BRCA、HRD与PARP抑制剂：卵巢癌临床研究中的相关问题与思考

DNA损伤修复功能异常是肿瘤发生发展的重要特点之一［1］。乳腺癌易感基因（Breast Cancer Susceptibility Genes,BRCA）包括BRCA1和BRCA2,通过同源重组（homologous recombination,HR）整合参与DNA双链断裂的修复。BRCA1/2基因作为HR修复的关键抑癌基因,其编码的蛋白参与DNA双链损伤的修复、细胞生长和防止异常细胞分裂导致肿瘤的发生。BRCA1/2基因突变意味着抑癌基因“刹车”失控,不能有效地抑制肿瘤细胞的增殖。 浏览更多请关注本刊微信公众号及当期杂志。     

BRCA、HRD与PARP抑制剂：卵巢癌临床研究中的相关问题与思考

        DNA损伤修复功能异常是肿瘤发生发展的重要特点之一［1］。乳腺癌易感基因 （Breast Cancer Susceptibility Genes, BRCA）包括BRCA1和BRCA2,通过同源重组（homologous recombination,HR）整合参与DNA双链断裂的修复。BRCA1/2基因作为HR修复的关键抑癌基因,其编码的蛋白参与DNA双链损伤的修复、细胞生长和防止异常细胞分裂导致肿瘤的发生。BRCA1/2基因突变意味着抑癌基因“刹车”失控,不能有效地抑制肿瘤细胞的增殖。 浏览更多请关注本刊微信公众号及当期杂志。     

PARP抑制剂卵巢癌治疗研究进展

卵巢癌是病死率最高的妇科恶性肿瘤之一,初始治疗后复发率高,5年总生存率低,晚期卵巢癌的治疗是临床工作中的难题.PARP抑制剂极大改善了目前卵巢癌的治疗现状.多项临床试验数据表明,PARP抑制剂不仅在一线维持治疗和铂敏感复发维持阶段显著延长卵巢癌患者无进展生存期,使得维持治疗成为卵巢癌治疗的新模式,同时PARP抑制剂在复...     

卵巢癌中PARP抑制剂耐药机制的研究进展

卵巢癌在妇科恶性肿瘤中预后最差、病死率最高.在全球范围内,女性恶性肿瘤中,卵巢癌发病率是第7位,死亡率是第8位,5年生存率低于45％[.虽然早期患者预后较好,但大多数患者在诊断时已属晚期.其中上皮性卵巢癌约占80％,手术减瘤、含铂化疗(如卡铂、紫杉醇等)是公认的一线治疗方案.但这些治疗长期效果并不满意,超过70％的晚期...     

PARP抑制剂在铂耐药上皮性卵巢癌治疗中的应用

PARP抑制剂在上皮性卵巢癌的一线维持治疗中展示出了良好的临床效果,但在铂耐药上皮性卵巢癌的治疗中尚无较多临床数据提供参考。本文对PARP抑制剂在铂耐药上皮性卵巢癌治疗中的应用做一综述,以期提供临床参考。     

卵巢癌一线治疗:PARP抑制剂研究进展

背景:多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂对铂敏感复发卵巢癌的治疗带来了重大变革.最新研究表明在卵巢癌的全程治疗中早期应用PARP抑制剂可使患者获益.设计:汇总近期PARP抑制剂治疗/维持治疗新诊断卵巢癌患者的III期临床试验资料.讨论各种PARP抑制剂临床试验中的疗效和安全性,比较研究设计的优缺点,考虑后续研究...     

PARP抑制剂治疗引起的卵巢癌适应性反应及意义

近年来以聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂为主的靶向治疗改善了BRCA1/2突变卵巢癌患者的预后,但仍难以避免耐药及复发的困境。肿瘤在接受PARP抑制剂治疗时会通过适应性反应、逃避药物压力从而获得耐药性。本文综述了PARP抑制剂作用后肿瘤和肿瘤免疫微环境产生的适应性反应,为阻断PARP抑制剂适应性反应的联合疗法提供了理论依据。     

PARP抑制剂能开启卵巢癌治疗模式的新篇章吗？

卵巢癌是继宫颈癌和子宫内膜癌之后,发病率最高的妇科恶性肿瘤,其病死率居妇科肿瘤之首。在2012年,全球发生卵巢癌23.9 万例,死亡15.2 万例［1］。卵巢癌有显著的地域差异性,其中,北美、中欧和东欧地区发病率最高（＞8/10万）,亚洲和非洲发病率最低（≤3/10万）。     

PARP抑制剂与贝伐珠单抗治疗铂敏感复发性卵巢癌的网状Meta分析

目的 通过网状Meta分析比较聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)抑制剂与贝伐珠单抗治疗铂敏感复发性卵巢癌的疗效,为铂敏感复发性卵巢癌患者提供最有效的维持治疗策略.方法 计算机检索中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学数据库、Pubmed、Web of Science、Embase及Cochrane Libra...     

ATM对卵巢癌细胞株CaOV3顺铂敏感性的影响

目的:探讨ATM激酶表达水平和活性对卵巢癌细胞Ca OV3顺铂敏感性的影响,以及可能的机制。方法:以ATM-siRNA转染Ca OV3细胞48h下调ATM蛋白水平,以KU-55933预处理Ca OV3细胞12h下调ATM激酶活性。CCK8试验检测细胞活性,Western blot法检测ATM及r-H2AX蛋白表达,荧光共聚焦confocal检测细胞DNA双链损伤标志蛋白r-H2AX表达及同源重组修复关键蛋白RAD51表达及两者细胞核中共定位,应用碱性慧星试验检测细胞内DNA双链损伤情况,流式细胞术检测细胞周期分布。结果:卵巢癌细胞系Ca OV3具备相对完整的同源重组修复能力,下调ATM或抑制ATM激酶活性均可降低DNA双链损伤情况下的同源重组修复能力,增加其对c DDP敏感性,同时减少c DDP引起的G0/G1期周期阻滞。结论:抑制ATM可影响卵巢癌细胞同源重组修复过程,增加DNA双链损伤,缓解G0/G1期周期阻滞,增加其对顺铂敏感性。     

DNA修复相关蛋白ERCC1、BRCA1和hMLH1与卵巢上皮性癌顺铂耐药的关系

目的 研究DNA修复相关蛋白ERCC1、BRCA1和hMLH1与卵巢上皮性癌顺铂耐药的关系.方法 应用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法检测1996年1月至2003年5月在天津医科大学总医院的58例卵巢上皮性癌组织中ERCC1、BRCA1和hMLH1蛋白的表达,分析其与临床病理特征和顺铂耐药的关系及3种DNA修复蛋白的相关性.结果 58例卵巢癌组织ERCC1、BRCA1、hMLH1蛋白的阳性表达率分别为37.93%、32.76%、75.86%,ERCC1和BRCA1表达与患者年龄、临床分期、病理组织学类型、组织学分级及有无腹水无相关性(P＞0.05).hMLH1表达与病理组织学类型相关(P=0.023).顺铂化疗耐药组ERCC1、BRCA1和hMLH1蛋白的阳性表达率分别为57.89%、52.63%和78.95%,化疗敏感组的阳性表达率分别为28.21%、23.08%和74.36%,两组比较,ERCC1和BRCA1的表达差异有统计学意义(P=0.029,P=0.024),hMLH1的表达差异无统计学意义(P=0.486).BRCA1和hMLH1蛋白的表达具有相关性(P=0.023).结论 ERCC1、BRCA1蛋白的表达与卵巢癌顺铂耐药有关,可能成为预测卵巢癌顺铂敏感性的指标.     

紫杉醇、顺铂联合方案治疗原发晚期上皮性卵巢癌的临床观察

<正>铂类药物联合紫杉醇（PT方案）已成为治疗晚期卵巢癌的一线方案,两者联合用药的有效反应率可达47％[1]。1993年3月至2001年4月我们使用PT方案治疗晚期卵巢癌术后患者11例,现将其疗效、用药方法、毒副反应等报告如下。     

ERCC1 Ⅷ外显子剪接变异对卵巢癌细胞顺铂耐药的影响

目的:探讨ERCC1 Ⅷ外显子剪接变异对卵巢癌细胞顺铂耐药的影响。方法:分别构建缺失Ⅷ外显子和野生型的ERCC1表达载体pD-DE(含突变型ERCC1基因)和pD-WE(野生型ERCC1),脂质体转染法转染A2780细胞,Western blot检测ERCC1表达水平研究该剪接变异对ERCC1基因表达水平的影响。MTT法检测肿瘤细胞的顺铂耐药性,彗星实验检测转染后细胞DNA的损伤修复情况。结果:成功构建重组质粒pD-DE和pD-WE;Western blot结果显示,该剪接变异未显著影响ERCC1表达;转染pD-DE的细胞与转染pD-WE的细胞相比,明显降低了顺铂的耐受性与细胞DNA损伤修复的能力。结论:ERCC1 Ⅷ外显子剪接变异降低卵巢癌细胞DNA损伤修复能力和对顺铂的耐药性。     

L型氨基酸转运蛋白抑制剂BCH联合顺铂对卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用

目的:探讨L型氨基酸转运蛋白抑制剂2-氨基双环-(2,2,1)-庚烷-2-羧酸(BCH)单用及联用顺铂对人卵巢癌SKOV3细胞生长的影响及其可能的分子机制。方法:人卵巢癌SKOV3细胞经不同浓度的BCH及BCH联合顺铂处理后,采用CCK-8法检测各组细胞的增殖活性;Western blot检测BCH对mTOR通路的影响。结果:单用BCH可显著抑制SKOV3细胞增殖,并呈现一定的时间-剂量依赖性。联用顺铂较之单独用药组,细胞活性明显降低(P<0.01),且BCH在顺铂之后应用时抑制作用更为明显(P<0.05)。Western blot显示BCH可抑制mTOR、p70 S6K和4E-BP1磷酸化,阻断mTOR通路。结论:L型氨基酸转运蛋白抑制剂BCH单用及联用顺铂均可显著抑制人卵巢癌SK-OV3细胞增殖,且BCH在顺铂之后应用抑制作用更明显,呈协同作用。     

顺铂对沉默β-catenin的卵巢癌SKOV3增殖、凋亡的影响

目的:通过沉默Wnt/β-catenin信号转导通路的核心蛋白β-catenin,探讨顺铂对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡的影响,为卵巢癌的耐药逆转提供新思路。方法:用包含β-catenin基因特异RNA序列的慢病毒转染人卵巢癌SKOV3细胞,沉默β-catenin蛋白表达。分组:SKOV3组、SKOV3-neg组(转染空载体)、SKOV3-RNAi组(转染β-catenin-RNAi慢病毒)。Western blot法检测转染前后SKOV3细胞中β-catenin蛋白的表达。12.5μg/ml顺铂作用48h后,用MTT法检测顺铂对各组SKOV3细胞增殖抑制率的影响;流式细胞术检测各组中SKOV3细胞的凋亡率。结果:(1)Western blot结果显示,SKOV3-RNAi组中β-catenin蛋白表达水平显著低于SKOV3-neg和SKOV3组(P<0.05)。(2)相同浓度顺铂作用下,SKOV3-RNAi组的增殖抑制率显著高于SKOV3组及SKOV3-neg组(P<0.05),而后两组的增殖抑制率无显著差异(P>0.05)。(3)流式细胞术检测结果显示,SKOV3-RNAi、SKOV3-neg和SKOV3组的细胞凋亡率分别为(18.8±4.3)%、(1.8±0.3)%、(1.9±0.3)%,SKOV3-RNAi组凋亡率显著高于其余两组(P=0.008<0.05)。顺铂作用后,SKOV3-RNAi、SKOV3-neg和SKOV3组的细胞凋亡率分别为(67.7±2.5)%、(33.3±2.6)%、(32.3±2.1)%;顺铂作用后,各组凋亡率均显著升高(P均<0.05),且SK-OV3-RNAi组凋亡率显著高于其余两组(P=0.000<0.05)。结论:沉默β-catenin蛋白能有效增强SKOV3对cDDP的敏感性,β-catenin有可能成为逆转卵巢癌化疗耐药的治疗靶点。     

盐酸拓扑替康、紫杉醇及顺铂对人卵巢癌细胞株OC_3体外作用的实验研究

目的 :研究国产盐酸拓扑替康 (TPTHCh)、紫杉醇 (PIX)与顺铂 (cDDP)对人卵巢癌细胞株OC3 的生长抑制作用。方法 :采用MTT法观察上述药物单药应用、双药联合及 3药联合使用对卵巢癌细胞株OC3 生长的影响 ,评价药物联合应用的效果。结果 :3种药物单药应用、双药联合及 3药联合应用均对卵巢癌细胞株OC3 有显著的抑制作用 ,以卵巢癌的标准化疗方案PIX加cDDP为对照组 ,3药联合应用的抑制效果显著增强 ,且三药全量及半量联合应用效果差异无显著性。结论 :PIX、TPTHCh及cDDP联合应用具有高效协同抑制卵巢癌细胞株OC3 的作用 ,可为临床难治性和复发性卵巢癌患者的化疗及小剂量化疗提供参考     

小剂量金喜素与顺铂、VP16及5-FU对人卵巢癌细胞株生长抑制作用的实验研究

目的 :探讨小剂量国产盐酸拓扑替康 (金喜素 )与顺铂 (cDDP)、足叶乙甙(VP16 )及 5 -氟尿嘧啶 (5 -FU)对人卵巢癌细胞株 3AO细胞生长抑制的作用。方法 :采用MTT法观察上述药物单用及联合使用对 3AO细胞生长的影响 ,并评价药物的联合作用。结果 :相当于临床用药浓度的金喜素 (80 0ng/ml)及其半量浓度 (40 0ng/ml)与cDDP、5 -FU或VP16联合应用对 3AO细胞具有显著的协同生长抑制作用 ,较各药单用组抑制率显著提高。半量金喜素联用即可达到全量联用时的抑制效果。结论 :小剂量金喜素与cDDP、5-FU或VP16具有协同抑制 3AO细胞生长的作用 ,可为临床小剂量应用提供参考     

多西紫杉醇对人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤的抑制作用及其与顺铂、曲妥珠单抗联合作用的探讨

目的:观察多西紫杉醇(Docetaxel,又名多西他赛,商品名泰素帝)对人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤的抑制作用,并观察其与顺铂和(或)曲妥珠单抗(Trastuzumab,商品名赫赛汀)联用的抑制作用差异。方法:将SKOV3细胞悬液接种于裸鼠右侧腋窝皮下,成功建立人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤模型后,随机将荷瘤裸鼠分为8组,即顺铂组、赫赛汀组、泰素帝组、顺铂+赫赛汀组、顺铂+泰素帝组、赫赛汀+泰素帝组、顺铂+赫赛汀+泰素帝组和对照组,每组4只。顺铂按3 mg/kg、赫赛汀按30 mg/kg、泰素帝按5 mg/kg每周1次经尾静脉给药,连续6周,每周测量1次小鼠肿瘤的长、短径及小鼠体质量,用药结束后1周处死小鼠,计算抑瘤率,肿瘤组织HE染色观察细胞凋亡,TUNEL技术检测凋亡指数,免疫组织化学方法检测肿瘤组织中Ki-67的表达情况。结果:(1)泰素帝能明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞裸小鼠移植瘤的生长,且分别与顺铂、赫赛汀联合后对肿瘤生长的抑制作用更明显,顺铂+赫赛汀+泰素帝组对肿瘤生长的抑制作用最明显;(2)泰素帝单药组肿瘤细胞凋亡指数较对照组显著升高,且分别与顺铂、赫赛汀联合后肿瘤细胞凋亡指数更高,顺铂+赫赛汀+泰素帝组肿瘤细胞凋亡指数最高;(3)泰素帝单药组肿瘤组织中Ki-67的表达率较对照组显著下降,且分别与顺铂、赫赛汀联合后肿瘤组织中Ki-67的表达率下降更明显,而顺铂+赫赛汀+泰素帝三联组肿瘤组织中Ki-67的表达率下降最明显。结论:(1)泰素帝能够有效抑制人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的生长,其可能的机制是通过下调Ki-67等的表达而抑制肿瘤的增殖活性,并诱导肿瘤细胞凋亡;(2)泰素帝分别与顺铂、赫赛汀间具有协同作用,而泰素帝、顺铂、赫赛汀三药联合应用能更有效地抑制肿瘤生长。     

人文关怀护理在紫杉醇联合奈达铂治疗卵巢癌中应用及对患者不良情绪的影响分析

目的 探讨人文关怀护理在紫杉醇联合奈达铂治疗卵巢癌护理中的应用及对患者不良情绪的影响。方法 选取66例卵巢癌患者,均接受紫杉醇联合奈达铂治疗。根据数字奇偶法分为参照组与观察组,每组33例。参照组实施常规护理,观察组在参照组基础上实施人文关怀护理。对比两组患者护理效果。结果 护理前,两组焦虑自评量表（SAS）、抑郁自评量表（SDS）评分比较,差异无统计学意义（P>0.05）;护理后,两组SAS评分、SDS评分均低于护理前,且观察组明显低于参照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。观察组患者躯体功能、社会功能、认知功能及角色功能评分均高于参照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。观察组患者不良反应发生率9.09%低于参照组的30.30%,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 卵巢癌患者在接受紫杉醇+奈达铂药物化疗期间,因药物不良反应会出现不良情绪,通过给予人文关怀护理干预,可缓解患者的不良情绪,减少不良反应发生,从而提升生活质量。     

雌二醇及雌激素受体抑制剂对卵巢癌SKOV3细胞凋亡及其PTEN、GSK3β、cyclinD1蛋白表达的影响

目的:探讨雌二醇(E2)与雌激素受体抑制剂ICI182,780作用后,对卵巢癌SKOV3细胞凋亡及磷脂酰肌醇/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路上蛋白表达的影响,明确E2及其受体抑制剂对SKOV3细胞作用的机制。方法:采用流式细胞技术检测普通培养液(对照组)、浓度为10-7mol/L的E2(E2组)和相同浓度E2与ICI182,780(E2+ICI182,780组)作用SKOV3细胞后不同时间段(24、48小时)SKOV3细胞凋亡率的变化,Western-Blot法检测E2与ICI182,780作用SKOV3细胞后不同时间段(0、1、2、6、12、24小时)PI3K/AKT信号通路相关分子的蛋白表达。结果:①E2组作用SKOV3细胞24、48小时后SKOV3细胞凋亡率明显低于对照组(P<0.05);E2+ICI182,780组作用SKOV3细胞24、48小时后SKOV3细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05)。②E2上调SKOV3细胞人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、p-PTEN、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)、细胞周期素D1(cyclinD1)蛋白表达;ICI182,780在不同程度上拮抗以上的作用,但是二者对GSK3β蛋白表达均无影响。结论:E2激活SKOV3细胞内的PI3K/AKT信号传导通路,促使通路上蛋白磷酸化,最终抑制细胞凋亡;雌激素受体抑制剂ICI182,780可抑制E2对PI3K/AKT信号传导通路的激活作用,从而促进细胞凋亡。