p57KIP2、cyclin D1和cyclin E在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的探讨p57^KIP2、cyclin D1及cyclin E蛋白在宫颈癌发生、发展中的作用。方法用免疫组织化学SP法检测100例宫颈鳞癌、60例宫颈上皮内瘤变和30例正常宫颈鳞状上皮组织中p57^KIP2、cyclin D1和cyclin E蛋白的表达情况。结果cyclin D1、cyclin E蛋白在宫颈SCC与NE、CIN与NE组织中阳性表达率之间比较、cyclin E蛋白在宫颈SCC与CIN组织中阳性表达率之间比较，差异均有显著性（P〈0．01）；cyclin D1与cyclin E之间的表达呈正相关（P〈0．01）；三者表达均与组织学分级、淋巴结转移、患者年龄无关（P〉0．05）。结论p57^KIP2、cyclin D1及cyclin E蛋白共同参与了宫颈癌的发生发展。cyclin D1和cyclin E蛋白高表达可能是宫颈组织恶变的重要生物学标志，cyclin E异常表达是宫颈癌发生的早期事件。     

P16和CyclinE蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨P16和cyclinE蛋白在食管鳞状上皮、增生上皮和癌变上皮中表达状况及其与鳞状细胞癌发生、发展和转移的相关性。方法采用SP免疫组织化学方法,检测食管鳞癌72例,粘膜上皮增生21例,正常对照13例和淋巴结转移癌15例中P16和cyclinE基因蛋白的表达。结果P16在正常上皮组无阳性表达,增生组为23.81%,鳞癌组为38.89%;高分化鳞癌组阳性表达率(41.67%)显著高于低分化鳞癌组(27.27%)(P<0.05);有淋巴结转移组(16.67%)和无淋巴结转移组(42.85%)比较具有显著性差异(P<0.05);原发癌组阳性率显著高于淋巴结转移癌组(P<0.05)。cyclinE在正常上皮组无阳性表达,增生上皮组为33.3%,鳞癌组为51.4%;高分化鳞癌组阳性表达率(44.44%)显著低于低分化鳞癌组(81.81%)(P<0.05);淋巴结转移组cyclinE阳性表达率(79.17%)和淋巴结无转移组(48.57%)比较有显著性差异(P<0.05)。P16和cyclinE表达与肿瘤部位和浸润深度相关性不明显。结论在食管癌中P16和cyclinE基因蛋白的表达与病理分化程度有关;检测P16和cyclinE对食管癌早期诊断有指导作用。     

流式细胞术对食管癌组织中四种细胞周期调控蛋白的定量检测及意义

目的 探讨细胞周期调控蛋白cyclin E、cyclin D1、CDK4和D27在食管癌的表达及其与食管癌的分化和淋巴结转移的关系。方法 采用流式细胞术对65例食管鳞状细胞癌组织中cyclin E、cyclin D1、CDK4和p27的表达强弱进仃定量检测,结果 用荧光指数F1表示。结果 cyclin E、cyclin D1和CDK4在低分化型鳞癌的表达量显著高于分化型鳞癌(P值分别为0．0275,0．0001和0．0174);而p27在低分化型鳞癌的表达量显著低于分化型鳞癌(P=0．0042)。cyclin D1与cyolin E,cyclin D1与CDK4之间呈显著正相关;而cyclin D1与p27呈显著负相关。4种基因蛋白的表达与淋巴结转移均无相关性。结论 cyclhi E、cyclin D1、CDK4和p27的表达与食管癌的分化密切相关;正负性细胞周期调控蚩白表达的失衡是导致癌变的重要原因之一。     

Ⅱ型环氧合酶和CDK4在食管鳞癌中的表达及意义

目的 探讨Ⅱ型环氧合酶(COX-2)和CDK4在食管鳞癌中的表达与食管鳞癌的发生、浸润及转移的关系.方法 采用免疫组化S-P法检测49例食管鳞癌及癌旁黏膜组织中的表达.结果 COX-2在癌旁正常上皮、单纯增生上皮、轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织中的阳性表达率分别为0%(0/25)、7.1%(2/28)、33.3%(7/21)、50.0%(5/10)、69.2%(9/13)和73.5%(36/49).正常上皮组织与单纯增生上皮比较差异没有统计学意义(P＞0.05),但与轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织比较差异有统计学意义(P＜0.01).其在食管鳞癌中的阳性率与癌组织分级有关(P＜0.05).CDK4蛋白在癌旁正常上皮、单纯增生上皮、轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织中的阳性表达率分别为8%(2/25)、21.4%(6/28)、42.9%(9/21)、70%(7/10)、61.5%(8/13)和91.8%(45/49).正常上皮组织与单纯增生上皮比较差异没有统计学意义(P＞0.05),但与轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织比较差异有统计学意义(P＜0.01).CDK4阳性率与鳞癌分级无关(P＞0.05).COX-2、CDK4蛋白表达与食管鳞癌的浸润深度和淋巴结转移无关(P＞0.05).食管鳞癌组织中COX-2、CDK4蛋白阳性率有正相关性(P＜0.01).结论 COX-2、CDK4蛋白表达与食管鳞癌的发生有关.     

p57 KIP2 、cyclin D1 和cyclin E 在宫颈鳞癌中的表达及意义

 目的 探讨p57^KIP2、cyclin D1及cyclin E蛋白在宫颈癌发生、发展中的作用。方法 用免疫组织化学SP法检测100例宫颈鳞癌、60例宫颈上皮内瘤变和30例正常宫颈鳞状上皮组织中p57 KIP2、cyclin D1和cyclin E蛋白的表达情况。结果 cyclin D1、cyclin E蛋白在宫颈SCC与NE、CIN与NE组织中阳性表达率之间比较、cyclin E蛋白在宫颈SCC与CIN组织中阳性表达率之间比较,差异均有显著性（P〈0．01）;cyclin D1与cyclin E之间的表达呈正相关（P〈0．01）;三者表达均与组织学分级、淋巴结转移、患者年龄无关（P〉0．05）。结论 p57 ^KIP2、cyclin D1及cyclin E蛋白共同参与了宫颈癌的发生发展。cyclin D1和cyclin E蛋白高表达可能是宫颈组织恶变的重要生物学标志,cyclin E异常表达是宫颈癌发生的早期事件。     

细胞周期蛋白D1表达与宫颈鳞癌关系的研究

目的探讨细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达与宫颈鳞癌关系的规律,为寻找一种早期诊断的手段奠定基础.方法采用班点杂交方法检测96例经福尔马林固定,石蜡包埋的宫颈鳞状上皮癌(宫颈鳞癌)38例,宫颈鳞状上皮不典型增生32例、慢性宫颈炎12例和正常宫颈组织标本14例中cyclin D1的表达情况.结果cyclin D1的表达在宫颈鳞癌与不典型增生相差不显著(P＞0.05).显著高于慢性宫颈炎和正常宫颈组织(P＜0.05).结论揭示cyclin D1的高表达与宫颈鳞癌的发生有关.     

膜联蛋白-1在食管鳞状细胞癌发生发展中的表达差异

目的　检测膜联蛋白 -1(annexin -1)在食管鳞状细胞癌及癌前病变中的表达差异。方法　应用免疫组化S -P方法检测 13 5例食管鳞状细胞癌及其癌旁正常鳞状上皮、原位癌及其不典型增生病变中annexin -1的表达情况。结果　annexin -1在 12 9例 (95 .6% )癌旁正常食管鳞状上皮呈强阳性表达 ;在 3 5例 (2 5 .9% )鳞状细胞癌呈阳性表达 ,60例 (4 4 .4% )为弱阳性 ,40例(2 9.6% )为阴性 ,统计学处理有极显著性差异 (P <0 .0 1)。食管鳞状细胞癌annexin -1表达下降与患者的年龄、性别、肿瘤分化程度及淋巴结转移无关 (P >0 .0 5 )。annexin -1在原位癌和不典型增生病变的表达亦呈下降趋势 ,与正常鳞状上皮比较有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　annexin -1蛋白在食管鳞状细胞癌和癌前病变中有不同程度的丢失 ,它很可能成为食管癌早期诊断以及预测食管癌前病变癌变风险的具有重要应用价值的指标     

食管癌组织中p21cip1/WAF、p53表达及HPV-16感染的意义

目的　探讨食管癌发生原因及其机制。方法　采用免疫组化方法 ,检测食管癌组织中p2 1cip1/WAF、p5 3蛋白表达水平 ,同时检测HPV 16。并与正常食管上皮和癌旁非典型增生上皮进行对比观察。结果　 9例正常食管鳞状上皮中有 8例p2 1cip1/WAF阳性 (88.89% ) ,明显高于食管癌组织 (4 8.72 % ,19/3 9) ;非典型增生中其阳性率 (74.19% ,2 3 /3 1)介于两者之间 ,非典型增生者其阳性率与食管癌比较无显著性差异 (χ2 =3 .669,P >0 .0 5 ) ,但表达强度明显强于食管癌 (χ2 =7.40 3 ,P <0 .0 1) ;正常上皮中 p5 3表达均阴性 ,食管癌组织中p5 3阳性率 (64 .10 % )明显高于非典型增生上皮 (3 5 .48% ) ,P <0 .0 1;正常食管上皮中HPV 16均阴性 ,3 9例食管癌有 13例表达阳性 (3 3 .3 3 % ) ,与非典型增生 (9.68% )比较无显著性差异 (χ2 =3 .3 73 ,P >0 .0 5 )。结论　食管癌患者可发生HPV 16感染 ,食管癌发生与 p5 3基因突变以及 p2 1cip1/WAF表达减弱有关。     

喉鳞癌组织中p53蛋白的表达及其临床意义

目的　探讨p5 3蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法　采用免疫组化技术检测p5 3蛋白在喉鳞癌、癌旁非典型增生组织及正常组织中的表达。结果　p5 3蛋白在喉鳞癌、癌旁和正常组织中阳性表达率分别为 5 3 .7%、3 8.1%和0 ,三者有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;重度非典型增生组织与中、轻度增生、癌旁单纯增生和癌旁正常黏膜 p5 3阳性表达分别有显著性差异 ,表达率分别为 68.8%、2 1.4%、16.7%、8.3 %和 0 ;在肿瘤浸润的前沿部 p5 3阳性表达显著强于浅表部 (P <0 .0 5 ) ;且癌巢边缘 p5 3表达显著强于中央部 (P <0 .0 5 ) ;p5 3阳性表达与喉鳞癌的分化、淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。 结论　p5 3的过度表达可能为喉鳞癌的早期发生事件 ,癌旁组织中已发生p5 3基因突变的细胞可能是肿瘤复发的根源 ;p5 3表达与喉鳞癌的浸润生长、分化及转移有关 ,为判断预后的 1个有意义指标。     

应用组织芯片检测食管鳞状细胞癌中APC、β-catenin、E-cadherin与cyclin D1的表达及其意义

背景与目的:食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)的发生是个多因素多阶段的演进过程.Wnt信号转导通路在肿瘤发生发展中起重要作用.本研究探讨4种Wnt通路上的蛋白在食管鳞癌发生中的作用及在早期诊断中的意义.方法:制作由199例食管鳞癌组织与其癌旁164例正常粘膜、34例基底细胞增生和30例不典型增生上皮组成的组织芯片,应用免疫组化方法检测APC、B-catenin、E-cadherin、cyelin DI的表达情况.结果:APC和E-cadherin在ESCC阳性率分别是69.6%、19.6%,均低于各自正常组(98.0%、96.3%,均为P＜0.01),B-catenin和eyclin D1在ESCC的异常表达率分别是65.5%和70.9%,均高于各自正常组(1.2%,0.8%,均为P＜0.01).按正常粘膜→基底细胞增生→不典型增生→ESCC的顺序,APC低表达发生在ESCC,β-catenin和E-eadherin表达异常始于不典型增生.cyclin DI过表达始于基底细胞增生.随着ESCC分化程度由高到低的改变,APC、E-cadherin和cyclin D1阳性率逐渐减少,β-eatenin逐渐增加.β→catenin的表达与APC无相关(r=-0.10,P＞0.05),与E-eadherin呈负相关(r=-0.31,P＜0.01),与cyclin D1呈正相关(r=0.49,P＜0.01).结论:APC、E-cadherin、β-catenin 和cyclin D1可能在ESCC发生过程中起重要作用.β-catenin、E-cadherin和eyelin D1的表达检测有助于ESCC的早期诊断.     

非小细胞肺癌中细胞周期蛋白D1与E的作用及相互关系

目的 :研究细胞周期蛋白D1与E在非小细胞肺癌 (NSCLC)发生、发展中的作用及相互关系。方法 :免疫组化方法检测 87例NSCLC肿瘤组织中细胞周期蛋白D1、E的表达及PCNA估计增殖指数 (PI) ,并将上述结果与临床病理及预后资料进行对比分析。结果 :87例NSCLC中细胞周期蛋白D1、E阳性率分别为 4 4 .8% (39/87)、4 8.3% (42 /87) ,细胞周期蛋白D1阳性组的PI值显著高于阴性组 (P〈0 .0 5 ) ,细胞周期蛋白E阳性组PI值与阴性组无显著差异 (P〉0 .0 5 ) ;细胞周期蛋白D1阳性组肿瘤直径、淋巴结转移率和生存率均与阴性组有显著差异(P〈0 .0 1、〈0 .0 5、〈0 .0 1) ,细胞周期蛋白E阳性组淋巴结转移率、临床分期和生存率均与阴性组有显著差异 (P〈0 .0 5、〈0 .0 5、〈0 .0 1) ;细胞周期蛋白D1阳性组中细胞周期蛋白E的阳性率显著高于其阴性组 (P〈0 .0 5 ) ;细胞周期蛋白D1与细胞周期蛋白E双阳性组的PI值、肿瘤直径、淋巴结转移率显著高于非双阳性组 (P值均〈0 .0 5 ) ,生存率显著低于非双阳性组 (P〈0 .0 1)。结论 :细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白E均参与NSCLC的发生、发展 ,并影响其预后 ,但两者在其中所起作用不同 :细胞周期蛋白D1是调节NSCLC增殖的主要因素 ,细胞周期蛋白E主要与NSCLC进展有关 ;细胞周期蛋白D1可促     

人脑胶质瘤组织中cyclin D1和cyclin E表达的研究

目的 :研究人脑胶质瘤中细胞周期素 (cyclin)D1和cyclinE的表达与肿瘤病理等级的关系。方法 :采用免疫组织化学法检测 5 2例人脑胶质瘤和 8例正常脑组织标本中cyclinD1和cyclinE的表达。结果 :人脑胶质瘤组中有 2 9例cyclinD1的表达。随着胶质瘤病理分级增高 ,高、低恶性度胶质瘤的阳性率和平均标记指数均显著升高 ,两者差异有统计学意义 ,P <0 0 5。cyclinD1与cyclinE的平均标记指数之间呈明显正相关 ,Pearson相关系数r =0 64 4,P <0 0 1。结论 :cyclinD1与cyclinE在胶质瘤中被异常表达 ,是肿瘤发生和恶性转化的重要促进因子。     

Overexpression of cyclin D1 and cyclin E in N-nitrosomethylbezylamine-induced rat esophageal tumorigenesis

Dysregulation of Gl cyclins has been implicated in several humanmalignancies. To further investigate the role of Gl cyclinsin chemical carcinogenesis, the expression of cyclin Dl andcyclin E was analyzed by RT-PCR and immunohistochemical studiesin N-nitrosomethylbenzylamine (NMBA)-induced rat esophagealtumongenesis. Cyclin Dl mRNA levels were increased 2.8-foldin 25 week (P < 0.05) and 6.8-fold in 45 week (P < 0.01)papillomas induced by NMBA, when compared with normal rat esophagealepithelium. Cyclin E mRNA levels were increased 6.2-fold in25 week (P < 0.01) and 6.9-fold in 45 week (P < 0.01)papillomas. Immunohistochemical staining revealed exclusivenuclear staining of both cyclin Dl and cyclin E. Furthermore,there was a sequential increase in cyclin Dl and cyclin E-positivecells from normal epithelium, to preneoplastic lesions, to papillomas.These findings suggest that overexpression of cyclin Dl andcyclin E occur relatively early in rat esophageal tumongenesisand participate in tumor progression in this model.     

Expression of cyclin E and cyclin D1 in non-small cell lung cancers

The relationships between overexpression of cyclin D1 or cyclin E and clinicopathological factors were investigated in 157 patients with non-small cell lung cancers (NSCLCs) using immunohistochemical analysis. Fifty-eight cases of NSCLCs (58/157, 37%) showed the overexpression of cyclin D1, and 64 cases (64/157, 41%) were positive for cyclin E. Cyclin E and cyclin D1 were infrequently concurrently overexpressed (17/157, 10.8%). Overexpression of cyclin E was more frequently observed in squamous cell carcinoma (29/57, 51%) compared with that in adenocarcinoma (28/86, 33%) (P<0.05). In addition, overexpression of cyclin E was more frequently observed in poorly or moderately differentiated NSCLCs (52/103, 50%) than in well-differentiated ones (12/54, 22%) regardless of their histological types (P<0.01). On the contrary, there was no statistically significant relationship between cyclin D1 overexpression and histological types or grade of tumor differentiation. These findings suggest that expression of cyclin E was frequently independent of that of cyclin D1 and played some roles in the grade of tumor differentiation in NSCLCs.     

Parallel cyclin E and cyclin A expression in neoplastic lesions of the uterine cervix

Cyclin E levels are high during late G1 and early S-phase in normal cells. The cyclin E expression over the cell cycle in tumours is not fully known. The impact on patient outcome by high cyclin E levels during other parts of the cell cycle than late G1- and early S-phase is unknown. We set out to study the expression of cyclin E over the cell cycle in cervical carcinomas. Using immunofluorescence staining of cyclin A, digital microscopy, and digital image analysis, we determined which cells in a tissue section that were in S- or G2-phase. M-phase cells were detected by morphology. By simultaneously staining for cyclin E, we investigated the variation in cyclin E levels over the cell cycle in cervical carcinoma lesions. In a case-control study, in which each deceased patient was matched with a patient still alive and well after >5 years of follow-up, we found that the deceased patients had a considerably higher fraction of cyclin A-positive cells staining for cyclin E than the survivors (n = 36). We conclude that parallel cyclin E and cyclin A expression is an indicator for poor outcome in cervical carcinomas. In addition, we investigated the expression pattern of cyclin E and cyclin A in consecutive biopsy samples from cervical carcinomas at different stages, as well as in human papillomavirus positive or negative adenocarcinomas in order to further study the cyclin E and cyclin A expression pattern in neoplastic lesions of the uterine cervix.     

人细胞周期素D1和B1真核表达载体的构建及对HeLa细胞的转染

目的：构建人细胞周期素cyclin D1和cyclin B1的真核表达载体,并将其瞬时转染到HeLa细胞株中。方法：以HeLa细胞总RNA为模板,通过RT-PCR扩增cyclin D1和cyclin B1基因编码的cDNA,并将扩增的cDNA片段插入p3XFLAG-CMV~（TM）-14真核表达载体,分别构建p3XFLAG-cyclin D1和p3XFLAG-cyclin B1重组质粒,重组子经酶切分析和测序鉴定后,用脂质体介导的基因瞬时转染法,将重组正确的表达载体转染HeLa细胞,用Western-blot技术检测细胞中FLAG融合蛋白的表达。结果：经酶切鉴定和Western印迹分析证实人cyclin D1和cyclin B1的真核表达载体构建成功,并能在瞬时转染的HeLa细胞中表达分子量大小相符的重组蛋白。结论：成功构建了人cyclin D1和cyclin B1的真核表达载体,为两种细胞周期素及其相关蛋白的功能研究奠定了基础。