牛磺酸对白细胞介素—1β损伤的胰岛细胞分泌的影响

在Ｗｉｓｔａｒ新生大鼠离体培养胰岛细胞中定量观察了ＩＬ－１β对胰岛素分泌的抑制作用以及牛磺酸的反转效应，实验结果表明：（１０ＩＬ－１β（５－２０Ｕ／ｍｌ）可抑制胰β细胞的分泌功能，表现为胰岛素的基础分泌和葡萄糖刺激时的分泌量均明显减少。（２）经ＩＬ－１β处理 胰岛细胞加入牛磺酸共同孵育后，可见胰岛素的基础分泌量和糖刺激时的分泌量均显著增加表明牛磺酸能反转ＩＬ０１β的抑制作用，并且这种反转效应有量效     

一氧化氮介导的细胞因子对大鼠胰岛素分泌的影响

目的观察白细胞介素１β（ＩＬ１β）、白细胞介素６（ＩＬ６）对胰岛细胞一氧化氮（ＮＯ）生成、胰岛素分泌的影响。方法在体外单层培养的大鼠胰岛细胞上，分别应用分光光度法、放免双抗体法检测ＩＬ１β、ＩＬ６及其联合对胰岛细胞ＮＯ生成、胰岛素分泌的影响，并进一步观察一氧化氮合酶抑制剂ＮＧ单甲基Ｌ精氨酸（ＬＮＭＭＡ）的作用。结果ＩＬ１β能诱导大鼠胰岛细胞ＮＯ的生成，同时显著抑制胰岛素基础分泌及葡萄糖刺激的胰岛素释放。ＬＮＭＭＡ能阻断这些作用（Ｐ值均＜０．００１）。ＩＬ６不能诱导胰岛细胞的ＮＯ生成（Ｐ值＞０．０５），对胰岛素分泌有促进作用，但对葡萄糖刺激的胰岛素释放有明显的抑制作用（Ｐ值＜０．００１）。ＩＬ６与ＩＬ１β联合作用时，不能影响ＩＬ１β对胰岛素释放的抑制作用及其诱导的ＮＯ生成（Ｐ值均＞０．０５）。结论ＩＬ１诱导的胰岛细胞损害可能由ＮＯ介导。ＩＬ６诱导胰岛细胞功能改变的作用方式与ＩＬ１β不同，可能与其不能诱导ＮＯ生成有关。     

氨基胍对白细胞介素－1β所致胰岛损伤的保护作用

白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）对胰岛β细胞具有细胞毒效应。本实验采用离体培养的新生大鼠胰岛，观察ＩＬ－１β对胰岛素分泌、ＤＮＡ合成和一氧化氮（ＮＯ）生成的影响及氨基胍对胰岛功能的保护作用。结果：①ＩＬ－１β（１０、２０、４０Ｕ／ｍｌ）孵育胰岛２４小时后，可抑制急性高浓度葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛３Ｈ－ＴｄＲ掺入量，具有明显的剂量依赖性，且其抑制程度与亚硝酸盐的生成量密切相关。②氨基胍（０．１、０．２、０．４ｍｍｏｌ／Ｌ）抑制亚硝酸盐的生成，同时减轻或完全阻断ＩＬ－１β对胰岛素分泌和３Ｈ－ＴｄＲ掺入的影响，呈剂量依赖性。实验结果表明：ＩＬ－１β对胰岛β细胞的细胞毒效应由ＮＯ介导，氨基胍通过抑制ＮＯ的合成阻断了ＩＬ－１β的胰岛损伤效应。     

氨基胍对白细胞介素—1β所致胰岛损伤的保护作用

白细胞介素－１β对胰岛β细胞具有细胞毒效应，本实验采用离体培养的新生大鼠胰岛，观察ＩＬ－１β对胰岛素分泌，ＤＮＡ合成和一氧化氮生成的影响及氨基胍对胰岛功能的保护作用。     

一氧化氮在白介素—1β诱导的离体大鼠胰岛细胞损伤机制中的作用

目的 观察一氧化氮（ＮＯ）在白介素－１β（ＩＬ－１β）诱导的胰岛细胞损伤机制中的作用。方法 应用体外单层培养的大鼠胰岛细胞,分别检测ＩＬ－１β、一氧化氮合酶抑制剂Ｎ＾Ｇ－单甲基－Ｌ精氨酸（Ｌ－ＮＭＭＡ）（１ｍｍｏｌ／Ｌ）、胰岛细胞保护剂尼克酰胺（ＮＡ）（１０．２０ｍｍｏｌ／Ｌ）及ＩＬ－１β诱导,胰岛细胞亚硝酸盐生成量显著增加,同时胰岛素基础细胞内ＤＮＡ、胰岛素含量和细胞活性的影响。结果 以ＩＬ－６     

致糖尿病药物对胰岛β细胞电活动的影响及其机制

致糖尿病药物对胰岛β细胞电活动的影响及其机制沈新明，苏清芬，张镜如目前对四氧嘧啶（ＡＬＬ）、链脲佐菌素（ＳＴＺ）和白细胞介素Ｉ－β（ＩＬ－１β）对胰岛β细胞急性作用机制不明。由于β细胞的放电与胰岛素分泌相耦联，能较好地反映胰岛素的即时分泌，因此本工作...     

一氧化氮介导的白细胞介素（IL）—β和IL—6对大鼠胰岛细胞的作用

目的 观察一氧化氮（ＮＯ）在白细胞介素（ＩＬ）－１β、ＩＬ－６对胰岛细胞影响中的作用。方法 应用体外单层培养的大鼠胰岛细胞检测ＩＬ-１β、ＩＬ－６对胰岛细胞内Ｄ ＮＡ、胰岛素含量和细胞活性的影响,并进一步观察一氧化氮合酶抑制剂Ｎ^G－单甲基－Ｌ－精氨酸（Ｌ－ＮＭＭＡ）的作用。结果 以ＩＬ－１β诱导,胰岛细胞亚硝酸盐生成量显著增加（Ｐ〈０．００１）;同时胰岛细胞内ＤＮＡ、胰岛素含及细胞活性（ＭＴＴ值）均     

rhIFNγ对人胚胎胰岛分泌IL-6及对胰岛分泌功能的影响

目的探讨重组人γ干扰素（ｒｈＩＦＮγ）对人胚胎胰岛分泌白细胞介素６（ＩＬ６）以及对胰岛分泌功能的影响，为ＩＦＮγ和ＩＬ６在１型糖尿病中的可能作用提供依据。方法采用胶原酶Ｖ型消化方法分离人胚胎胰岛，并对其进行原代培养，加入不同浓度的ｒｈＩＦＮγ培养４８小时收获上清，进行ＩＬ６、胰岛素、胰升血糖素活性检测和ＩＬ６单抗中和试验，对ｒｈＩＦＮγ刺激和对照组胰岛ＲＮＡ进行ＩＬ６ＲＮＡ斑点杂交。结果（１）ｒｈＩＦＮγ刺激后胰岛培养上清ＩＬ６含量显著升高，当ｒｈＩＦＮγ浓度在１００ｕ／ｍｌ时ＩＬ６含量最高；（２）ＩＬ６单抗对ｒｈＩＦＮγ刺激的胰岛培养上清中ＩＬ６有很强的中和效应；（３）斑点杂交结果显示ｒｈＩＦＮγ刺激的胰岛ＲＮＡ中ＩＬ６ｍＲＮＡ含量高于对照组；（４）人胚胎胰岛受ｒｈＩＦＮγ刺激后培养上清胰岛素降低不明显；（５）人胚胎胰岛受ｒｈＩＦＮγ刺激后培养上清胰升血糖素分泌能力明显升高，分泌趋势与ＩＬ６相似。结论ｒｈＩＦＮγ可以促进胰岛分泌ＩＬ６，而ＩＬ６的过度分泌可以加重１型糖尿病的进程。     

1型糖尿病胰β细胞破坏的机制

Ｔ淋巴细胞是１型糖尿病发生时胰岛的主要细胞,可直接或间接地杀伤β细胞。由Ｔ淋巴细胞、巨噬细胞等分泌产生的Ⅰ型因子（ＩＦＮγ,ＩＬ－２,ＴＮＦβ）和炎症前因子（ＩＬ－１α,ＬＩ－１β,ＴＮＦα等）对胰岛β细胞有破坏作用。也有证据表明氮氧自由基可作为细胞因子诱发β细胞破坏的中介者。     

胰岛与Sertoli细胞体外共同培养

目的 研究胰岛体外长期培养的新方法。方法 采用绿色荧光蛋白（GFP）标记成年SD大鼠胰岛，与Sertoli细胞共同培养20周，应用形态学方法和透射电镜观察胰岛细胞单独培养和共同培养的生长特性；放射免疫法测定胰岛素分泌量。结果 胰岛单独培养3周。细胞存活率显著下降，胰岛阳性细胞数目减少，胰岛素24h累积分泌量和对葡萄糖刺激的反应性下降，大部分胰岛β细胞超微结构破坏，分泌颗粒减少；与Sertoli细胞共同培养的胰岛存活时间显著延长，细胞存活率和胰岛素阳性细胞数目较单独培养显著增加，胰岛素分泌量始终处于高水平状态，培养20周胰岛β细胞超微结构基本正常，结论 大鼠胰岛与Sertoli细胞共同培养可以促进胰岛生长，显著延长存活时间，是一种新的体外长期培养胰岛的方法。     

醋酸敏感的G蛋白耦联受体FFAR2调控胰岛素分泌机制的研究

目的探讨对醋酸敏感的G蛋白耦联受体-短链脂肪酸受体2(FFAR2)及其配体对胰岛素分泌的影响和相关机制。方法使用以C57BL/6J为背景的野生型(WT)小鼠(n=17)和敲除编码受体基因Ffar2的转基因(KO)小鼠(n=15),分别于第6周和第26周测定体重、空腹血糖及胰岛素水平。提取小鼠胰岛细胞,随机分组分别给予不同浓度葡萄糖和FFAR2配体物质(SCA14、SCA15、CPTB和CMTB)刺激,并使用ELISA方法测定胰岛素分泌量。结果不同基因型小鼠的体重、空腹血糖及胰岛素水平差异无统计学意义(P均0.05)。体外胰岛β细胞胰岛素分泌实验中,KO型胰岛细胞在低浓度葡萄糖刺激下胰岛素分泌量与WT型无差别,高浓度葡萄糖刺激下KO型胰岛细胞胰岛素分泌量少于WT型,差异有统计学意义(P0.05)。类似生理浓度的醋酸盐(1mM)刺激胰岛素分泌,在WT型胰岛细胞中,胰岛素分泌量是无醋酸盐时的2倍以上,在KO型胰岛细胞中,促进作用减弱。FFAR2配体物质SCA14、SCA15在WT型同样促进胰岛素分泌,而在KO型胰岛细胞中则无类似作用。另一类FFAR2配体物质CMTB、CPTB在WT型和KO型胰岛细胞中均抑制胰岛素分泌。结论敲除Ffar2不影响小鼠的生长发育。FFAR2可调控胰岛素分泌,并具有血糖依赖性。作为FFAR2的主要配体,醋酸可刺激胰岛素分泌且具有受体依赖性。其他FFAR2配体中,SCA14、SCA15与醋酸作用类似,但CPTB和CMTB抑制胰岛素分泌且不依赖受体产生作用。     

胰腺微循环与胰岛β细胞的关系研究进展

糖尿病的发生主要是胰岛素分泌的绝对或相对不足[胰岛素抵抗(IR)],胰岛素分泌不论是基础分泌还是葡萄糖刺激后的胰岛素分泌均与糖尿病的发生发展密切相关[1],而胰岛素是由胰岛β细胞合成和分泌,因此,胰岛β细胞损伤是糖尿病发生的最关键因素.胰岛β细胞的生长发育离不开其赖以存在的"土壤"--微环境的稳定.     

糖尿病的胰岛素治疗

胰岛素是由胰岛B细胞所分泌的，是人体内唯一能够降低血糖的激素。正常人胰岛素的生理分泌分为两个部分，基础状态分泌和餐时爆发分泌。基础状态的胰岛素全天持续分泌，分泌量约为每小时1单位左右，全天共约24单位左右。餐时爆发分泌在每次进餐后出现．     

高浓度葡萄糖、脂肪酸和糖皮质激素对PDX-1表达和胰岛素分泌功能的影响

SD大鼠胰岛细胞分别在含5.6mmol／L葡萄糖、33mmol／L葡萄糖、0．6mmol／L软脂酸或20nmol／L地塞米松培养液中培养3d，RIA测定基础和葡萄糖刺激后胰岛素分泌量，免疫组化法测定细胞内胰十二指肠同源盒蛋白1（PDX-1）蛋白表达和原位杂交法测定细胞内PDX-1 mRNA表达。结果显示高浓度葡萄糖、脂肪酸和糖皮质激素对PDX-1蛋白表达和胰岛素分泌均有抑制作用。     

糖尿病酮症和酮症酸中毒患者胰岛β细胞功能改变的初步观察

用Ｌ－精氨酸（Ｌ－ＡＲＧ）或葡萄糖（ＧＬＵ）刺激法，对４２例发病年龄２５岁－３９岁之间的糖尿病酮症（ＤＫ）和酮症酸中毒（ＤＫＡ）患者的胰岛β细胞功能和临床特点进行分析。结果：（１）胰岛β细胞对ＬＡＲＧ刺激虽有一定的反应性，但胰岛素和Ｃ肽分泌峰值明显低于正常人，随病程工逐渐降低，经良好控制血糖和其它代谢紊乱后，Ｉｎｓ和Ｃ肽分泌峰值有所提高。ＧＬＵ胰β细胞刺激反应明显减弱，治疗后也无明显提高；（２）病     

肝细胞生长因子及葡萄糖对人胰腺干细胞向胰岛素分泌细胞分化的影响

目的 探讨人胰腺干细胞体外扩增及其向胰岛素分泌细胞分化的影响因素.方法 应用剪碎消化法从孕4～6月龄引产的人胎儿胰腺中获得胰岛组织,选用差速贴壁法从胰岛中分离胰腺干细胞,经扩增后定向诱导成具有胰岛素分泌功能和胰岛样结构的胰岛样细胞团,观察肝细胞生长因子和葡萄糖对胰腺干细胞向胰岛素分泌细胞诱导分化以及胰岛样细胞团胰岛素分泌功能的影响.采用流式细胞仪和免疫组织化学法检测扩增前后nestin阳性细胞和ABCG2阳性细胞.行葡萄糖刺激的胰岛素释放试验,以酶联免疫吸附法（ELISA）检测每1×105个扩增细胞经定向诱导后形成的胰岛样细胞团释放的胰岛素量,比较肝细胞生长因子和葡萄糖对定向分化的影响.采用单因素方差分析或多样本均数两两比较进行统计学分析.结果 经过15代连续扩增,nestin阳性细胞和ABCG2阳性细胞分别扩增了27.9倍和37.8倍.扩增后的细胞经15 d定向诱导后形成具有胰岛素分泌功能和胰岛样结构的细胞团.葡萄糖刺激的胰岛素分泌试验显示,当诱导培养基中肝细胞生长因子浓度为0、5、10、15μg/L时,5.6 mmol/L葡萄糖刺激后,胰岛素分泌量分别为5.00、12.93、14.91和11.23μU;25.0 mmol/L葡萄糖刺激后,胰岛素分泌量分别为19.91、35.53、47.43和23.33 μU.诱导培养基中的葡萄糖浓度为0、2.8、5.6和11.2 mmol/L时,5.6 mmol/L葡萄糖刺激后,胰岛素分泌量分别为9.07、14.21、6.91和3.53 μU;25.0 mmol/L葡萄糖刺激后,胰岛素分泌量分别为26.64、48.97、37.63和34.20 μU.结论 人胰腺中nestin和ABCG2阳性胰腺干细胞具有很强的体外扩增能力.扩增后的胰腺干细胞仍然具有形成胰岛素分泌细胞的功能,经体外诱导后能形成胰岛样细胞团.在胰腺干细胞向胰岛素分泌细胞分化诱导过程中,适当浓度的肝细胞生长因子和葡萄糖有利于胰岛样细胞团的形成和胰岛素分泌.     

胰岛β细胞的胰岛素抵抗

近年发现胰岛β细胞同样具有胰岛素的信号转导途径，同时也存在胰岛素抵抗。β细胞自身的胰岛素抵抗会导致葡萄糖刺激的一相胰岛素分泌异常，抑制β细胞增殖，促进β细胞凋亡。肥胖可以促进胰岛β细胞胰岛素抵抗的发生发展。胰岛β细胞自身胰岛素抵抗可能是2型糖尿病发病的中心环节。     

成骨细胞分泌白细胞介素—6及其调控在骨质疏松症中的作用

目的研究成骨细胞分泌白细胞介素－６（ＩＬ－６）在骨吸收代谢中的作用。方法从新生大鼠颅骨分离出成骨细胞，采用杂交瘤细胞系Ｂ９细胞增殖方法检测细胞ＩＬ－６的分泌量，并研究白细胞介素－１（ＩＬ－１）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、细菌脂多糖（ＬＰＳ）等因素对其活性的影响。结果新生鼠颅骨成骨细胞能自发分泌ＩＬ－６，该细胞的上清液能促进ＩＬ－６依赖的杂交瘤细胞系Ｂ９细胞增殖，其促增殖作用与细胞浓度有关，并可被抗ＩＬ－６抗体所抑制；在未加入单克隆抗体８的实验组内，ＩＬ－６的平均分泌值为３５．１±１２．０ｋＵ／Ｌ，明显高于加入单克隆抗体８组（４．３±６．０ｋＵ／Ｌ）。且当ＩＬ－１量从１ｋＵ／Ｌ增至１００００ｋＵ／Ｌ时，成骨细胞分泌量明显提高（最大３１０ｋＵ／Ｌ）。ＴＮＦ、ＬＰＳ也促进大鼠成骨细胞分泌ＩＬ－６。结论绝经期后雌激素水平下降引起的骨质疏松，可能与成骨细胞及其分泌ＩＬ－６的作用有关。     

核苷酸代谢对胰岛素分泌影响的主要相关因素分析

目的 研究同时作用于胰岛β细胞第二分泌调控位点水平上的多种核苷酸代谢对胰岛素分泌量的影响。方法 以小鼠离体胰岛细胞为材料,用二氮嗪阻断α细胞膜上的Ｋ＾＋－ＡＴＰ通道作用后,将细胞补液Ｋ＾＋浓度提高到３０ｍｍｏｌ／Ｌ;用葡萄糖诱导胰岛素分泌,同时测定胰岛素分泌量、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＧＴＰ、ＧＤＰ和ＵＴＰ水平。并分析它们之间的关系。结果 在上述实验条件下,胰岛素分泌仍随葡萄糖浓度增加而增加,呈现正常的一     

人工合成多肽（P—15）对单层培养胰岛细胞的作用

观察人工合成多肽（Ｐ－１５）的新生大鼠单层培养胰岛细胞素分泌和胰岛素表达的作用。含有１６．７ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖的ＴＣＭ１９９培养基培养２４小时的Ｗｉｓｔａｒ大鼠单层胰岛细胞被Ｐ－１５刺激３０、９０分钟。结果表明，短时期内Ｐ－１５对胰岛细胞产生刺激分泌效果，长时间７．２μｍｏｌ／ＬＰ－１５既增加胰岛素的分泌，也刺激胰岛素的基因表达，高浓度却丧失了这种刺激效果。