激素敏感型单纯性肾病病毒基因反式激活调控中IκBα的异常表达

目的研究激素敏感型单纯性肾病(SRSNS)病毒基因反式激活过程中IκBα基因表达及其对NF-κB活性的调控作用。方法采用实时定量RT-PCR、Westernblot和电泳迁移率改变实验、RT-PCR和ELISA分别检测SRSNS活动期、缓解期患儿和正常儿童外周血单个核细胞(PBMCs)中IκBαmRNA、IκBα蛋白质、NF-κB活性、呼吸道病毒基因表达和血浆病毒抗体。结果SRSNS活动期NF-κB活性高于SRSNS缓解期和正常儿童,与呼吸道病毒检出率呈正相关趋势;SRSNS活动期IκBα蛋白质低于SRSNS缓解期患儿和正常儿童,与NF-κB活性呈直线负相关(r=-0.884,P<0.05)。而SRSNS活动期IκBαmRNA水平高于正常儿童,但仍低于SRSNS缓解期。结论SRSNS病毒基因反式激活过程中存在IκBα异常表达,IκBα蛋白质调控NF-κB活性。     

激素敏感型单纯性肾病病毒基因反式激活调控中IκBa的异常表达

目的：研宛激素敏感型单纯性肾病（SRSNS）病毒基因反式激活过程中IκBa基因表达及其对NF-κB活性的调控作用。方法：采用实时定量RT—PCR、Western blot和电泳迁移率改变实验、RT—PCR和ELISA分别检测SRSNS活动期、缓解期患儿和正常儿童外周血单个棱细胞（PBMCs）中IκBamRNA、IκBa蛋白质、NF-κB活性、呼吸道病毒基因表达和血浆病毒抗体。结果；SRSNS活动期NF-κB活性高于SRSNS缓解期和正常儿童，与呼吸道病毒检出率呈正相关趋势;SRSNS活动期IκBa蛋白质低于SRSNS缓解期患儿和正常儿童，与NF-κB活性呈直线负相关（r=-0．884，P＜0．05）。而SRSNS活动期IκBamRNA水平高于正常儿童，但仍低于SRSNS缓解期。结论：SRSNS病毒基因反式激活过程中存在IκBa异常表达，IκBa蛋白质调控NF-κB活性。     

抑制子κBα调控激素敏感型单纯性肾病病毒基因反式激活途径中核因子κB活性的研究

目的研究抑制子κBa基因（IκBa）表达及其对激素敏感型单纯性肾病（SRSNS）病毒基因反式激活途径核因子κB（NF-κB）活性的调控作用。方法采用荧光定量RT—PCR、Western blot和电泳迁移率改变实验分别测定SRSNS活动期、SRSNS缓解期患儿和正常儿童外周血单个核细胞（PBMCs）中IκBamRNA、蛋白质表达水平和NF—κB活性。同时采用RT—PCR和ELISA分别检测PBMCs呼吸道病毒基因表达和血浆病毒抗体。结果SRSNS活动期PBMCs细胞核中NF-κB活性增加，与SRSNS缓解期和正常儿童比较，差异有统计学意义（P＜0．05）。NF-κB活性与呼吸道病毒检出率呈正相关趋势（OR=27，Kappa系数=0．59，P＜0．05）。SRSNS活动期PBMCs细胞浆中IκBa蛋白质低于SRSNS缓解期和正常儿童（P＜0．05）。SRSNS活动期NF-κB活性与bcBa蛋白质水平呈负相关（r=-0．884，P＜0．05）。SRSNS活动期IκBα mRNA水平高于正常儿童，但仍低于SRSNS缓解期（P＜O．05）。结论NF-κB介导的病毒基因反式激活过程中存在IκBα异常表达，IκBα对于NF-κB活性具有调控作用。     

核因子кB介导病毒基因反式激活途径在激素敏感型单纯性肾病发病中的作用

目的研究核因子кB(NF-кB)介导的病毒基因反式激活途径在激素敏感型单纯性肾病(SRSNS)发病中的作用,探讨呼吸道病毒触发该病的机制.方法采用电泳迁移率改变分析、RT-PCR和ELISA法分别对SRSNS、肾炎性肾病、继发性肾小球疾病、毛细支气管炎和正常儿童外周血单个核细胞(PBMC)NF-кB转录活性、呼吸道病毒基因和抗体表达、血清IL-8水平进行检测.结果①SRSNS活动期NF-кB转录活性增高,与SRSNS恢复期、缓解期和其它组比较差异有统计学意义(P<0.05);②SRSNS活动期血清IL-8水平增高,与NF-кB转录活性呈直线正相关关系(r=0.88,P<0.001),NF-кB活性与呼吸道病毒检出阳性率亦呈正相关趋势.结论 NF-кB介导的病毒基因反式激活途径能使IL-8等基因表达增高而致病,这可能是呼吸道病毒触发SRSNS的主要机制之一.     

抑制子κBα调控激素敏感型单纯性肾病病毒基因反式激活途径中核因子κB活性的研究

目的 研究抑制子κBα基因(IκBα)表达及其对激素敏感型单纯性肾病(SRSNS)病毒基因反式激活途径核因子κB(NF-κB)活性的调控作用.方法 采用荧光定量RT-PCR、Western blot和电泳迁移率改变实验分别测定SRSNS活动期、SRSNS缓解期患儿和正常儿童外周血单个核细胞(PBMCs)中IκBα mRNA、蛋白质表达水平和NF-κB活性.同时采用RT-PCR和ELISA分别检测PBMCs呼吸道病毒基因表达和血浆病毒抗体.结果 SRSNS活动期PBMCs细胞核中NF-κB活性增加,与SRSNS缓解期和正常儿童比较,差异有统计学意义(P＜0.05).NF-κB活性与呼吸道病毒检出率呈正相关趋势(OR=27,Kappa系数=0.59,P＜0.05).SRSNS活动期PBMCs细胞浆中IκBα蛋白质低于SRSNS缓解期和正常儿童(P＜0.05).SRSNS活动期NF-κB活性与IκBα蛋白质水平呈负相关(r=-0.884, P＜0.05).SRSNS活动期IκBα mRNA水平高于正常儿童,但仍低于SRSNS缓解期(P＜0.05).结论 NF-κB介导的病毒基因反式激活过程中存在IκBα异常表达,IκBα对于NF-κB活性具有调控作用.     

核因子кB介导病毒基因反式激活途径在激素敏感型单纯性肾病发病中的作用

目的研究核因子kB（NF-kB）介导的病毒基因反式激活途径在激素敏感型单纯性肾病（SRSNS）发病中的作用，探讨呼吸道病毒触发该病的机制。方法采用电泳迁移率改变分析、RT-PCR和ELISA法分别对SRSNS、肾炎性肾病、继发性肾小球疾病、毛细支气管炎和正常儿童外周血单个核细胞（PBMC）NF—kB转录活性、呼吸道病毒基因和抗体表达、血清IL-8水平进行检测。结果①SRSNS活动期NF—kB转录活性增高．与SRSNS恢复期、缓解期和其它组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；②SRSNS活动期血清IL-8水平增高，与NF-kB转录活性呈直线正相关关系（r=0．88，P〈0．001），NF-kB活性与呼吸道病毒检出阳性率亦呈正相关趋势。结论NF—kB介导的病毒基因反式激活途径能使IL-8等基因表达增高而致病．这可能是呼吸道病毒触发SRSNS的主要机制之一。     

NF-κB在成人原发性肾病综合征发病中的作用及机制探讨

目的探讨核因子-κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）在成人原发性肾病综合征（pri mary nephritic syn-drome,PNS）发病机制中的意义,研究PNS患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）中NF-κB活性对白细胞介素8（interleukin-8,IL-8）水平的调控作用。方法以28例确诊PNS的成人患者（PNS组）和25例健康成人（对照组）为研究对象,抽血、提取PBMC并培养,用酶联免疫吸附法分别检测两组的NF-κB活性吸光度（opticaldensity,OD）值及酶联免疫吸附双抗体夹心法检测IL-8的浓度。再分别用NF-κB的特异性激动剂IL-1β和糜蛋白酶样丝氨酸蛋白酶抑制剂N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮（N-tosyl-L-phenylanyl chloromethyl ketone,TPCK）进行干预后,分别检测两组的NF-κB活性吸光度和IL-8的浓度。结果与正常对照组相比,PNS组NF-κB活性及IL-8浓度均显著增高,差异有统计学意义（P〈0.05）,且随着NF-κB活性的增强和抑制,IL-8的浓度也相应升高和降低,两者有直线相关关系（P〈0．05）,而正常对照组无此相关关系。结论NF-κB在成人原发性肾病综合征发病中有重要意义,可能是通过调节IL-8的浓度而发挥其致病作用。     

慢性阻塞性肺疾病患者单核细胞NF-κB活性的研究(英文)

目的探讨单核细胞NF-κB的激活在COPD发病机制中的作用。方法抽取31例急性加重期组和26例稳定期组的COPD患者外周血,分离单核细胞并培养,免疫细胞化学法测定核转录因子NF-κBp65的活性表达;同时检测外周血SOD、MDA、IL-8浓度,所有患者均测定肺功能(FEV1占预计值%、FEV1/FVC)。并以15例健康志愿者作为对照组。结果LPS刺激后,急性加重期组单核细胞NF-κBp65表达显著高于稳定期组及正常组(P<0.01),稳定期组高于正常组(P<0.01)。经LPS刺激后,各组单个核细胞NF-κBp65活性均显著增高,(P<0.05);外周血单核细胞NF-κB的激活与血清IL-8、MDA水平呈正相关,而与SOD呈负相关。结论NF-κB在COPD单核细胞表达细胞因子IL-8的信号转导调控中起重要作用。     

呼吸道病毒基因在儿童肾病综合征白细胞的表达和抑制研究

目的通过研究呼吸道病毒基因在外周血单个核细胞（PBMC）的表达和抑制，探讨呼吸道病毒感染与激素敏感型单纯性肾病综合征（SRSNS）发病的相关性。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法，分别在反义寡核苷酸（ASONs）转染至外周血单个核细胞前后检测呼吸道病毒基因的表达。结果SRSNS组患儿PBMC中呼吸道病毒基因检出率均高于肾炎性肾病组、紫癜性肾炎及正常对照组，SRSNS患儿PBMC中呼吸道病毒基因的表达其相应的反义寡核苷酸所抑制。结论呼吸道病毒确实存在于SRSNS患儿体内，其基因的表达能被能被其相应的反义寡核苷酸所抑制。呼吸道病毒感染作为主要触发因素，可能为SRSNS的重要发病机制。     

卵巢癌中核因子-κB与血管内皮生长因子及IL-2的表达

目的通过测定卵巢癌组织核因子-κB（NF-κB）与血管内皮生长因子（VEGF）及IL-2的表达,探讨NF-κB通道的激活及其与肿瘤血管形成的关系。方法收集本院2008年~2014年卵巢癌患者47例,Ⅰ期组12例,Ⅱ期组20例,Ⅲ/Ⅳ期组15例,选择正常卵巢20例为对照组。采用免疫组织化学方法（SABC）测定NF-κB、VEGF和IL-2的表达,并用SPSS 19.0软件对数据进行统计学分析。结果 1）对照组可见少量NF-κB、VEGF和IL-2蛋白的表达;与对照组比较,Ⅰ期组、Ⅱ期组和Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB、VEGF和IL-2表达均增多（P〈0.05）;与Ⅰ期组比较,Ⅱ期组和Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB、VEGF表达均增多（P〈0.05）,IL-2表达均减少（P〈0.05）;与Ⅱ期组比较,Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB、VEGF表达增多（P〈0.05）,IL-2表达均减少（P〈0.05）。2）Ⅰ期组、Ⅱ期组和Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB与VEGF呈正相关（P〈0.05）,与IL-2呈负相关（P〈0.05）。结论卵巢癌相关蛋白NF-κB可通过上调VEGF的表达及下调IL-2的表达共同调节肿瘤血管的生成。     

小儿肾病综合征与呼吸道病毒基因表达关系的研究

目的通过研究呼吸道病毒基因在激素敏感型单纯性肾病综合征患儿外周血单个核细胞（PBMC）的袁达,探讨呼吸道病毒感染与其发病的关系。方法采用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）法,检测外周血单个核细胞呼吸道病毒基因的表述。结果32例SRSNS组患儿PBMC中有23例检测到呼吸道病毒RNA,检出的阳性率（71．9％）高于肾炎性肾病组、紫癜性肾炎及正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论呼吸道病毒确实存在于SRSNS患儿体内,呼吸道病毒感染可能为SRSNS的重要发病机制。     

紫癜性肾炎患儿PBMC核因子-KB的变化及黄芪的作用

目的 探讨核因子-κB（NF-κB）在儿童紫癜性肾炎（HSPN）中的作用及黄芪对其的影响.方法 选取35例HSPN患儿（HSPN组）和30例健康儿童（健康对照组）作为研究对象.抽取所有研究对象5 ml静脉血并提取外周血单个核细胞（PBMC）,分别加入NF-κB刺激剂白介素-1β（IL-1β）、NF-κB抑制剂对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基酮（TPCK）及黄芪注射液.经培养后离心,留细胞沉渣提取核蛋白,采用ELISA检测其NF-κB活性.结果 HSPN组PBMC NF-κB活性明显高于健康对照组（P＜0.01）.黄芪能显著降低HSPN组PBMCNF-KB活性（P＜0.01）,但不影响健康对照组NF-κβ活性（P＞0.05）.经IL-1B刺激后,HSPN组和健康对照组NF-κB活性均显著增高（均P＜0.01）,而黄芪能显著降低上述两组经IL-1β作用后的NF-κB活性（均P＜0.01）.经TPCK抑制后,HSPN组和健康对照组NF-κB活性均显著降低（均P＜0.01）,而黄芪能显著提高上述两组经TPCK作用后的NF-κB活性（均P＜ 0.01）;黄芪对HSPN组PBMC NF-κB活性的影响较健康对照组明显（P＜0.01）.结论 HSPN患儿PBMC的NF-κB活性上调,推测其参与HSPN的发病;黄芪能显著降低HSPN患儿PBMC NF-κB活性;黄芪对PBMC的NF-κB信号途径具有双向调节作用.     

IL-1预刺激对反义IRAK-2寡核苷酸抑制NF-κB活化的影响

目的 研究白介素-1（IL-1）预刺激对反义受体相关激酶-2寡核苷酸（IRAK-2 ODN）抑制IL-1激活核因子-kappa B（NF-κB）的影响。方法 实验分IL-1预处理组和非预处理组,以脂质体介导反义 IRAK-2 ODN转染293细胞,以夹心酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测NF-κB的含量。结果 IL-1非预处理组反义IRAK-2 ODN不能抑制NF-(B活化,而预处理组NF-κB活化受到明显抑制（4 (g 反义 IRAK-2 ODN与细胞共孵育8 h时,NF-κB的光密度值从ODN转染前的0.835±0.013下降到转染后的 0.261±0.008）,且这种抑制作用具有时间（5~24 h）和剂量（1~8 (g）依赖性。结论 IL-1预刺激在反义IRAK-2 ODN抑制IL-1诱导的NF-κB活化中起决定性作用。     

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖刺激人子宫平滑肌细胞白细胞介素8表达的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对脂多糖（LPS）刺激离体培养的人晚期妊娠子宫平滑肌细胞IL-8表达和核转录因子（NF-κB）活性的影响。方法原代培养足月未临产的子宫平滑肌细胞，10μg／mL LPS与经浓度分别为0（生理盐水对照，NS）、5、10、15mmol／L的NAC预处理的子宫平滑肌细胞作用8h，以及10mmol／L的NAC或NS预处理的子宫平滑肌细胞经LPS干预0h、3h、6h、12h、24h、48h，收集细胞免疫印迹检测NF-κB P65合成情况、RT-PCR检测IL-8 mRNA表达及上清液ELISA检测IL-8浓度。结果①NAC在5～15mmol／L呈剂量依赖性抑制LPS刺激IL-8蛋白合成和mRNA表达。②随着NAC浓度由低至高，NF-κB P65合成由强到弱，差异有统计学意义（P〈0．01），其变化趋势与IL-8 mRNA一致。结论NAC能抑制LPS刺激晚期妊娠子宫平滑肌细胞IL-8蛋白合成和基因表达，可能与其抑制NF-κB激活有关。     

盐酸戊乙奎醚抑制白细胞介素-1β诱导A549细胞分泌细胞间黏附分子-1及其机制的研究

目的探讨盐酸戊乙奎醚（PHC）抑制白细胞介素-1β（IL-1β）诱导A549细胞分泌细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及其作用机制。方法体外培养A549细胞株,分别用培养液（A组）、PHC（B组）、IL-1β（C组）和IL-1β＋PHC（D组）处理,NF-κB DNA结合活性试剂盒检测刺激后1 h NF-κB DNA结合活性;反转录-聚合酶链反应检测刺激后4 h ICAM-1 mRNA表达;酶联免疫吸附法检测刺激后24 h ICAM-1蛋白表达。结果 IL-1β刺激后,C组NF-κB DNA结合活性、ICAM-1 mRNA和蛋白明显升高（P〈0.01）,D组NF-κB DNA结合活性、ICAM-1 mRNA和蛋白高于A组（P〈0.05）,但低于C组（P〈0.05）,PHC预处理能抑制IL-1β诱导的NF-κB DNA结合活性、ICAM-1 mRNA和蛋白表达升高。结论 PHC可抑制IL-1β诱导A549细胞分泌ICAM-1,其机制可能通过抑制NF-κB激活。     

核因子-κB与IL-10在慢性阻塞性肺疾病中的作用

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者核因子-κB(NF-κB)与白细胞介素-10(IL-10)的关系及在AECOPD发病中的作用,以及糖皮质激素治疗AECOPD的可能机制。方法:选择60例AECOPD急性加重期患者为试验组,其中轻—中度组30例,重—极重度组30例,另选择同期30例健康体检者为对照组。采用蛋白免疫印迹法(Western blotting法)和ELISA法分别检测各组及重—极重度AECOPD组糖皮质激素治疗后单核细胞核内NF-κB水平及血清IL-10含量,对AECOPD患者行肺功能检测(测FEV1占预计值,FEV1/FVC值)。结果:AECOPD组NF-κB水平高于对照组(P<0.01),IL-10水平低于对照组(P<0.01);重—极重度AECOPD组NF-κB水平高于轻—中度组(P<0.01),IL-10水平低于轻—中度组(P<0.01),该组经糖皮质激素治疗后NF-κB水平低于治疗前(P<0.01),IL-10水平高于治疗前(P<0.01)。各组NF-κB水平与IL-10含量及FEV1占预计值均呈负相关。结论:NF-κB在AECOPD气道的炎性反应中起重要作用;IL-10通过抑制NF-κB水平抑制AECOPD气道炎性反应;糖皮质激素可以控制AECOPD气道炎性反应,其通过提高NF-κB的表达,和抑制IL-10的产生实现。     

老年患者医院获得性肺炎血清可溶性髓系细胞触发受体-1、核转录因子-κB和白细胞介素-8水平变化的研究

目的：观察老年患者医院获得性肺炎（HAP）血清可溶性髓系细胞触发受体-1（sTREM-1）及相关炎症因子水平变化,探讨老年HAP患者的全身炎症反应状态。方法20例老年HAP患者和20例健康体检者,于入组第1、5、10天检测血清sTREM-1、核转录因子-κB（NF-κB）、白细胞介素8（IL-8）的浓度,结合临床肺部感染评分（CPIS）分析上述指标与肺炎严重程度、预后的相关性。结果肺炎组血清sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度较对照组显著增高,上述指标与CPIS评分呈正相关。结论 sTREM-1、NF-κB、IL-8是HAP诊断的良好指标,sTREM-1、NF-κB、IL-8水平与HAP的严重程度呈正相关。     

转录因子在孟鲁司特钠治疗类固醇激素抵抗型变应性鼻炎中的作用

目的 研究外周血单个核细胞中转录因子活化蛋白-1（AP-1）及核因子-κB（NF-κB）在孟鲁司特钠治疗类固醇激素抵抗型变应性鼻炎（AR）中的作用。方法 筛选50例类固醇激素抵抗型AR患者,随机分成两组,分别口服孟鲁司特钠片（孟鲁司特钠组）或ATP片（安慰剂组）治疗,治疗21 d后,对两组患者进行症状和体征记分,应用EMSA法测定外周血中AP-1及NF-κB的DNA结合活性,ELISA法测定血清IL-4、IL-5及IL-10的表达水平。结果 治疗21 d后,孟鲁司特钠组治疗有效率显著高于安慰剂组（P〈0.01）;与安慰剂组比较,孟鲁司特钠组AP-1和NF-κB的DNA结合活性明显降低（P〈0.01）;孟鲁司特钠组症状与体征总积分下降指数（SRI）与AP-1及NF-κB的DNA结合活性呈负相关（P〈0.05）,而安慰剂组两者间无明显相关关系（P〉0.05）;经治疗后孟鲁司特钠组患者血清IL-4、IL-5水平较安慰剂组显著降低,而IL-10水平较安慰剂组显著升高（P〈0.01）。结论 孟鲁司特钠可能通过抑制外周血单个核细胞中转录因子AP-1及NF-κB的转录活性,调节细胞因子IL-4、IL-5及IL-10的表达,改善类固醇激素抵抗型AR患者病情,发挥抗炎作用。     

急性冠脉综合征患者血清sCD40L、NF-κB的变化及其相关性

目的探讨急性冠脉综合征（ACS）患者外周血清可溶性CD40配体（sCD40L）水平与单个核细胞核因子kappa B（NF-κB）活性变化及其相关性。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定ACS组32例、稳定性心绞痛组20例及正常对照组20例外周血清sCD40L的浓度及外周血单个核细胞NF-κB的活性。结果 ACS组外周血清sCD40L的浓度及外周血单个核细胞NF-κB的活性均高于SAP组和正常对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;ACS组血清sCD40L水平与外周血单个核细胞NF-κB的活性呈显著正相关（P〈0.01）。结论 CD40L可能通过促进NF-κB的活化而导致各种促动脉粥样硬化的细胞因子和趋化因子的生成,最终促使ACS的发生。     

抗氧化剂PDTC对酸性环境诱导的人卵巢癌SKOV3细胞IL-8表达的作用及机制

目的：探讨二硫氨基甲酸吡啶（PDTC）对酸性环境中培养的人卵巢癌细胞SKOV3的增殖活性及白细胞介素8 (IL-8) 表达的影响,以及细胞核转录因子-κB（NF-κB）在此过程中的作用。方法：将SKOV3细胞分为5组:常规培养液组（对照组）和酸性培养组以及酸性培养液加PDTC组(分别加入终浓度为25、50、100 μmol•L^-1的PDTC);各组培养12 h后,MTT法检测PDTC对SKOV3细胞增殖的影响,ELISA法检测培养上清中IL-8蛋白含量,Western blotting检测核内NF-κB蛋白的表达。结果： SKOV3细胞在酸性环境中IL-8表达水平［(1 384.211±42.320) ng•L^-1］高于对照组［（617.505±47.850） ng•L^-1］ ( P<0.01)。加入不同浓度PDTC（25、50、100 μmol•L^-1） ,IL-8表达逐步降低［（1 239.053±14.490）、（1 113.578±29.140）、（1 014.457±55.490） ng•L^-1］ ,均低于酸性培养组( P<0.05)。在酸性环境中的SKOV3细胞可观察到颜色较深的核内NF-κB蛋白条带,应用PDTC后NF-κB在核内的蛋白条带颜色变浅。结论： PDTC对酸性环境中SKOV3细胞IL-8的表达具有抑制作用,该作用与PDTC抑制NF-κB的活化有关。