依达拉奉对大鼠心肌再灌注抗凋亡作用的机制

目的：观察大鼠心肌缺血再灌注时依达拉奉抗凋亡作用的机制。方法：采用体外结扎大鼠左前降支制备大鼠心肌缺血再灌注模型。将Wistar大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组、依达拉奉组（再灌注即刻经尾静脉注射依达拉奉3mg／kg）。分别用TUNEL染色法及免疫组化法检测心肌细胞凋亡、心肌凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果：（1）凋亡检测结果示,对照组无细胞凋亡,依达拉奉组较缺血再灌注组凋亡细胞数明品减少[（13．11±1．58）比（24．33±1．38）,P〈0．01];（2）免疫组化结果示,依达拉奉组与缺血再灌注组Bcl-2、Bax蛋白表达均明显高于对照组（P〈0．01）;依达拉奉组较缺血再灌注组Bcl-2蛋白表达明显升高[（0．2300±0．0218）比（0．0924±0．0152）],而Bax蛋白表达明显降低[（0．0249±0．0042）比（O．1312±0．0173）],P均〈0．01;缺血再灌注组Bcl-2／Bax比值较对照组明显降低[（0．6906±0．0035）比（1．1632±0．0212）],依达拉奉组Bcl-2／Bax比值（7．4752±0．5573）较缺血再灌注组和对照组明显升高（P〈0．01）。结论：依达拉奉能够减少心肌细胞凋亡,心肌细胞凋亡的减轻与下调Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达以及Bcl-2／Bax比值有关。     

依达拉奉对大鼠急性坏死性胰腺炎的保护作用

目的:探讨自由基清除剂依达拉奉对大鼠急性坏死性胰腺炎的保护作用及其机制.方法:90只♂SD大鼠随机分为假手术组(SHAM组)、坏死性胰腺炎组(ANP组)、依达拉奉治疗组(EDA组),每组30只.SHAM组为开腹后只翻动十二指肠及胰腺后关腹;ANP组胰胆管内逆行输注1.5%脱氧胆酸钠制备急性坏死性胰腺炎模型;EDA组为ANP造模后立即尾静脉注射依达拉奉(6mg/kg).分别于术后6、12、24h处死大鼠(每个时点10只),观察胰腺病理形态改变并评分;检测血清淀粉酶、TNF-α、ET-1、sICAM-1含量;检测胰腺组织中丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力.结果:与ANP组比较,EDA治疗组在胰腺病理改变、血清TNF-α水平(6h:109.6ng/L±49.0ng/Lvs190.2ng/L±46.6ng/L,12h:405.4ng/L±116.3ng/Lvs559.7ng/L±203.9ng/L,24h:415.4ng/L±164.6ng/Lvs648.7ng/L±222.1ng/L,均P<0.05)、血清ET-1水平(6h:45.6ng/L±13.5ng/Lvs66.0ng/L±16.0ng/L,12h:83.5ng/L±15.4ng/Lvs96.8ng/L±23.0ng/L,24h:85.1ng/L±25.8ng/Lvs103.9ng/L±28.9ng/L),血清sICAM-1水平(6h:0.58ng/L±0.13ng/Lvs0.78ng/L±0.14ng/L,12h:0.78ng/L±0.10ng/Lvs0.94ng/L±0.12ng/L,24h:0.96ng/L±0.16ng/Lvs1.24ng/L±0.30ng/L,均P<0.05)、胰腺组织MDA含量(6h:4.22nmol/mgprot±0.40nmol/mgprotvs8.79nmol/mgprot±0.80nmol/mgprot,12h:5.90nmol/mgprot±0.51nmol/mgprotvs12.30nmol/mgprot±1.02nmol/mgprot,24h:9.10nmol/mgprot±0.84nmol/mgprotvs17.88nmol/mgprot±1.43nmol/mgprot)均有不同程度减轻(均P<0.05),T-SOD活力增强(6h:88.6U/mgprot±7.1U/mgprotvs68.8U/mgprot±10.5U/mgprot,12h:77.6U/mgprot±6.8U/mgprotvs46.0U/mgprot±8.9U/mgprot,24h:45.5U/mgprot±5.3U/mgprotvs27.8U/mgprot±4.3U/mgprot,均P<0.05);血清淀粉酶变化无显著差异.与SHAM组比较,ANP组胰腺组织病理评分、血清淀粉酶、TNF-α、ET-1、sICAM-1明显升高,胰腺组织MDA含量升高,T-SOD活力下降,差异均有统计学意义.结论:依达拉奉可以清除坏死性胰腺炎体内过量生成的氧自由基并减少炎性因子的表达,减轻胰腺组织损伤.     

依达拉奉对阿霉素诱导的心肌细胞毒性的影响及其机制

目的 观察依达拉奉对蒽环类抗癌药阿霉素诱导的乳鼠心肌细胞毒性的影响及其机制.方法 用不同浓度的阿霉素处理乳鼠心肌细胞,建立蒽环类抗癌药心脏毒性的体外模型.依达拉奉在阿霉素处理心肌细胞前1 h加入培养液中作为预处理.应用CCK-8比色法检测细胞存活率;谷胱甘肽试剂盒检测细胞内还原型谷胱甘肽的水平;双氯荧光素染色/荧光显微镜照相检测细胞内活性氧的含量;Western blot法检测胞浆中细胞色素C和Cleaved Caspase-3的表达.结果 阿霉素在1~8 mg/L浓度范围内处理乳鼠心肌细胞24 h,可剂量依赖性地降低细胞存活率.在2 mg/L 阿霉素处理心肌细胞前1 h,应用不同浓度的依达拉奉预处理可明显地抑制阿霉素诱导的心肌细胞毒性损伤,使细胞存活率显著升高.20 μmol/L依达拉奉预处理1 h可抑制2 mg/L 阿霉素引起的氧化应激反应,使胞内还原型谷胱甘肽水平升高,活性氧含量降低.在阿霉素损伤心肌细胞前,给予依达拉奉预处理也可降低胞浆中Cytochrome C含量及Cleaved Caspase-3表达.结论 依达拉奉可显著减弱阿霉素诱导的心肌细胞毒性,此保护作用可能与抗氧化及抑制凋亡相关蛋白的表达有关.     

依达拉奉对一氧化碳中毒后心肌损害的保护作用

目的评价依达拉奉对一氧化碳(CO)中毒后心肌损害患者的保护作用。方法选择于2008年1月至2013年12月在该院接受治疗的CO中毒合并心肌损害的患者150例,随机分为两组各75例。对照组通过常规对症治疗,观察组在上述治疗的基础上联合依达拉奉注射液静脉滴注治疗。结果治疗前,两组CO中毒合并心肌损害患者肌酸磷酸激酶(CK)、肌钙蛋白(cTnI)、乳酸脱氢酶(LDH)以及超敏C反应蛋白(hs-CRP)等相关指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者的上述指标均呈现一定幅度的下降,但是观察组的下降幅度更大,两组比较具有统计学意义(P<0.01)。治疗前,两组CO中毒合并心肌损害患者的异常心电图发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,观察组异常心电图发生率中ST-T改变与心率异常少于对照组(P<0.05)。结论依达拉奉对CO中毒后并发的心肌损害具有较好的保护作用,对于抑制心肌细胞的凋亡、恢复心功能具有十分显著的效果,具有较高的临床应用价值。     

依达拉奉对缺血再灌注损伤后大鼠脑caspase-3表达的影响

目的 观察脑神经保护剂依达拉奉对创伤性脑缺血再灌注大鼠脑组织的保护作用,并探讨其作用机制.方法 采用大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,通过凋亡原位TUNEL检测评价神经细胞凋亡情况,并采用免疫组化的方法检测各组不同时段大鼠脑组织caspase-3的表达.结果 脑缺血再灌注后凋亡细胞在48 h达到高峰,治疗组和模型组比较在48、72 h差异有统计学意义(P＜0.05).caspase-3在缺血再灌注12 h起显著增加,48 h达高峰期.治疗组与模型组比较,再灌注后48、72 h可明显降低 caspase-3表达(P＜0.05).结论 脑缺血后 caspase-3表达增高,自由基清除剂依达拉奉可以保护脑组织,其作用可能与抑制caspase-3在损伤脑组织中的表达有关.     

依达拉奉对急性脊髓损伤后大鼠神经细胞的保护机制

目的 观察依达拉奉对大鼠急性脊髓损伤后caspase-3、Bcl-x1表达的影响,探讨其对脊髓损伤后神经细胞的保护作用。方法将80只SD大鼠随机分为假手术组（A组,16只）,手术对照组（B组,32只）和依达拉奉治疗组（C组,32只）。采用改良Alien法,建立脊髓损伤大鼠模型。B、C组分别在建立模型后静滴Ns和依达拉奉。采用硫代巴比妥酸法和免疫组化sP法分别检测脊髓损伤后3、6、24、48h脊髓组织中丙二醛（MDA）水平和caspase·3、Bcl-x1的表达水平。结果B组MDA水平、caspase-3和Bd-x1阳性表达水平均明显高于A组（P〈0．05和P〈0．01）;C组MDA水平和caspase_3阳性表达水平均低于B组（P均〈0．05）,Bcl-x1表达水平高于B组（P〈0．05）。结论依达拉奉可抑制脊髓损伤后神经细胞凋亡,此作用可能与其减轻氧化激化、减弱caspase-3表达和增强Bel-x1表达水平有关。     

依达拉奉对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的干预作用

目的探讨依达拉奉在慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)的干预作用。方法取72只健康SD大鼠随机分为空白组、慢阻肺模型组、低剂量依达拉奉组和高剂量依达拉奉组,每组各18只,四组大鼠于造模4周后对肺功能、血清抗氧化因子、支气管肺泡灌洗液中炎性因子以及肺组织中金属蛋白酶水平进行检测和比较分析。结果肺功能检测结果显示,慢阻肺模型组与空白组相比,f、RI明显增高,Cdyn以及PIF水平均明显降低(P0.05)。与慢阻肺模型组相比,低剂量依达拉奉组RI明显降低,Cdyn、PIF水平明显升高,高剂量依达拉奉组f、RI均明显降低,Cdyn及PIF明显升高。与低剂量依达拉奉组相比,高剂量依达拉奉组Cdyn明显升高(P0.05)。血浆抗氧化物检测结果显示,与空白组相比,慢阻肺模型组MDA、SOD水平明显升高(P0.05);与慢阻肺模型组相比,低剂量依达拉奉组和高剂量依达拉奉组MDA明显降低(P0.05)。支气管肺泡灌洗液检测及结果显示,与空白组相比,慢阻肺模型组WBC、TNF-α水平明显升高(P0.05);与慢阻肺模型组相比,低剂量依达拉奉组和高剂量依达拉奉组WBC、TNF-α水平均明显降低(P0.05);与低剂量依达拉奉组相比,高剂量依达拉奉组WBC、TNF-α水平明显降低(P0.05)。肺组织检测结果显示,与空白组相比,慢阻肺模型组MMP-9、MMP-12、Caspase-12、CHOP表达明显增强(P0.05);与慢阻肺模型组相比,低剂量依达拉奉组和高剂量依达拉奉组MMP-9、MMP-12、Caspase-12、CHOP表达均明显减弱(P0.05);与低剂量依达拉奉组相比,高剂量依达拉奉组MMP-9、MMP-12、Caspase-12、CHOP表达明显减弱(P0.05)。结论依达拉奉可提高抗氧化能力、减少炎症因子的释放和聚集以及改善蛋白酶调节,对延缓慢阻肺临床病理进展有一定的作用。     

依达拉奉治疗重型颅脑损伤患者的临床研究

目的通过观察单光子发射计算体层摄影术(SPECT)的变化,评价依达拉奉治疗重型颅脑损伤患者的临床效果。方法 60例重型颅脑损伤患者被随机分为治疗组及对照组,每组30例。对照组给予常规治疗。治疗组在对照组治疗的基础上,给予依达拉奉30mg加入0.9%氯化钠溶液100ml,静脉滴注,2次/d,连续14d。所有患者在治疗前(T0)、治疗后第7天(T1)及治疗后第14天(T2)各做1次SPECT脑血流断层显像。结果两组治疗T1、T2后,缺血灶数量及缺血灶平均直径均与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.01);治疗组在治疗T1、T2后,缺血灶数量及缺血灶平均直径与对照组比较,,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论依达拉奉可以显著减少颅脑损伤患者缺血灶数量及缺血灶平均直径,具有显著的脑保护作用。     

依达拉奉对脑出血血肿周围水肿的影响

目的探讨依达拉奉治疗对高血压性脑出血血肿周围水肿的影响。方法选择2014年1月至2017年1月收入淮安市第一人民医院神经内科急性高血压性脑出血患者105例,所有患者按照随机分组分为依达拉奉治疗组52例和常规治疗组53例。两组均给予常规脱水降颅压,脑保护,调控血压等治疗,依达拉奉治疗组在常规治疗的基础上加用依达拉奉治疗,14 d为一个疗程。两组患者均于治疗前,治疗后1 d、3 d、7 d、14 d分别进行头颅CT检查测量脑血肿体积及血肿周围水肿体积,计算相对水肿体积指数(REI)、水肿变化指数(AEI),检测神经功能缺损评分,抽取静脉血检测血中丙二醛(MDA)的水平及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果依达拉奉组与常规治疗组入院时REI和入院后1 d REI、AEI差异无统计学意义,依达拉奉治疗组REI指数3 d、7 d、14 d,均低于常规治疗组同周期(t=2.841、3.215、3.587,P <0.05);依达拉奉治疗组AEI指数3 d、7 d、14 d,均高于常规治疗组同周期(t=4.324、4.163、4.561,P <0.05),神经功能缺损评分明显改善(t=2.212、2.258、2.851、3.573,P <0.05);与常规治疗组比较,依达拉奉治疗组血SOD活性升高和MDA水平降低(t=3.563、4.129、4.254、2.240、2.871、4.212,P <0.05)。结论依达拉奉治疗可减轻高血压性脑出血血肿周围水肿,能促进血肿吸收、减轻血肿周围损伤、改善神经功能,可能是通过清除体内自由基,抑制氧化应激反应来实现的。     

依达拉奉对心肌缺血-再灌注损伤作用的研究进展

依达拉奉作为一种新型自由基清除剂已广泛应用于临床治疗急性脑梗死。心肌缺血-再灌注损伤的中心环节之一是自由基对内皮细胞的损伤。既往的动物实验表明,依达拉奉通过其强大的抗氧化作用清除自由基,调节炎症过程,保护血管内皮细胞等机制发挥作用。在冠心病患者再灌注治疗之前应用依达拉奉可以降低再灌注损伤和保护心肌细胞,进而减少恶性心律失常的发生,改善心功能和预后。     

不同频率间歇低氧下大鼠肝脏氧化应激损伤及Tempol的干预作用

目的 探讨不同频率间歇低氧(IH)对大鼠肝脏氧化应激损伤差异和Tempol的干预作用及可能机制.方法 应用慢性间歇低氧(CIH)大鼠模型,模拟OSAS周期性间歇低氧/再氧和病理生理过程.56只雄性Wistar大鼠随机分为不同频率IH组(IH1,IH2,IH3,IH4,频率依次为10、20、30、40次/h),30T组(...     

氧化应激与心肌细胞缺血再灌注损伤

冠状动脉粥样硬化性心脏病血运重建治疗是挽救缺血心肌的重要治疗方式。但血流恢复本身会引起缺血再灌注损伤,氧化还原失衡是缺血再灌注损伤发生的重要起始因素。心肌细胞各结构参与氧化应激反应的发生。细胞膜结构中富集Caveolin-1的质膜微囊影响NADPH氧化酶的组装、移位和ROS介导的信号转导参与缺血再灌注中氧化还原反应的发生。由复合物I、II、III、IV及电子载体组成的线粒体电子传递链在缺氧-复氧过程中遭到破坏导致电子传递受阻,线粒体膜通透性转换孔持续开放,是细胞中氧自由基过量产生的重要来源。细胞核及线粒体中核酸分子损伤影响结构蛋白正常合成,细胞氧化还原平衡代谢受损,此外位于细胞核中的肌球蛋白还可以作为一种核转录因子调控NOX2的表达,增加氧自由基的合成。JNK、p38MAPK、Egr-1、NF-κB作为氧化应激导致心肌缺血再灌注损伤的通路蛋白参与其中。     

依达拉奉治疗急性心肌梗塞的疗效观察

目的：观察依达拉奉治疗急性心肌梗塞（AMI）的疗效。方法：60例发病48h内行溶栓或经皮冠状动脉介入治疗（PCI）后的心肌梗塞患者被随机分为对照组（32例）、依达拉奉组（28例）,治疗2～3周后比较疗效。结果：与对照组相比,依达拉奉组患者左室射血分数（LVEF）明显升高[51．9±4．99）％：（55．31±5．36）％,P〈0．05],住院期间恶性心律失常发生率明显降低（25．9％：13．3％,P〈0．05）,但两组患者住院期间总体病死率无明显差异（P〉0．05）。结论：依达拉奉作为一种新型氧自由基清除剂,治疗急性心肌梗塞有明显的疗效。     

重度间歇低氧大鼠学习记忆功能与氧化应激的关系

目的 通过建立重度间歇低氧动物模型,探讨OSAHS大鼠学习记忆功能与氧化应激的关系.方法 成年雄性Wistar大鼠48只,体重(170±10)g,采用随机数字法分为5％间歇性低氧组和对照组,每组又分为2、4、6和8周时间组,每组6只,其中实验组给予5％间歇低氧,并分别在2、4、6、8周进行Morris水迷宫检测学习记忆功能,随后处死大鼠,取脑组织于透射电子显微镜下观察海马区超微结构的变化,通过化学比色法测定海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛水平.结果 与对照组比较,实验组大鼠水迷宫测试大鼠逃避潜伏期时间延长、跨越目标象限时间缩短、穿台次数减少,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05);随着间歇低氧持续时间延长,实验组各时间点学习功能的改变差异组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).对照组大鼠海马组织于电子显微镜下神经元结构完整,细胞器丰富,而实验组大鼠海马组织的神经元和突触数量明显减少,细胞核皱缩,突触结构模糊,突触间隙增宽,且随着暴露时间的延长,细胞损伤改变愈加明显.与对照组比较,实验组海马组织丙二醛含量明显增高,而SOD活性降低,且随间歇低氧时间延长其变化更为明显,差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 间歇重度低氧大鼠海马组织存在氧化应激损伤,可能通过引起神经元及突触数量与结构的改变,从而导致学习记忆功能障碍,且随着缺氧时间的延长逐渐加重.     

丹参注射液降低血管内皮细胞氧化应激损伤，对心肌梗死患者心肌功能的保护效果

目的:探讨丹参注射液降低血管内皮细胞氧化应激损伤,对急性心肌梗死(AMI)患者心肌功能的保护效果。方法:120例行经皮冠脉介入治疗(PCI)的AMI患者被随机均分为常规治疗组和丹参组(在常规治疗组基础上加用丹参注射液),两组均治疗14d。治疗前后检测比较两组外周血超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、高敏心肌肌钙蛋白T (hscTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及LVEF、心肌梗死面积,并随访观察两组术后3个月内主要不良心血管事件(MACE)和用药不良反应发生情况。结果:与常规治疗组治疗后比较,丹参组外周血SOD水平[(20.76±1.58)U/ml比(25.81±1.45)U/ml]、LVEF [(52.44±6.74)%比(57.57±4.39)%]显著升高,外周血MDA [(8.84±0.47)pg/ml比(6.74±0.56)pg/ml]、NO [(19.11±1.58)μmol/L比(15.34±1.74)μmol/L]、iNOS [(80.37±1.65)U/ml比(73.28±2.76)U/ml]、hscTnT [(38.25±4.24)ng/ml比(26.85±3.23)ng/ml]、CK-MB [(63.26±5.64)U/L比(32.68±4.49)U/L]水平以及心肌梗死面积[(19.42±4.33)mm2比(13.58±3.25)mm2]均显著降低,P均=0.001。术后随访3个月,丹参组MACE发生率显著低于常规治疗组(20.00%比41.67%),P=0.010。两组治疗过程中,均无严重药物不良反应发生。结论:丹参注射液能够显著减轻AMI患者PCI术后血管内皮细胞氧化应激损伤,保护缺血再灌注心肌功能,改善预后,值得推广。     

芥子气肺损伤细胞凋亡与氧化应激的实验研究

目的建立大鼠芥子气（sulfur mustard,SM）肺损伤的动物模型,探讨SM致大鼠ALI的细胞凋亡和氧化应激情况。方法选取雄性大鼠72只,随机分为SM组（32只）、丙二醇对照组（32只）和正常对照组（8只）。SM组气管内注入稀释的SM（2mg／kg,0．1ml）,丙二醇对照组气管内注人丙二醇0．1ml,正常对照组不做任何处理。通过电镜、免疫组化、BALF观察SM诱导细胞凋亡和氧化应激。结果SM组：①BALF中乳酸脱氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平6h达高峰;②Ⅰ型肺泡细胞膜局部缺失,Ⅱ型肺泡细胞表面微绒毛断裂缺失,两者均有线粒体嵴模糊,粗面内质网表面附着的核糖体脱离;③肺泡间隔细胞凋亡明显增多。丙二醇对照组与正常对照组相同。结论细胞凋亡和氧化应激是SM（2mg／kg）诱导大鼠ALI机制的两大特征。     

波动性及恒定性高糖对牛视网膜毛细血管周细胞氧化应激的影响

目的 对比研究波动性与恒定性高糖对牛视网膜毛细血管周细胞氧化应激的影响.方法 体外培养3代融合的牛视网膜血管周细胞,分别在对照组(5.5 mmol/L)、不同浓度高糖(15 mmol/L、25 mmol/L)、不同幅度的高糖波动(5.5～15 mmol/L、5.5～25 mmol/L)下孵育6 d.硫代巴比妥酸检测培养液丙二醛(MDA)水平;黄嘌呤氧化酶法检测培养液超氧化物歧化酶(SOD)水平.结果 与对照组相比,波动性高糖组与恒定性高糖组MDA含量/SOD活力比值增加(P＜0.05),且与葡萄糖浓度及高糖波动幅度呈正相关(P＜0.01),波动性高糖1组(5.5～15 mmol/L)较恒定性高糖1组(15 mmol/L)MDA含量/SOD活性比值增加(P＜0.05),恒定性高糖2组(25 mmol/L)较波动性高糖2组(5.5～25 mmol/L)MDA含量/SOD活性比值增加(P＜0.05).结论 在一定葡萄糖浓度范围内,波动性高糖较恒定性高糖对细胞的氧化损伤加重,而超过一定葡萄糖浓度,恒定性高糖使氧化损伤更为显著.     

间歇低氧对大鼠血管内皮硫氧还蛋白的影响

目的 通过测定睡眠呼吸暂停模式间歇低氧大鼠血管内皮硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)mRNA的表达水平,进一步探讨氧化应激在阻塞性睡眠呼吸暂停综合征导致高血压发生机制中的具体作用.方法 160只成年雄性Wistar大鼠随机分为5组:5%间歇低氧组,7.5%间歇低氧组,10%间歇低氧组,10%持续低氧对照组和常...     

Mechanisms of oxidative stress and myocardial protection during open-heart surgery

Cold heart protection via cardioplegia administration, limits the amount of oxygen demand. Systemic normothermia with warm cardioplegia was introduced due to the abundance of detrimental effects of hypothermia. A temperature of 32–33°C in combination with tepid blood cardioplegia of the same temperature appears to be protective enough for both; heart and brain. Reduction of nitric oxide (NO) concentration is in part responsible for myocardial injury after the cardioplegic cardiac arrest. Restoration of NO balance with exogenous NO supplementation has been shown useful to prevent inflammation and apoptosis. In this article, we discuss the “deleterious” effects of the oxidative stress of the extracorporeal circulation and the up-to-date theories of “ideal” myocardial protection.