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目的 探讨蜕膜细胞条件培养液(DCM)对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响。方法 用体外培养早孕、晚孕蜕膜细胞的方法制备DCM,然后将其处理体外培养的早孕滋养细胞。用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析早孕滋养细胞侵袭调节基因表达的变化。结果 正常培养的早孕滋养细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、基质金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)、尿激酶型纤溶酶原激活因子(u-PA)mRNA均有表达;而TIMP-2、纤溶酶原激活因子抑制因子(PAI-1)mRNA未见表达。早孕和晚孕DCM均能下调滋养细胞MMP-2、MMP-9、u-PAmRNA的表达,而上调TIMP-1mRNA的表达。早孕、晚孕DCM均能诱导滋养细胞PAI-1mRNA的表达,但对TIMP-2mRNA的表达未见有影响。结论 蜕膜细胞可能通过调节滋养细胞中MMP-2、MMP-9与TIMP-1之间的平衡以及u-PA与PAI-1之间的平衡,而影响滋养细胞的侵袭能力。 相似文献
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蜕膜细胞条件培养液对卵巢癌细胞株COC1侵袭相关基因表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究蜕膜细胞条件培养液(DCM)对卵巢癌相关侵袭基因表达的影响。方法 原代培养早孕蜕膜细胞及晚孕蜕膜细胞并提取DCM,用DCM处理卵巢癌细胞株COC1,利用RT-PCR法对卵巢癌侵袭相关基因的表达进行分析。结果 卵巢癌细胞株COC1表达基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-2)及纤溶酶原抑制剂(PAI-1),而不表达MMP-9、TIMP-1及尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)。早孕及晚孕DCM能显著下调卵巢癌细胞株COC1 MMP-2的表达(P<0.01);早孕及晚孕DCM处理的卵巢癌细胞株COC1也表达TIMP-2、PAI-1mRNA,且有显著差异(P<0.00)。结论 DCM可以通过改变卵巢癌细胞株COC1侵袭基因MMP-2/TIMP-2以及u-PA/PAI-1之间的平衡,从而降低卵巢癌细胞株COC1的侵袭能力。 相似文献
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目的 研究蜕膜细胞条件培养液(DCM)对卵巢癌相关侵袭基因表达的影响。方法 原代培养早孕蜕膜细胞及晚孕蜕膜细胞并提取DCM,用DCM处理卵巢癌细胞株COCl,利用RT-PCR法对卵巢癌侵袭相关基因的表达进行分析。结果卵巢癌细胞株COC1表达基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-2)及纤溶酶原抑制剂(PAI-1),而不表达MMP-9、TIMP-1及尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)。早孕及晚孕DCM能显著下调卵巢癌细胞株COC1 MMP-2的表达(P<0.01);早孕及晚孕DCM处理的卵巢癌细胞株COC1也表达TIMP-2、PAI-1 mRNA,且有显著差异(P<0.01)。结论DCM可以通过改变卵巢癌细胞株COCl侵袭基因MMP-2/TIMP-2以及B-PA/PAI-1之间的平衡,从而降低卵巢癌细胞株COCl的侵袭能力。 相似文献
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利用富含IL-3的WEHI-3细胞条件培养液(WEHI3-CM)和富含M-CSF的L929细胞条件培养液(L929-CM)代替重组因子在体外用单层琼脂法培养小鼠HPP-CFC获得成功。在合用WEHI3-CM和L929-CM的基础上,联合rhIL-1,rhIL-6和rmGM-CSF,HPP-CFC的产率有所提高。用5-FU处理小鼠2天后,骨髓细胞中HPP-CFC得以浓集。产生的HPP-CFC集落直径 相似文献
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目的 研究蜕膜细胞条件培养液(decidual cell conditioned media,DCM)中肿瘤坏死因子(TNF-α)及表皮生长因子(EGF)对卵巢癌细胞株(COC1)侵袭基因尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)/纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)表达的影响.方法 原代培养早孕蜕膜细胞及晚孕蜕膜细胞并提取蜕膜细胞条件培养液(DCM),分别将加有TNF抗体及EGF抗体的DCM处理卵巢癌细胞株(COC1),利用RT-PCR法对卵巢癌侵袭基因uPA/PAI-1的表达进行分析.结果 COC1表达PAI-1,不表达uPA.与DCM组比较,TNF-α抗体组可以使COC21 PAI-1mRNA的表达上调,二者之间差异有显著性(P<0.01).与DCM组比较,FGF抗体组PAI-1mRNA的表达不明显,呈下调的趋势,二者之间亦差异有显著性(P<0.01).结论 早孕DCM中TNF-α降低了DCM抑制COC1纤溶酶原系统作用的能力;而EGF增加了DCM的上述能力.同时说明纤溶酶原系统在COC1的侵袭能力方面不起主导作用. 相似文献
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目的:研究不同浓度的星形胶质细胞(AS)条件培养液对新生大鼠海马神经元生长活性的影响。方法:进行新生大鼠海马神经细胞的原代培养,AS条件培养液的制备,通过测量海马神经细胞胞体直径和轴突长度及应用MTT法观察AS条件培养液对海马神经细胞生长活性的影响。结果:AS条件培养液能明显促进海马神经细胞胞体直径及轴突长度的增加,增强海马神经细胞内琥珀酸脱氢酶的活性,而且以高浓度的AS条件培养液作用最为显。结论:AS条件培养液对体外培养的新生大鼠海马神经元有明显的促生长作用。 相似文献
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The effect of axon guidance factors ephrin-A 1/EphA2 on the invasion of trophoblastic cells and the possible mechanism were investigated in this study.The expression of EphA2 in vascular endothelial ce... 相似文献
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目的 研究蜕膜NK细胞(decidual natural killer,dNK)能否作为母-胎界面中与滋养细胞直接接触的细胞介质,通过其分泌的相关细胞因子,协同子痫前期相关微小RNA-18a (miR-18a)影响人正常滋养细胞(HTR8)浸润能力,参与子痫前期(pre-eclapmpsia,PE)发病。 方法 收集2017年9月—12月于西安医学院第一附属医院妇科行人工流产患者的早孕蜕膜组织(11例),梯度密度离心联合流式细胞术分选、纯化dNK细胞;在HTR8细胞中转染miR-18a前体分子,共分3组:miR-18a过表达组、miR-18a抑制组、NC组(对照组);将dNK与上述3组HTR8细胞分别共培养;实时定量PCR (RT-qPCR)检测转染后HTR8细胞中miR-18a mRNA的表达。ELISA检测共培养24 h后各组上清液中白细胞介素8(interleukin 8,IL-8)的表达;Transwell实验分3组:共培养组、单纯培养组、对照组;检测dNK与miR-18a抑制组HTR8细胞共培养上清对滋养细胞浸润能力的影响。 结果 与对照组相比,miR-18a过表达和抑制均获得明显效果(均P<0.001);dNK与抑制组HTR8共培养24 h后,上清液中IL-8的表达低于对照组[(508.35±28.22) ng/L,P<0.001];与单纯培养组相比,共培养组HTR8细胞浸润能力增强(367.11±88.26,P<0.001)。 结论 dNK细胞能够通过其分泌细胞因子IL-8,并协同miR-18a共同影响滋养细胞浸润能力,从而可能参与PE发病过程。 相似文献
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目的研究不同培养基对人脐静脉内皮细胞体外培养生长的影响,探讨内皮细胞的最佳体外扩增培养条件。方法取健康产妇分娩后脐带,用胶原酶Ⅰ消化后得脐静脉内皮细胞,进行原代培养,并用免疫荧光染色的方法对细胞进行鉴定,传代培养时则分别采用RPMI-1640培养基和EGM-2培养基,倒置显微镜观察两种培养条件下细胞的生长状态,同时利用流式细胞仪检测其生长周期,对比培养效果。结果 EGM-2组内皮细胞生长良好,2d后贴壁生长的细胞可达90%。EGM-2组S期细胞比例为(29.07±1.48)%,RPMI-1640培养基组S期细胞为(17.58±3.49)%,二者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 EGM-2培养基更适合人脐静脉内皮细胞的体外传代扩增培养。 相似文献
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调控Livin基因表达对食管癌EC9706细胞生物学行为的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:探讨调控Livin基因表达对食管癌EC9706细胞生长速度、细胞凋亡以及放射线敏感性的影响.方法:取EC9706细胞,分7组,siRNA组、Livinα组、Livinβ组分别用脂质体包裹法转染沉默Livin表达的siRNA载体pSUPER-neo-Sli1、Livinα表达载体pIRES2-AcGFP-Livinα及Livinβ表达载体pIRES2-AcGFP-Livinβ;Livinα/β组同时转染pIRES2-AcGFP-Livinα和pIRES2-AcGFP-Livinβ,空siRNA载体组转染pSUPER-neo,空表达载体组转染pIRES2-AcGFP,空白对照组不转染.取各组细胞,荧光定量RT-PCR法检测Livin mRNA表达情况,MTT法测定细胞生长曲线,TUNEL法检测细胞凋亡,同时检测Caspase-3 活性及放射线敏感性.结果:与空白对照组比较,空表达载体组、空siRNA载体组细胞倍增时间、凋亡指数、Caspase-3活性和放射线敏感性差异均无统计学意义(P>0.05).与空白对照组比较,Livinα组、Livinβ组和Livinα/β组细胞倍增时间、凋亡指数、Caspase-3活性和放射线敏感性均降低(P<0.05);siRNA组细胞凋亡指数、Caspase-3活性和放射线敏感性增加(P<0.05),细胞倍增时间差异无统计学意义(P>0.05).结论:调控EC9706细胞Livin基因的表达,可有效改变细胞的生物学行为;Livin基因可能成为肿瘤治疗的新靶点. 相似文献
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目的:观察嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)条件培养液对PC12细胞神经丝蛋白(neurofilament protein,NF)、突触蛋白(synapsin)和突触素蛋白(synaptophysin)表达的影响,探讨嗅鞘细胞条件培养液促神经细胞分化生长的作用机制。方法:原代培养并纯化OECs,收集培养上清制备成嗅鞘细胞培养液(OEC culture medium,OECCM),与PC12细胞培养24、48、72h,观察细胞形态学变化;通过免疫荧光法检测PC12细胞NF的表达及分布;蛋白质印迹法检测NF、突触蛋白和突触素的相对含量。结果:OECCM培养的PC12细胞长有突起,并随着培养时间的延长,细胞形态酷似神经元;免疫荧光染色显示NF起初在核周分布,OECCM作用后NF的分布范围逐渐增加,其分布面积与β-tubulin分布面积的比值显著增高(P<0.05)。蛋白质印迹法显示OECCM组NF、突触蛋白(synapsin)和突触素蛋白(synaptophysin)的表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论:嗅鞘细胞能分泌一些促PC12细胞分化的因子,这些因子能促进P... 相似文献
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