吲哚-3-甲醇酸性代谢产物辐射防护作用的研究

目的 探讨吲哚-3-甲醇(I3C)酸性代谢产物的辐射损伤防护作用.方法 采用细胞克隆形成实验检测细胞的存活分数;采用Western Blot方法检测蛋白表达水平.结果 采用正常纤维上皮细胞184A1,发现7种I3C酸性代谢产物表现出不同的辐射损伤防护效果,其中CTET(1μmol/L)、LTET(1μmol/L)、HI-IM(1 μmol/L)和3,3'-二吲哚甲烷(DIM)(0.3 μmol/L)4种代谢产物在细胞γ-射线照射前24 h预处理细胞均不同程度地提高了辐照细胞的存活分数,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),而CT(1μmol/L)、LTr-1(1 μmol/L)和ICZ(1μmol/L)3种代谢产物则对辐照细胞存活分数无影响(P＞0.05).进一步研究发现CTET、LTET、HI-IM和DIM可导致ATM、BRCA1和NBS1蛋白磷酸化水平的改变.同样,CT、LTr-1和ICZ对这些蛋白的磷酸化水平不产生影响.另外,HI-IM可明显降低辐射损伤诱导的细胞坏死和细胞凋亡.结论 CTET、LTET、HI-IM和DIM 4种I3C酸性代谢产物可明显降低184A1细胞的辐射敏感性,即具有辐射防护作用,其机制可能与其调节DNA损伤与修复蛋白磷酸化和细胞凋亡有关.     

吲哚-3-甲醇对甲醛合次硫酸氢钠致小鼠急性毒性及精子畸形率的影响

目的确定甲醛合次硫酸氢钠（又名吊白块）半数致死剂量LD50，并了解吲哚-3-甲醇对吊白块LD50及对吊白块所致小鼠精子畸形的影响。方法采用改进寇氏法测定吊白块LD50及联合应用吲哚-3-甲醇和吊白块后并持续给予吲哚-3-甲醇，观察吊白块LD50及精子畸形的变化。结果吊白块NIH小鼠经口灌胃LD。为8711mg／kg·bw，联合应用吲哚-3-甲醇和吊白块可降低吊白块急性毒性（LD。为10000mg／kg·bw）（P〈0．05），并可显著降低吊白块致精子畸形的发生（P〈0．05）。结论根据国家标准评价，吊白块毒性分级属实际无毒级；持续摄入一定浓度水平的吲哚-3-甲醇可有效降低吊白块的急性毒性，且对低剂量吊白块所致精子畸形具有一定的预防作用。     

吲哚-3-甲醇对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖和凋亡的影响

目的探讨吲哚-3-甲醇（13C）对人肝癌细胞株SMMC．7721的增殖和凋亡的影响。方法不同浓度的13C（100、150、200、250、300、350Ixmol／L）处理细胞48h后,显微镜下观察细胞生长状况;采用WST-1法检测细胞增殖情况,Hoehest33258染色、TUNEL染色检测细胞凋亡情况,Westernblot法检测凋亡相关蛋白。结果13C能够抑制SMMC．7721细胞增殖,诱导细胞凋亡,处理浓度在250μmol／L以下时,细胞生长变慢;处理浓度达到300μmol／L时,大量细胞凋亡。13C浓度高于200μmol／L时CytC、Cleavedcaspase．9和Cleavedcaspase．3蛋白表达明显增加,且随着13C浓度的增加三种蛋白的表达也明显增加。结论13C在体外实验条件下可抑制人肝癌细胞株SMMC．7721增殖并诱导其发生凋亡。     

吲哚胺2，3-二氧化酶与母胎免疫

吲哚胺2，3-二氧化酶(IDO)是色氨酸经犬尿氨酸途径代谢的限速酶，可抑制免疫细胞尤其是T细胞增殖，并通过多种机制调节免疫。抗原呈递细胞和胎盘滋养细胞表达IDO，调节母胎免疫，保护胎儿免受母体T细胞攻击。IDO抑制剂1-甲基色氨酸可通过旁路途径激活补体，引发母胎界面以T细胞依赖性、抗体非依赖性的补体沉积和出血性坏死为特征的广泛炎症，导致同种异基因胎儿排斥。     

吲哚胺2,3-双加氧酶与树突状细胞

吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)是降解必需氨基酸色氨酸的限速酶,广泛表达于各种组织和细胞,在感染或炎症期间其表达量明显增高.而树突状细胞(DC)是专职的抗原提呈细胞,IDO在其内的表达可影响DC的表型和功能,进而抑制T细胞的免疫反应.研究IDO和DC的关系对深入理解IDO在免疫系统中的作用以及开发新的免疫调节策略都具有重要意义.     

吲哚胺2,3-二氧化酶与母胎免疫

吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)是色氨酸经犬尿氨酸途径代谢的限速酶,可抑制免疫细胞尤其是T细胞增殖,并通过多种机制调节免疫。抗原呈递细胞和胎盘滋养细胞表达IDO,调节母胎免疫,保护胎儿免受母体T细胞攻击。IDO抑制剂1-甲基色氨酸可通过旁路途径激活补体,引发母胎界面以T细胞依赖性、抗体非依赖性的补体沉积和出血性坏死为特征的广泛炎症,导致同种异基因胎儿排斥。     

吲哚胺2,3-双加氧酶1在胃癌中的研究进展

胃癌 (Gastric Cancer,GC) 是全球第五大最常见的恶性肿瘤,也是第四大癌症死亡相关原因。胃癌异质性明显,肿瘤微环境复杂,免疫检查点抑制剂虽然在晚期胃癌中展现出一定抗肿瘤疗效,但获益人群仍在少数。吲哚胺2,3-双加氧酶 1 (Indoleamine 2,3-Dioxygenase 1,IDO1) 是色氨酸沿犬尿氨酸途径代谢中的关键酶,对肿瘤免疫逃逸起到了关键作用。目前已有多项研究表明IDO1在胃癌发生发展及幽门螺杆菌感染和EB病毒感染中发挥重要作用,所以靶向IDO1有望成为胃癌免疫治疗的新策略。本文就IDO1作用机制、IDO1在胃癌及相关疾病中的研究进展及IDO1抑制剂在胃癌中的应用前景进行综述。     

吲哚胺2，3-二氧化酶转染供体可抑制大鼠肝移植的急性排斥反应

背景：吲哚胺2,3-二氧化酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)表达于免疫特赦器官中,能选择性诱导T细胞免疫耐受。 目的：观察腺病毒相关质粒载体介导IDO转染供体对大鼠肝移植急性排斥反应的抑制作用。 方法：构建携带IDO的重组腺病毒质粒pWCM-IDO,建立PVG/DA大鼠肝移植模型48对,随机分为3组,生理盐水组、pWAV2组、pWCM-IDO组分别腹腔注射生理盐水、pWCM悬液和pWCM-IDO悬液1 mL。 结果与结论：pWCM-IDO可成功转染PVG供体肝脏,PWCM-IDO组生存期和IDO表达明显高于生理盐水组和pWAV2组(P < 0.05~0.01);移植后第4天PWCM-IDO组急性排反应程度明显弱于其他2组。提示IDO的重组腺病毒质粒可成功转染大鼠肝脏,缓解急性排斥反应,但难以持续有效表达,对免疫排斥的抑制作用有限。     

吲哚胺2,3二加氧酶与自身免疫性疾病

自身免疫性疾病的发病机制主要在于机体自身耐受的破坏，机体产生自身抗体和（或）自身反应性淋巴细胞，导致疾病的发生。最近很多研究表明，吲哚胺2，3-二加氧酶（indoleamine 2，3-dioxygenase，IDO）催化的色氨酸代谢与自身免疫耐受机制有关，表达IDO的细胞能够抑制T细胞免疫应答，在自身免疫性疾病的发病机制中起重要作用。因而研究IDO介导色氨酸代谢途径可以为阐明自身免疫疾病的发病机制和治疗自身免疫性疾病提供一种全新的观念。     

吲哚美辛对造血调控的影响

吲哚美辛是临床上广泛使用的一种非甾体类抗炎药。它通过抑制ＰＧＥ２ 合成，阻抑ＰＧＥ２的造血抑制作用，对放、化疗后的骨髓造血功能具有一定的保护作用；此外，它通过激活体内免疫杀伤系统杀伤白血病细胞或直接作用于白血病细胞，起抑制增殖、促进分化、诱导凋亡及介导多药耐药的逆转作用     

吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)的免疫调节作用

吲哚胺 2 ,3双加氧酶 (indoleamine 2 ,3 dioxygenase ,IDO )是肝脏以外唯一可催化色氨酸沿犬尿酸途径分解代谢的限速酶 ,在哺乳动物的组织与细胞 ,尤其是淋巴组织和胎盘中广泛表达。它通过降解局部组织中的色氨酸 ,在诱发宿主免疫防御、抑制T细胞免疫和抗肿瘤免疫、诱导母胎免疫耐受和移植物免疫耐受中均发挥重要的代谢性免疫调节作用。     

SOCS3和吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)在早孕绒毛和蜕膜组织中的表达呈负相关

目的探讨人早孕时细胞因子信号传送阻抑物3(SOCS3)及吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)在母胎界面的表达及其相关性。方法用Western blot法检测正常妊娠绒毛、蜕膜组织中SOCS3及IDO的表达。结果正常妊娠绒毛及蜕膜组织中均有IDO及SOCS3蛋白的表达,SOCS3与IDO表达呈高度负相关。SOCS3在绒毛和蜕膜组织中的表达无差异,而IDO在蜕膜组织中表达较高。结论在正常生理妊娠状态下,母胎界面中SOCS3参与调节IDO的表达,在妊娠免疫耐受的调节中起重要作用。     

单细胞蛋白质组图谱鉴定3,3′-二吲哚甲烷诱导乳腺癌的干细胞特性

目的 3,3’-二吲哚甲烷（DIM）是一种由吲哚-3-甲醇转化而来的二聚体化合物,被认为在乳腺癌化学预防药物具有应用前景。本研究首次从单细胞水平探讨了DIM诱导乳腺癌干细胞（CSC）的可塑性。方法 采用MTT法检测细胞增殖。流式细胞仪检测MCF-7细胞周期分布和凋亡情况。采用单细胞质谱流式技术（CyTOF）检测DIM诱导的MCF-7细胞的单细胞蛋白质组学特征及其对CSCs的可塑性。结果 DIM呈浓度依赖性抑制MCF-7细胞增殖。当DIM浓度为10、20、30μmol/L时,DIM分别诱导7%、11.3%和15%的细胞凋亡,S期细胞比例分别由16.6%降至15.1%、14%和8.5%,流式细胞仪检测结果显示,DIM处理后MCF-7细胞CD133+Nanog+亚群比例明显增加。SPADE分析显示DNA损伤和凋亡阳性细胞主要发生在干性标志表达相对较低的类群中。通过t-SNE分析,DIM诱导的信号通路蛋白在非CSC样细胞和CSC样细胞中的变化模式有显著差异。结论 上述结果提示DIM在抑制MCF-7细胞增殖的诱导肿瘤干细胞的可塑性。     

Vav1在吲哚胺2,3双加氧酶抑制T细胞中的作用初探

目的:探讨吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)抑制T细胞中信号传导分子Vav1的分子机制.方法:应用稳定表达IDO的CHO细胞株,与纯化的外周血T细胞共孵育,检测IDO抑制T细胞增殖,诱导凋亡的情况,通过semi-quantitative RT-PCR检测T细胞中Vav1、IL-2 mRNA表达变化;Western blot及免疫沉淀技术检测Vav1蛋白表达及活化情况.结果:IDO可抑制T细胞的增殖.T细胞中Vav1和IL-2 mRNA水平明显下降(P<0.05).而且,IDO还能使Vav1蛋白的表达和磷酸化水平降低.结论:研究证实在肿瘤局部产生于抗原呈递细胞或肿瘤细胞的IDO,可能通过抑制细胞内重要的信号传导蛋白Vav1的表达和磷酸化过程,使肿瘤浸润淋巴细胞的主动免疫受损,有利于肿瘤发生免疫逃逸.     

吲哚美辛对乳腺癌细胞体外迁移能力的影响研究

目的 观察吲哚美辛对乳腺癌细胞系MCF-7体外迁移能力的影响,探讨可能存在的机制.方法 采用Transwell实验方法检测吲哚美辛刺激后MCF-7细胞的迁移能力,运用流式细胞术、Real-timePCR及ELISA方法分别检测吲哚美辛刺激后MCF-7细胞中趋化因子受体(CXCR4)、环氧合酶(COX-2)、表皮生长因子受体( EGFR)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况.结果 吲哚美辛刺激组MCF-7细胞的迁移能力较未刺激组明显降低;吲哚美辛可呈时间-剂量依赖性地抑制MCF-7细胞表面CXCR4的表达,并显著下调细胞中CXCR4、COX-2和EGFR mRNA水平的表达,但对VEGF的产生并无明显的影响.结论MCF-7细胞中CXCR4、COX-2和EGFR表达的显著下调,可能是吲哚美辛抑制MCF-7细胞体外迁移能力的重要机制.     

吲哚美辛通过Akt/GSK3β/NAG-1信号通路诱导胃癌细胞的凋亡

目的: 探讨非选择性环氧合酶抑制剂吲哚美辛诱导胃癌细胞凋亡作用与Akt/GSK3β/NAG-1信号通路的关系。方法: MTT法测定胃癌细胞的活力;Hoechst 33258 染色检测细胞形态学改变,流式细胞术检测DNA 含量的变化,Western blotting检测蛋白表达的变化。结果: 吲哚美辛通过caspase通路诱导胃癌细胞MGC-803的凋亡,明显降低Akt和GSK3β的磷酸化水平,同时上调NAG-1的表达。单独抑制PI3K或Akt的活性亦可上调NAG-1的表达,而GSK3β抑制剂预处理后则取消吲哚美辛上调NAG-1表达的作用。结论: 吲哚美辛可通过Akt/GSK3β/NAG-1信号通路诱导胃癌细胞MGC-803的凋亡。     

吲哚美辛对结肠癌复发转移患者免疫及凝血状态的影响

为评价吲哚美辛对结肠癌复发转移患者免疫及凝血状态的影响,收集2016年7月至2017年12月于复旦大学附属闵行医院收治的37例结肠癌术后复发转移患者为结肠癌组,予吲哚美辛栓塞肛治疗2周(100 mg/次,1次/d)。另选40例健康体检者为健康对照组。采用全自动血细胞分析仪计数结肠癌患者应用吲哚美辛前后及健康对照者外周血细胞,计算中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR);ELISA测定外周血IL-1、TNF-α水平;流式细胞术检测外周血T细胞亚群;血栓弹力图记录凝血状态。结果显示,结肠癌组患者NLR、PLR及外周血IL-1、TNF-α水平较健康对照组明显升高(P0.05),应用吲哚美辛2周后,患者NLR、PLR及外周血IL-1、TNF-α水平较用药前下降(P0.05);结肠癌组患者CD4~+T细胞表达率、CD4~+/CD8~+比值及NK细胞活性较健康对照组明显下降(P0.05),应用吲哚美辛2周后,患者上述免疫功能指标较用药前有所提升(P0.05);与健康对照组比较,结肠癌组患者血栓弹力图指标中反应时间(reaction time,R)缩短,ɑ角(angle alpha,ANG)和最大振幅(maximum amplitude,MA)增大(P0.05),应用吲哚美辛2周后,患者R值延长,ANG和MA减小(P0.05)。提示结肠癌复发转移患者处于免疫抑制及高凝状态,应用吲哚美辛可调节其免疫、凝血状态。     

早孕绒毛及蜕膜组织中酪氨酸磷酸酶-1 / 2( SHP-1,SHP-2) 与吲哚胺2,3-双加氧酶( IDO) 的表达及其相关性

目的:研究母胎界面中吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)及酪氨酸磷酸酶-1/2(SHP-1,SHP-2)的表达及其相关性,以探索母胎免疫耐受的新机制。方法:30 例正常早孕6 ~8 周妇女行人工流产获取绒毛及蜕膜组织,用Western blot 方法检测绒毛、蜕膜组织中的酪氨酸磷酸酶-1/2(SHP-1、SHP-2)与IDO 的蛋白表达,分析IDO 与SHP-1、SHP-2 的相关性。结果:人早孕绒毛及蜕膜组织中均有SHP-1、SHP-2 的表达,与IDO 的表达呈正相关;SHP-1、SHP-2 和IDO 在蜕膜组织中的表达均高于绒毛;结论:在正常生理妊娠状态下,母胎界面中SHP-1、SHP-2可能参与调节IDO 的表达,在维持母胎界面的免疫耐受状态起着重要作用。     

siRNA干扰14-3-3ζ基因可体外促进人胃癌SGC-7901细胞凋亡

目的探讨siRNA干扰14-3-3ζ基因对人胃腺癌细胞系SGC-7901增殖凋亡的影响及其作用机制。方法利用siRNA干扰技术降低14-3-3ζ基因的正常表达的SGC-7901细胞为实验组,siRNA-control的对照组和未加处理的空白组。用实时荧光定量PCR和Western blot检测14-3-3ζ基因mRNA的表达水平和蛋白表达水平;CCK8实验检测各组SGC-7901细胞的增殖;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;Western blot检测周期和凋亡相关蛋白P53、cyclin D1、PUMA、Bax和Bcl-2。结果 siRNA干扰组14-3-3ζ基因的mRNA和蛋白表达水平低于空白组和对照组(P0.05);CCK8检测细胞增殖较对照组显著降低(P0.05);siRNA干扰组细胞周期G0/G1的比率较对照组高,而G2/M和S期则显著降低(P0.05);siRNA干扰组的细胞凋亡率也显著升高(P0.05);相关通路蛋白在siRNA干扰组中cyclin D1和Bcl-2表达降低,P53、PUMA、Bax蛋白表达增高(P0.05)。结论 siRNA干扰14-3-3ζ可以通过P53通路,下调cyclin D1抑制SGC-7901细胞增殖并阻滞周期,上调PUMA、Bax蛋白和下调Bcl-2蛋白促进细胞凋亡。     

吡咯烷螺二吲哚对非小细胞肺癌A549细胞活力及凋亡的影响

目的:探讨吡咯烷螺二吲哚对人非小细胞肺癌A549细胞活力及凋亡的影响。方法:用不同浓度(25、50和100 mg/L)的吡咯烷螺二吲哚处理A549细胞24 h,通过CCK-8法测定吡咯烷螺二吲哚对细胞活力的影响,流式细胞术分析细胞凋亡情况,Western blot法检测吡咯烷螺二吲哚对p53和PARP表达及m TOR磷酸化的影响。结果:不同浓度的吡咯烷螺二吲哚处理A549细胞后,细胞的活力较DMSO对照组明显下降(P 0.01),细胞的凋亡率较DMSO对照组明显升高(P 0.01)。与DMSO对照组相比,吡咯烷螺二吲哚可以诱导p53的表达并诱导PARP切割,抑制m TOR的磷酸化水平(P 0.01)。结论:吡咯烷螺二吲哚诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与抑制m TOR的磷酸化有关。