我国汉、回和藏族部分人群HEV感染的血清学调查

目的了解我国不同民族的健康人群戊型肝炎病毒感染情况。方法采用ELISA方法检测人群血清中戊型肝炎病毒（戊肝,HEV）IgG抗体。汉族人群血清分别来自于四川、北京、黑龙江和山东,回族和藏族人群血清来自于甘肃、宁夏和青海,总共10448份血清采集于2006—2008年。结果七省市人群HEV抗体总阳性率为17．97％（1878／10448）。汉、回和藏不同民族人群HEV抗体阳性率分别为24．32％（1794／7376）、3．59％（81／2258）和0．37％（3／814）。不同地区人群HEV抗体阳性率分布,四川、北京、黑龙江和山东汉族人群阳性率分别为27．45％、20．30％、22．89％和22．68％,甘肃汉和回族分别为24．63％（184／747）和6．12％（77／1258）,宁夏回族和青海藏族分别0．40％和0．37％。汉回藏不同民族各年龄组人群HEV感染分布,汉族各年龄组人群HEV抗体阳性率,在≤10岁年龄组为5．19％,11～20岁组为11．64％,21～30岁组为20．08％,31～40岁组为34．17％,41—50岁为41．75％,51～60岁组为48．58％,≥61岁组为57．43％。回族人群各年龄组人群HEV抗体阳性率依次为3．11％,3．96％,2．11％,3．98％,2．52％,4．57％和6．67％。藏族人群3份阳性者分布在21—30岁组、31—40岁组和51～60岁组各1份,阳性率为0．63％、0．58％和1．01％。结论汉族人群戊肝病毒感染明显高于回族和藏族,感染率随年龄增长而升高。回藏族人群HEV抗体阳性率低下,应加强对HEV感染的监测。     

登革热疫点22年后的血清流行病学调查

目的了解曾发生登革热流行的旧疫区健康人群抗登革病毒的抗体水平及分布。方法在1986年曾爆发Ⅱ型登革热疫情的黄埔区鱼珠街一带,对2周内无临床症状的健康人群横断面采样,收集血清,ELISA法检测血清中抗登革病毒IgG抗体,并和非疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率进行比较。RT—PCR法检测抗体阳性者血清中登革病毒。结果登革热疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率为23.3％,非疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率为3．8％,两者差异有统计学意义（P〈0．01）;登革热疫点人群抗体阳性率与年龄成正相关,0～20、21～30、31—40、41～50、51—60、61～70和70岁以上各年龄组的抗体阳性率分别为3．8％、5．8％、9．1％、26．5％、27．7％、32．5％和35．1％。30岁以下年龄组与31～40岁年龄组、31～d0岁年龄组与41～60岁年龄组、41-60岁年龄组与61岁年龄组间的抗登革病毒IgG抗体阳性率差异分别具有统计学意义（P〈0．05）。登革热疫点和非疫点15岁以下中小学生滤纸血样标本中均未检测到抗登革病毒IgG抗体。RT—PCR法未检测到抗体阳性者血清中有登革病毒。结论登革热疫点人群抗登革病毒IgG阳性率明显高于非疫点人群,疫点人群抗体阳性率随年龄增长而上升,提示登革热疫点在登革热疫情后,登革病毒可能在蚊媒体内存在低密度的循环。     

陕西、青海、新疆三省(区)部分人群庚型肝炎病毒血清学调查

目的：调查陕西、青海、新疆三省（区）部分人群庚型肝炎病毒（HGV／GBV）血清学特征。方法：采用ELISA方法，共调查三省（区）1469份血清中GBV－IgG抗体。结果：少数民族血清GBV－IgG抗体的阳性率（藏族4．11％，蒙古族5．36％，维吾尔族4．55％，回族4．00％）略高于汉族（1．36％－1．73％），但差异无显著性（P＞0．05）；吸毒人群GBV－IgG阳性率（11．30％，34／301）明显高于正常人群（2．44％，18／736），（P＜0．01）；献血员GBV－IgG阳性率为1．02％－7．68％。结论：三省区民族间GBV－IgG抗体阳性差异无显著性，血源性传播是其重要途径，应加强对献血员及吸毒人员的监管。     

SARS患者特异性SARS-CoV抗体变化的观察

目的　研究SARS患者特异性SARS CoV抗体IgG、IgM动态变化规律 ,探讨机体感染SARS CoV后免疫应答的可能模式及流行病学意义 ,为科学的防治SARS提供理论依据。方法　ELISA测定北京地区最早感染SARS CoV的 3条传播链的SARS患者 4 7例 ,12 4份血清中SARS CoV特异性抗体IgG、IgM。其中 ,山西链 9人 ,13份血清 ;香港链 31人 ,84份血清 ;北京链 7人 ,2 7份血清。结果　 3条传播链SARS患者IgM阳性率 73% ,IgG阳性率 86 %。IgM最早于发病第 6天出现 ,阳性率高峰在病程 2～ 3周 ;持续时间短 ,1月后 6 0 %患者IgM逐渐阴转。IgG最早也可在发病第 6天出现 ,阳性率高峰在病程 3～ 4周 ,3月后IgG抗体阳性率减少。机体感染SARS CoV后 ,抗体出现有 3种模式。结论　机体感染SARS CoV后 ,近 90 %患者可出现特异性IgG ,病程 3～ 4周阳性率最高 ;特异性IgM抗体在病程2～ 3周阳性率最高 ,但多数只持续 2 0～ 30d。特异性IgG抗体表现 3种免疫应答模式。     

深圳市肠道病毒71型血清流行病学初步调查

目的探讨深圳市不同人群肠道病毒71型血清流行病学规律。方法收集1999—2003年深圳地区正常人血清584份，按年龄0-岁、1-岁、2-岁、5-岁、15-岁和〉30岁分成6个组，用ELISA方法对其肠道病毒71型抗体进行检测。结果1999—2003年深圳地区正常人血清中肠道病毒71型抗体阳性率最高的年龄组为5-岁组，阳性率超过50％；15-岁和〉30岁组血清阳性率分别为47．7％和39．8％；2．岁血清阳性率约为30％，其中0-岁和1-岁两个低年龄组的血清阳性率最低。不超过20％。结论5岁以下低年龄儿童是肠道病毒71型的易感人群。     

SARS相关冠状病毒M蛋白基因重组核酸疫苗的实验研究

目的：构建针对SAILS相关冠状病毒M蛋白基因的重组核酸疫苗，观察其免疫小鼠后肌体的抗体产生情况，探讨其作为抗SAILS病毒疫苗的可能性。方法：通过分子生物学的方法构建SARS相关冠状病毒M蛋白基因真核表达质粒pcDNA3．1／M。经肌注免疫健康BALB／c小鼠，在免疫后的2．4、6周取小鼠血清，用ELISA法检测其中的抗体。结果：接种含M基因的真核表达质粒pcDNA3．1／M的低剂量组和高剂量组的小鼠血清在接种2周后就可检测出SARS-CoV特异性IgG，第4周时，这种特异性IgG水平有升高趋势，第6周时，血清中的抗体含量与4周时无大的差异。高剂量组产生抗体与低剂量组产生抗体无显著差异。pcDNA3．1空载体接种的对照组未检测出特异性抗体（其OD值低于0．18）。结论：构建的真核表达质粒pcDNA3．1／M能诱导小鼠产生了针对SARS的抗体。     

福建北部政和县斯氏并殖吸虫病新疫区调查

目的了解福建北部政和县病例所在地肺吸虫流行情况。方法对病例所在乡村进行人群感染情况以及传播宿主调查。结果政和县西表村人群皮试阳性率7．53％（28／372）,其中5～岁与21～岁年龄组皮试阳性率分别为9．76％（12／123）和6．43％（16／249）;男、女性皮试阳性率分别为9．50％（17／179）和5．70％（11／193）,年龄组及男女性别皮试阳性率无显著差别。皮试阳性者的ELSAS阳性检出率为35．71％（10／28）,其中5～岁与21．岁组ELESA血清抗体阳性率分别为66．67％（8／12）和12．50％（2／16）,两年龄组ELESA血清抗体阳性率具显著性差异。小桥拟钉螺与建欧拟小豆螺的斯氏并殖吸虫尾蚴感染率分别为1．02％和0．08％。福建华溪蟹和福建博特溪蟹的斯氏并殖吸虫尾蚴感染率分别为80．6％和33．3％。结论政和县存在高度感染的斯氏并殖吸虫病流行区．青少年为本病的防治重点。     

广州市番禺区人群b型流感嗜血杆菌多糖抗体水平调查

目的了解番禺区全年龄组人群抗b型流行性感冒（流感）嗜血杆菌荚膜多糖（Hib．PRP）自然抗体水平和儿童免疫后抗体水平。方法用酶联免疫吸附试验检测509份不同年龄组健康人群和80份健康儿童血清的抗Hib多糖抗体。结果人群血清抗Hib。PRP抗体总阳性率为69．4％,随着年龄的增长,抗体水平逐渐上升,31岁以上的人群血清抗Hib—PRP抗体阳性率达到80％以上;儿童完成全程免疫后,抗体水平增长,12～36月儿童的抗体阳性率达到78．9％,但未完成全程免疫的儿童,抗体阳性率较低。结论番禺区人群抗Hib多糖自然抗体水平较高,未完成全程免疫的儿童抗体阳性率较低。     

人冠状病毒229E、OC43与SARS-CoV血清学相关性的研究

目的 检测正常人和SARS患者血清中3种人冠状病毒（229E、OCA3和SARS-CoV）特异性抗体．分析3种冠状病毒血清学相关性。方法 采用免疫印迹、免疫荧光和ELISA方法检测100例健康献血员、34例SARS患者恢复期以及11例SARS患者双份血清中229E、OCA3和SARS-CoV3种冠状病毒核衣壳（N）蛋白抗体。结果 用免疫荧光方法检测100例健康献血员血清中229E、OCA3和SARS-CoV IgG阳性率分别为98％、100％和1％，34例SARS患者恢复期血清中3种冠状病毒IgG的阳性率均为100％；免疫印迹检测100例健康献血员血清中229E、OCA3和SARS-CoVN蛋白IgG阳性率分别9r7％、99％和2％，34例SARS患者恢复期血清中229E、OCA3和SARS-CoVN蛋白IgG阳性率分别97％、100％和100％；11例SARS患者的急性期和恢复期双份血清中，免疫荧光检测有5例出现229E IgG滴度4倍或以上升高，10例出现OC43 IgG滴度4倍或以上升高，ELISA检测2例出现229EN蛋白IgG滴度4倍以上升高，没有一例出现OCA3N蛋白抗体滴度升高。结论 正常人群中普遍存在229E和OCA3两种人冠状病毒抗体，SARS-CoV感染者存在对人冠状病毒229E和OCA3血清学交叉反应，提示核衣壳蛋白不是引起血清学交叉反应的主要抗原，结果对研究SARS溯源有重要意义。     

对儿童肺炎支原体特异性抗体的实验室检测及方法学分析

目的对呼吸道感染患者进行肺炎支原体检测，以期协助临床早诊断早治疗，并对常用检测方法进行分析。方法对1060例呼吸道感染者同时做冷凝集试验并用。结果1060例呼吸道感染者，检出Mp特异性抗体阳性201例，阳性率18、9％。（3岁、-6岁、-14岁、〉14岁4个年龄组Mp特异性抗体阳性率分别为8、7％（28／320）、23．5％（95／402）、33．1％（71／214）、5．6％（7／124）。在201例临床诊为Mp感染的病例中，抗-Mp—IgG阳性131例，敏感性63.5％，抗-Mp—IgM阳性177例，敏感性85．9％例，冷凝集实验阳性99例，敏感性48．1％，抗-Mp—IgM敏感性较冷凝集实验高（P〈0.05）。结论间接免疫荧光法检测血清Mp抗体是目前较稳定可靠的检测方法，可作为早期诊断Mp感染的指标之一。     

严重急性呼吸综合征患者相关病毒的随访监测及意义

目的 随访监测确诊SARS患者,研究SARS-CoV、新型呼肠病毒和脊髓灰质炎病毒在患者体内的存在状况及与SARS的可能相关性.方法 采集8例SARS患者痊愈2年后的咽拭子、唾液（或痰液）、尿液、血清及连续3天的粪便标本,用RT-PCR的方法分别扩增SARS-CoV、呼肠病毒和脊髓灰质炎病毒;采用ELISA的方法检测患者血清中的SARS-CoV抗体和脊髓灰质炎病毒IgG抗体.结果 8例患者中有4例的粪便中脊髓灰质炎病毒RNA阳性,均为Sabin 1毒株,在5′端非编码区的第480nt及VP1蛋白编码区的第2795nt两个重要的减毒位点上均发生了回复突变;SARS-CoV和新型呼肠病毒均阴性.对照组标本中均未检测到上述三种病毒.3例随访患者血清中SARS-CoV抗体阳性;4例患者血清中脊髓灰质炎IgG抗体阳性.25例健康体检者的血清中SARS-CoV抗体均阴性,其中23例的血清中脊髓灰质炎病毒抗体阳性.结论SARS患者痊愈2年后的血清中特异性脊髓灰质炎病毒抗体与健康人有显著差异,其粪便标本中仍有较高的脊髓灰质炎病毒阳性率,而且病毒核酸在两个重要的减毒位点上均发生了回复突变.     

传播链和非传播链SARS患者中SARS冠状病毒抗体的分布及变化规律

目的　探讨人体对SARS CoV血清抗体反应及分布规律。方法　对 30 1例临床诊断病例的血清标本 (其中传播链上的病例 15 8例 ,非传播链病例 14 3例 ) ;采用北京华大GBI生物技术有限公司生产的间接ELISA试剂 ,进行SARS CoVIgG抗体的检测 ,部分病例还进行了SARS CoVIgM的检测。结果　传播链涉及 15条 ,最多涉及 4代 ,各条链的SARSIgG抗体阳性率为 85 70 %～ 10 0 .0 0 % ,总阳性率为 94 30 % (14 9 15 8)。SARS病例数随代数增加而减少。但各代间IgG阳性率的差异无显著意义 ;χ2 =5 11,P >0 0 5。非传播链病例的血清抗体阳性率为 12 5 9% (18 14 3)。与传播链的阳性率比较 ,两者间的差异有显著意义 ;χ2 =199 6 4 ,P <0 0 0 1。在发病后的 0～ 7d、8～ 14d、15～ 2 1d、2 2～ 30d内 ,SARS CoVIgG的累计阳性率分别为 16 6 7%、4 0 0 0 %、70 0 0 %、93 10 % ;然后进入平台期 ,并可以维持 6个月以上。在发病 7d内 ,SARS CoVIgM的累计阳性率为 16 6 7% ,8～ 14d时 ,已有 5 5 17%的标本IgM抗体阳转 ,在 2 1～ 30d时 ,抗体阳性率达高峰 (86 96 % ) ,以后迅速下降。结论　SARS感染后 ,94 %的感染者可产生IgG抗体。检测该抗体可以作为临床核实诊断的依据。SARS CoVIgG抗体在 7d时可能检出 ,一般在 4周达     

Comparison of immunoglobulin G responses to the spike and nucleocapsid proteins of severe acute respiratory syndrome (SARS) coronavirus in patients with SARS

Both the nucleocapsid (N) and the spike (S) proteins of severe acute respiratory syndrome (SARS)-associated coronavirus (SARS-CoV) are able to induce strong humoral responses in humans following an infection. To compare the immunoglobulin G (IgG) responses to the S and N proteins of SARS-CoV in SARS patients during the manifestation/convalescent period with those during the postinfection period, serum samples were collected from hospitalized SARS patients within 6 weeks after the onset of illness (set 1; 57 sequential samples from 19 patients) or 2 to 3 months after their recovery (set 2; 33 postinfection samples from 33 subjects). Serum samples from 100 healthy blood donors (set 3), collected in 2002, were also included. The specific IgG response to whole virus, the fragment from positions 450 to 650 of the S protein (S450-650), and the full-length N protein of SARS-CoV were measured by enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs). Western blot assays were carried out to confirm the ELISA results. Fifty-one of the serum samples in set 1 (89%) bound to the N protein, a proportion similar to that which recognized whole virus (79%) and the S-protein fragment (77%). All 33 serum samples from set 2 were strongly positive for N-protein-specific IgG, while 27 (82%) were positive for anti-S450-650 IgG. Two of the serum samples from set 3 were strongly positive for anti-N-protein IgG but not anti-S450-650 IgG. Similar levels of IgG responses to the S and N proteins were observed in SARS patients during the manifestation and convalescent stages. In the postinfection period, however, a number of patients had much lower serum IgG levels against S450-650 than against the N protein.     

Recombinant nucleocapsid protein-based IgG enzyme-linked immunosorbent assay for the serological diagnosis of SARS

The recombinant nucleocapsid protein (rNP) of severe acute respiratory syndrome (SARS) coronavirus (SARS-CoV) was expressed in a baculovirus system. The purified SARS-CoV rNP was used as an antigen for detection of SARS-CoV antibodies in IgG enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The ELISA was evaluated in comparison with neutralizing antibody assay and the authentic SARS-CoV antigen-based IgG ELISA. Two-hundred and seventy-six serum samples were collected from health care workers in a hospital in which a nosocomial SARS outbreak took place and used for evaluation. The SARS-CoV rNP-based IgG ELISA has 92% of sensitivity and specificity compared with the neutralizing antibody assay and 94% sensitivity and specificity compared with the authentic SARS-CoV antigen-based IgG ELISA. The results suggest that the newly developed SARS-CoV rNP-based IgG ELISA is a valuable tool for the diagnosis and seroepidemiological study of SARS. The SARS-CoV rNP-based IgG ELISA has an advantage over the conventional IgG ELISA in that the antigen can be prepared by laboratory workers without the risk of infection.     

重组人干扰素α-2b喷雾剂预防SARS等呼吸道病毒感染的人群试验研究

目的评估重组人干扰素α2b喷雾剂(远策素喷雾剂)预防SARS等常见呼吸道病毒感染的效果。方法研究对象共14391人,用药剂量为90万IU/次,每日2次,连用5d,未次用药后15d取血,或用药前和用药3周后采取双份血清。采用随机、对照方法检测血清抗SARSCoVIgG抗体;采用双盲、随机、安慰剂对照方法测定血清抗常见呼吸道病毒(B型流感病毒、副流感病毒1～3型,呼吸道合胞病毒及腺病毒3、7型)的血清IgM抗体。结果两次实验中,干扰素组血清SARS病毒IgG抗体阳性率均较试验组高,但差异无统计学意义(P>0.05)。但用药组应用干扰素后副流感病毒1～3型,B型流感病毒,腺病毒3、7型和呼吸道合胞病毒IgM抗体阳性率(依次为6.45%、4.52%、4.30%和17.20%)均低于对照组(依次为19.40%、13.60%、7.12%和25.62%)。其中副流感病毒、B型流感病毒、腺病毒3种病毒IgM抗体阳性率差异均有统计学意义(P<0.01)。结论应用远策素喷雾剂鼻和咽部喷雾能不同程度地降低用药人群常见呼吸道病毒的感染率。     

SARS患者康复期血清特异性抗体效价检测

目的：SARS患者康复期血清特异性抗体的效价。方法：采用间接酶联免疫法和双抗原夹心法。结果：SARS患者康复期血清特异性抗体IgG水平在住院第5周达最高值，IgM水平在住院第3周达到最高值。SARS患者康复期血清IgG水平是IgM的1～7倍。住院5～7周的SARS康复期患者，其血清特异性抗体检测阳性率达100％。结论：SAPS患者康复期血清特异性抗体水平在住院第5周达到最高值，其阳性检出率达100％。     

严重急性呼吸综合征患者IgG抗体的研究

目的　探讨血清特异性IgG抗体检测对严重急性呼吸综合征 (SARS)临床诊断的意义及影响因素。方法　用华大公司研制的SARS冠状病毒抗体 (IgG)酶联免疫试剂盒 ,对部分住院SARS患者的血清进行IgG抗体检测 ,统计分析不同年龄、性别和激素使用患者的SARS特异性抗体的产生情况。结果　在确诊的 12 1例患者中 ,IgG抗体阳性率为 71 1% ,年龄 <15岁、15～ 5 9岁和 6 0岁以上的患者 ,阳性检测率分别为 6 0 0 %、70 2 %和 85 7% ,差异无显著意义 (P =0 76 6 ) ;使用激素和不使用激素的患者 ,阳性率分别为 70 6 %和 72 4 % (P =0 84 ) ;病重和病情较轻患者的阳性检测率分别为78 1%和 6 7 4 % (P =0 4 93) ;男性和女性患者检测率均为 71 1%。结论　SARS特异性IgG抗体检测的敏感性有待进一步提高 ,IgG抗体的产生与性别、年龄、病情轻重和激素的使用无显著性关系。     

Detection of specific antibodies to severe acute respiratory syndrome (SARS) coronavirus nucleocapsid protein for serodiagnosis of SARS coronavirus pneumonia

We report the evaluation of recombinant severe acute respiratory syndrome (SARS) coronavirus (SARS-CoV) nucleocapsid protein enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)-based antibody tests for serodiagnosis of SARS-CoV pneumonia and compare the sensitivities and specificities of this ELISA for detection of immunoglobulin G (IgG), IgM, IgA, and their combinations with serum samples from 149 healthy blood donors who donated blood 3 years ago as controls and 106 SARS-CoV pneumonia patients in Hong Kong. The specificities of the ELISA for IgG, IgM, and IgA detection were 95.3, 96.6, and 96.6%, respectively, with corresponding sensitivities of 94.3, 59.4, and 60.4%, respectively. The present ELISA appears to be a sensitive test for serodiagnosis of SARS-CoV pneumonia, is much more economical and less labor-intensive than the indirect immunofluorescence assay, and does not require cultivation of SARS-CoV.     

Immunogenicity of SARS inactivated vaccine in BALB/c mice

Severe acute respiratory syndrome (SARS) is a serious infectious threat to public health. To create a novel trial vaccine and evaluate its potency, we attempted to generate a SARS inactivated vaccine using SARS coronavirus (SARS-CoV) strain F69 treated with formaldehyde and mixed with Al(OH)3. Three doses of the vaccine were used to challenge three groups of BALB/c mice. We found that the mice exhibited specific IgM on day 4 and IgG on day 8. The peak titers of IgG were at day 47 in low-dose group (1:19,200) and high-dose group (1:38,400) whereas in middle-dose group (1:19,200), the peak was at day 40. On day 63, the IgG levels reached a plateau. Neutralization assay demonstrated that the antisera could protect Vero-E6 cells from SARS-CoV's infection. Analysis of the antibody specificity revealed that the mouse antisera contained a mixture of antibodies specifically against the structure proteins of SARS-CoV. Furthermore, the mouse antisera conferred higher amount of antibodies against protein N, polypeptide S4 and S2 than those of proteins M and 3CL. These findings suggest that the inactivated SARS-CoV could preserve its antigenicity and the inactivated vaccine can stimulate mice to produce high levels of antibodies with neutralization activity. Results also suggest that polypeptides originating from protein N or S might be a potential target for the generation of a recombinant SARS vaccine.