乙肝转阴冲剂抗乙肝病毒效应研究

将乙型肝炎转阴冲剂制成乙型肝炎转阴冲剂口服液，然后观察其对鸭乙肝病毒感染的动物模型的抗病毒效果，将２８只被乙肝病毒感染后的雏鸭分为４组，即乙型肝炎转阴冲剂Ⅰ组（５ｍｇ／ｋｇ），乙型肝炎转阴冲剂Ⅱ组（４ｍｇ／ｋｇ），乙型肝炎转阴冲剂Ⅲ组（２ｍｇ／ｋｇ）和生理盐水对照组，结果显示３组治疗组的血清和肝组织中的病毒ＤＮＡ均受到明显的抑制，说明乙型肝炎转阴冲剂有满意的抗病毒效果。     

肝舒Ⅰ号对鸭乙型肝炎病毒的作用

以鸭乙型肝炎病毒感染鸭为实验模型对肝舒Ⅰ号进行了抗病毒试验，肝舒Ⅰ号剂量为５ｇ／ｋｇ·ｄ时抗病毒效果与阳性对照药物无环鸟苷基本相当。将转阴鸭连续喂养３个月后，不出现＂反跳＂现象，优于无环鸟苷。     

肝舒Ⅰ号对鸭乙型肝炎病毒的作用

以鸭乙型肝炎病毒感染鸭为实验模型对肝舒Ⅰ号进行了抗病毒试验，肝舒Ⅰ号剂量为５ｇ／ｋｇ·ｄ时抗病毒效果与阳性对照药物无环鸟苷基本相当。将转阴鸭连续喂养３个月后，不出现＂反跳＂现象，优于无环鸟苷。     

无环鸟苷治疗慢性乙型肝炎的疗效随访

目的：观察无环鸟苷治疗慢性乙型肝炎的疗效。方法：无环鸟苷治疗２５例，用无环鸟苷１０ｍｇ／ｋｇ／ｄ，分两次静滴，３个月为一疗程；对照组２７例。ＨＢＶＭ检测用ＥＬＩＳＡ法，ＨＢＶ－ＤＮＡ采用生物素探针班点杂交法。结果：在治疗结束时、随访半年、１年、２年和３年，无环鸟苷治疗的总有效率（ＨＢｅＡｇ和／或ＨＢＶ－ＤＮＡ阴转）分别为３６．０％３２％、３２％、３０．４％和３３．３％，显著高于对照组（７．４％，Ｐ     

单磷酸阿糖腺苷3日疗法治疗水痘-带状疱疹病毒感染疗效观察

入院重症水痘－带状疱疹病毒感染患者随机分为两组。无环鸟苷组２３例;单磷酸阿糖腺苷组２５例。治疗方法：无环鸟苷组常规给予抗生素Ｃ、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ１２和解热止痛等对症支持治疗,口服无环鸟苷１５～２０ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）,分４次口服,疗程７天,继发细菌性感染...     

尼卡地平预防双腔支气管导管插管反应的观察

目的 观察应用尼卡地平预防双腔支气管导管插管心血管反应的效果。方法 肺、食道择期手术病人４０例，随枘发为２组，每组２０例。 唑安定０．０４ｍｇ／ｋｇ、异丙酚１．５ｍｇ／ｋｇ、芬太尼４μｇ／ｋｇ、维库溴铵０．１２ｍｇ／ｋｇ静脉诱导后，甲组给予尼卡地平４μｇ／ｋｇ，乙组给予生理盐水３ｍｌ作为对照，分别于诱导前、后、插管后即刻及１、３、５ｍｉｎ监测收缩压（ＳＢＰ）、舒张压（ＤＢＰ）、心率（ＨＲ），并计算心率收缩压乘积（ＲＰＰ）。结果 Ａ组插管后血压无明显升高，心率较诱导前无明显增快，Ｂ组插管后血压明显升高。结论 尼卡地平可抑制双腔支气管导管插管时的心血管副反应。     

异丙酚和苏芬太尼联合用药对插管应激反应的影响

探讨异丙酚和苏芬太尼联合应用对全麻诱导期插管应激反应的影响。２９名患者随机分为３组。第１组（９例）用异丙酚１．５ｍｇ／ｋｇ，第２组（１０例）用异丙酚２．０ｍｇ／ｋｇ；第３组（１０例）异丙酚１．５ｍｇ／ｋｇ加苏芬太尼０．８μｇ／ｋｇ。注入异丙酚后４ｍｉｎ行气管插管，连续监测插管前后心率（ＨＲ）、收缩压（ＳＢＰ）、舒张压（ＤＢＰ）、平均动脉压（ＭＡＰ）及氧饱和度（ＳｐＯ２）变化。结果显示，第１组患者插     

小剂量芬太尼与异丙酚联合用于人工流产的研究

目的 将异丙酚与小剂量阿片类药芬太尼联合应用于人工流产，从而减少其副作用。方法 ６２例孕妇随机分成两组：异丙酚组（Ｄ组），用３ｍｇ／ｋｇ作为诱导：芬在尼与异丙酚组（ＦＤ）先静脉注射０．１ｍｇ芬太尼，接着静脉注射异丙酚１．２６ｍｇ／ｋｇ，维持剂量两组相同均为异丙酚３０ｍｇ／次，静脉注射直至能耐受手术。结果 麻醉效果满意优等效果两组无差异（Ｐ〈０．０５）；异丙酚用药量Ｄ组高于ＦＤ组差异有非常显著性（Ｐ     

抗高血压药物对自发性高血压大鼠降压及逆转左室肥厚作用

目的使用４种抗高血压药物治疗自发发性高血压大鼠（ＳＨＲ）探讨血压和左室肥厚之间的关系。方法ＳＨＲ４２只雌性，周龄１６周，随机分为６组，（１）高血压基础对照组，在１６周时处死观察有关指标，（２）高血压对照组，（３）卡托普利组（１００ｍｇ／ｋｇ．ｄ＾－１）（４）培哚普利组（５ｍｇ／ｋｇ．ｄ＾－１）（５）双氢克尿塞组（１００ｍｇ／ｋｇ．ｄ＾－１）（６）普萘洛尔组（４０ｍｇ／ｋｇ．ｄ＾－１）给药１６周，观     

氧氟沙星阴道泡腾片抗菌活性实验动物的研究

采用氧氟沙星（ＯＦＬＸ）阴道泡腾片和诺氟沙星（ＮＦＬＸ）阴道栓对临床常见的细菌性阴道炎进行了动物体内外抗菌活性测定。结果显示：体外测定组：ＯＦＬＸ对致病菌的ＭＩＣ在０１～３１２μｇ／ｍｌ而ＮＦＬＸＭＩＣ与其相近。体内测定组：ＯＦＬＸ的治愈率２ｍｇ／ｋｇ组为５０％，４ｍｇ／ｋｇ和８ｍｇ／ｋｇ组为１００％。而ＮＦＬＸ栓２ｍｇ／ｋｇ组为４０％，４ｍｇ／ｋｇ组为８０％，８ｍｇ／ｋｇ组为１００％，空白组治愈率为０。说明ＯＦＬＸ阴道泡腾片对此类阴道炎具良好的疗效，低、中剂量组略优于ＮＦＬＸ栓。但两药无统计学差异     

"911"抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究

目的：评价药物“911”在鸭实验动物模型中抗鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的效果。方法：北京鸭足静脉注射DHBV，第1次试验随机分为空白，Ara-AMP对照和20，40，80mg/kg3个治疗组，于感染后第7d,给药后第5，10d和停药后第5d采血，第2次试验设空白对照和40．80mg/kg2个治疗组，用药后第5，10d及停药后第5d各组分别处死3只鸭取肝脏检测肝HDBV DNA，采用DOT EIA法检测血清DHBsAg，斑点分子杂交法检测DHBV DNA，Southern转膜杂交检测鸭肝DHBV DNA。结果：第1次试验结果表明，血清DHBsAg及DHBV DNA在20mg/kg组基本无变化，在40mg/kg组治疗后明显下降，但效果无80mg/kg组明显；80mg/kg组DHBsAg 及DHBV DNA水平治疗效果最明显，与用药前及空白对照比较均有统计学意义。第2次试验与第1次试验的结果基本吻合，鸭肝脏DHBV DNA检测表明，80mg/kg治疗组对鸭肝DHBV DNA复制有明显抑制作用。可减少鸭肝DHBV DNA含量。结论：“911”有较好的抗DHBV感染效果，具有明显的剂量反应关系和可重复性。     

不同种雏鸭建立鸭乙肝病毒感染模型及抗病毒效果的实验研究

目的：探讨不同种雏鸭建立鸭乙肝病毒感染模型的影响因素,观察应用该模型抗病毒的效果。方法：采集鸭血清,应用PCR方法定性检测鸭血清中病毒DNA;定量PCR方法检测鸭血清中病毒DNA载量变化;用抗病毒药物处理,观察其在鸭DHBV感染模型中的抗病毒效果。结果：不同种鸭DHBV自然感染率不同,樱桃谷鸭为8.75%,湖北麻鸭两个批次分别为17.80%和10.68%;静脉注射和腹腔注射两途径均能致雏鸭感染DHBV,静脉注射感染率80%,腹腔注射感染率65%;鸭感染DHBV后,体内病毒载量维持在106~108拷贝/mL,可持续20天以上;抗病毒药物处理后,在不同DHBV模型中其抗病毒效果变化趋势一致。结论：鸭的种类和人工感染途径可影响DHBV感染率;雏鸭感染DHBV后其体内有持续性的病毒血症;DHBV感染模型是药物抗病毒研究较好模型。     

清肝排毒饮抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的观察清肝排毒饮抗鸭乙型肝炎（DHBV）作用。方法用Dot—BLOT法筛选出DHBsAg强阳性1d龄华南麻鸭。随机分为5组，分别为模型组、拉米夫定（ACV）组和清肝排毒饮大、中、小剂量组。除模型组外，其他各组均灌胃口服治疗10d，于用药前（T0）、用药第5d（T5）、第10d（T10）厦停药后第3d（P3）分别采血，采用斑点杂交方法检测用药前后鸭血清乙肝病毒脱氧核糖核酸（DHBV DNA）的动态变化。结果清肝排毒饮中剂量治疗组第5、10d鸭血清DHBV DNA OD值明显低于培药前，差异有显著性（P〈0．05），但与拉米夫定组比较，差异无显著性意义（P〉0．05）。停药3d后无反跳。结论清肝排毒饮有一定的抑制DHBV DNA复制作用。     

The Effect of Gankang Suppository on Duck Hepatitis B Virus, Serum Biochemistry and Liver Histology in Ducklings

To examine the effect of Gankang Suppository on duck hepatitis B virus （DHBV）, the serum biochemistry and hepatic histology in an animal model of DHBV infection, a model of DHBV infection was established by infecting 1-day-old Yingtaogu ducklings with DHBV-positive serum. The successful model was confirmed by PCR assay and 48 ducklings infected with DHBV were randomly divided into 3 groups： a Gankang Suppository treatment group, an acyclovir （ACV） group and a DHBV model group （control）, with each group having 16 animals. All the animals were given the medicines for 4 weeks in a row. The serum of the animals was taken 14 and 28 days after the medica- tion and 7 days after drug discontinuation. Real-time PCR was performed to detect the copy numbers of DHBV DNA in the serum. ALT and AST were dynamically monitored. The ducklings were sacrificed on the 7th day after the discontinuation of the treatment and livers were harvested and examined for inflammation and degeneration of liver cells by using HE staining. The results showed that on day 14, 28 after the treatment and day 7 after the withdrawal, the logarithmic values （log） of DHBV DNA copy numbers in ducklings of Gankang Suppository treatment group were significantly lower than that before the treatment （P=0.0092, P=0.0070, P=0.0080, respectively）. Compared with DHBV model control group, the ALT level was significantly decreased （P=0.0020, P=0.0019, respectively） on day 28 after the treatment and on day 7 after the withdrawal. The AST level was also reduced on day 14 after the treatment （P=0.0298）. Compared with the ACV control group, the level of ALT was lower on day 7 after the withdrawal （P=0.0016）. Histologically, the hepatocyte swelling, vacuolous degeneration and acidophilic degeneration in Gankang Suppository treatment group were alleviated 7 days after the withdrawal as compared with model control group （P=0.0282, P=0.0084, P=0.0195, respectively）. It is concluded that Gankang Suppository can effectively suppress DHBV     

鸭肝损伤模型血清中鸭乙肝病毒cccDNA的动态检测

目的 探讨在不同程度肝损伤的DHBV感染麻鸭外周血中能否检测出DHBVcccDNA.方法 选择持续感染DHBV的2月龄上海麻鸭24只随机分均分为4组,分别以(1)A组:D-氨基半乳糖(D-GalN)2.2 g/kg+脂多糖(LPS)100 μg/kg;(2)B组:D-GalN+LPS+10 ml/kg的CCl4灌胃2次;(3)C组:D-GalN+LPS+15 ml/kg的CCl4灌胃2次;(4)NC组:生理盐水处理作为正常对照组(NC组).在处理后0、24、36和48 h进行血清ALT、DHBV载量和DHBV cccDNA检测,最后处死动物取肝组织评价肝损伤程度,并检测肝组织中的总DHBV DNA和DHBV cccDNA.结果 NC组鸭肝脏无明显病理改变,A组、B组和C组鸭则分别出现点状坏死至大片肝坏死的肝损伤,3组之间的肝损伤程度分级差异有统计学意义(P＜0.01).B组和C组在处理后48 h分别有1只和4只鸭死亡.NC组和A组各检测时点血清中均未检测到DHBV cccDNA;B组和C组在处理后36 h分别有2只和3只鸭血清中检测到DHBV cccDNA,含量在(0.32～1.72)×104拷贝/ml之间,在处理后48 h两组各有1只鸭血清中仍可以检测出DHBV cccDNA.Logistic逐步回归分析显示血清中DHBVcccDNA的检出率与肝损伤程度评分有关(P=0.0029),而与血清DHBV载量、ALT水平以及肝组织中的总HBV DNA和DHBV cccDNA 含量无关.结论 在肝组织发生严重损伤时,血清中可以出现DHBV cccDNA,血清中DHBV cccDNA的检出与肝组织损伤程度显著相关.     

乙型肝炎病毒在宿主内不受核苷类药物影响的机理探讨

目的 探讨乙型肝炎病毒在宿主中不受药物影响而得以长期与宿主共存的机理。方法 以核苷类药物拉米夫定（3TC）和无环鸟苷（ACV）对鸭乙肝病毒（DHBV）感染一日龄广州麻鸭模型进行治疗，以斑点杂交法检测治疗前后和停药后鸭血清中鸭乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（DHBV－DNA）的变化，并取提鸭的肝，肾，脾，肺，心组织中的DNA，用聚合酶链反应（PCR）方法检测DHBV－DNA在各脏器组织中存在的情况。结果 以斑点杂交法检测鸭血清DHBV－DNA，3TC和ACV两个治疗组在治疗后5－10d内血清DHBV－DNA含量持续下降（与模型组比较均P＜0．05），但停药后有回升倾向；用PCR方法检测各组的肝，肾，脾，肺，心组织，显示治疗后DHBV－DNA在各脏器组织中存在的情况与模型组比无显著性差异（P＞0．05）。进一步比较了斑点杂交法和PCR法检测的结果，显示斑点杂交法检测组织中病毒远不如PCR法敏感，并提示可能组织中病毒复制量很低，以致用斑点杂交法检测出现很多假阴性。结论 乙型肝炎病毒感染宿主后，药物治疗只对宿主血清DHBV－DNA含量有影响，但未发现对肝和肝外脏器组织中DHBV－DNA有影响，乙肝病毒不受药物影响而长期在宿主中存在并低水平持续复制，可导致宿主机体对其无法识别和清除而形成慢性感染。建议使用较敏感的PCR法监控组织中DHBV－DNA含量，作为评价药物长期疗效的指标之一。     

结合肽抑制鸭乙型肝炎病毒复制作用的研究

目的:探讨与鸭乙型肝炎病毒多聚酶(DHBVP)特异结合的结合肽,对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染的原代鸭肝细胞中DHBV复制的抑制作用.方法:应用噬菌体表面展示技术(PDT)筛选出与DHBVP特异结合的结合肽,经测序得知其核苷酸序列,推论出其氨基酸序列,据此合成结合肽,将其作用于体外感染DHBV的鸭肝原代培养细胞,分时段检测细胞核、细胞浆及培养上清中的DHBV-DNA.结果:应用噬菌体展示技术筛选3轮后共筛到7条结合肽,根据推论出的氨基酸序列合成结合肽,作用于体外感染DHBV的鸭肝原代培养细胞,其中3号肽、6号肽的培养上清及胞浆中的DHBV-DNA含量低于对照组(P<0.05).结论:与DHBVP特异结合的结合肽对DHBV的复制有抑制作用.     

知母宁抗乙肝病毒作用的体内外实验研究

目的:观察知母宁的抗乙肝病毒作用。方法:观察不同浓度知母宁对体外培养的2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用及对乙肝模型鸭DHBV-DNA的影响。结果:知母宁浓度为4mg/mL时对2.2.15细胞分泌HBeAg有明显的抑制作用;以200mg/kg治疗乙肝模型鸭10d后DHBV-DNA水平明显降低。结论:知母宁有抗乙肝病毒的作用,其机制可能与抑制HBV-DNA的复制有关。     

3种新型核苷类似物抗鸭乙型肝炎病毒活性及其对肝脏组织形态学的影响

目的:研究3种具有新型结构的核苷类似物在体内的抗鸭乙型肝炎病毒的活性及其对鸭肝脏组织形态学的影响,探寻新型高效核苷类抗乙型肝炎病毒药物.方法:实验组鸭分为2、10和50 mg·kg-1 3个剂量组,分别给予核苷类似物030703、030605和030705,对照组鸭给予阿德福韦10 mg·kg-1,每日1次,经口服连续...     

Experimental study on pathogenicity of precore mutants in Hepadnaviridae

OBJECTIVE: To study the replicative competency and pathogenicity of precore gene mutants of duck hepatitis B virus (DHBV) in the duck model. METHODS: Three site-directed point mutations in the precore region of cloned DHBV were constructed. Head-to-tail dimers were formed. The three plasmids were named: pEDM1-2 (initiation codon ATG mutated to TTG), pEDM2-2 (an "A" was inserted down stream of codon 12, leading to frame shift in the distal end of precore region), pEDM3-2 (codon 38 was changed from TAT to TAA, leading to a stop codon at the 3'-end). Mutants and wild-type cloned DNA dimers were first separately used to transfect LMH cells (a chicken hepatoma cell line) and viruses were collected from supernatant and used to infect 6 one-day-old ducklings per group. Serum duck hepatitis B surface antigen (DHBsAg) and DHBV DNA were assayed. Six weeks after infection, ducks were killed and liver tissues were studied for histopathological changes. RESULTS: After transfection, pEDM1-2, pEDM2-2 and pEDM3-2 expressed similar level of DHBsAg. Replication of pEDM1-2 and pEDM3-2 was similar to that of the wild type clone, while pEDM2-2 replicated at a significantly decreased level. Infection study employing the supernatant of transfected cells was as follows: pEDM1-2 infected 5/6 ducklings, pEDM2-2 non infected, pEDM3-2 infected 2/6 ducklings, wild type virus infected 6/6 ducklings. Positive serum samples from both pEDM1-2 and pEDM3-2 were at a lower serum DHBV level compared to that of the wild type virus. Pathological changes were more significant in pEDM3-2 infected duck livers, with numerous inflammatory cells in portal tract and infiltration into parenchyma. CONCLUSIONS: Mutations in the initiating codon or generation of a stop codon at the 3'-end of the precore region resulted in decreased replication competency of DHBV, while frame-shift mutation of the precore region, covering the epsilon encapsidation signal abolished the replication of DHBV. When the mutants replicated in hosts, more severe pathological changes were observed in ducks infected with mutant harboring a stop codon at the 3'-end. Data suggest that replicative-competent DHBV precore mutant can be more pathogenic than wild-type DHBV.