肝癌及癌旁组织中p53基因及AFP、CEA等表达异常及相关性研究

目的　从分子生物学及病理学角度对肝癌中抑癌基因p5 3和肿瘤标志物AFP(甲胎蛋白 )、CEA(癌胚抗原 )的表达及相关性进行研究。方法　收集 40例肝细胞肝癌 (HCC)患者癌组织连带部分癌旁组织 ,用免疫组织化学法检测p5 3基因、AFP、CEA等。结果　p5 3基因癌内表达为 80 % ,癌旁组织为 5 0 % ;AFP癌内表达为 87.5 % ,癌旁组织为80 % ;CEA癌内表达为 5 5 % ,癌旁组织表达不明显。结论　检测 p5 3基因 ,并与其它肿瘤标志物和相关基因一起 ,在基因水平诊断肝癌、估计预后及制定术后治疗方案等有着重要作用。     

肝癌及癌旁组织中p53基因及AFP、CEA等表达异常及相关性研究

目的：从分子生物学及病理学角度对肝癌中抑癌基因p53和肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP)、癌胚抗原（CEA）的表达及相关性进行研究。方法：收集40例肝细胞癌（HCC)患者癌组织连带部分癌旁组织，用免疫组织化学法检测p53基因、AFP、CEA等。结果：p53基因癌内表达率为80％，癌旁组织为50％；AFP癌内表达率为87．5％，癌旁组织为80％；CEA癌内表达率为55％，癌旁组织表达不明显。结论：检测p53基因表达，并与AFP、CEA一起，对诊断肝癌、估计预后及制定术后治疗方案等有重要作用。     

组织hTERT基因及GGTmRNA-H亚型与血清AFP对小肝癌早期诊断意义的比较

目的 :研究小肝癌组织中端粒酶逆转录酶hTERT基因及谷氨酰转移酶GGTmRNA H亚型表达 ,通过与小肝癌血清AFP的比较 ,探讨其在小肝癌早期诊断中的意义。方法 :应用RT PCR法检测 65例原发性肝癌患者癌组织hTERT与GGTmRNA H亚型的表达 ,同时通过放免法检测血清AFP阳性表达情况。结果 :在 65例原发性肝癌中 ,癌组织hTERT基因的阳性例数 5 6例 ( 86 2 % ) ,GGTmRNA H亚型的阳性例数为 61例 ( 93 8% ) ,肝组织血清AFP阳性 40例 ( 61 5 % ) ,P <0 0 5 ;hTERT基因在2 0例小肝癌癌组织阳性表达例数为 16例 ,阳性率为 80 0 % ;GGTmRNA H亚型阳性表达例数为 18例 ,阳性率为 90 0 % ;与血清AFP组比较 ,差异有统计学意义 ,P <0 0 5。结论 :肝癌组织中hTERT基因、GGTmRNA H亚型联合检测可弥补AFP测定的不足 ,对提高肝癌早期诊断具有重要意义。hTERT基因及GGTmRNA H亚型的检测比AFP更敏感、特异性更高 ,有望成为小肝癌早期诊断的理想指标     

肝细胞肝癌中T细胞转录因子4基因表达及突变

目的 :研究人T细胞转录因子 4(hTcf 4 )基因在肝细胞肝癌中表达及突变和肝癌发生发展的关系。方法 :用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)检测了 32例肝癌组织及癌旁组织中hTcf 4基因表达 ,并用聚合酶链反应 -单链构像多态性分析 (PCR SSCP)方法检测了肝癌组织中hTcf 4外显子 1、4、9、15的突变情况。结果 :hTcf 4mRNA在癌组织及癌旁组织中表达率分别为 90 .6 %和 71.9%。且癌组织中表达水平明显高于癌旁组织 [(0 .71±0 .13)vs (0 .2 9± 0 .0 5 ) ,P <0 .0 0 1]。同时 ,此基因在包膜不完整及有转移的癌组织表达增高更为显著。 32例肝癌中仅检测到 2例hTcf 4基因外显子 15突变 ,突变率为 6 .2 5 %。结论 :hTcf 4基因在肝细胞肝癌 ,尤其伴转移肝癌组织中表达增高 ,并与肝癌侵袭转移有关 ,而该基因突变与肝癌关系不密切。     

肝癌患者p16基因甲基化与DNMTs表达相关性分析

目的:研究p16基因启动子区域异常甲基化所导致的基因表达异常在肝癌形成过程中的作用,探讨p16基因甲基化与DNMTs(DNMT1、DNMT2、DNMT3A和DNMT3B)表达之间的相关性。方法:检测肝癌患者癌组织、癌旁组织和肝硬化组织中p16基因的异常甲基化状态及p16、DNMTs基因mRNA的表达水平;采用甲基化特异性PCR技术检测甲基化状态,荧光定量技术检测mRNA的表达。结果:p16基因在肝癌组织、肝硬化组织和癌旁组织中的甲基化率分别为70.5%(31/44)、37.1%(13/35)和9.1%(4/44),肝癌组织和肝硬化组织中的甲基化改变与癌旁组织比较差异有统计学意义,P<0.01。31例甲基化阳性组织中17例p16基因表达降低或缺失,13例甲基化阴性组织中2例基因表达降低或缺失,甲基化阳性与阴性的p16基因表达水平存在明显差异。癌组织和肝硬化组织中4种DNMT mRNA水平均高于相应癌旁组织。其中DNMT1、DNMT3A和DNMT3BmRNA的表达水平差异有统计学意义,DNMT1:P值分别为0.009和0.020;DNMT3A:P值分别为0.005和0.010;DNMT3B:P值分别为0.039和0.036。DNMT2mRNA的表达水平虽然高于相应癌旁组织,但差异无统计学意义,P值分别为0.120和0.350。DNMT1、DNMT 3A和DNMT3B的表达与p16甲基化有相关性,P值分别为0.013、0.025和0.041。结论:p16基因甲基化是肝癌的早期、频发事件,其改变是其基因表达下降甚至失活的重要原因。DNMTs活性的改变可能促进p16基因的异常甲基化。     

肝癌及相关组织中NET-1基因与蛋白的表达

背景与目的:NET-1是最近发现的肿瘤相关基因,它在肝癌中的表达目前尚未见报道。本研究在胚胎肝、成人肝、肝癌及相应的癌旁组织中筛检和比较NET-1基因和蛋白表达,以探讨NET-1基因在肝癌表达的特征。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测3例胚胎肝、4例成人肝、4例验证肝癌组织和28例肝癌与相应癌旁组织中NET-1mRNA的表达,由四星图像分析系统软件检测NET-1基因mRNA的光密度。用基因生物工程方法制备NET-1多克隆抗体,并用激光共聚焦显微镜观察免疫荧光细胞化学检测培养的人肝癌细胞系SMMC-7721中NET-1抗体的表达,免疫组化法检测28例肝癌与癌旁组织中NET-1蛋白的表达。结果:(1)正常成人和胎儿肝组织中NET-1基因mRNA不表达,4例验证肝癌组织中NET-1基因mRNA均呈阳性表达;肝癌与癌旁组织中NET-1基因mRNA高表达,阳性率均为85.71%(24/28)。肝癌组织中NET-1mRNA的平均光密度显著高于癌旁组织(0.64与0.47,P<0.05)。(2)经激光共聚焦显微镜观察SMMC-7721细胞中NET-1抗体的表达定位于胞浆。(3)免疫组化检测NET-1多克隆抗体在同组肝癌和癌旁组织中NET-1蛋白检出率分别为96.43%(27/28)和71.43%(20/28),两者差异具有显著性意义(P<0.05)。(4)RT-PCR方法和免疫组化方法检测肝癌和癌旁组织中NET-1基因mRNA表达与蛋白表达两者之间阳性率无显著性差异,并呈显著性正相关(癌中r=0.48,癌旁r=0.40,均P<0.05)。结论:NET-1基因表达可能是肝癌发生的早期分子事件,该基因在肝癌诊断中可能有一定的参考价值。     

p16影响乙肝病毒相关性肝细胞肝癌的发生

目的　探讨乙肝病毒 (HBV)基因整合和p16基因表达改变及其与肝细胞肝癌发生发展的关系。方法　 35例肝癌及癌旁肝组织为标本 ,采用聚合酶链式反应 (PCR)及Southernblot检测HBVX基因整合 ,以单链构象多态性分析确定p16基因突变 ,以RT PCR检测p16mRNA ,以Westernblot检测p16蛋白。结果　肝癌中X基因整合与p16mRNA及蛋白表达相关 (P <0 .0 5 ) ,肝癌及癌旁肝组织中p16蛋白表达缺失率分别为 6 2 .9%和 4 0 .0 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;癌组织中p16蛋白表达缺失与肝癌分化程度、癌细胞浸润有相关性 (P <0 .0 5 )。结论　X基因整合与p16蛋白缺陷有关 ,p16改变在肝细胞癌变各阶段发挥重要作用 ,并与肝癌的演进和侵袭有关。     

GPC3基因在原发性肝癌中的表达意义

目的分析GPC3基因在肝癌组织和癌周组织中的表达及对原发性肝癌的诊断价值。方法从20例原发性肝癌及相对应的癌周组织提取总RNA,利用RT-PCR方法对AFP、GPC3基因进行半定量分析。结果AFP、GPC3基因在癌组织和癌周组织的表达存在显著差异,在癌组织的表达率分别为70.0%和75.0%,联合应用达80.0%,在癌周组织的表达率均为10.0%,组织AFP mRNA的表达与血清AFP相关,而GPC3 mRNA的表达不受血清AFP值影响,在血清AFP≤20 ug/l的肝癌组织中,GPC3 mRNA表达率为40.0%（4/8）。结论GPC3 mRNA在肝癌癌组织中的表达明显高于癌周组织的表达,GPC3基因对血清AFP阴性肝癌有一定的辅助诊断意义,可能是肝癌的一种新的潜在的肿瘤特异标志物。     

TC21/R-Ras 2在肝癌中的表达、亚细胞定位及意义

目的:探讨TC21基因在肝癌细胞、肝癌及癌旁组织中的表达、亚细胞定位及意义。方法:用RT-PCR检测TC 21在肝癌细胞系及人肝癌及癌旁组织中mRNA水平的表达,用免疫组化及Western印迹检测TC21蛋白在肝癌相关组织中的表达差异,用组织芯片技术结合免疫组化检测TC21蛋白的亚细胞定位。结果:RT-PCR检测结果表明TC21 mRNA在SMMC-7721、BEL-7402、Huh-7、Hep3B、HepG2、MHCC-97L、MHCC-LM3 7个肝癌细胞系及L-02和Chang liver 2株永生化人肝细胞系、7对肝癌及对应癌旁肝组织中均有较高表达;Western印迹结果表明上述细胞系中TC21蛋白表达与mRNA表达一致,TC21在4对肝癌及癌旁组织中均呈较高水平的表达;免疫组化检测结果表明TC21在人原发性肝癌、癌旁组织、硬化肝组织与正常肝组织中的表达阳性率分别为84.2%、77.2%、41.7%、0%,肝癌与肝硬化、正常肝相比显著高表达(P<0.05,P<0.01),与癌旁组织比无统计学意义(P>0.05);统计学分析结果表明TC21蛋白表达与肿瘤大小呈正相关(P<0.05),与是否肝硬化呈负相关(P<0.05);肝癌组织中TC21主要定位于肝癌细胞核,部分定位于胞质,膜定位不明显,TC21蛋白在肝癌细胞中的核定位显著高于癌旁肝细胞(P<0.001)。结论:本研究首次揭示TC21蛋白在肝癌组织中的高表达及核定位预示其在肝细胞恶性转化及肝癌发生发展中发挥重要作用。     

p27 蛋白在喉癌组织中的表达及其临床意义

目的 :探讨细胞周期调控因子p2 7蛋白在喉癌组织中的表达及临床意义。方法 :采用免疫组织化学SP法检测41例喉癌组织中 p2 7蛋白的表达 ,并与 12例癌旁正常组织作对照 ,进行比较分析。结果 :41例喉癌组织中p2 7蛋白的阳性表达率为 2 6 8% ( 11/4 1) ,12例癌旁正常组织阳性率为 5 8 3 % ( 7/12 ) ,二者差异有统计学意义 ,P <0 0 5。p2 7蛋白阳性表达率与喉癌患者的不同性别、年龄、病程、肿瘤部位、TNM分期以及淋巴结有无转移无关 ,P >0 0 5 ;患者吸烟 ( 14 3 % )和饮酒组 ( 10 0 % )与各自对照组 ( 5 3 8%和45 0 % )差异有统计学意义 ,P <0 0 5 ;与喉癌组织的病理分级差异有统计学意义 ,P <0 0 1。结论 :p2 7蛋白在喉癌的发生、发展过程中起着一定的作用 ,可作为判断喉癌恶性程度的一个重要参考指标     

肝细胞肝癌中VEGF、p53、mdm2蛋白表达及其相互关系

目的　研究肝细胞肝癌 (HCC) VEGF、p5 3、m dm2蛋白表达及其相互关系。方法　用免疫组化 S- P法或SAP法检测 HCC组织 VEGF、mdm2和 p5 3蛋白表达 ,计数微血管密度 (MVD) ,并与临床病理指标比较分析。结果　 72例 HCC中 VEGF、p5 3、mdm2蛋白阳性表达分别为 6 2 .5 %、4 1.6 %和 33.3% ;VEGF和 p5 3,VEGF和 m dm2 ,mdm2和 p5 3蛋白表达有相关性 (P<0 .0 5 )。 2 5例癌旁组织中 VEGF蛋白阳性表达为 2 0 .0 % ,m dm2蛋白阳性表达为 8.0 % ,p5 3蛋白阳性表达为 8.0 %。肝癌组织和癌旁组织 VEGF、m dm2和 p5 3蛋白表达差异有显著性 (P<0 .0 5 )。 10例正常肝组织无 VEGF、mdm2和 p5 3蛋白表达。 HCC组织中 VEGF、p5 3、mdm2蛋白阳性表达以及高MVD与血管侵犯和转移倾向明显相关 (P<0 .0 5 )。结论　 HCC组织中 VEGF、p5 3、mdm2蛋白过表达。p5 3突变和mdm2蛋白过表达 ,是 VEGF表达上调的原因之一 ,并与 HCC组织中血管侵犯和转移倾向有关     

血AFP、CEA、CA-50、CA-199联合检测对原发性肝癌的诊断价值

目的　探讨肿瘤标志物AFP、CEA、CA -5 0、CA -199联合检测对原发性肝癌的诊断价值。方法　选择原发性肝癌 32例 ,行血清AFPRIA、CEARIA、CA -5 0IRMA、CA -199IRMA检测。结果　原发性肝癌 32例血AFP、CEA、CA -5 0、CA -199四项联合检测阳性符合率 10 0 % ,而各单项检测AFP为 6 8 8% (P <0 0 1) ,CEA 15 6 % (P <0 0 0 1) ,CA -5 0 78 1% (P <0 0 5 ) ,CA -19975 % (P <0 0 5 )。在原发性肝癌AFP阴性 10例中 ,血CEA值增高 2例 (2 0 % ) ,血CA -5 0值增高 9例 (90 % ) ,血CA -199值增高 8例 (80 % )。结论　血AFP、CEA、CA -5 0、CA -199四项标志物联合检测优于各单项检测 ,CA -5 0、CA -199对血AFP阴性原发性肝癌阳性符合率高 ,血CEA原发性肝癌诊断性符合率低 ,诊断意义较小。     

端粒酶和p53及PCNA蛋白过度表达与胃癌临床病理特征的关系

目的:观察端粒酶活性、p53蛋白和增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)在胃癌组织中的表达及其与胃癌分化、浸润和转移的关系。方法:端粒重复序列扩增(telomericrepeatamplificationprotocol,TRAP)法检测58例胃癌和35例癌旁正常组织中端粒酶活性;采用免疫组化SABC法检测40例胃癌和35例癌旁正常组织中p53和PCNA的表达,并对端粒酶活性与临床病理特征以及p53和PCNA的表达的关系进行分析。结果:胃癌组织端粒酶活性、p53和PCNA阳性率分别为89%(49/55)、77.5%(31/40)和80%(32/40);癌旁正常组织端粒酶活性、p53和PCNA阳性率分别为11.4%(4/35)、8.5%(3/35)和14.2%(5/35),胃癌组织与正常组织相比差异有统计学意义,P=0.0256;胃癌不同分期及分化程度之间端粒酶活性的差异无统计学意义,P值分别为0.1741和0.0852,而且端粒酶活性与p53、PCNA表达之间无相关性,P=0.0859。结论:端粒酶活化、p53和PCNA表达均参与胃癌的发生和发展;端粒酶、p53和PCNA在胃癌分化、浸润中各自起着独立的作用;端粒酶、p53和PCNA同时高表达的患者具有较高的淋巴结转移率。     

C-erbB-2、p53、ER和PR受体在乳腺癌组织中的表达及意义

目的分析研究C—erbB-2、p53、ER、PR在乳腺癌中的表达与分期、转移关系及临床意义。方法用免疫组化法测定83例原发性乳腺癌C—erbB．2、p53、ER、PR的表达情况,进行对照比较。结果C—erbB-2、p53、ER、PR阳性表达者分别为30例（36．1％）、31例（37．3％）、45例（54．2％）、53例（63．9％）。C—erbB-2的表达与p53呈正相关（P〈0．05）,与ER、PR呈负相关（P〈0．05）。C—erbB-2和p53的表达率随着临床分期增加和淋巴结转移而增加,差异有显著性（P〈0．05）。ER、PR阳性表达率随着临床分期的递增和淋巴结转移的减少而降低,差异无显著性（P〉0．05）。ER、PR阳性表达率与C．erbB-2、p53表达呈负相关,差异无显著性（P〉0．05）。结论C—erbB-2、p53是判断乳腺癌预后的有效指标,ER、PR与临床分期及腋窝淋巴结转移有一定关系,联合检测C-erbB-2、p53、ER、PR可指导临床综合治疗。     

Detection of serum p53 antibodies in colorectal cancer patients and the clinical significance of postoperative monitoring

p53 protein overexpression was found to induce the production of antibodies in patient serum and, recently, the easy detection of serum antibodies has been made possible. The aim of this study is to determine the significance of serum p53 antibodies in patients with primary colorectal adenocarcinoma in comparison with their clinicopathological features, and the tumor marker sensitivities of carcinoembryonic antigen (CEA), carcinoma antigen 19-9 (CA19-9) and alpha-fetoprotein (AFP). Thirty-nine of 86 patients (45.3%) were positive for serum p53 antibodies. However, there was no relation with the cancer progression or clinicopathological findings. The sensitivities of CEA, CA19-9 and AFP were 36.0%, 38.4%, and 8.1% respectively, but there was no relation between serum p53 antibodies and these three markers. When the sensitivity of serum p53 antibodies and CEA was evaluated according to clinical stage, the presence of serum p53 antibodies was more significantly associated with stage 0, I and II colorectal cancer than was CEA. Thirty-three patients who showed preoperative positivity for serum p53 antibodies were followed by serial evaluation of circulating antibodies after resection. Negative conversions after resection were significantly higher in the "Cur A" group than in the "Cur B" or "Cur C" groups. Serum p53 antibodies appear to be a useful tumor marker independent of the other markers, especially in the early stage, and are expected to be useful in the development of a method of early diagnosis for mass screening, and as a postoperative monitoring marker for colorectal cancer.     

喉鳞癌中p53、p21的过度表达

为了探讨ｐ５３、ｐ２１的过度表达在喉癌发生发展中的意义，作者应用免疫组化ＡＢＣ法对５６例喉鳞癌和７例喉正常组织进行检测。结果在５６例喉鳞癌中，ｐ５３、ｐ２１阳性率分别为５１．８％和７３．２％，正常组织均为阴性。喉鳞癌的临床分期、淋巴结转移和患者术后３年生存率与ｐ５３阳性表达率关系密切，与ｐ２１阳性表达无明显关系。结果表明：ｐ５３的过度表达与喉鳞癌的不良预后有关，ｐ２１对判断喉鳞癌的预后无明显价值。     

利用组织微阵列结合免疫组化法研究PTEN、P16、P21、P53在肺癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的:肺癌的发生与PTEN、p16、p21和p53突变或失表达有关。利用组织微阵列技术研究PTEN、P16、P21、P53在肺癌中表达报道较少见。本研究目的是检测肺癌中PTEN、P16、P21和P53蛋白表达及其与肺癌侵袭、转移、临床病理特征的关系。方法:利用组织微阵列技术结合免疫组化法检测PTEN、P16、P21和P53蛋白在100例肺癌组织和相应的癌旁组织中的表达。结果:肺癌组织中PTEN、P16、P21和P53蛋白的阳性率分别为31%(31/100)、38%(38/100)、42%(42/100)、53%(53/100),其癌旁组织中的阳性率分别为85%(85/100)、75%(75/100)、80%(80/100)、23%(23/100)。肺癌组织中PTEN、P16和P21蛋白阳性率显著低于其相应癌旁组织,而P53蛋白在癌组织中呈高表达,但癌旁组织呈低表达(P<0.05,P<0.01)。肺癌组织中PTEN与P21两者呈共同低表达(P<0.05)。PTEN、P16、P21和P53的表达与肺癌临床分期以及肺鳞癌和腺癌的病理分级有关(P<0.05,P<0.01)。有淋巴结转移者PTEN、P16和P21呈低表达而P53高表达(P<0.05,P<0.01)。结论:肺癌中存在PTEN、P16、P21蛋白的共同低表达和突变型P53蛋白高表达;PTEN、P16和P21低表达和突变型P53蛋白高表达与肺癌侵袭、转移有关。     

血清CEA、SF、AFP联合检测对肝转移癌的诊断价值

目的　探讨肝转移癌患者血清中CEA、SF、AFP检测及临床意义。方法　检测 134例肝转移癌和183例原发性肝癌血清的CEA、SF、AFP。结果　原发性肝癌的CEA、SF和AFP阳性率分别为 2 0 2 2 % ,81 4 2 %和 6 1 75 % ,肝转移癌的CEA、SF和AFP阳性率分别为 87 31% (P <0 0 1) ,72 39% (P >0 0 5 )和5 2 2 % (P <0 0 1)。肝转移癌化疗前后的血清CEA有显著性差异 (P <0 0 1)。结论　检测CEA对肝转移的诊断、治疗及预后有明显的指导意义。     

血清AFP、CA125、CA199和CEA联合检测在原发性肝癌诊断中的价值

目的 通过联合检测血清AFP、CA125、CA199、CEA四种肿瘤标志物的含量,观察其对原发性肝癌(PHC)的诊断价值.方法 运用电化学发光免疫分析的方法,检测PHC组68例、良性肝病组50例及健康对照组58例血清中AFP、CA125、CA199、CEA的含量,分析各肿瘤标志物的灵敏度、特异性、准确度及联合检测的临床意义.结果 单独检测AFP、CA125、CA199、CEA对PHC的诊断阳性率分别为76.4%、35.3%、44.1%、29.4%;联合检测四种肿瘤标志物的阳性率为94.1%.结论 四种肿瘤标志物的联合检测有助于提高PHC患者的诊断阳性率.