机械张力对人成骨样细胞TGF-β表达的影响

目的 观察机械张力对人成骨细胞TGF-β基因表达的影响。方法 通过Flexercell细胞拉伸力学装置对人成骨样细胞MG-63进行6%，12%和24%的拉伸应变加载实验，用RT-PCR反应检测细胞受力后TGF-βmRNA的表达。结果 6%和12%的拉伸率能显著促进MG-63细胞TGF-β的表达，但24%的拉伸率作用对细胞TGF-β基因表达影响不明显。结论 恰当大小的机械张力可以增加成骨细胞TGF-β的表达。过大的应力刺激可能没有这种效应。     

颌骨牵张成骨的临床及基础研究

牵张(引)成骨(distraction osteogenesis，DO)是通过对切开后的骨段施加特定大小的牵引或扩张力，使骨段间隙内再生新骨以延长或扩宽骨骼，达到矫治骨骼发育不足或修复骨缺损的一种外科技术。DO起源于矫形外科，至20世纪90年代，这项技术才开始引入颅颌面外科。1992年McCarthy等首次利用骨牵张术成功延长了半侧颜面短小畸形患者的下颌骨，为颌面骨骼发育不足的外科矫治与骨缺损畸形的整复治疗打开了全新的窗口。     

胰岛素样生长因子Ⅱ对辐射后体外培养成骨细胞增殖的影响

目的：探讨不同剂理辐射后胰岛素样生长因子Ⅱ（Insulin-like growth factor Ⅱ,IGF-Ⅱ)对成骨细胞增殖的效应。方法：成骨细胞通过酶消化法从SD大鼠乳鼠颅骨中获得传代，分别进行0，100，400，600，900，cGy的γ线辐射，然后用含有不同浓度IGF－Ⅱ的培养液培养6d，观察成骨细胞的增殖情况，并用MTTI地进行检测。结果：γ线电离辐射抑制了细胞增殖，100cGy剂量时细胞的增殖率从0辐射时的489．1％下降到437．5％，而IGF－Ⅱ使增殖率恢复到完全正常的状态，即使到了400cGy，也能使增殖率得到一定程度的恢复，但当剂量到达900cGy时，IGF－Ⅱ的这种促增殖效应几乎不存在。结论：IGF－Ⅱ能有效拮抗电离辐射对成骨细胞的抑制效应，但这种作用依赖于辐射剂量的大小。     

颌骨牵张成骨术的影响因素

<正> 牵张成骨(distraction osteogenesis,DO)是通过特殊牵张装置,对切开后仍保留骨膜、软组织附着与血供的骨段施加特定的牵张力,使骨段和相应软组织延长,以达到矫治骨畸形或缺损的外科技术。它广泛应用于颅骨、上下颌骨、牙槽嵴等的扩张延长。DO的成功应用受牵张器械、牵张参数、手术方案、机体状况等多种内外因素影响。现综述如下。     

牵张成骨对下颌骨发育的影响

牵张成骨因能减小手术创伤、减少术后并发症并增加术后稳定性而得到学者们的青睐.随着在一些综合征患者或先天畸形患者治疗中的应用,牵张成骨对下颌骨发育的影响越来越受到学者们的关注.本文就下颌骨牵张成骨对下颌骨发育影响的研究进展作一综述.     

大鼠牙周膜牵张成骨过程中细胞增殖之评价

目的:通过建立大鼠牙周膜牵张成骨快速牙移动模型,观察牙周膜牵张成骨过程中成骨细胞、破骨细胞及骨细胞的增殖情况。方法:40只SD雄性大鼠,随机分为实验组和正畸模型对照组。所有动物拔除右侧上颌第一磨牙后,对照组按传统方法建立正畸模型;实验组对右侧上颌第二磨牙近中牙槽骨实施减阻措施后,在右侧上颌第二磨牙和支抗牙上安装自制牵张装置,频率为1mm/2d,牵引1周后进入巩固期。所有动物于牵张开始时腹膜内注射溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),分别在牵张开始后第3、5、10、20、30天,2组动物中随机选择4只动物处死,获取标本后,进行免疫组织化学染色。在标本新生组织中观察BrdU标记细胞的增殖和分化情况,对BrdU阳性细胞进行计数,利用SPSS16.0软件包中的配对t检验等进行统计学分析。结果:实验组的张力侧和压力侧均发现BrdU阳性细胞,主要为骨细胞、成骨细胞、破骨细胞和成纤维细胞等;BrdU阳性成纤维细胞和成骨细胞在第10天达到峰值,破骨细胞于第20天达到峰值,阳性骨细胞的数量随时间变化呈逐渐上升趋势。正畸模型对照组阳性成纤维细胞和成骨细胞在第5天和第10天的表达虽也呈上升趋势,但明显低于实验组,破骨细胞在第5天达到峰值,...     

机械牵张后大鼠颅缝成骨样细胞Etsl和Cbfal基因表达的研究

目的：探讨大鼠颅骨缝成骨细胞在张应力作用下Etsl和Cbfal基因表达的变化，以揭示骨缝牵张成骨的分子机制。方法：分离培养新生大鼠颅缝成骨样细胞，应用四点弯曲细胞加力装置对其施加单一周期的机械张力，并通过SYBR Green实时定量RT-PCR技术，对Etsl和Cbfal的基因表达进行检测。结果：Etsl和Cbfal的mRNA水平分别在机械张应力作用后6h及12h内显著增高，随后，mRNA水平逐渐恢复到对照组水平，Etsl先于Cbfal表达，在加力后表达立即升高，并在0．5h达到最高水平，而Cbfal则首先经历一个短暂的潜伏期，后表达逐渐升高，在6h达到最高水平，Cbfal的最高表达水平约为Etsl的2．58倍。结论：Etsl和Cbfal在骨缝牵张中对成骨细胞合成分泌骨基质蛋白可能起着不同的调节作用，而它们的功能具有时序性。高频率的牵张（〉2次／24h）更有利于Etsl和Cbfal的最佳表达。     

机械压力对成骨样细胞增殖活性及功能状态的影响

目的:初步探讨机械压力对成骨样细胞增殖活性及功能状态的影响,为研究正畸矫治力对牙周及骨组织的生长改建的机理提供理论依据。方法:对体外培养的成骨样细胞在受到顶-底轴向压力(225 ×g) 后6、12、18、24、30、36 h ,利用流式细胞术及MTT比色法,检测细胞增殖动力学的变化及线粒体琥珀酸脱氢酶的代谢活性。结果:加力组较对照组各期细胞所占百分比及细胞功能状态都有显著性差异( P < 0101) ,其中以加力后12 h、S 期细胞的增加及功能状态的降低最为明显,而增殖指数增加的最大值出现在加力后18 h ,加力组与对照组各项指标在24 h 后趋于一致;前向散射光参数FSC 两组间无显著性差异。结论:顶-底轴向压力(225 ×g) 可显著影响成骨样细胞的增殖活性和功能状态,并随时间的推移逐渐恢复,未发生病理性损害。     

牵张成骨对山羊下颌骨成骨细胞增殖节律的影响

目的　研究山羊下颌骨牵张成骨术后牵张区成骨细胞的增殖节律性。方法　选取48只健康山羊, 分为牵张成骨组和对照组2组,牵张成骨组进行牵张成骨术,术后4周,分别在0:00、4:00、8:00、12:00、16:00、 20:00时点处死两组动物,并取牵张成骨组右下颌骨颏孔区新骨组织、对照组右侧颏孔区骨组织各2 cm×2 cm× 0.5 cm进行原代细胞培养成骨细胞,采用流式细胞术对成骨细胞的增殖指数(PI)进行定量测定,并采用余弦分析法对两组细胞增殖的节律性进行分析。结果　牵张成骨组和对照组的PI均可拟合余弦曲线,牵张成骨组的调整值和振幅显著高于对照组(P<0·05),两组峰值相位无显著性差异(P>0·05),其峰值出现在19:47。结论　牵张成骨可增加成骨细胞的增殖活性,牵张后成骨细胞仍具有昼夜节律性变化。     

颅面部牵张成骨的临床应用

牵张成骨（distraction osteogenesis,DO)已成为矫治各类先天性和获得性颅面部畸形的重要手段。本文以distraction、lengthening、mandible、mandibular、maxilla、maxillary、midface、midfacial、monobloc、cranial、craniofacial及maxillofacial为关键词,通过PUBMED检索自1966年至1999年12月的109篇临床研究报告,依照牵张类型、适应征、患者年龄、手术类型、牵张速度与频率、延迟期与固定期等参数分类,对各家文献报告的不同DO治疗程序与结果进行归纳与分析研究,评估其临床适应征,并尝试建立颌面部DO术的治疗方案与成功标准。     

rhVEGF对大鼠成骨细胞增殖及功能的影响

目的:研究rhVEGF对成骨细胞增殖和分化能力的影响。方法:采用细胞培养技术,应用光镜、MTT法及PNPP偶氮法,分别从细胞形态、细胞增殖及分化等特性,分析不同浓度的rhVEGF对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响。结果:rhVEGF能促进成骨细胞的增殖和分化,其中,在加入3.125ng/ml浓度的rhVEGF并于第3天时,成骨细胞增殖最显著;而12.5ng/ml组对碱性磷酸酶活性的影响最明显。结论:一定剂量的rhVEGF可明显促进成骨细胞的增殖和分化。     

机械牵张应力对成骨细胞增殖和分化影响的初步研究

目的:研究不同力值及加力时间的机械牵张应力对成骨细胞增殖和分化能力的影响。方法:采用Flexcell牵张应力加载系统,对成骨样细胞Saos-2进行不同力值、不同时间的刺激,MTT法检测细胞受力后的增殖变化;ALP试剂盒检测细胞受力后ALP活性的变化;半定量RT-PCR检测骨钙蛋白(OC)、骨桥蛋白(OPN)的mRNA的表达;用茜素红染色观察矿化结节形成。结果:当应变值为12%时,力学刺激对成骨样细胞Saos-2增殖以及ALP活性的促进作用最强(P<0.01)。应变值为12%的力学刺激呈时间依赖性明显上调了成骨样细胞Saos-2的增殖、ALP活性以及骨桥蛋白和骨钙蛋白mRNA的表达(P<0.01);牵张应力刺激组较对照组更加容易形成矿化结节。结论:大小适宜的牵张应力可以促进成骨细胞的增殖以及分化指标如ALP活性、骨桥蛋白和骨钙蛋白mRNA的转录水平、矿化结节的形成等,说明机械牵张应力对于成骨细胞的增殖和分化发挥着重要的调控作用。     

重组人血管内皮生长因子和重组人骨形态发生蛋白-7对大鼠成骨细胞增殖能力的影响

目的研究重组人血管内皮生长因子（recombinant human vascular endothelial growth factor,rhVEGF）和重组人骨形态发生蛋白-7（recombinant human bone morphogenetic protein-7,rhBMP-7）对成骨细胞增殖能力的影响。方法取大鼠颅盖骨组织块,采用改良组织块混合酶消化法培养成骨细胞,分成4组,第1组、第2组、第3组分别加3．125ng／mL不含血清的rhVEGF培养液、50．000ng／mL不含血清的rhBMP-7培养液、3．125ng／mL不含血清的rhVEGF和50．000ng／mL不含血清的rhBMP-7培养液,第4组加不含血清的培养液作为对照组,采用细胞培养技术,应用光镜、四甲基偶氮唑盐（methyl thiazolyl tetrazotium,MTT）法,分析不同浓度的rhVEGF和rhBMP．7对成骨细胞增殖的影响。结果与对照组相比,3．125ng／mL rhVEGF和50.000ng／mLrhBMP-7单独或者联合作用,在1、3、5d均有促进细胞增殖的作用,与对照组的差异均有统计学意义（P〈0.05）,各组间比较差异也有统计学意义（P〈0．05）。其中,3．125ng／mLrhVEGF和50．000ng／mL rhBMP-7单独或者两者联合作用于第3天时,成骨细胞增殖最显著。结论一定剂量的rhVEGF和rhBMP-7可明显促进成骨细胞的增殖。     

rhbFGF/rhBMP-2对成骨样细胞增殖影响的实验研究

目的 :研究不同浓度rhbFGF、rhBMP 2独立或联合对体外培养兔成骨样细胞增殖的影响 ,探讨两者协同作用的可能最适浓度。方法 :取经矿化诱导第三代兔骨髓基质细胞获得的兔成骨样细胞以 2× 10 6/ml的浓度接种于 96孔板 ,用 3种浓度rhFGF、单一rhBMP 2、不同浓度rhFGF和rhBMP 2的组合等 7种条件培养基进行诱导培养 ,设空白对照组 ,每组 8孔。于 1、4、7、10d后用MTT比色法检测细胞增殖情况。结果 :第 4d ,10ngrhbFGF 10 0ngrhBMP 2 /ml组的MTTOD值与 10ng/mlrhbFGF组无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,但大于 10 0ng/mlrhBMP 2组、1ngrhbFGF 10 0ngrhBMP 2 /ml组和 5 0ngrhbFGF 10 0ngrhBMP 2 /ml组 ,且有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :rhbFGF和rhBMP 2的不同浓度组合对兔成骨样细胞的增殖有不同影响 ,其中 10ngrhbFGF 10 0ngrhBMP 2 /ml组合对细胞的增殖有最强的促进作用。     

力学刺激对人腺样囊性癌高低转移细胞系增殖的影响

目的:比较不同大小的力对腺样囊性癌高低转移细胞系增殖的影响。方法:通过体外培养腺样囊性癌高低转移细胞系ACC-2,ACC-M,建立双轴力学刺激细胞模型,用不同大小力刺激,用流式细胞仪检测ACC-2,ACC-M增殖变化。结果:不同大小的力及作用时间对ACC细胞增殖活性的影响具有统计学意义,并且这种影响还具有随时间延续而变化的特性。结论:力对细胞增殖有影响并与力大小和作用时间相关。     

机械牵张力对人牙周膜细胞成骨样细胞功能的影响

目的 观察机械力作用下牙周膜细胞成骨样细胞特性的改变，以深入探讨正畸牙齿移动的机理。方法 利用自行研制的细胞加力装置对体外培养的人牙周膜细胞施加间歇性机械牵张力，检测其成骨样细胞表型蛋白碱性磷酸酶（alkaline phosphotase,ALP)、骨桥蛋白（osteopontin,OPN)和骨钙素（osteocalcin,OCN)表达的改变。结果 人牙周膜细胞在受到机械牵引力刺激后表现为ALP分泌活性的影响，而且24h的时段内波动，2、4h和24h出现2个显著增高期（P＜0．01）；OCN受机械牵张力影响出现较缓慢和晚期的表达增强，加力4h后缓慢增高，在12h最为明显（P＜0．05）；非分泌型ALP、OPN随观察时间延长蛋白表达水平，如ALP、OCN和OPN都增强，具有时序性。提示人牙周膜细胞在机械力诱导下向成骨样细胞分化成熟，从而可能在机械力介导的骨改建中起作用。     

辛伐他汀对人牙周膜细胞增殖和分化的影响

目的:研究辛伐他汀对人牙周膜细胞增殖和成骨分化的影响.方法:将第4 代人牙周膜细胞在条件矿化培养液中诱导培养,同时加入不同浓度的辛伐他汀(10-9、10-8、10-7、10-6 mol/L),噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖情况,4-硝基苯基磷酸二钠盐(4-nitrophenyl phosphate,hexahydrate,PNPP)偶氮法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性.结果:辛伐他汀各浓度组均能促进人牙周膜细胞的增殖和分化,其中10-8、10-7、10-6 mol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),10-7 mol/L的辛伐他汀组促进细胞增殖和ALP活性的作用最明显.结论:适宜浓度的辛伐他汀可有效促进人牙周膜细胞的增殖和成骨分化.     

脂多糖刺激单核巨噬细胞培养上清液对成骨细胞成骨特性的影响

目的 探讨建立牙周炎症的体外实验模型的可行性,为后续进行牙周炎症状态下应力对牙槽骨改建的研究奠定基础.方法 以牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)Pg-LPS刺激小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)的培养上清液作用于体外培养的小...