HPD对人胃癌细胞不同周期时相的光敏杀伤效应观察

体外培养的人胃癌细胞于高压N_2O下培养及过量TdR的阻断与释放,分刖制备出同步的G_1、s、G_2、M期细胞。观察各期细胞对HPD的摄取和杀伤效应关系。表明不同周期时相的细胞对HPD的摄取和杀伤效应呈正相关,S期细胞对HPD的摄取量最高,杀伤作用最强,M期细胞对HPD的摄取量最低,杀伤作用最弱。此外,还研究了Hu、Fu—o—G与HPD联合应用的协同杀伤作用,其杀伤率均高于单纯加药组与单纯HPD加光照组。     

体外人癌细胞与成纤维细胞对血卟啉衍生物摄取、存留及光敏杀伤效应的实验研究

应用荧光光度术对人胃低分化粘液腺癌细胞、人鼻咽癌上皮样细胞以及人二倍体成纤维细胞进行了HPD的摄取和存留的定量研究;并做了HPD加光照的光敏杀伤效应的比较实验。此外,对HPD的“亲水部分”和“疏水部分”的光敏杀伤效应进行了比较。HPD在人胃癌细胞及鼻咽癌细胞内的存留多于成纤维细胞。HPD的“亲水部分”的光敏杀份效应大于“疏水部分”。     

光动力疗法中不同激光条件癌肿杀伤效果的比较

本文报告应用两种不同波长激光为 PDT(光动疗法)的激光源,对小鼠移植肿瘤进行杀伤实验。结果表明:在相同光剂量下,HPD—氩离子泵浦的染料激光(波长6 300(?))对肿瘤杀伤的效果强于 HPD—氩离子激光(波长5 145(?))(P<0.01);同一波长激光在光剂量相同时,采用不同的瞬间功率,对肿瘤杀伤的效果相同(P>0.20)。     

癌光啉和PhotofrinⅡ对人体肿瘤细胞系光敏杀伤作用的比较

本文报道癌光啉(代号PsD-007)和photofrin Ⅱ对人体肿瘤细胞系杀伤效应的比较。结果表明,在相同浓度和相同光照剂量处理细胞时,PsD-007对人体肝癌细胞系SMMC-7721和人体胃癌细胞系NGCC-8310的光敏杀伤效应至少相当于或略优于Photofrin Ⅱ。实验提示,一定浓度的PsD-007和Photofrin Ⅱ作用细胞时,光敏杀伤效应随光辐照剂量的增加而增强;在一定光照剂量处理细胞时,一定浓度范围内,光敏杀伤效应随光敏剂浓度的增加而增强。     

肿瘤坏死因子在宫颈细胞系表达及其杀伤作用

①目的　探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)mRNA在宫颈细胞系的表达及TNFα对宫颈细胞系的杀伤作用。②方法　采用非放射性核素原位杂交法 ,检测了 3个传代的宫颈细胞系TNFαmRNA的定位表达 ;同时采用LDH释放细胞毒实验 ,观察TNFα对传代的人宫颈癌细胞系的杀伤作用 ,以及人干扰素 (IFNr)对TNFα产生的细胞毒性的协同作用。③结果　TNFαmRNA在SiHa和W 12细胞中有阳性表达 ,NCx细胞无阳性表达。TNFα对宫颈良、恶性肿瘤细胞均有微弱的细胞毒作用 ,而IFNr与TNFα联用则对宫颈癌来源的细胞系具有明显杀伤作用 (F=11.2 5 ,P <0 .0 1) ,对来源于正常、良性肿瘤的细胞系则无明显作用 (F =1.15、1.2 3,P >0 .0 5 )。④结论　宫颈人乳头瘤病毒感染对细胞内TNFα表达有促进作用 ;TNFα对宫颈细胞系具有杀伤作用 ,而且IFNr能促进这种杀伤作用。     

血卟啉-红光照射对人肝癌细胞和横纹肌肉瘤细胞的杀伤效应观察

本文报道用细胞培养方法观察HPD和普通宽谱红光照射对人肝癌细胞及横纹肌肉瘤细胞的杀伤效应,结果表明,HPD和红光照射对两株细胞均有明显的杀伤作用,与对照组比较相差显著(P<0.05)而两种不同组织起源的恶性肿瘤细胞的光敏杀伤效应无明显差异(P>0.05),在不同浓度的HPD组,其杀伤效应无明显差异(P>0.05)。实验组细胞内DNA,RNA较对照组数量减少,分布不均,初步表明,光敏治癌的机制可能与光敏作用致使细胞内代谢紊乱,进而抑制了瘤细胞的DNA、RNA合成有关。     

单克隆抗体与血卟啉衍生物交联物的制备及其对胃癌靶细胞的杀伤作用

以碳二亚胺(EDCI)为连接剂,将血卟啉衍生物(HPD)与抗胃癌单克隆抗体18M(McAb18M)共价交联。经ELISA法测定及溶血试验表明,该交联物保留了McAb的反应特性及HPD的光故活性。体外试验表明,交联物对靶细胞的光动力杀伤效率提高了11.2倍,对非靶细胞的杀伤作用微弱,表明HPD—McAb具有特异杀伤作用。对游离HPD及交联HPD的吸收光谱,荧光激发光谱及发射光谱的分析比较表明,二者均有一定的差异。     

单克隆重抗体与血卟啉衍生物交联物抗胃癌作用的实验研究

为了提高血卟啉衍生物HPD的光敏效应,减低副作用,将其与抗胃癌McAb3G9和3H11交联.体外实验中,3G9～HPD交联物+照光比单用HPD对胃癌细胞株BGC823的细胞毒效应提高17倍,3H11-HPD交联物提高8.6倍.将两种交联物进行不同比例组合,组合后的杀伤效应未见进一步增高.两种交联物对荷瘤裸鼠的抑瘤效应明显高于各对照组,并且能显著延长荷瘤小鼠的生存期.表明McAb对HPD有导向作用.     

血卟啉加激光照射对人体肝癌细胞系(SMMC-7721)作用的初步实验研究

本文报道用细胞培养方法,观察血卟啉衍生物(HPD)加激光照射对人体肝癌细胞的杀伤作用。实验结果显示,HPD(50μg/ml)对7721细胞的生长无影响,单独用激光(光距5.6cm,光斑直径3.8cm,功率21mW/cm~2)照射培养细胞20分钟,细胞的形态也无明显改变,但在培养液内加HPD后再用激光照射,细胞即可出现损伤,并随HPD浓度的增加和激光照射功率的加强,对7721人体肝癌细胞可见明显的杀伤作用。为了区分细胞损伤的程度,本文提出了细胞形态变化的分类法。 我们在实验中还发现:培养细胞在HPD加激光照射后,绝大多数细胞发生变性坏死,但其中尚有部分细胞存活而呈岛状分布,作者提出,这是由于激光束分布不均匀性所造成,并对过去HPD加红激光照射肿瘤的治疗中,仍有部分病例复发的原因提出了新的解释。因此,临床在用激光连续照射治疗肿瘤时,必须作顺序移动照射。     

t al Department of Pathology, Qingdao Medical College, Qingdao 2660

①目的探讨肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）对肿瘤细胞的杀伤作用,并观察重组人干扰素（ＩＦＮγ）对ＴＮＦα细胞毒性的协同作用。②方法采用非同位素细胞毒试验,对３个子宫颈来源的细胞系进行传代培养,与ＴＮＦα接触后检测其杀伤细胞情况。③结果ＴＮＦα对子宫颈良、恶性肿瘤细胞均呈微弱的细胞毒作用,而ＩＦＮγ与ＴＮＦα联用则对宫颈癌来源的细胞系具有明显杀伤作用（Ｆ＝１１．２５,Ｐ＜０．０１）,对源于正常、良性肿瘤的细胞系则无明显作用（Ｆ＝１．１５,１．２３,Ｐ＞０．０５）。④结论ＴＮＦα对肿瘤细胞具有杀伤作用,且ＩＦＮγ能促进这种杀伤作用     

人中性粒细胞多肽体外杀伤肿瘤细胞的实验研究

目的：观察人中性粒细胞多肽（ｈｕｍａｎ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ,ＨＮＰ）对实体瘤胃细胞系和卵巢癌细胞系的毒性作用．方法：采用噻唑蓝（ＭＴＴ）法检测细胞杀伤活性．结果：ＨＮＰ对胃癌细胞系和卵巢癌细胞 的毒性作用呈剂量和时间依赖性,在１００ｍｇ／Ｌ,８ｈ,杀伤率达８７％,比较二者的毒性作用,其差异不显著．结论这两种肿瘤细胞均具有显著的毒性作用,该毒性作用在这两种肿瘤细胞中无特异选择性．     

肿瘤坏死因子对肿瘤细胞杀伤作用的观察

探讨肿瘤坏死因子对肿瘤细胞的杀伤作用,并观察重组人干扰素对ＴＮＦα细胞毒性的协同作用。方法采用非同位素细胞毒试验,对３个子宫颈来源的细胞系进行传代培养,与ＩＦＮα接触后检测其杀伤细胞情况。     

微波对人体及小鼠的正常与恶性细胞系杀伤作用的初步观察(简报)

近年来,国内外常用微波作为肿瘤加温治疗的一种手段。然而,关于微波杀伤肿瘤细胞的能量问题报道不一,亦未见有有关微波对体外培养人体癌细胞系杀伤作用的描述。本文旨在用各种不同能级的微波照射多种人体及小鼠的正常与恶性细胞系,探讨在微波辐射后细胞形态改变以及微波杀伤作用的机制。实验用我所研制的实验动物微波杀生器发生的不同能级微波,照射人体食管癌Eca109细胞系,HeLa细胞系,人体子宫颈癌801克隆,小鼠畸胎瘤F_9细胞系,小鼠 B_16黑色素瘤细     

树突状细胞体外激活的CTL杀伤效应

目的 :研究树突状细胞 (dendriticcell,DC)激活的肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的特异性杀伤效应。方法 :从人外周血中分离出外周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcell,PBMC) ,在GM -CSF和IL - 4的作用下培养 7天诱导出DC ,然后PBMC或DC为刺激细胞在体外诱导出HBsAg特异性CTL ;在调节好一定浓度靶细胞 (人肝癌细胞系HepG2及人肺腺癌细胞系A5 4 9)中加入效应细胞 (DC或PBMC) ,4 8h后瑞氏染色计数残存细胞数 ,计算杀伤率。结果 :DC激活的CTL对HepG2 杀伤率为 71.6 % ,而PBMC(APC ,非T细胞 )激活的CTL杀伤率为 4 3.8% ,两者有显著性差异 ,P <0 .0 1。此外 ,DC诱导的肝癌细胞抗原特异性CTL对肺癌细胞的杀伤率仅为 2 3%。结论 :DC诱导的CTL比PBMC高效 ,而且具有较高的特异性。     

抗EGFR/CD3双特异性抗体的制备与功能的初步研究

目的 构建抗表皮生长因子受体(anti-EGFR)和抗CD3(anti-CD3)的双特异性抗体(anti-EGFR/CD3),并在体外初步评价其杀伤肿瘤的功能. 方法 通过基因工程技术,利用 knobs-into-holes模式分别构建表达anti-EGFR-HC-knob、anti-EGFR-LC和anti-CD3-scFV-HC-hole的载体,共同转染 Expi 293F细胞,表达双特异性抗体,依次用抗体特异的亲和层析和分子排阻层析进行纯化,再用流式细胞仪和实时无标记细胞功能分析仪评价其体外结合能力和体外肿瘤杀伤功能. 结果 成功获得较高纯度的抗体.流式细胞仪体外结合实验结果显示,双特异性抗体能够同时与EGFR+的U87 Ⅷ脑胶质瘤细胞系、HCT-116结肠癌细胞系和CD3+的Jurkat T 淋巴瘤细胞系结合,具有2种抗体的功能,同时还能很好地激活T细胞(P<0.0001);在体外杀伤效果方面,双特异性抗体作用后杀伤效果明显高于其他抗体和对照组(均为 P<0.0001),具有很好的杀伤效果. 结论 用knobs-into-holes技术获得的anti-EGFR/CD3具有较好的生物活性,为双特异性抗体的肿瘤免疫治疗奠定了一定的基础.     

可溶性HLA-G1抑制人自然杀伤细胞NK92 对猪内皮细胞PED的黏附

目的 研究可溶性HLA-G1(HLA-G5)对人自然杀伤细胞(NK细胞)黏附到猪血管内皮细胞(PED)的抑制作用,从而降低人NK细胞对猪血管内皮细胞杀伤杀伤活性.方法 利用核转染技术将pcDNA3-HLA-G5转入LCL721.221细胞株.以RT-PCR、Dot-ELISA技术分别在基因水平和蛋白水平检测HLA-G5的表达;以人类NK细胞系(NK92)效应细胞,猪内皮细胞系(PED)为靶细胞,检测NK92在静止和流动状态下对PED的黏附作用;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HLA-G5抑制NK细胞的杀伤活性.结果 与未加入HLA-G5的对照组相比,NK92在静止和流动状态下对PED的黏附功能明显降低(P＜0.01),且对HLA-G5组PED的杀伤效率均有明显下降(P＜0.01).结论 HLA-G5可以通过抑制NK92对PED的黏附功能,来减轻NK92对PED的杀伤作用.     

巨噬细胞对转染粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的胰腺癌细胞株PC-3的杀伤作用

目的 研究巨噬细胞对转染粒细胞-巨噬细胞细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因后的胰腺癌细胞系PC-3的杀伤作用。方法 巨噬细胞由小鼠腹腔注射ConA刺激后分离培养而获得。通过脂质体转染法,将含GM-CSF基因的质粒及空质粒转染至PC-3细胞。以上基因的表达由Western blot免疫印迹法鉴定。采用Cal-cein-AM释放法行巨噬细胞杀伤试验以评估GM-CSF对肿瘤免疫调节作用。结果 巨噬细胞对转染GM-CSF基因后的PC-3细胞杀伤率较空质粒组显著增高(P<0.001)。结论 GM-CSF能增强巨噬细胞杀伤PC-3细胞的能力,提示GM-CSF对于胰腺癌的免疫治疗有潜在价值。     

白血病细胞系K562可以诱导外周血NK细胞凋亡

摘要：目的探讨红白血病细胞系K562对自然杀伤细胞（NK cells）诱导凋亡的作用。方法利用MACS免疫磁珠阴性分选纯化
健康志愿者外周血NK细胞,用重组人白介素-2（rhIL-2）和干细胞培养液培养、观察NK细胞。把NK细胞与人红白血病细胞系
K562按不同效靶比例和作用时间混合培养,用PE-AnnexinV/7-AAD凋亡试剂盒检测这两种细胞各自的凋亡情況。结果免疫
磁珠分选后NK细胞纯度为（93.99±4.22）%;K562细胞诱导NK细胞凋亡作用时,在相同效靶比情况下,随着共培养时间的延长,
NK细胞凋亡率显著增高;在相同培养时间的情况下,随着效靶比降低,NK细胞凋亡率逐渐升高,杀伤活性逐渐减低。结论红
白血病细胞系K562可以诱导活化的NK细胞凋亡,这有可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸的机制之一。
     

光敏剂对激光治疗肿瘤的增敏作用

目的探讨光敏剂对激光治疗肿瘤的增敏作用。方法采用细胞动力学方法探讨4种光敏剂对激光杀伤、抑制肿瘤细胞的增敏作用的异同。结果4种光敏剂对激光杀伤、抑制肿瘤细胞均有增敏作用,叶绿素、019、酞青酯和HPD的增敏效果依次增强。结论光敏剂有助于提高激光对肿瘤的杀伤、抑制作用,为提高激光治疗肿瘤效果提供参考。     

LAK细胞对直肠腺癌细胞杀伤的观察

采用体外培养方法,在恒温(37℃)和5％CO_2条件下,连续观察LAK细胞对直肠腺癌细胞系(HR8348)的结合率。杀伤活性及杀伤动态。结果表明:HR8348细胞对LAK细胞杀伤较敏感,在相同的效靶比例条件下,4h时效靶细胞结合率为52.0±3.6,LAK细胞杀伤率为49.0±2.3％。效靶细胞结合率及杀伤率呈正相关(P<0.01),LAK细胞的杀伤取决于效靶细胞的稳定结合。LAK细胞杀伤HR8348的动态过程是:效靶细胞主动趋向运动→相互识别→接触与结合→LAK细胞发挥杀伤作用→靶细胞溶解。LAK细胞杀伤作用随效靶共育时间延长乃效靶比例的增高而增强。