透明质酸联合羟乙基淀粉预防术后腹腔粘连的作用机制初探

目的:探讨透明质酸(HA)与羟乙基淀粉(HES)联合作用下,大鼠腹腔粘连组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况。方法:建立大鼠术后肠粘连模型,20只SD大鼠随机分成4组:假性粘连组、生理盐水对照组、透明质酸与羧甲基纤维素(HA-CMC)对照组和HA-HES实验组。用HE染色方法观察腹膜粘连程度以及用免疫组化的方法检测组织中TGF-β1和TNF-α的表达情况。结果:HA-HES实验组粘连分级及粘连发生率比生理盐水组和HA-CMC对照组明显减轻,差异显著(P<0.05)。结论:HA-HES防粘连剂能够明显减轻术后腹腔粘连程度,抑制术后腹膜损伤部位TGF-β1及TNF-α的表达。     

卡巴胆碱对大鼠腹腔粘连形成和粘连组织TGF-β1表达的影响

目的 研究卡巴胆碱对大鼠腹腔粘连的干预作用及其对粘连组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 22只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(n=6)、腹腔粘连组(n=8)、卡巴胆碱干预组(n=8,50μg/kg).采用开腹后无菌干纱布摩擦大鼠盲肠蚓突盲端、并损伤侧腹壁法制作大鼠腹腔粘连动物模型.各组于术后第14天处死动物,参考Phillips 5级分类法评估大鼠腹腔粘连程度.取粘连盲肠组织切片行HE染色观察粘连组织病理变化,免疫组织化学法观察粘连组织TGF-β1表达变化情况.结果 卡巴胆碱干预组腹腔粘连组织面积明显减少.粘连程度评分(O.874±0.641)明显低于腹腔粘连组(3.125±0.641),P＜0.01;卡巴胆碱干预组与腹腔粘连组比较,粘连组织HE染色显示炎症反应轻,偶见增生纤维结缔组织;免疫组织化学染色示假手术组与卡巴胆碱干预组TGF-β1表达水平均显著低于腹腔粘连组.结论 卡巴胆碱可能通过抑制大鼠腹腔粘连组织炎症反应和TGF-β1表达影响腹腔粘连的形成.     

全反式维甲酸对大鼠腹膜透析模型腹膜TGF-β1和COL-Ⅰ表达的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对大鼠腹膜透析模型腹膜转化生长因子-β1(TGF-β1)和胶原(COL-Ⅰ)表达的影响,初步探讨其对腹膜纤维化的作用机制。方法建立大鼠腹膜透析模型,ATRA2mg/kg(小剂量组)、5mg/kg(大剂量组)每日腹腔内注射进行干预,在实验第28d取腹膜组织进行Masson染色,免疫组织化学检测TGF-β1、COL-Ⅰ在脏层腹膜的表达;RT-PCR检测TGF-β1mRNA的表达。结果Masson染色显示,模型组腹膜较对照组明显增厚,胶原大量沉积;ATRA治疗组腹膜病变均有不同程度减轻。免疫组化和RT-PCR结果表明,模型组腹膜组织中TGF-β1和COL-Ⅰ的表达明显高于对照组,小、大剂量ATRA组表达均显著降低,且大剂量组较小剂量组表达低。结论ATRA可以下调TGF-β1的表达和抑制COL-Ⅰ的合成,延缓腹膜纤维化的进展。     

川芎嗪对大鼠腹膜纤维化模型腹膜形态及TGF-β1表达的影响

目的观察不同剂量川芎嗪对腹膜透析腹膜纤维化大鼠模型腹膜形态的影响。方法50只大鼠随机分为5组,每组10只,1）空白对照组（大鼠不做任何处理）;2）模型组（HGC大鼠给于每天腹腔注射4.25%的透析液25ml）;3）川芎嗪给药组（HGL）：高剂量组每只大鼠腹腔注射含60mg/L川芎嗪的腹透液25ml;中剂量组每只大鼠腹腔注射含40mg/L川芎嗪的腹透液25ml;低剂量组每只大鼠腹腔注射含20mg/L川芎嗪的腹透液25ml。上述动物连续给药35d,HE染色观察腹膜形态,免疫组化的方法检测腹膜TGF-β1的表达。结果模型组腹膜组织厚度明显增加,壁层腹膜有大量纤维组织积聚,间皮细胞脱落,纤维裸露,间质有炎性细胞浸润。不同剂量川芎嗪对上述病变均有一定的改善作用,其中以中剂量组的作用最明显。正常大鼠腹膜组织的TGF-β1表达极少。而透析5周后腹膜组织TGF-β1表达明显增加,不同剂量川芎嗪均可抑制TGF-β1的组织表达量,低、中剂量抑制作用明显。结论川芎嗪能可抑制长期腹膜透析所致的腹膜纤维化,改善腹膜结构,而抑制腹膜组织TGF-β1表达可能是其抑制腹膜纤维化的机制之一。     

大蒜素对肺纤维化大鼠肺组织α-SMA和TGF- β1表达的影响

目的 观察大蒜素对肺纤维化大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α -SMA)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,并初步探讨大蒜素对大鼠肺纤维化抑制作用的机制.方法 通过气管内注射博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,空白对照组大鼠用生理盐水代替.造模后的Wistar大鼠随机分成4组:空白对照组(气管内注入生理盐水+生理盐水灌胃)、大蒜素组(博莱霉素造模+大蒜素灌胃)、秋水仙碱组(博莱霉素造模+秋水仙碱灌胃)和模型组(博莱霉素造模+生理盐水灌胃),分别于第7天和第28天处死大鼠后取肺组织,行HE染色和Masson染色,观察大鼠肺组织肺纤维化程度,碱水解法检测大鼠肺组织内羟脯氨酸的浓度,免疫组织化学染色检测大鼠肺组织α -SMA及TGF-β1的表达.结果 在HE染色和Masson染色中,大蒜素组及秋水仙碱组肺炎分级和肺纤维化分级较模型组降低.与模型组相比,大蒜素组大鼠肺组织内羟脯氨酸的浓度降低,肺组织内α-SMA及TGF-β1的表达均明显减少,与秋水仙碱组相似.结论 大蒜素对大鼠肺纤维化的干预作用可能与下调TGF-β1的表达,从而减少成纤维细胞α-SMA基因的表达有关.     

醛固酮受体拮抗剂抑制腹膜纤维化及机制

目的探讨醛固酮受体拮抗剂对腹膜透析腹膜纤维化的作用及机制。方法30只Wister大鼠随机分成3组,一组为正常组,其余两组均采用4.25%含糖透析液 脂多糖致腹膜纤维化模型。再分为对照组,安体舒通给药组,30天后处死各组大鼠,留取腹膜组织做HE及Masson染色,留取血液和腹透液做ELISA法测TGF-β,腹透液计数腹水中细胞总数和巨噬细胞数,免疫组织化学法测定腹膜组织MCP-1,C-J。结果安体舒通组的壁层腹膜厚度比模型组薄,腹水细胞总数和巨噬细胞数减少(P<0.01),转化生长因子-β的浓度下降,MCP-1表达下调(P<0.01)。结论醛固酮受体拮抗剂安体舒通可明显抑制腹膜间皮细胞MCP-1表达,降低TGF-β活性,抑制腹膜炎症,从而减轻腹膜纤维化。     

吡非尼酮通过抑制TGF-β1通路和炎症反应预防大鼠尿道损伤后的纤维化及狭窄

目的 探讨吡非尼酮对大鼠尿道损伤后狭窄形成的预防作用及可能机制。方法 选取SD雄性大鼠30只,随机分为3组（10只/组）：阴性对照组、阳性对照组及吡非尼酮组。吡非尼酮组：切开后尿道海绵体建立大鼠尿道损伤模型,按100 mg·kg-1·d-1腹腔注射吡非尼酮;模型组：同对照组构建大鼠尿道损伤模型,腹腔注射等量溶剂;假手术组：不予尿道损伤处理,但腹腔注射等量溶剂。术后2周逆行尿道造影观察尿道狭窄,留取尿道损伤组织,行HE染色观察尿道组织形态学变化,Masson染色检测胶原变化,免疫组化及Western blot检测a-SMA和TGF-β1的蛋白表达,qRT-PCR检测大鼠尿道组织中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA的表达。结果 吡非尼酮组大鼠较阴性对照和阳性对照组体质量下降,逆行尿道造影显示阳性对照组大鼠尿道显著变窄,吡非尼酮组大鼠尿道较阳性对照组大鼠明显好转（P<0.05）。HE染色显示阳性对照组尿道上皮细胞增生,管腔狭窄,炎性细胞增多;吡非尼酮组病理学表现与阴性对照组相似。Masson染色显示吡非尼酮组较阳性对照组胶原纤维含量少,排列规则有序。免疫组化和Western blot结果表明阳性对照组尿道a-SMA和TGF-β1表达显著高于阴性对照组（P<0.05,P<0.01）,而吡非尼酮能够抑制TGF-β1和α-SMA的表达。qRT-PCR结果显示吡非尼酮能够抑制损伤组织中TNF-α、IL-6、IL-1β等炎症因子的基因表达（P<0.05,P<0.01）。结论 吡非尼酮可预防尿道损伤后纤维化及狭窄,并可能与抑制TGF-β1通路和炎症反应相关。     

苦参碱?γ干扰素对大鼠肺纤维化干预作用

目的:探讨苦参碱、γ干扰素(IFN-γ)对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用及其可能的机制.方法:SD雄性大鼠60只,分为健康对照组、肺纤维化模型组、苦参碱干预组、IFN-γ干预组,各组分别于7 d、14 d、28 d处死5只,行HE染色及Masson 染色半定量判断肺组织肺泡炎及肺纤维化程度.免疫组化测肺组织TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的蛋白水平表达.结果:苦参碱干预组、IFN-γ干预组大鼠肺泡炎、肺纤维化程度均较模型组好转.与模型组相比,苦参碱、IFN-γ都能够抑制肺组织中的TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的表达(P<0.05).结论:苦参碱及IFN-γ对大鼠肺纤维化模型均有一定的疗效,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1和CTGF的表达来减少Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的生成.     

六味地黄颗粒干预下的哮喘大鼠模型肺组织中TGF-β1的变化

目的观察六味地黄颗粒干预下哮喘大鼠肺组织中TGF-β1的变化,为研究中医药防治小儿哮喘提供实验依据。方法以卵清白蛋白建立哮喘大鼠模型并分组,通过HE染色观察大鼠肺组织变化;免疫组织化学法检测各组肺组织TGF-β1蛋白表达量,并用ELISA法检测各组大鼠肺泡灌洗液TGF-β1含量。结果 HE染色显示哮喘模型对照组肺组织炎症细胞浸润,支气管黏膜皱襞增多,气道平滑肌明显增厚。免疫组化结果显示,与空白对照组相比,哮喘模型对照组TGF-β1蛋白表达明显升高。与哮喘模型对照组相比,六味地黄颗粒组和阳性对照地塞米松组TGF-β1均明显降低,且六味地黄颗粒组的TGF-β1水平与空白对照组水平相比,差异无统计学意义。ELISA检测结果显示,各组大鼠肺泡灌洗液中TGF-β1含量变化与免疫组化结果一致。结论在六味地黄颗粒干预下,哮喘大鼠模型肺组织TGF-β1的表达量下调。     

基于TGF-β/Smad信号通路研究芒果苷对肝纤维化大鼠的作用机制

目的基于TGF-β/Smad信号通路研究芒果苷对肝纤维化大鼠的作用机制。方法健康SD大鼠40只随机分为5组,包括空白组、模型组、芒果苷低剂量组、芒果苷中剂量组及芒果苷高剂量组。除空白组外,其余组采用四氯化碳诱导肝纤维化大鼠模型,造模成功后,芒果苷低、中、高剂量组分别以15mg/kg、30mg/kg、60mg/kg芒果苷生理盐水溶液灌胃,空白组、模型组等量生理盐水灌胃,1次/d,连续6周,待最后一次给药72h后眼眶取血并处死动物,采样。HE、Masson染色观察肝组织病理学改变; ELISA检测血清TGF-β1、HA、HYP、SOD水平;免疫组化检测肝脏组织Collagen I、α-SMA、Smad2、TGF-β的表达; RT-PCR检测肝脏组织中Smad2、TGF-β、MCP-1 m RNA表达。结果 HE和Masson染色结果显示芒果苷高剂量组可明显减轻肝脏组织病理损伤;与模型组相比,仅芒果苷高剂量组能明显降低TGF-β1、HA、HYP、Collagen I、α-SMA、Smad2、TGF-β、MCP-1水平,明显升高SOD水平,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论芒果苷具有抑制大鼠肝纤维化作用,其机制可能与减轻炎症反应保护肝功能,抑制TGF-β/Smad信号通路有关。     

木葡聚糖基温敏水凝胶预防大鼠腹壁-肠壁再粘连及其对局部TGF-β1和CTGF表达的影响

目的：评价木葡聚糖基（mXG）温敏水凝胶对L929鼠成纤维细胞的抗黏附性能,建立粘连松解术后再次粘连动物模型,探讨mXG温敏水凝胶对粘连松解术后再次粘连的预防作用及对转化生长因子β1（TGF-β1）和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法：将L929鼠成纤维细胞接种于mXG温敏水凝胶表面,荧光显色检测其在凝胶表面的黏附性能。制备粘连松解术后再次粘连大鼠模型。48只SD大鼠二次损伤完成后随机分成3组,分别为再粘连组,将1 mL生理盐水注射于大鼠腹壁和盲肠的创面;商业膜组,将2 cm×3 cm大小的壳聚糖防粘连膜覆盖于腹壁创面;mXG温敏水凝胶组,将1mL4% mXG温敏水凝胶注射至腹壁和盲肠的创面,待水凝胶完全形成（3 min）后关腹;每组16只。二次术后第7和14天,每组分别处死8只大鼠,对粘连程度进行评分及组织学观察,免疫组织化学法观察TGF-β1和CTGF表达水平。结果：对照组可见大量L929鼠成纤维细胞贴壁生长,呈细长的梭形并有伪足的形成;mXG温敏水凝胶组在凝胶表面仅有非常少的L929鼠成纤维细胞,呈圆球状。一次术后所有大鼠均形成了可用钝器分开的粘连区。二次术后第7天,再粘连组形成了4~5分粘连,纤维结缔组织大量增生;商业膜组大部分为中度粘连,纤维结缔组织增生较多;mXG组大部分大鼠未见粘连发生且盲肠及腹壁开始愈合,有少量纤维结缔组织增生。术后第14天,再粘连组大鼠腹腔粘连严重,纤维结缔组织及胶原大量增生;商业膜组形成了接近再粘连组的严重粘连;mXG组有2只大鼠发生轻微粘连,其余均未发生粘连,并且盲肠及腹壁创面恢复良好。术后第7和14天mXG水凝胶组大鼠平均粘连评分明显低于再粘连组和商业膜组（P<0.05）。免疫组织化学染色,TGF-β1和CTGF表达水平随大鼠腹膜粘连评分和胶原沉积升高而升高,在再粘连组表达最高,在mXG温敏水凝胶组表达最低。结论：mXG温敏水凝胶具有优异的抗成纤维细胞黏附性能,可以有效预防粘连松解术后再次粘连的发生,并可减少粘连相关因子TGF-β1和CTGF的表达水平。     

TGF-β1在COPD气道重塑中的作用及抗胆碱能药物干预效应实验研究

目的 通过分析TGF-β1在COPD小鼠气道重塑中的作用及抗胆碱能药物对其的干预作用,进一步探讨COPD形成及治疗机制.方法 采用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）滴入小鼠气管内制作COPD模型.30只小鼠采用数字表法随机均分为4组：对照组（生理盐水气道滴入）、COPD模型组及噻托溴铵（雾化吸入）、山莨菪碱（雾化吸入）两组干预组.经过6周的造模＋干预治疗之后,处死小鼠,右下肺用以病理切片,左肺下叶与右肺中叶制作成肺匀浆液.ELISA法检测肺组织匀浆TGF-β1的含量;Western blot法检测肺组织中Smad-2、pSmad-2及α-SMA的表达;肺组织切片观察：Masson染色观察肺组织胶原沉积及平滑肌层增厚情况;HE染色观察气道炎症情况.结果 COPD模型组出现TGF-β1、pSmad-2/Smad-2、α-SMA显著增高现象.此外,还出现气道管壁胶原沉积、平滑肌层增厚、气道炎症反应等改变.干预组较模型组,TGF-β、pSmad-2/Smad-2、α-SMA无明显增高且炎症反应轻微、气道管壁胶原沉积、平滑肌增生情况不明显.结论 TGF-β1在气道重塑上有着重要作用,抗胆碱能药物可干预上述现象.提示抗胆碱能药物除了传统观念的支气管扩张作用,在一定程度上还起到抗炎及抑制气道重塑的作用.     

腹壁-盲肠损伤粘连模型的建立及mXG温敏水凝胶的防粘连机制研究

  目的  构建腹壁-盲肠损伤粘连模型并探究改性木葡聚糖(mXG)温敏水凝胶对腹壁-盲肠损伤粘连的防治效果。  方法  选用SD大鼠构建腹壁-盲肠损伤粘连模型,随机分为空白对照组(Control)、商业化壳聚糖膜对照组(Film)和mXG温敏凝胶组(Hydrogel),每组16只。Hydrogel组,将1 mL 4%(m/V)mXG溶液涂抹至腹壁和盲肠的创面,待凝胶形成(3 min)后关腹;Film组,关腹前将2 cm×3 cm大小的壳聚糖防粘连膜覆盖于腹壁创面;Control组,关腹前将1 mL生理盐水注射于腹壁和盲肠的创面。术后7 d和14 d,开腹检查腹壁与盲肠的粘连情况,采用双盲设计进行粘连评分。取同一部位粘连组织或创面组织,进行HE、Masson和Van Gieson染色后,进行防粘连效果组织学评价,免疫组织化学染色检测转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的表达情况。另取12只SD大鼠予以造模和mXG温敏水凝胶干预,术后第1周和6周取心、肝、脾、肺、肾等主要脏器使用HE染色进行组织学检查,进行体内毒性评价。  结果  动物模型大体观察发现,Hydrogel组的大鼠基本未发生粘连,Film组发生轻度粘连,Control组发生了严重的粘连,差异有统计学意义(P < 0.05)。组织学镜下观察发现,7 d时Hydrogel组创面恢复良好,未看到变异的组织,有一定程度的炎性细胞浸润;14 d时创面组织中的炎性细胞明显减少,新生间皮层下仅含有少量胶原纤维的愈合组织;而7 d、14 d,其余两组均出现不同程度粘连的病理表现。免疫组织化学染色发现,Hydrogel组TGF-β1和CTGF的阳性表达一致且较其它两组弱,差异有统计学意义(P < 0.05)。体内毒性检测发现,使用mXG凝胶的动物在不同时间点各脏器的结构均没有出现明显变化。  结论  mXG温敏水凝胶能够在粘连形成的关键时期起到良好的物理隔离作用,有效预防盲肠-腹壁粘连的发生。     

人类成熟型TGF-β_1真核表达载体的构建及表达

目的：构建人类成熟型TGF-β1的真核表达载体,转染成纤维细胞进行表达,为其在基因治疗中的应用提供实验依据。方法：TRIzol法抽提人新鲜胎盘组织的总RNA,RT-PCR法扩增人成熟型TGF-β1基因,构建真核重组载体pIRES2-EGFP-hTGF-β1,并采用脂质体介导法转染成纤维细胞。结果：从人新鲜胎盘组织中成功提取得到含有hTGF-β1基因的总RNA。重组载体pIRES2-EGFP-hTGF-β1转染成纤维细胞后,经荧光显微镜观察可见绿色荧光。结论：成功构建了人成熟型TGF-β1基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-hTGF-β1,转染成纤维细胞株后hTGF-β1获得成功表达。     

姜黄素对哮喘小鼠气道重构及TGF-β1 mRNA表达的影响

目的：研究姜黄素对哮喘小鼠气道重构及肺组织转化生长因子β1 mRNA表达的影响．方法：将48只雄性小鼠随机分成正常对照组（A组）、哮喘组（B组）、地塞米松1mg／kg治疗组（C组）、姜黄素治疗组（D组）,用卵清蛋白（OVA）进行致敏和激发,建立哮喘模型．收集小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）行白细胞和嗜酸粒细胞（EOS）计数,观察并计算离体支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度、支气管平滑肌细胞核数量和肺组织形态学改变,采用医学图像分析软件测定支气管各项指标;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺组织转化生长因子母,mRNA和免疫组织化学方法测定转化生长因子β1的蛋白表达水平．结果：正常对照组、哮喘组、地塞米松治疗组、姜黄素治疗组的EOS分别是（0．51±0．17）×10^8／L,（7．42±0．33）×10^8／L,（4．89±0．75）×10^8／L,（3．14±0．24）×10^8／L,哮喘组明显比正常对照组增高,两组比较有统计学意义（P〈0．01）．哮喘组小鼠具有明显的气道炎症,出现上皮细胞增生、平滑肌肌层增厚、结缔组织增生、黏液分泌旺盛并伴小气道栓塞,支气管黏膜下、血管壁及周围、肺间质均有大量胶原纤维沉积,姜黄素治疗组小鼠炎症明显改善,黏液产生减少,上皮增生、平滑肌层增厚不明显,气道周围胶原纤维及黏液颗粒均减少．免疫组化法TGF—β1的表达中,正常对照组阳性率为8．3％（1／12）,哮喘组达66．7％（8／12）,地塞米松治疗组为41．7％（5／12）,姜黄素治疗组为25．0％（3／12）,两两比较差异有统计学意义（P〈0．01）．结论：姜黄素不仅可明显抑制哮喘小鼠的气道炎症反应,还可明显减轻气道重构的程度,这种作用可能是通过抑制TGF—β1 mRNA表达来实现的．     

肠功能恢复汤透明质酸纳对腹腔粘连大鼠IL-1β，TGF-β1的影响

目的：观察肠功能恢复汤、透明质酸钠及两药合用预防大鼠腹膜粘连的效果及对粘连组织IL-1β,TGF—β1的影响．方法：选用SD大鼠85只,随机分为5组：空白对照组（n=5）、模型对照组（n=20）、透明质酸钠组（n=20）、肠功能恢复汤组（n=20）、透明质酸钠与肠功能恢复汤合用组（n=20）．除空白对照组外,其余组大鼠均按Ellis法制备成腹膜粘连模型,术后第1,3,5日取粘连或损伤处组织;于术后第7日取所有组的粘连或损伤处组织,免疫组化法测定IL-1β及TGF-β1表达水平,进行粘连程度肉眼分级并做病理检查．结果：模型对照组粘连分级明显高于其余各组（P〈0．05）．模型对照组的IL-1β,TGF-β1水平明显高于空白对照组（P均〈0．001）;与模型对照组相比,透明质酸钠组、肠功能恢复汤组及透明质酸钠与肠功能恢复汤合用组的IL-1β,TGF—β1含量均显著降低（P均〈0．05）．结论：透明质酸钠、肠功能恢复汤及透明质酸钠与肠功能恢复汤合用能降低腹膜粘连大鼠粘连组织中IL-1β,TGF—β1的含量,尤以两药合用效果最佳．细胞因子IL-1β,TGF—β1在腹膜粘连中成中发挥重要作用．     

贯叶连翘提取物对TGF—β1诱导肺成纤维细胞胶原合成影响的体外研究

目的研究贯叶连翘提取物对TGF-β1诱导离体肺成纤维细胞胶原合成的影响。方法离体成纤维细胞分别加入TGF-β1（10ng／ml）、贯叶连翘提取物（250mg／L）以及TGF-β1＋贯叶连翘提取物共培养48h,设为TGF-β1组,贯叶连翘组,TGF-β1贯叶连翘组,取DMEM培养液为对照组。应用SP免疫细胞化学法,免疫荧光细胞化学法及平均光密度（MOD）分析,观察在TGF-β1作用下,肺成纤维细胞α-SMA、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达及贯叶连翘提取物的干预。结果TGF-β1诱导肺成纤维细胞α-SMA、Ⅰ、Ⅲ型胶原阳性染色表达均显著高于对照组。贯叶连翘提取物干预48小时后,α-SMA、Ⅰ、Ⅲ型胶原阳性染色表达明显下降,仍高于空白对照组。结论贯叶连翘提取物可抑制TGF-β1：诱导肺成纤维细胞转分化及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的合成。     

肺纤维中过氧化物酶体增殖物激活受体γ的参与机制研究

[摘要] 目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）及其配体在博莱霉素诱导大鼠肺纤维化中的作用及参与机制。 方法 将24只雄性SD大鼠随机分为生理盐水对照组、罗格列酮对照组、博莱霉素组、罗格列酮干预组。经气管内注射博莱霉素建立肺纤维化模型。HE染色及Masson染色观察肺组织形态学变化;检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中乳酸脱氢酶（LDH）及转化生长因子β1（TGF-β1）浓度;应用荧光定量RT-PCR及Western blot检测肺组织中TGF-β1和PPARγ表达。 结果 博莱霉素气管内注入后肺Ashcroft评分,胶原沉积、TGF-β1表达、PPARγ表达及BALF中LDH、TGF-β1水平增加;给予罗格列酮干预后,除PPARγ表达进一步增加外,上述指标均下降。博莱霉素组PPARγ蛋白水平与TGF-β1mRNA表达、BALF中LDH含量呈负相关。 结论 PPARγ参与了肺纤维化的发生;PPARγ及其配体罗格列酮可能通过调节炎症反应,抑制TGFβ1转录,从而减少胶原沉积,对肺纤维化进行负性调控。     

黄芩苷抗博来霉素大鼠肺纤维化作用及机制研究

目的 观察黄芩苷对大鼠肺纤维化的病理学改变及其机制研究.方法 通过气管内注射博来霉素方法复制大鼠肺纤维化模型,腹腔注射不同剂量黄芩苷,28 d后取材,病理采用HE和Masson染色观察肺泡炎症及纤维化程度,免疫组织化学方法检测肺组织中TGF-β1的表达情况.结果 与模型组相比,黄芩苷组高低2个剂量组肺泡炎症及纤维化程度均明显减轻,高剂量组效果更好(P<0.05);与模型组相比,黄芩苷组肺组织内TGF-β1含量明显下降(P<0.01).结论 黄芩苷抑制肺纤维化的发生与发展,其可能机制是通过降低肺内TGF-β1来实现的.     

益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF—β／smad信号通路及结缔组织生长因子的影响

目的：观察益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β／smad信号通路及结缔组织生长因子（connectivetissue growthfactor,CTGF）的影响。方法：健康雄性Wistar大鼠30只诱导建立单侧输尿管梗阻（unilateralureteralobstruction,UUO）致肾小管间质纤维化模型,模型成功后随机分为模型组,益气活血方大、中、小剂量组和西药组,另取健康雄性Wistar大鼠6只设为假手术组。3周后处死大鼠,称取体质量;取血清检测肌酐（creatinine,Cr）、尿素氮（bloodureanitrogen,BUN）水平;取肾脏组织采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法和免疫印迹法检测各组转化生长因子G（transforminggrowthfactor—B,TGF-β）、smad2、smad7、CTGFmRNA和蛋白表达水平;苏木精一伊红染色和Masson染色检测各组肾间质纤维化指数。结果：模型组大鼠血清Cr和BUN值较假手术组偏高;与模型组比较,大剂量益气活血方可以降低Cr和BUN值,但差异无统计学意义。苏木精-伊红染色和Masson染色显示模型组肾小管上皮细胞萎缩,大部分肾小管管腔扩张,间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,肾小球数目明显减少,胶原成分显著增加。益气活血方大剂量组、中剂量组和西药福辛普利钠组大鼠肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生、肾小管扩张情况较模型组明显减轻,胶原成分明显减少。与假手术组比较,模型组大鼠肾脏组织中TGF—D、smad2和CTGFmRNA以及蛋白表达水平明显升高（P〈0．05）,smad7的表达水平则明显降低（P〈0．05）。与模型组比较,益气活血方大剂量组和中剂量组大鼠TGF-β、smad2、CTGFmRNA和蛋白表达明显下降（P〈0．01,P〈0．05）,smad7表达明显升高（P〈0．01,P＜0．05）。结论：UUO大鼠肾组织中CTGFmRNA的表达可能通过TGF-β／smad信号通道进行调节;益气活血方可以通过下调TGF—β、smad2和上调smad7的表达来抑制CTGF表达,进而遏制肾纤维化的进展。