达比分别为（1．35±0．11）、（7．38±1．15）、（9．85±1．26）。结论小鼠骨髓基质细胞向破骨细胞转化的实验中,存在结核分枝杆菌裂解物的浓度和时间依赖性,且与 OPG/RANKL mRNA的表达比呈负相关,破骨细胞形成时的数量与活性受到结核分枝杆菌的调控,其分子机制与 OPG/RANKL系统的变化密切相关。     

RANK/RANKL/OPG信号通路的研究进展

核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路是近些年来骨代谢领域的重大发现。许多激素、细胞因子、生长因子通过作用于核因子κB受体活化因子配体,骨保护素影响骨代谢,而导致骨代谢疾病如骨质疏松,溶骨性骨肿瘤及恶性肿瘤骨转移等。该文就主要RANK/RANKL/OPG信号通路的成员、信号转导及表达调控进行综述。     

骨科髋关节置换术患者手术前后外周血中OPG与RANKL浓度分析

目的通过对15例行人工髋关节置换术患者进行术前术后外周血液中骨保护素(OPG)、核因子kappaB受体活化因子配体(RANKL)浓度测定,探讨髋关节术后短期内骨代谢调节方式。方法收集15例髋关节置换手术患者手术前后外周血液,采用ELISA法检测血清中OPG、RANKL手术前后浓度,分析OPG、RANKL表达水平变化。结果 15例行髋关节置换术患者术后OPG浓度均较术前明显增加,而12例患者术后RANKL浓度均明显下降,其中3例患者术后RANKL浓度轻度增加,术后患者RANKL/OPG比值明显下降。结论 OPG过高表达提示髋关节术后短期内机体成骨增强,破骨受抑制。     

类风湿关节炎患者血小板计数升高与疾病活动性关系

目的对类风湿关节炎患者的疾病活动性与血小板计数升高的关系进行探讨。方法对北京朝阳医院1999年～2001年诊断为类风湿关节炎并伴有明显血小板计数升高的30例住院患者进行回顾性分析。结果类风湿关节炎患者的血小板计数与其疾病活动的血清学指标——血沉及C反应蛋白值之间有显著直线正相关关系(r分别为0.93和0.87,P<0.01),并与其疾病活动的临床指标—最僵时间及Ritchie指数也有显著直线正相关关系(r为0.93,P<0.01)。结论类风湿关节炎患者的血小板计数升高与其疾病的活动性密切相关,可作为疾病活动性的判断指标之一。     

OPG/RANK/RANKL轴与二尖瓣合并房颤患者术后窦性心律稳定性的相关性研究

目的:探讨OPG/RANK/RANKL轴与二尖瓣合并永久性房颤患者术后自动转复的窦性心律稳定性的关系及其临床意义?方法:选取135例在行单纯二尖瓣置换术后自动复律的房颤患者,根据术后7 d内房颤是否复发分为房颤(AF)组和窦性心律(SR)组?术中取右心耳组织,采用Western blot 及免疫组织化学法检测组织中OPG?RANK?RANKL的表达,用Masson三色法检测组织中间质纤维化程度?结果:AF组RANK和RANKL表达水平以及RANKL/OPG 比值均高于SR组,胶原容积分数(CVF) 在SR组显著低于AF组,RANK?RANKL表达水平以及RANKL/OPG 比值与CVF呈显著正相关?结论:OPG/RANK/RANKL轴可能参与了二尖瓣合并房颤患者术后房颤的复发,因此可作为房颤上游治疗一新靶点?