子宫内膜癌中TRAIL诱骗受体的表达研究

目的：了解子宫内膜癌中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱骗受体（DcR1、DcR2)的表达情况。方法：用免疫组化的方法观察13例子宫内膜癌和7例正常子宫内膜标本中DcR1、DcR2的表达，分析其在子宫内膜癌中的含量变化。结果：子宫内膜癌中DcR1、DcR2的表达水平较正常子宫内膜显著减低。结论：DcR1、DcR2在子宫内膜癌中的低表达可能与其发病机制有关，可能对防止子宫内膜癌变具有一定作用。     

TRAIL与肿瘤关系的研究进展

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）是肿瘤坏死因子超家族第三个成员,可诱导多种肿瘤细胞发生凋亡,但不会损害正常组织细胞.其特异性受体死亡受体（DR）4、DR5在多数肿瘤细胞表达,正常细胞缺失,这使得应用TRAIL进行抗肿瘤治疗成为可能.TRAIL能触发细胞凋亡通路,激活caspase家族,促进线粒体凋亡途径的启动,诱导细胞凋亡.该文就TRAIL的结构、受体及其与肿瘤的关系作一综述.     

人重组TRAIL对胆囊癌细胞生长的影响

目的探讨人重组肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(recombinant human tumor necrosis factor relat-ed apoptosis inducing ligand,rhTRAIL)对胆囊癌细胞株SGC-996的作用。方法用Western-blot法检测胆囊癌细胞株中TRAIL死亡受体DR4、DR5和Fas相关死亡结构域(fas-associated death domain,FADD)的表达状况,生长曲线、相差显微镜和流式细胞仪观测rhTRAIL作用于胆囊癌细胞株后的细胞生长状况。结果胆囊癌细胞株SGC-996中,有死亡受体DR4、DR5和Fas相关死亡结构域(FADD)的表达,rhTRAIL作用胆囊癌细胞后,细胞生长受到抑制,作用前后细胞Casepase-3/7活性明显升高,流式细胞仪检测表明rhTRAIL治疗组和对照组细胞的凋亡差异明显(P<0.05)。结论rhTRAIL在体外对胆囊癌细胞株SGC-996有明显抑制作用,可能成为治疗胆囊癌的新途径。     

TRAIL诱导结肠癌SW480细胞的凋亡

目的探讨TRAIL对结肠癌SW480细胞凋亡的影响。方法实验分rmhTRAIL处理组和阴性对照组。MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western Blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达变化。结果 TRAIL能明显呈浓度依赖性地抑制结肠癌SW480细胞增殖（P〈0.05）,SW480细胞经rmhTRAIL处理后,流式细胞术分析显示其凋亡率明显上升（P〈0.01）,Western Blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达情况,显示Bcl-2蛋白表达明显下降,而Bax蛋白的表达明显升高（P〈0.05）。结论 TRAIL可以诱导结肠癌细胞的凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达有关。     

不同浓度葡萄糖对MG63细胞株TRAIL表达的影响

目的: 观察不同浓度葡萄糖环境下人成骨肉瘤MG63细胞株肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其护骨素(OPG)、护骨素配体(OPGL)的表达,探讨糖尿病骨质疏松症的发病机制. 方法: 用不同浓度葡萄糖(5.5, 16.7, 33.3 mmol/L)分别刺激培养的MG63细胞24 h, RT-PCR法检测TRAIL, OPG, OPGL mRNA的表达,免疫组织化学法检测MG63细胞中TRAIL的表达及分布. 结果: 葡萄糖对MG63细胞中TRAIL, OPGL mRNA的表达,均按照对照组、5.5 mmol/L组、16.7 mmol/L组、33.3 mmol/L组顺序递增(P＜0.05),OPG mRNA的表达按照此顺序递减(P＜0.05). 33.3 mmol/L组TRAIL mRNA的水平明显高于对照组[(1.004±0.070) vs (0.740±0.023), P＜0.05], TRAIL免疫反应阳性物质密度也明显高于对照组. 结论: 高糖环境可能导致成骨细胞中TRAIL和OPGL表达增多,OPG的表达减少,这可能是糖尿病骨质疏松症的重要发病机制之一.     

TRAIL受体在胆管癌组织中的表达及意义

目的 :探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)的受体在人胆管癌组织、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)的表达及其临床意义。 方法 :应用原位杂交组织化学法检测TRAIL受体mRNA在人胆管癌组织、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)中的表达。 结果 :DR4mRNA、DR5mRNA在人胆管癌组织、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)均呈阳性表达。只有 3例DcR1(3/5 2 )和 7例DcR2 (7/5 2 )在人胆管癌组织呈弱阳性表达。DcR1、DcR2 mRNA在癌旁胆管组织呈阳性表达 ,而在胆管癌细胞株 (QBC939)均不表达。 结论 :TRAIL死亡受体和诱捕受体在人胆管癌、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)的表达不同 ,这些受体表达的变化可能在调控人胆管癌凋亡中发挥重要作用。     

白藜芦醇对TRAIL诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响

目的 研究白藜芦醇对TRAIL诱导乳腺癌,MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响.方法 MTT法检测细胞增殖;AnnexinV染色并流式细胞术检测细胞凋亡;分光光度法检测Caspse-8、Caspase-3相对活性;DAPI细胞核染色法观察细胞凋亡.结果 50μmol/L和100μmol/L白藜芦醇分别与50 ng/mL TRAIL联合作用后,对MDA-MB-231细胞增殖的抑制率为(62.43±2.07)%和(87.32±1.44)%;而细胞凋亡率分别为(53.59±1.44)%和(73.72±1.96)%,与单独应用相应浓度的白藜芦醇和TRAIL比较,差异均存在显著性(P＜0.01).50ng/mL TRAIL分别与50μmol/L和100μmol/L白藜芦醇联合作用后,Caspase-8、Caspase-3的相对活性为(0.282±0.008)、(0.386±0.013)及(0.437±0.05)、(0.521±0.03),与对照组及单用TRAIL、白藜芦醇比较均明显增强,差异显著(P＜0.01).结论 TRAIL与白藜芦醇联合可协同抑制MDA-MB-231细胞增殖并诱导其凋亡,白藜芦醇增强TRAIL诱导细胞凋亡的作用可能是通过促进Caspase-8和Caspase-3的表达来实现.     

TRAIL受体在子宫内膜癌细胞株的表达

目的:研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)受体在正常子宫内膜组织、子宫内膜癌组织和癌旁组织的表达特征。方法:采用RT-PCR技术,检测20例正常子宫内膜、20例子宫内膜癌及癌旁组织中TRAIL受体DR4、DR5和假受体DcR1、DcR2阳性表达情况。结果:TRAIL受体DR4、DR5的mRNA在人正常子宫内膜组织、子宫内膜癌组织和癌旁组织中均表达,诱骗受体DcR1的mRNA在子宫内膜各组织中的表达率不同,但差异无统计学意义(P>0.05),而诱骗受体DcR2的mRNA在子宫内膜癌组织中的表达率明显低于正常子宫内膜组织和癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.005),癌旁组织细胞中DcR2表达和正常子宫内膜组织相近(P>0.05)。结论:TRAIL诱骗受体DcR1、DcR2在子宫内膜癌中的低表达可能与其发病机制有关,可能对防止子宫内膜癌变具有一定作用。     

联合索拉非尼与TRAIL对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响

目的:研究多激酶抑制剂甲苯磺酸索拉非尼(SOR)是否具有增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。方法:体外培养HT-29细胞。碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)定量分析亚二倍体(sub-G1)细胞百分率。比色法测定细胞Caspase-3活性。AO/EB双染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态。结果:SOR(5μmol/L)和TRAIL(100ng/mL)以及两者合用作用48小时HT-29细胞的sub-G1百分率分别是4.65%±2.33%、5.29%±2.80%和42.6.50%±4.65%;HT-29细胞的Caspase-3的活性分别是培养基组的1.24、1.37和9.51倍。两者合用展示出细胞核染色质固缩和碎裂的典型凋亡细胞形态。结论:亚细胞毒性浓度的SOR具有增强TRAIL诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。     

正常大鼠角膜组织TRAIL及其受体DR4的表达及意义

目的观察大鼠角膜组织肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-relatedapoptosis-inducingligand,TRAIL)及其死亡受体4(deathreceptor4,DR4)的表达及分布情况,分析其临床意义。方法取正常大鼠角膜组织片,采用免疫组织化学方法检测TRAIL及其受体DR4在角膜组织中的表达状况。结果在正常角膜组织中TRAIL及其受体DR4均有表达,主要分布于上皮层及内皮层,基质层也有少量表达。结论正常大鼠角膜组织中有TRAIL及其受体DR4的表达。     

TRAIL及其受体在自身免疫性疾病中的作用机制

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)是新的肿瘤坏死因子家族成员,共有5种受体,其配体-受体系统介导细胞凋亡。免疫细胞的凋亡异常与自身免疫性疾病的发生密切相关。以往研究主要集中在肿瘤的发生、发展和治疗等方面,近年来,TRAIL在免疫系统中的作用开始受到关注。现就TRAIL及其受体在免疫细胞凋亡中的作用及其与自身免疫性疾病发生和发展的关系予以综述。     

喉癌发生发展过程中TRAIL和Survivin蛋白的表达研究

目的:探讨喉癌发生发展过程中TRAIL、Survivin蛋白的表达及与喉癌病理特征的关系。方法:采用免疫组化SP法对48例喉癌患者手术后大体标本中喉正常黏膜、不典型增生及浸润癌组织进行检测及分析。结果:TRAIL蛋白从正常黏膜-不典型增生-浸润癌呈渐进性低表达,而Survivin蛋白则呈渐进性高表达。喉浸润癌组织中TRAIL蛋白的低表达与Survivin蛋白的高表达呈负相关(r=-0.510,P<0.01)。结论:TRAIL和Survivin两种蛋白参与了喉癌的发生发展,两者的表达失调与喉癌发生密切相关。     

肝癌组织及肝癌细胞株中TRAIL受体的检测

目的:检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)受体在原发性肝癌(PHC,简称肝癌)组织及肝癌细胞株HepG2及SMMC7721中的表达,以期选出与肝癌组织中TRAIL受体表达相近的细胞株。方法:收集原发性肝癌组织30例,以常规方法培养人肝癌细胞株HepG2及SMMC7721,以半定量RT-PCR法,对TRAIL受体的表达作半定量检测。结果:30例肝癌组织及HepG2细胞中均有TRAIL受体DR4(deathrecptor4)、DR5、DcR1(decoy receptor1)、DcR2的表达,而SMMC7721细胞中不表达DcR1;半定量结果显示肝癌组织及HepG2中DR4及DR5的表达量明显高于DcR1及DcR2;肝癌组织中4对受体间的表达量存在相关性,HepG2细胞中DR4的表达与DcR1及DcR2间存在相关性。结论:HepG2中TRAIL受体的表达类似于肝癌组织。     

TRAIL及其受体与慢性肝病关系的研究进展

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体是肿瘤坏死因子家族的新成员,其介导的细胞凋亡作用在疾病发展中发挥重要地位。从近几年研究报道可以看出,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体与慢性肝病发生发展及治疗的关系十分密切。特别是病毒性肝炎、肝硬化和肝癌。该文就此进行综述。     

鼠源TRAIL真核表达质粒的构建及其抑瘤效应的初步观察

采用RT-PCR自小鼠脾细胞RNA中扩增出鼠TRAIL基因的全长cDNA，利用DNA重组技术将其插入到真核表达载体pcDNA3.1中获得重组质粒pX1。经酶切鉴定及序列分析，表明成功构建TRAIL的真核表达质粒。通过直接肌肉内注射进行基因转染，pX1具有诱导肝癌细胞凋亡，抑制肝癌生长的作用。表明TRAIL可作为一种直接杀伤机制应用于肝癌的基因治疗。     

TRAIL抑制胃癌多药耐药基因MDR1/P-gp的表达

目的观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对胃癌耐药细胞株SGC-7901/VCR多药耐药基因MDR1及其编码P-gp蛋白表达的影响,探讨以TRAIL为靶点逆转胃癌多药耐药的机制。方法 SGC-7901/VCR细胞株经不同浓度的TRAIL处理48 h后,RT-PCR检测各组胃癌细胞株中多药耐药MDR1 mRNA的表达情况,同时用ELISA法检测各组胃癌细胞株中P-gp表达的含量。结果不同浓度TRAIL(50、100、200、400μg/L)作用于细胞后,胃癌耐药细胞株SGC-7901/VCR的MDR1/P-gp表达受不同程度抑制,与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05)。400μg/L与200μg/L组相比其MDR1/P-gp抑制程度并不明显,其余各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TRAIL可抑制SGC-7901/VCR MDR1/P-gp的表达,且呈量效关系。TRAIL可能通过降低耐药基因MDR1的表达逆转胃癌的多药耐药。     

激活淋巴细胞中TRAIL及其受体表达的初步研究

目的：探讨静止及激活状态外周血淋巴细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）及其受体的表达和它们在淋巴细胞生长、增殖中的作用。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测和基因测序确定不同状态淋巴细胞TRAIL及其受体的表达。结果：在静止状态外周血淋巴细胞TRAIL及其受体皆不表达，而在激活状态TRAIL及其受体都存在不同程度的表达。结论：TRAIL及其受体在激活的淋巴细胞中表达增强，可能参与其激活调控机制。     

乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因载体的构建及表达

目的：构建乏氧（HRE）/辐射（Egr1）双敏感启动子介导的分泌型人TRAIL (shTRAIL)基因表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,观察乏氧和辐射对其表达的影响。 方法：利用化学合成HRE上、下链,PCR扩增得到双链HRE;pMD19T-Egr1经Sac Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切得到Egr1;pshuttle-shTRAIL 经Kpn Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切得到shTRAIL;利用基因重组技术构建含有HRE/Egr1双敏感启动子介导shTRAIL的表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,经酶切、PCR和测序鉴定正确。肺腺癌A549细胞分为正常组、乏氧组（1%）、照射组(6 Gy)和乏氧加照射组;表达载体转染肺腺癌A549细胞,RT-PCR及ELISA法检测shTRAIL的表达。结果：BamH Ⅰ和Sma Ⅰ酶切,所得片段大小分别为1 284和4 998　bp、2 292和3 990 bp;以Egr1和shTRAIL引物PCR扩增该载体,得到469和820 bp产物;将pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL进行测序,所得结果与设计一致,说明构建正确。转染肺腺癌A549细胞后,乏氧组、辐射组及乏氧加照射组shTRAIL mRNA和蛋白表达增加,与对照组比较差异有显著性（P<0.05）,且乏氧加照射组表达更明显。结论：成功地构建了乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因表达的载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL;乏氧及照射能够诱导TRAIL表达增加,且二者具有协同作用。