过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂15d-PGJ2抑制垂体腺瘤细胞生长的研究

目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPARγ）激动剂15d—PGJ2对垂体腺瘤细胞生长和激素分泌的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：采用MTT和ELISA法检测15d—PGJ2对大鼠垂体腺瘤细胞系GH3细胞增殖和生长激素分泌的抑制效应,进一步应用电镜、FCM及Western blot分别检测细胞凋亡、细胞周期以及caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果：15d—PGJ2呈剂量和时间依赖性方式抑制GH3细胞增殖和GH分泌,与对照组相比,差异有统计学意义,P〈0．05。15d-PGJ2干预后,GH3细胞出现典型的凋亡形态学表现;Q和S期的细胞比例下降,而G1期的细胞比例明显增加;细胞中Bax和caspase-3蛋白表达水平明显增加,而Bcl-2蛋白表达水平下调,且表现出剂量依赖效应。与对照组相比,差异均有统计学意义,P〈0．05。结论：15d-PGJ2可能通过诱导细胞凋亡和细胞周期停滞来抑制垂体腺瘤细胞生长和激素分泌,这为垂体腺瘤的防治提供一个新的分子靶点。     

PPARγ活化诱导细胞凋亡和周期阻滞来抑制结肠癌细胞生长

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)在结肠癌细胞株HT-29中的表达及其活化后对结肠癌细胞生长的影响。方法通过RT-PCR和Western blot检测HT-29中PPARγmRNA及蛋白质的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法检测PPARγ配体罗格列酮(rosiglitazone,Rosi)和15d-PGJ2对HT-29细胞生长的影响,荧光显微镜、TUNEL法观察Rosi和15d-PGJ2激活PPARγ后诱导HT-29细胞凋亡形态和生化改变,流式细胞仪(FCM)以碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期。结果RT-PCR及Western blot检测结果表明结肠癌细胞HT-29中存在PPARγmRNA及蛋白质的表达。MTT结果显示Rosi和15d-PGJ2可抑制HT-29细胞生长,且具有时间、剂量依赖效应。荧光显微镜、TUNEL检测显示PPARγ活化后HT-29细胞出现典型的凋亡现象,10μmol/L Rosi或15d-PGJ2作用48h后的细胞凋亡率分别为(17.3±1.9)%及(20.8±2.9)%,与对照组(3.86±0.49)%相比差异均具有统计学意义(P<0.05)。FCM结果显示Rosi和15d-PGJ2激活PPARγ后诱导细胞周期阻滞于G0/G1期,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论结肠癌细胞HT-29表达PPARγ,其活化可通过诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞,抑制结肠癌细胞增长。因此,PPARγ可能为结肠癌治疗的一个新靶点。     

过氧化物酶体激活物活化受体γ活化对人胃癌细胞周期的影响

目的:探讨过氧化物酶体激活物活化受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)活化在诱导人胃癌MGC803细胞周期停滞中的作用。方法:MTT法检测吡格列酮(pioglitazone,PGZ)对MGC803细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测肿瘤细胞周期的改变;RT-PCR方法检测PPARγ、细胞周期蛋白Cyclin D1和细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4的表达。结果:0.1~10μmol/L PGZ作用MGC803细胞96 h后能显著抑制细胞增殖;10μmol/L PGZ分别作用48、72和96 h,G1期细胞随着作用时间的延长而增加,呈明显的G1期阻滞;在MGC803细胞中PPARγ表达较弱,经10μmol/L PGZ作用48 h表达水平显著增加;作用96 h,细胞中细胞周期调节因子CDK4表达显著降低(P<0.01),Cyclin D1轻微下调。结论:PPARγ活化能诱导MGC803细胞周期G1期阻滞,该作用可能与其下调细胞周期因子CDK4和Cyclin D1的表达有关。     

Ciglitazone对肝癌细胞株HepG2在体内外生长的影响

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor γ,PPARγ)激动剂ciglitazone对人肝癌细胞株 HepG2体内、外生长的影响,并探讨其可能机制。方法培养HepG2细胞,加入不同浓度的ciglitazone,用生长曲线检测HepG2细胞体外生长情况,用流式细胞仪进行细胞周期分析; Western blot检测ciglitazone对PPARγ蛋白表达的影响。建立裸鼠肝癌动物模型,随机将其分为两组:对照组(A组,10只),ciglita zone注射组(B组,10只),B组隔天注射ciglitazone 100μ(100 μmol/L)连续15次,对照组注射100 μL生理盐水,1个月后,切除瘤灶、称瘤重、计算抑瘤率。标本用Western blot检测细胞周期素D1(cyelinD1)、细胞周期素依赖性激酶抑制子P21蛋白的表达。结果(1)ciglitazone体外抑制HepG2细胞生长,并呈现明显时间和剂量依赖性。(2)经ciglitazone处理后PPARγ蛋白表达增加。(3) 经ciglitazone治疗后,A组、B组的瘤重分别为3．73±0．22g,2．60±0．35g,B组的抑瘤率达30％,A组的cyclinD1较B组明显增高,A 组的P21蛋白表达水平较B组明显降低。结论 Ciglitazone能抑制肝癌HepG2细胞的恶性增殖,其抑制作用呈明显的时间及剂量依赖性,并诱导其分化,其机制与PPARγ干预细胞周期的调控有关。     

尼美舒利对食管癌Eca-109细胞生长的影响及其可能机制

目的:探讨尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞生长和凋亡的影响及其作用机制。方法:应用MTT比色法检测尼美舒利对Eca-109细胞体外生长的抑制作用;流式细胞仪测定细胞周期和凋亡,琼脂糖凝胶电泳法进一步观察细胞凋亡;RT-PCR法检测COX-2、PPARγmRNA表达变化,Western blot检测PPARγ蛋白表达变化。结果:尼美舒利(50~400μmol/L)对Eca-109细胞生长有抑制作用,随浓度升高、时间延长作用增强,呈剂量-时间效应关系;可使Eca-109细胞G0/G1期比例增高,S期细胞减少,凋亡细胞增多并出现典型的凋亡细胞DNA ladder。此外,尼美舒利可下调COX-2表达并上调PPARγ表达。结论:尼美舒利能抑制Eca-109细胞的生长,其机制可能是通过抑制Eca-109细胞增殖、诱导细胞周期G0/G1期阻滞、细胞凋亡、下调COX-2表达、上调PPARγ表达而实现的。     

PPARα配体对肌细胞的毒性作用研究

背景与目的： 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferators-activated receptor α, PPARα)配体类降脂药物对人骨骼肌细胞的影响。 材料与方法： WST-1法测定苯扎贝特及与阿托伐他汀联合应用时对人横纹肌肉瘤(RD)细胞的毒性作用;全自动生化分析仪测定不同浓度的苯扎贝特及与阿托伐他汀联合作用RD细胞,细胞中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性;Hoechest 33342染色法观察细胞凋亡的形态学改变。 结果： 苯扎贝特明显抑制RD细胞生长,明显降低CK活性,并引起细胞凋亡的典型变化,呈剂量-效应和时间-效应关系,与阿托伐他汀联合应用时对RD细胞的作用增强。 结论： 苯扎贝特作为PPARα配体对RD细胞具有明显的细胞毒性作用,与他汀类合用时细胞毒性增强。     

HDAC在PPARγ途径抑制胃癌SGC-7901细胞侵袭中的作用

背景与目的:有研究表明组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)能抑制过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)促进脂肪细胞分化的能力;最近发现PPARγ活化后,能够抑制多种肿瘤细胞的生长与侵袭.本研究旨在观察HDAC在PPARγ途径影响胃癌细胞株SGC-7901侵袭能力中的作用及机制.方法:用不同浓度的HDAC抑制剂曲古抑菌素A(TSA)和PPARγ配体罗格列酮(ROZ)分别作用于SGC-7901细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测两种药物对细胞增殖的抑制作用,以筛选出合适的联合浓度.将SGC-7901细胞随机分为对照组、TSA组、ROZ组和TSA与ROZ联合组.MTY法检测细胞增殖抑制率,Transwell小室法检测各组胃癌细胞侵袭能力,RT-PCR法检测各组细胞PPARγ、MMP-2 mRNA表达情况,Western blot检测MMP-2蛋白的表达.结果:5 μmol/L ROZ和40 nmol/LTSA为无明显细胞毒性作用的最高浓度,低于此浓度的ROZ及TSA可减弱SGC-7901细胞的侵袭能力(P<0.01).5 μmol/L ROZ与20 nmol/L TSA联合作用对SGC-7901细胞的侵袭抑制旱协同作用(q=1.41>1.15).ROZ可以下调SGC-7901细胞MMP-2 mRNA和蛋白的表达(P<0.01),TSA与ROZ联合处理组细胞MMP-2表达下调较单用ROZ组明显(P<0.01).RT-PCR结果显示,TSA作用SGC-7901细胞后,可使PPARγ表达增加(P<0.01).结论:HDAC通过一系列分子机制限制PPARγ的激活,应用TSA抑制HDAC活性后,可以使ROZ抑制胃癌细胞的侵袭活性增强.     

过氧化物酶体增生物激活受体γ激动剂对Raji细胞的增生抑制作用及其机制

目的探讨过氧化物酶体增生物激活受体γ（PPARγ）激动剂曲格列酮（TGZ）对白血病Raji细胞的增生抑制作用及其作用机制。方法以不同浓度的TGZ（0—60μmol／L）作用于体外培养的Raji细胞24、48、72h,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡时的DNA梯状条带,并应用免疫印迹法（Western Blotting）检测凋亡调节蛋白Bax、bcl-2及Survivin的变化。结果20μmol／L以上的TGZ可显著抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,呈现出明显的量效与时效关系,药物作用72h后在琼脂糖凝胶电泳上可见明显的DNA梯状条带。Western Blotting检测结果表明,药物作用48h后凋亡抑制蛋白bcl-2及Survivin的表达水平明显降低,而促凋亡蛋白Bax的表达水平显著升高。结论PPAR1激动剂TGZ能显著抑制Raji细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,降低bcl-2、Survivin及升高Bax的表达水平是TGZ诱导细胞发生凋亡的重要作用机制之一。     

罗格列酮对白血病K562细胞的诱导凋亡作用及其作用机制

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体y(PPART)激动剂罗格列酮(msiglitazone,RGZ)对白血病K562细胞的诱导凋亡作用及其作用机制.方法 以不M浓度的RGZ(20～80umol/L)作用于体外培养的K562细胞0,24、48、72 h,应用噻唑蓝法检测细胞生长抑制率,用膜联蛋白v.碘化丙啶双染法检测细胞凋亡,并对细胞凋亡前后1'53蛋白的表达水平及Caspse.3活性进行榆测.结果 40~moVL以上的RGZ可显著抑制细胞生长及诱导细胞发生凋亡,呈现出明显的量效与时效关系,在细胞凋亡的同时,P53蛋白的表达水平及Caspse-3活性均明显升高.结论 40umol/L以上的RGZ能显著抑制K562细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,升高半胱天冬蛋白酶(Caspse)-3活性,上涮促凋亡蛋白P53的表达水平是RGZ诱导K562细胞发生凋亡的重要作用机制之一.     

PPARγ配体吡格列酮联合放射治疗对小鼠结肠癌的实验研究

 目的：探讨过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ配体吡格列酮联合放射治疗对小鼠结肠癌的抑制作用。 方法：小鼠结肠癌细胞CT26接种于BALB/c小鼠右侧肋腰部,将小鼠随机分为空白对照组、肿瘤对照组、溶剂（DMSO）对照组、单纯给吡格列酮组、单纯放疗组和放疗+给吡格列酮组,分别观察各组肿瘤生长情况,计算并比较抑瘤率,病理观察肿瘤在光镜下的变化。 结果：放疗后两周小鼠的肿瘤体积比较,吡格列酮组、放疗组、放疗+吡格列酮组与肿瘤对照组比较,对小鼠结肠癌的生长均有抑制作用（p<0.05）,放疗组或放疗+吡格列酮组与吡格列酮组比较,结果均有统计学意义（p<0.05）,放疗组与放疗+吡格列酮组比较,结果无统计学意义（p>0.05）;吡格列酮组、放疗组、放疗+吡格列酮组的抑瘤率分别为46.30%、68.60%和70.01%;肿瘤病理学变化明显。 结论：吡格列酮、放疗以及两者联合使用均能够抑制小鼠结肠癌的生长,PPARγ是肿瘤治疗较好的新靶点。 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ;吡格列酮;放射治疗;小 鼠;结肠癌     

乳腺癌组织中PPARγ与内分泌治疗预测指标相关性

[目的]研究乳腺癌组织中过氧化物酶增殖激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptors γ,PPARγ)的表达与ER、PR、pS2、C-erbB-2之间的关系,探讨其临床意义。[方法]应用组织芯片和免疫组织化学EnVision法检测71例乳腺癌组织和41例非癌组织PPARγ、ER、PR、pS2、C-erbB-2的表达。[结果](1)71例乳腺癌中PPARγ、ER、PR、pS2和C-erbB-2的阳性表达率分别为47.89%、64.79%、61.97%、39.44%和40.85%。(2)PPARγ的表达与组织学分级呈正相关(P<0.01)。(3)PPARγ的表达与ER、PR表达分别呈正相关(C1=0.3102,C2=0.2441),与pS2、C-erbB-2的表达无显著性相关(P>0.05)。[结论]PPARγ在分化较好和ER阳性乳腺癌中高表达,与ER、PR、pS2、C-erbB-2联合检测有助于指导内分泌治疗及评估预后。     

食管鳞癌组织PPARγ和MMP-7蛋白表达临床意义的探讨

目的:探讨过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-aetivated recelmtorγ,PPART)和基质金属蛋白酶-7(matrix Metalloproteinase-7,MMP-7)在食管鳞癌组织中的表达及其生物学意义.方法:免疫组织化学SP法检测PPARy和MMP-7蛋白在40例食管鳞状细胞癌、25例非典型增生和13例正常黏膜组织中的表达.流式细胞术检测其中30例食管鳞癌、15例非典型增生和10例正常黏膜组织中PPARγ和MMP-7蛋白含量.结果:PPARγ在癌组织中的阳性表迭率为52.5%(21/40),高于不典型增生组织(20.0%,5/25)和正常黏膜组织(7.7%,1/13),P<0.05;MMP-7在癌组织中的阳性表达率为65.0%(26/40),高于不典型增生组织(28.0%,7/25)和正常黏膜组织(0),P<0.05.流式细胞术结果与免疫组化结果一致.PPARγ的表达与细胞分化程度、淋巴结转移相关,P<0.05;MMP-7的表达与浸润深度和淋巴结转移相关,P<0.05;PPARγ和MMP-7的表达成正相关.结论:PPARγ和MMP-7的表达与食管鳞癌的发生发展密切相关,且两者在此过程中可能具有协同作用.中华肿瘤防治杂志,2009,16(1):40-43     

过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)在肝癌组织中的差异性表达

目的检测过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)在肝癌组织中有无差异性表达且有无突变.方法用半定量RT-PCR,Western blot,FISH,PCR-SSCP等方法进行鉴定.结果用半定量RT-PCR检测,有8/14为癌中高表达;Western blot方法检测,9/15为癌中高表达.免疫组化显示PPARγ在所有的癌旁组织中定位于细胞浆中;而在5个癌组织中定位于细胞核中;突变热点PPARγ外显子3和5在34对肝癌标本中没有突变.结论过氧化物酶体增殖激活性受体γ在肝癌组织中有差异性表达并且在肝癌标本中没有突变.提示PPARγ可能与肝癌的发展有一定的相关性.     

蒿甲醚激活 PPARγ途径抑制小鼠 Lewis 肺癌细胞体外增殖和侵袭机制研究

目的：研究青蒿素类衍生物蒿甲醚（ARE）对小鼠 Lewis 肺癌细胞株（LLC）体外生长和侵袭的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用 MTT 法观察 ARE 对 LLC 细胞生长的抑制效应。Trans-well 侵袭实验检测对照组、ARE 组、GW9662[过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）特异性抑制剂]组和 GW9662＋ARE 组4组LLC 细胞的侵袭力。实时 PCR 和 Western blotting 法检测4组细胞 PPARγ、NF-κB p65、Caspase-3 mRNA 和蛋白表达。结果ARE 呈时间和剂量依赖性方式抑制 LLC 细胞生长,24、48、72 h ARE 对 LLC 的 IC50值分别为271．29、189．08、65．99μg／ml。4组中 ARE 组的荧光值最低,为1744．67,对照组为6887．00,GW9662＋ARE 组为4597．00,GW9662组为10012．67,表明 ARE 组侵袭力最弱,而且相比对照组侵袭力明显减弱（t ＝12．411,P ＝0．000）。ARE 组、GW9662组 PPARγmRNA 相对表达量分别为2．276±0．534和0．362±0．206,与对照组相比差异均有统计学意义（t ＝4．785,P ＝0．001;t ＝2．395,P ＝0．044）;ARE 组 PPARγ蛋白表达量为27688．33±3593．06,比对照组（17716．33±2273．95）、GW9662＋ARE 组（21816．00±1644．07）高（t ＝5．159,P ＝0．001;t ＝3．038,P ＝0．016）。NF-κB p65 mRNA 表达量在 GW9662＋ARE 组（0．346±0．149）最低,其次为 ARE 组（0．392±0．187）, GW9662组最高（1．720±0．338）,ARE 组与对照组和 GW9662组相比差异有统计学意义（t ＝3．592,P ＝0．007;t ＝7．851,P ＝0．000）。Caspase-3 mRNA 和蛋白在各组的表达差异没有统计学意义（F ＝1．181, P ＝0．376;F ＝0．647,P ＞0．05）。结论蒿甲醚可以通过上调 PPARγ表达抑制 NF-κB 的途径来抑制 LLC细胞体外增殖和侵袭,提示 PPARγ可能为肺癌治疗提供一个新的靶点。     

曲格列酮对人乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞株增殖影响的研究

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂曲格列酮(TRG)对体外培养雌激素受体(ER)阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞及ER+乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法:以不同浓度的TRG(0～50μmol/mL)分别处理体外培养的MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞48h,MTT法检测细胞存活率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布;蛋白质印迹法检测PPARγ和ER-α的表达。结果:MTT结果示TRG浓度≥5μmol/mL时MDA-MB-231细胞(P值分别为0.006、0.006、0.000和0.000)和MCF-7细胞(P值分别为0.007、0.006、0.004和0.001)的存活率降低。FCM检测结果表明,经TRG作用后肿瘤细胞主要集中在G1期。以上2种检测结果显示,MDA-MB-231细胞对TRG的敏感程度较MCF-7细胞高;蛋白质印迹法检测结果表明,TRG处理后的MDA-MB-231细胞中PPARγ蛋白的表达水平随药物浓度增加逐渐升高(相对强度分别为2.045、2.600和3.038),MCF-7细胞的ER-α表达水平则随药物浓度增加逐渐降低(相对强度分别为1.164、1.130和0.680)。结论:TRG对ER+和ER-乳腺癌细胞均有抑制作用,且ER-乳腺癌细胞对TRG更敏感。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ途径抑制 肿瘤血管生成的研究进展

0引言 过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)属于Ⅱ型核激素受体超家族成员,是由亲脂性配体激活的核转录因子,1990年由Issemann等[1]人首先发现.     

RNA干扰沉默PPARγ对人胃癌细胞生长的影响

目的:采用RNA干扰技术探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor γ, PPARγ)表达在人胃癌中的作用.方法:根据人 PPARγ基因序列设计获得3个小干扰RNA(small interfering nRNA,siRNA)靶位点,并构建了3个针对靶位点的一个载体编码一个短发夹状RNA(shRNA)的质粒表达载体(Y1、Y2和Y3),同时合成了1个阴性对照质粒表达载体(HK),采用阳离子脂质体将质粒转染人胃癌MGC803细胞,FCM法观察转染效率.分别采用RT-PCR和Western印迹法检测PPARγ mRNA和蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖,相差倒置显微镜、Hoechst33342染色和FCM检测细胞凋亡.结果:RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默PPARγ表达后抑制人胃癌MGC803细胞增殖并诱导其凋亡.结论:PPARγ高表达可能通过促进细胞增殖和抑制细胞凋亡促进人类胃癌的形成,PPARγ有望成为治疗胃癌的新靶点.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在肺癌中的作用

过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ是一类配体激活的核转录因子,属于核受体超家族成员,在调节糖和脂肪代谢,肿瘤细胞增殖、分化、凋亡、侵袭和远处转移等方面发挥重要作用.研究显示在人类肺癌组织和多种肺癌细胞株中均有PPARγ表达,且经其配体活化后能显著地干预包括肺癌在内的多种癌的进展和演变.但近来也有资料表明激活PPARγ导致促癌效应.     

舒林酸对胃癌细胞生长抑制作用的体外观察

背景与目的:体外研究舒林酸对人胃癌BGC-823细胞的生长抑制作用,探讨其作用机制。材料与方法:将舒林酸作用于人胃癌BGC-823细胞,并设置不同的作用浓度和作用时间。以体外药物敏感实验(单核细胞直接细胞毒测定Mono-nuclearcelldireccytotoxicityassay,MTT)检测舒林酸在不同浓度及不同作用时间下对人胃癌BGC-823细胞的增殖抑制效应;流式细胞仪检测胃癌细胞周期分布;透射电镜观察药物作用后细胞凋亡的形态学改变;免疫组化检测细胞增殖(ki-67)、凋亡抑制基因(bcl-2)及还氧合酶(COX-2)蛋白的表达。结果:舒林酸对人胃癌BGC-823细胞有生长抑制作用,使G0/G1期比例增高,S期比例降低;透射电镜观察到细胞凋亡的形态特征及凋亡小体,而ki-67、bcl-2及COX-2蛋白表达阳性率显著降低;上述作用均呈时间和剂量依赖性。结论:舒林酸在体外具有良好的抑制胃癌BGC-823细胞生长的作用,其机制涉及影响细胞周期分布、诱导细胞凋亡及抑制COX-2、ki-67及bcl-2蛋白的表达。