左归丸对GDM大鼠胎盘组织11 β-HSD1表达的影响

目的:探讨左归丸对妊娠糖尿病大鼠胎盘组织11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)基因表达水平的影响。方法:育龄雌性SD大鼠受孕后随机分为正常妊娠组(C)、妊娠糖尿组(GDM)、胰岛素干预组(INS)、左归丸干预组(ZGW)、左归丸联合胰岛素干预组(F),每组10只;受孕当日GDM组和3个干预组按45 mg·kg-1ip链脲佐菌素(STZ)复制妊娠糖尿病模型。并于孕4 d开始给药干预(左归丸10 g·kg-1ig,胰岛素20 U·kg-1ih)。孕19 d断头取血,葡萄糖氧化酶法测定血糖;酶联免疫吸附法检测血清皮质酮、胰岛素;采用RT-q PCR技术检测胎盘11β-HSD1基因mRNA的表达水平,并进行定量分析。结果:与正常妊娠组比较,GDM组血糖水平、血清胰岛素浓度、皮质酮水平、胎盘11β-HSD1基因mRNA的表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P0.01);与妊娠糖尿组比较,左归丸干预组血糖水平、血清胰岛素浓度、皮质酮水平、胎盘11β-HSD1基因mRNA的表达水平均明显降低(P0.05,P0.01),但仍高于正常妊娠组,联合组治疗效果优于左归丸组。结论:左归丸可降低妊娠期糖尿病大鼠血糖水平,胎盘部位有11β-HSD1基因的表达,妊娠糖尿病病理状态可影响11β-HSD1基因在胎盘的表达水平,左归丸有下调11β-HSD1基因表达水平的作用,推测可能是其改善GDM大鼠胰岛素抵抗的机制之一。     

四逆散对2型糖尿病大鼠血糖、11βHSD1及GR的影响

目的观察研究四逆散对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响及作用机制。方法利用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立2型糖尿病大鼠模型。设空白对照组、模型组、四逆散高剂量组及四逆散低剂量组,给药4周后测各组大鼠体质量、空腹血糖(FPG)、随机血糖、血清胰岛素(FINS)水平、血浆皮质酮含量,并计算胰岛素抵抗指数,采用Western blot法检测肝脏组织中11β-HSD1、GR蛋白表达。结果给药后,四逆散可以控制糖尿病大鼠体质量增长(P0.05),具有降低空腹及随机血糖的作用(P0.01),且中药高剂量组降血糖效果更佳,降低血清胰岛素水平、胰岛素抵抗指数水平(P0.05或P0.01),降低血浆皮质酮含量(P0.05)。模型组肝脏11β-HSD1、GR蛋白表达量上调,经中药治疗后两种蛋白的表达量均有所下调(P0.01)。结论四逆散能够改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗,其作用机制可能与下调11β-HSD1、GR蛋白的表达有关。     

灯盏花素注射液对怀孕大鼠血清IGF-Ⅱ及鼠胎儿生长的影响研究

目的 探讨灯盏花素注射液对妊娠大鼠血清胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)浓度及胎鼠体重、身长、体重系数变化的影响.方法 利用放射免疫法测定大鼠及胎鼠血清中IGF-Ⅱ的浓度,并测定胎鼠的体重、身长,计算体重系数.结果 ①3组大鼠血清IGF-Ⅱ浓度相近;胎儿生长受限(FGR)组的胎鼠血清IGF-Ⅱ浓度低于正常对照组(P＜0.05),干预组IGF-Ⅱ浓度高于FGR组.②胎鼠体重、身长:正常对照组＞FGR+干预组＞FGR组,各组相比均有显著性差异(P＜0.05).⑨胎鼠体重系数正常对照组＞FGR+干预组＞FGR组,正常对照组与其余两组相比有统计学意义(P＜0.05).结论 ①大鼠、胎鼠血清中IGF-Ⅱ的来源不同,不能通过胎盘屏障交换;②检测母血中IGF-Ⅱ的浓度不能用以诊断FGR;③胎血IGF-Ⅱ浓度下降可能是导致FGR的重要原因.④灯盏花素可有效治疗和保护胎鼠胎儿生长.     

左归丸母代干预对妊娠糖尿病模型大鼠子代胎鼠胰腺发育调控因子PDX-1、HNF-6的影响

目的 探讨左归丸母代干预对妊娠糖尿病(GDM)模型大鼠子代胎鼠的影响及机制.方法 通过雌雄同笼制备孕鼠90只,随机分为正常组,模型组,门冬胰岛素组,左归丸低、中、高剂量组,每组15只.除正常组外,其余孕鼠通过腹腔注射链脲佐菌素的方法复制GDM孕鼠模型.造模成功后左归丸低、中、高剂量组给予左归丸灌胃剂量分别为2.5、5....     

左归丸对妊娠糖尿病大鼠血清相关指标及胰腺PDX-1表达的影响

目的:研究左归丸母代干预对妊娠糖尿病(GDM)模型大鼠血清及以胰腺指标改善作用的影响。方法:通过雌雄同笼及腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制GDM孕鼠模型,采用随机数字表法将孕鼠分为正常组,模型组,门冬胰岛素组(20 U·kg-1),左归丸低、中、高剂量组(2.5,5.0,10.0 g·kg-1)。各组分别灌服相应药物2周,正常组和模型组予以等体积生理盐水,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清胰岛素,空腹血糖(FBG),及炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-8(IL-8)的水平;蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠胰腺十二指肠同源盒因子-1(PDX-1)蛋白及mRNA的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖及炎性因子TNF-α,IL-6均显著升高(P0.01),IL-8水平明显升高(P0.05),大鼠血清胰岛素水平、胰腺PDX-1蛋白及mRNA表达均显著降低(P0.01);与模型组比较,门冬胰岛素组血糖及血清炎性因子IL-8水平显著降低(P0.01),血清胰岛素水平、胰腺PDX-1蛋白及mRNA表达均显著升高(P0.01),左归丸中剂量组血糖及炎性因子TNF-α,IL-6,IL-8显著降低(P0.01),血清胰岛素水平、胰腺PDX-1蛋白及mRNA表达均显著升高(P0.01)。结论:左归丸可能通过降低GDM大鼠血清炎性因子水平,减少炎症反应及氧化应激反应的发生,以提升胰岛素的分泌,同时上调PDX-1蛋白和mRNA的表达,改善胰岛素抵抗,减少胰岛β细胞的损伤,降低大鼠血糖。     

黄芪散及其拆方对T2DM大鼠胰岛素抵抗及肝组织11β-HSD1，PEPCK的影响

目的:通过糖皮质激素联合高脂喂养建立2型糖尿病(T2DM)大鼠模型,观察黄芪散及其拆方对T2DM大鼠胰岛素抵抗及肝组织11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1),磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)mRNA与蛋白表达的影响。方法:SD大鼠适应性饲养1周后,将大鼠随机分为正常组,糖皮质激素组(GC),高脂饮食组(HFD),高脂+糖皮质激素复合模型组(HFD+GC),罗格列酮组,黄芪散处方1组(HQS-1,2.91 g·kg~(-1)),黄芪散处方2组(HQS-2,3.85 g·kg~(-1))和黄芪散原方组(HQS,2.96 g·kg~(-1)),每组8只。正常组和GC组大鼠喂以基础饲料,其他各组喂以高脂饲料。同时除正常组和HFD组给予等体积的生理盐水外,其他各组大鼠灌胃醋酸泼尼松龙(3.5 mg·kg~(-1),每天1次),并于1 h后灌胃相应受试药物。于给药10周后,测定各组大鼠空腹血糖(FBG)及胰岛素(FINS)含量,并计算胰岛素敏感指数(ISI);苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠肝脏病理变化;实时荧光定量-聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测肝组织中11β-HSD1,PEPCK mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组比较,HFD+GC复合模型组大鼠表现为高血糖、高胰岛素血症,肝细胞变性,肝11β-HSD1,PEPCK表达显著性升高(P0.01),病理学检测发现大鼠肝脏组织的病变较为明显。与HFD+GC复合模型组比较,各受试药物均不同程度地降低糖尿病大鼠FBG,FINS水平,提高ISI水平(P0.05,P0.01),对肝组织病理学形态也有不同程度的改善。比较HQS-1,HQS-2和罗格列酮的作用幅度,黄芪散原方对FINS水平及肝组织病理形态的改善更明显。HQS及其拆方均可不同程度地降低肝11β-HSD1,PEPCK mRNA和蛋白水平(P0.05,P0.01),且黄芪散原方组对11β-HSD1的降低幅度优于其他各组。结论:黄芪散具有提高胰岛素敏感性、改善肝脏病理的作用,其发挥防治糖尿病及改善胰岛素抵抗的作用机制可能与降低11β-HSD1水平有关。     

左归丸联合温和灸对骨质疏松症模型大鼠骨密度、骨保护素mRNA及核因子κB受体活化因子配体mRNA的影响

目的探讨左归丸联合温和灸治疗骨质疏松症的可能作用机制。方法 40只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、左归丸组、左归丸+温和灸组,每组10只。模型组、左归丸组、左归丸+温和灸组采用手术完整摘除双侧卵巢法制造骨质疏松症模型。造模3个月后左归丸组予左归丸10 ml/(kg·d)灌胃,左归丸+温和灸组予左归丸10 ml/(kg·d)灌胃+长强穴艾灸治疗,空白组和模型组予生理盐水10 ml/(kg·d)灌胃。各组均干预6周。干预前后测定大鼠股骨近端及第2腰椎骨密度,干预后通过PCR法检测大鼠骨组织骨保护素(OPG)mRNA和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组股骨、腰椎骨密度,骨组织OPG mRNA表达及OPG/RANKL降低,RANKL mRNA表达上升(P0.05或P0.01);与模型组比较,左归丸组、左归丸+温和灸组大鼠股骨、腰椎骨密度,骨组织OPG mRNA表达及OPG/RANKL均升高,RANKL mRNA表达降低(P0.05或P0.01),且左归丸+温和灸组大鼠股骨、腰椎骨密度,骨组织OPG mRNA表达及OPG/RANKL均较左归丸组升高,RANKL mRNA表达较左归丸组降低(P0.05)。结论左归丸联合温和灸能明显升高骨质疏松症大鼠的骨密度,上调OPG mRNA表达、下调RANKL mRNA表达可能是其作用机制之一。     

雷公藤内酯醇药物血清对体外培养的大鼠肾上腺皮质细胞分泌功能的影响

目的:研究雷公藤内酯醇药物血清对体外培养的大鼠肾上腺皮质细胞分泌功能的影响。方法:将SD大鼠30只随机分成对照组、泼尼松组和低、中、高剂量雷公藤内酯醇组,相应药物灌胃7d制备药物血清。分离正常大鼠肾上腺皮质细胞,分别加入药物血清常规培养48h后,采用免疫组织化学法观察增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达,并计算PCNA阳性细胞数;透射电子显微镜观察肾上腺皮质细胞的超微结构;酶联免疫吸附测定法检测细胞培养上清液中皮质酮水平;实时荧光定量聚合酶链式反应法检测肾上腺皮质细胞3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroi ddehydrogenase,3β-HSD)mRNA表达水平。结果:各个浓度雷公藤内酯醇药物血清组肾上腺皮质细胞培养上清液中皮质酮水平及细胞中3β-HSDmRNA表达水平较对照组明显升高;中、高剂量雷公藤内酯醇组PCNA阳性细胞比率高于对照组(P0.05),泼尼松组上清液中皮质酮水平、细胞中3β-HSDmRNA表达水平和PCNA阳性细胞比率均低于对照组(P0.05)。结论:雷公藤内酯醇对体外培养的大鼠肾上腺皮质细胞有刺激作用,可以促使肾上腺皮质细胞分泌皮质酮。     

一贯煎对子痫前期大鼠胎盘NF-κB mRNA与MMP-9 mRNA表达影响

[目的]探讨中药一贯煎对子痫前期大鼠胎盘核转录因子-κB mRNA(NF-κB mRNA)和基质金属蛋白酶-9mRNA(MMP-9 mRNA)表达的影响。[方法]建立子痫前期Wistar大鼠模型,并灌胃给予中药一贯煎,监测给药前后大鼠血压及24 h尿蛋白变化。PCR法检测孕鼠胎盘NF-κB m RNA及MMP-9 m RNA的表达。[结果]1)NF-κB mRNA:与正常妊娠组相比,模型对照组及一贯煎治疗组均升高,与模型对照组相比,一贯煎治疗组降低,且差异均有显著性(P0.05)。2)MMP-9 m RNA:与正常妊娠组相比,模型对照组与一贯煎治疗组均降低,与模型对照组相比,一贯煎治疗组有所升高,且差异均有显著性(P0.05)。[结论]一贯煎通过降低子痫前期大鼠胎盘NF-κB mRNA的表达,升高MMP-9mRNA的表达治疗子痫前期大鼠。     

左归丸和右归丸对皮质酮所致大鼠海马神经细胞病理模型学习记忆相关信号转导蛋白表达的影响

目的:观察左归丸和右归丸含药鼠血清对皮质酮所致大鼠海马神经细胞病理模型学习记忆相关信号转导蛋白表达的影响。方法:体外采用高浓度皮质酮(10-4M)处理细胞制作皮质酮损伤型大鼠海马病理细胞模型。采用Westernblot和免疫细胞化学法观察模型细胞与学习记忆相关的信号转导蛋白表达变化及左归丸和右归丸含药鼠血清的干预作用。结果:与空白对照组比较,皮质酮模型组细胞与学习记忆相关的信号转导分子pCaMKII、pCREB、pERK、pCREB和Arc蛋白表达、以及相关受体蛋白GR、MR、TrkB、NR1的表达均明显降低(P<0.05);与皮质酮模型组比较,含10%浓度的左归丸和右归丸鼠血清对模型细胞上述各项指标的异常变化均有显著改善作用(P<0.05)。结论:补肾方药—左归丸和右归丸能够改善高浓度皮质酮所致的海马神经细胞内学习记忆相关信号转导蛋白的异常表达。     

桃核承气汤对糖尿病鼠大血管纤维病变转化生长因子β和胰岛素样生长因子-1的表达干预作用

目的:通过观测糖尿病鼠大血管病变中转化生长因子-β(TGF-β)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)表达,及中药干预作用,明确中药在治疗糖尿病大血管纤维病变的效果。方法:雄性SD大鼠170只,正常对照组30只,余140只造糖尿病模型模,成功123例,随机分为4组:模型对照组31只、中药高剂量治疗组30只、中药中剂量治疗组31只、中药低剂量治疗组31只。药物干预第1周、12周、20周,按计划处死大鼠,各组分别取材。光镜下观测股动脉细胞形态学改变;免疫组化法检测糖尿病大鼠大血管中TGF-β、IGF-1表达情况。结果:糖尿病大鼠股动脉血管平滑肌细胞排列紊乱,内膜、中膜层明显增厚,血管腔狭窄,以纤维性增生为主。与正常对照组比较,各实验组大鼠TGF-β表达水平均有所上升(P0.05),而各组大鼠IGF-1表达水平均有所下降(P0.05),中药桃核承气汤干预可降低糖尿病大鼠大动脉中TGF-β表达,升高IGF-1表达。其干预作用与用药剂量相关。结论:中药桃核承气汤能有效降低致纤维化因子TGF-β表达,并升高IGF-1在实验性糖尿病鼠大血管纤维病变中的表达,其对糖尿病大血管纤维病变有改善作用,并存在剂量依赖关系。     

基于自噬-NLRP3炎症小体途径探究牛蒡子苷元对妊娠期高血压病大鼠血管内皮损伤的作用北大核心CSCD

探究牛蒡子苷元(arctigenin,ARC)对妊娠期高血压病(pregnancy-induced hypertension,PIH)大鼠血管内皮损伤的作用及机制。将50只SD受孕大鼠于妊娠12 d随机分为对照组、模型组、ARC组、自噬诱导剂雷帕霉素组(rapamycin,RAP)和ARC+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)组,每组10只,除对照组外,其余各组大鼠于受孕13 d腹腔注射亚硝基左旋精氨酸甲酯50 mg·kg^(-1)·d^(-1)构建PIH模型。ARC组大鼠于受孕15 d时腹腔注射ARC 50 mg·kg^(-1)·d^(-1);RAP组受孕大鼠腹腔注射RAP 1 mg·kg^(-1)·d^(-1);ARC+3-MA组受孕大鼠腹腔注射3-MA 15 mg·kg^(-1)·d^(-1),同时注射ARC 50 mg·kg^(-1)·d^(-1);对照组和模型组受孕大鼠腹腔注射等量生理盐水。观察各组大鼠干预前后血压、24 h尿蛋白(24 h-UP)变化。于受孕21 d进行剖宫产终止妊娠,比较各组胎鼠体质量及体长;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察胎盘组织病理变化;免疫组化检测胎盘组织内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达;试剂盒检测血清ET-1和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量;免疫荧光及Western blot检测自噬标志蛋白微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、Beclin-1、NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体(NLRP3、ASC、caspase-1)及白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-18表达;荧光染色检测胎盘组织活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果显示,妊娠12 d时,各组孕鼠血压、24 h-UP均无显著性差异;妊娠15 d时,与对照组相比,模型组孕鼠血压、24 h-UP均显著增加(P<0.05);妊娠19、21 d时,与对照相比,模型组孕鼠血压、24 h-UP均显著增加(P<0.05)。与模型组相比,ARC组和RAP组孕鼠血压、24 h-UP均显著降低(P<0.05)。与ARC组相比,ARC+3-MA组孕鼠血压、24 h-UP均显著增加(P<0.05)。妊娠21 d孕鼠剖宫产检测结果显示,与对照组相比,模型组胎鼠体质量、体长均显著降低(P<0.05),血清ET-1水平升高、NO水平降低(P<0.05),胎盘组织出现典型性病理损伤且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ,Beclin-1和eNOS表达显著降低(P<0.05),ET-1及NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达均显著升高(P<0.05),ROS水平升高。与模型组相比,ARC组和RAP组胎鼠体质量、体长均显著增加(P<0.05),血清ET-1水平降低、NO水平升高(P<0.05),胎盘组织病理性损伤减轻且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ,Beclin-1和eNOS表达显著升高(P<0.05),ET-1及NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达均显著降低(P<0.05),ROS水平降低。与ARC组相比,3-MA能够逆转ARC对PIH胎鼠上述指标的作用。综上,ARC能够通过诱导血管内皮细胞自噬,抑制NLRP3炎症小体活化,改善PIH血管内皮损伤。     

益肾填精中药对环境内分泌干扰物染毒大鼠睾酮合成关键酶及雄激素受体表达的影响

目的观察益肾填精中药对邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexylphthalate,DEHP)及氯氰菊酯(cypermethrin,CYP)染毒大鼠睾酮合成关键酶和雄激素受体(androgen receptor,AR)基因及蛋白表达水平的影响,探讨所用中药拮抗环境内分泌干扰物(environmental endocrine disruptors,EEDs)抗雄激素活性的可能作用机制。方法 70只21日龄雄性SD大鼠随机分为7组,每组10只。对照组(喂饲玉米油)、染毒A组(DEHP 500 mg/kg)、染毒B组(CYP 80 mg/kg)、染毒C组(DEHP 500 mg/kg+CYP 80 mg/kg)及治疗A组、治疗B组、治疗C组,治疗A、B、C组同时喂饲益肾填精中药合剂(40 m L/kg)。每日空腹灌胃给药,疗程为30天。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,real time-PCR)及免疫印迹方法(Western blot),分别检测St AR、CYP11A1、CYP17A1、3β-HSD、17β-HSD、AR mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,染毒A、B、C组St AR、CYP11A1、CYP17A1、3β-HSD、17β-HSD、AR mRNA表达水平显著下调(P0.05,P0.01)。中药治疗干预可使上述基因表达水平明显上调(P0.05,P0.01)。DEHP、CYP单独及联合染毒可导致CYP11A1、CYP17A1、AR蛋白表达水平显著下调(P0.05,P0.01),而中药治疗干预可使上述蛋白表达水平显著上调(P0.05,P0.01)。结论益肾填精中药可通过使睾丸的AR以及睾酮合成关键酶的表达上调,促进染毒大鼠自身睾酮的生物合成,多水平、多靶点地发挥其对EEDs抗雄激素活性及生殖毒性的拮抗作用。     

补肾方胚胎期干预子代成年大鼠IGT及其胰岛素抵抗、瘦素抵抗的研究

目的:通过大鼠胚胎发育期予补肾方干预,以研究中医补肾方在胚胎发育期干预能否预防高脂饮食诱发的子代成年大鼠糖耐量低减(IGT)及其对胰岛素、瘦素的影响.方法:将孕鼠分为正常对照组、模型组、左归丸组、右归丸组、八珍汤组,在孕1～19 d,各用药组分别以左归丸、右归丸、八珍汤灌胃(ig,20 g·kg-1,20 mL·kg-1),正常对照组和模型组以生理盐水灌胃.除正常对照组外,其余各组子鼠均于6周龄开始高脂饲料喂养,12周后测各组子鼠空腹血糖(FBG)、糖负荷后2h血糖(2hBG)、血清空腹胰岛素、瘦素.结果:与模型组比较,左归丸组2hBG明显降低(P＜0.05);八珍汤组和右归丸组2hBG无明显降低.左归丸组、右归丸组、八珍汤组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均较模型组显著降低(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05).左归丸组和右归丸组血清瘦素显著低于模型组(P ＜0.01,P＜0.01);而八珍汤组血清瘦素水平与模型组相比无显著性差异.结论:左归丸与右归丸胚胎期干预都可对抗高脂饮食引发子代成年大鼠胰岛素抵抗、瘦素抵抗,但对IGT的预防作用以左归丸为优.八珍汤组对抗胰岛素抵抗、瘦素抵抗作用相对弱,也未能预防高脂饮食引起的子鼠IGT的发生.     

左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠肾脏 TGF-β1/Smad4 mRNA表达的影响

目的:研究左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用及其机制.方法:SD雌性大鼠分为正常组,假手术组,模型组,左归丸高、中、低剂量组,及尼尔雌醇组,采用去卵巢的方法建立绝经后骨质疏松症模型,术后21 d开始给药:正常组,假手术组ig生理盐水;左归丸高、中、低剂量组分别ig6.4,3.2,1.6g·kg-1,1次/d;尼尔雌醇组ig0.021 g·kg-1,1次/周,连续60d.取大鼠左后肢股骨远端1/3做病理切片,光镜下观察骨组织形态学变化,测定骨小梁面积百分比(Tb· Ar);采用双能X射线骨密度仪测定右后肢离体股骨近端1/3及股骨整体的骨密度(BMD);采用RT-PCR法检测大鼠肾髓质的转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad4 mRNA表达.结果:与模型组比较,左归丸高、中剂量组骨小梁面积百分率(Tb· Ar)显著升高(P＜0.05),左归丸高、中剂量组的股骨的骨密度显著升高(P＜0.05);各组肾脏组织病理形态学未见明显病理变化;与正常组相比,模型空白组TGF-β1,Smad4 mRNA水平过高表达(P＜0.05);与模型组相比,各给药组肾组织中TGF-β1,Smad4 mRNA表达均显著下调(P＜0.05),且左归丸各剂量组的下调力度均强于尼尔雌醇组,但以左归丸低剂量组下调最为显著.结论:左归丸能有效防治绝经后骨质疏松症,其作用机制之一可能与其干预肾组织中TGF-β1/Smad4的信号转导通路有关.     

百事乐胶囊对皮质酮暴露大鼠海马神经元神经营养相关蛋白表达的影响

目的观察百事乐胶囊药物血清对皮质酮暴露大鼠原代海马神经元神经营养相关蛋白表达的影响,探讨其治疗抑郁症的潜在机制。方法采用受孕18 d的SD大鼠胎鼠进行海马神经元原代培养,将神经元随机分为正常组、空白血清组、皮质酮暴露组、氟西汀药物血清组、百事乐胶囊药物血清组。除正常组外,其余各组给予相应干预的同时进行高浓度皮质酮暴露。干预18 h后,光学显微镜下观察神经元生长情况,MTT法检测海马神经元细胞活力,高内涵分析技术检测神经营养相关蛋白的表达。结果与正常组比较,皮质酮暴露组神经元存活率显著降低(P0.01),树突断裂或明显减少,神经网络连接减少,脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养因子-3(NT-3)及神经生长因子(NGF)蛋白表达显著降低(P0.05,P0.01),血清和糖皮质激素诱导激酶1(SGK1)蛋白表达明显升高(P0.01);与皮质酮暴露组比较,氟西汀药物血清组和百事乐胶囊药物血清组神经元存活率明显升高(P0.05),胞间网络更丰富,BDNF、NT-3及NGF蛋白表达显著升高(P0.05,P0.01),SGK1蛋白表达显著降低(P0.05)。结论百事乐胶囊可提高皮质酮暴露下海马神经元细胞活力,促进神经细胞可塑性,并可通过SGK1信号增强神经营养。     

葛根素对妊娠期糖尿病大鼠的治疗效果及作用机制的研究

目的研究葛根素对妊娠期糖尿病大鼠的治疗效果及作用机制。方法妊娠SD大鼠随机分为正常妊娠组、妊娠期糖尿病组及葛根素组。妊娠SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立GDM模型。葛根素组每日给予葛根素150 mg/kg灌胃治疗,糖尿病组与正常妊娠组每日给予等量的生理盐水。检测孕鼠血糖水平,妊娠第20天记录胎仔数、胎鼠体质量、畸形发生数、胎鼠血糖水平及孕鼠血浆胰岛素水平。苏木精-伊红染色观察大鼠胰腺组织结构改变情况,免疫组织化学及Western blotting检测葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)的表达情况。结果葛根素可以显著降低GDM大鼠的血糖、增加胎仔数,降低胎鼠血脂和体质量。葛根素治疗能恢复胰岛数量和体积,同时增加GLUT-4蛋白表达。结论葛根素可以有效控制妊娠期糖尿病大鼠血糖水平,其作用机制可能与修复胰岛并上调胰岛内GLUT-4的表达有关。     

电针对中老年部分雄激素缺乏综合征雄性大鼠睾丸细胞色素P 450侧链裂解酶及17 β-羟基类固醇脱氢酶3表达的影响

目的:观察中老年部分雄激素缺乏综合征(partial androgen deficiency of aging male,PADAM)雄性大鼠睾丸细胞色素P 450侧链裂解酶(cytochrome P 450side chain cleavage,P 450scc)及17β-羟基类固醇脱氢酶3(17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3,17β-HSD3)的表达及电针干预对其表达的影响,探讨电针治疗PADAM的可能作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组10只,腹腔注射环磷酰胺复制PADAM模型。电针组取"肾俞""关元",每日治疗1次,每次15min,连续治疗8周。治疗前后观察大鼠悬尾时间和强迫游泳时间,采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清总睾酮(total testosterone,TT)、游离睾酮(free testosterone,FT)水平,免疫组织化学法、免疫印迹法和逆转录聚合酶链反应法检测大鼠睾丸P 450scc和17β-HSD3蛋白及mRNA的表达。结果:治疗前,模型组与正常组比较,悬尾不动时间延长,强迫游泳力竭时间缩短(P0.05);治疗后,电针组悬尾不动时间短于模型组而强迫游泳力竭时间长于模型组(P0.01)。与正常组相比,模型组大鼠血清TT、FT水平,睾丸P 450scc和17β-HSD3蛋白和mRNA表达显著降低(P0.01);与模型组相比,电针组血清TT、FT水平,睾丸P 450scc和17β-HSD3蛋白和mRNA表达显著升高(P0.01)。结论:电针可能通过调节睾酮合成限速酶P 450scc和17β-HSD3蛋白和mRNA的表达,从而促进睾酮的合成和分泌。这可能是电针治疗PADAM的作用机制之一。     

大黄对大鼠胚胎发育影响的实验研究

目的观察大黄水提取物(water extract of Rhubarb,WER)对大鼠胚胎发育的影响及与给药时间的关系。方法雄性SD大鼠10只,常规饲养;雌性SD大鼠50只,随机分为正常对照组,WER 2.0g·kg-1灌胃30d、40d、50d、60d组,记录性周期,给药结束时,各给药组均与上述雄鼠1∶1合笼,记录受孕时间,观察孕鼠体重增长情况,监测受孕率。于妊娠第19天处死,称胎鼠窝均体重、胎盘重,记录总着床数、吸收胎数、活胎数、死胎数、胎鼠性别,测量胎鼠身长、尾长,同时观察胎鼠外观。将每窝胎鼠分成两部分,其中2/3 Bouins液固定,用于内脏器官检查;1/3行骨骼染色,用于骨骼观察。结果 1各给药组均有雌鼠出现性周期紊乱,紊乱率高于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05);2各给药组雌鼠受孕率与正常对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);3各给药组孕鼠每3天体重增长率与正常对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);4各给药组胚胎吸收率高于正常对照组,活胎率低于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05);各给药组死胎率与正常对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);5各给药组胎鼠的窝均体重、胎盘重,胎鼠身长、尾长、性别比与正常对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);6各给药组胎鼠外观、内脏均未发现畸形,骨骼检查有胎鼠出现枕骨骨化不全、胸骨骨化不全或缺失,但与正常对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论孕前长期灌胃WER可影响雌鼠性周期规律性,易造成早期吸收胎,对孕鼠生殖功能有一定影响,但对胎鼠的生长发育无明显的毒性及致畸作用。     

左归丸胚胎期干预对糖耐量异常大鼠糖脂代谢的影响

目的:观察左归丸胚胎期干预对高糖高脂饮食诱发的糖耐量异常(IGT)大鼠的糖脂代谢及HPA轴的影响。方法:育龄期雌性Wister大鼠22只受孕后随机分为正常对照组(14只)和药物干预组(8只)。并于孕3～19天给药干预,最终20只孕鼠产子。子鼠6周龄时,将正常对照组分为空白对照组和高脂饲料组,高脂饲料组和药物干预组均予高糖高脂饮食。13周后葡萄糖干化学法测各组子鼠空腹血糖(FPG)、糖负荷后2h血糖(P2hG),全自动生化仪测血脂谱,酶联免疫法测促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)及皮质酮(CORT)浓度,并进行HE染色观察大鼠肝脏的病理形态。结果:高脂饲料组P2hG、TG、TC水平、血ACTH、CORT含量均显著高于空白对照组及药物干预组(P0.05)。结论:采用左归丸于胚胎期补肾干预可以预防子代大鼠成年后的糖脂代谢紊乱,其作用机制可能与下调HPA轴的活性有关。