星形胶质瘤中的Laminin阳性细胞

本研究以１５例星形胶质细胞瘤，２例脑膜瘤的瘤组织为材料，经４％多聚甲醛常规固定，冰切４０μｍ，每１例相邻切片分别用ＬＮ和ＧＦＡＰ抗体孵育，用免疫组化ＡＢＣ法观察基膜素（ＬＮ）和胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）在星形胶质细胞瘤中的表达及分布。结果发现在各级星形胶质瘤中均见有ＬＮ和ＧＦＡＰ阳性细胞；同１例ＬＮ和ＧＦＡＰ生细胞的形态，数量，分布及染色强度基本相似；其染色类型有两种：一种为胞体及突起均着色，呈     

人脑胶质细胞系CHG—5的建立及其生物学特性的分析

目的：建立一人脑胶质瘤细胞系并探讨其生物学特性。方法：取胶质瘤新鲜手术标本,经组织圮法培养并克隆、建株,采用光镜、电镜、免疫组化、流式细胞术、染色体分析及异种移植瘤实验对细胞株生物学特性进行观察。结果：原位肿瘤、细胞株及移植瘤标本经电镜证实为星形细胞源性,免疫组化呈ＧＦＡＰ、Ｖｉｍｅｎｔｉｎ及ＶＥＧＦ阳性,异种移植成瘤率高。与ＳＨＧ－４４细胞比较,ＧＦＡＰ表达强,Ｖｉｍｅｎｔｉｎ表达弱。结论：ＣＨ     

人脑胶质瘤细胞系CHG-5的建立及其生物学特性的分析

目的：建立一人脑胶质瘤细胞系并探讨其生物学特性。方法：取胶质瘤新鲜手术标本,经组织块法培养并克隆、建株,采用光镜、电镜、免疫组化、流式细胞术、染色体分析及异种移植瘤实验对细胞株生物学特性进行观察。结果：原位肿瘤、细胞株及移植瘤标本经电镜证实为星形细胞源性,免疫组化呈ＧＦＡＰ、Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ及ＶＥＧＦ阳性,异种移植成瘤率高。与ＳＨＧ－４４细胞比较,ＧＦＡＰ表达强,Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ 表达弱。结论：ＣＨＧ－５为一恶性胶质瘤细胞系,且其生物学特性可能与ＳＨＧ－４４细胞有所不同。该细胞高表达血管生成因子     

大鼠生后脑星形胶质细胞发育的形态学观察

目的：观察大鼠生后脑星形胶质细胞发育特征，推测其在大鼠脑发育中的作用。方法：采用胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）抗体进行免疫组化染色。结果：促大鼠脑ＧＦＡＰ阳性星形胶质细胞的分布于生后３个月达成体状态；②室管膜区及室管膜下区辐射状ＧＦＡＰ阳性细胞不明显，整个大脑ＧＦＡＰ阳性细胞形态相对单一。③海马和齿状回的ＧＦＡＰ阳性细胞呈规则的分层排列。结论：大鼠脑星形胶质细胞发育较晚，提示其对神经元迁移的引导作用     

体外鼠脑星形胶质细胞损伤后c-fos蛋白、GFAP及其mRNA的动态表达

研究ｃ－ｆｏｓ蛋白、ＧＦＡＰ—ｍＲＮＡ和ＧＦＡＰ在鼠脑星形胶质细胞（ａｓｔｒｏｃｙｅ，ＡＳ）损伤后反应性星形胶质化时的动态变化。用ＡＳ原代培养技术建立体外ＡＳ机械损伤模型．并结合应用免疫组织化学和原位杂交方法．结果：（１） ｃ－ｆｏｓ蛋白于损伤后 ４５ ｍｉｎ即有阳性表达，伤后 ２ ｈ消失； （２损伤边缘的 ＡＳ于损伤后 ６ ｈ开始表达 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ， １ｄ达高峰，３ ｄ则在损伤边缘少数 ＡＳ中可检出 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ；（３）损伤后 １ｄ，ＧＦＡＰ表达明显增强，胞体肥大，粗大突起伸向损伤区形成反应性星形胶质化。结论：（ｌ） ＡＳ受损后原癌基因 ｃ－ｆｏｓ首先被激活，ｃ－ｆｏｓ蛋白呈－过性的表达，参与调节ＡＳ的激活；（２）ＡＳ损伤后，ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ的转录增加，ＧＦＡＰ表达增强是由于在转录水平上ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ表达增强的结果；（３）反应性星形胶质化是ＡＳ的自身特性，以ＡＳ肥大为主，ＡＳ受损后，原癌基因ｃ－ｆｏｓ的蛋白参与调节ＡＳ激活的确切机制尚待阐明。     

大鼠脑损伤后波形蛋白和胶质纤维酸性蛋白的表达及意义

以胶质纤维酸性蛋白（ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌｌａｒｙａｃｉｄｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＡＰ）和波形蛋白（ｖｉｍｅｎｔｉｎ，Ｖｉｍ）为标记，观察针刺损伤大鼠脑基底节后反应性星形胶质化（ｒｅａｃｔｉｖｅａｓｔｒｏｇｌｉｏｓｉｓ）的发展过程。针刺后第四天Ｖｉｍ表达达到高峰，以后在较低水平上持续于实验全过程。Ｖｉｍ阳性细胞主要分布在伤口周边，但在第四天一过性出现于伤口同侧附近的大脑皮质。ＧＦＡＰ反应性表达增强则在７～１５ｄ达到高峰，且累及范围广，反应强度强。结果显示：反应性星形胶质化以原有星形胶质细胞的肥大为主，星形胶质细胞增生仅限于伤口周围。本文报道的同侧大脑皮质一过性的Ｖｉｍ表达的意义尚待阐明。     

去甲二氢愈创木酸对恶性胶质瘤细胞裸鼠移植瘤的作用

探讨去甲二氢愈创木酸对恶性胶质瘤细胞裸鼠移植瘤的作用,方法采用光镜和电镜观察移植瘤细胞的形态变化,用流式细胞仪进行细胞周期分析;用免疫组化检测肿瘤细胞中ＧＦＡＰ、ＰＣＮＡ的蛋白表达情况。结果（１）ＮＤＧＡ可明显降低裸鼠移植瘤的成瘤率;（２）ＮＤＧＡ能抑制移植瘤细胞的生长和诱导其分化,使细胞增殖受阻于Ｇ１→Ｓ期。结论：ＮＤＧＡ在体内与体外有相同的抗胶质瘤作用。     

体外鼠脑星形胶质细胞损伤后c—fos蛋白,GFAP及其mRNA的动态…

研究ｃ－ｆｏｓ蛋白，ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ和ＧＦＡＰ在鼠脑星形胶质细胞损伤后反应性星形胶质化时的动态变化。用 ＡＳ原代培养技术建立体外ＡＳ机械损伤模型，并结合应用免疫组织化学和原位杂交方法。结果（１）ｃ－ｆｏｓ蛋白于损伤后４５ｍｉｎ即有阳性表达，伤后２ｈ消失Ｄ（２）损伤缘的ＡＳ于损伤后６ｈ开始表达ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ，１ｄ达主同峰，３ｄ则在损伤边缘少数ＡＳ中可检出ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ；（３）损伤后１ｄ，Ｇ     

脑胶质瘤的免疫组织化学研究…

应用免疫组织化学技术对１６０例脑胶质瘤进行了１２种凝集素受体的染色标记，并对其在脑胶质瘤中的分布特征和同良、恶性分化程度的关系进行了研究。结果表明：ＣｏｎＡ、ＲＣＡ受体在良性星形细胞瘤中的阳性率均明显高于各自在恶性星形胶质瘤中的表现（Ｐ＜０．０５），即肿瘤的恶性程度同阳性反应强度呈负相关，可作为判定星形胶质瘤分化程度的指标。ＷＧＡ受体在良性少突胶质细胞瘤中的阳性率明显高于其在恶性少突胶质细胞瘤中的阳性率（Ｐ＜０．０５）。ＬＣＡ、ＰＮＡ和ＰＳＡ受体在良性室管膜瘤中的阳性率明显高于恶性室管膜瘤中的阳性率（Ｐ＜０．０５）。作者认为，ＷＧＡ、ＬＣＡ、ＰＮＡ和ＰＳＡ受体在判别这些肿瘤的分化程度上有参考价值。髓母细胞瘤经免疫组化染色发现有为数极少的、散在分布的、不同程度着色的阳性细胞出现，从其形态、位置、分化程度上推测可能是有向星形细胞分化潜能的瘤细胞和（或）为瘤组织发生时残存的星形细胞。     

胶质瘤150例临床病理分析

目的 观察胶质瘤演进异质化的细胞学分化特征,分析其对临床治疗和预后的影响.方法 收集 2005年 1 月～ 2006年9月在我院神经外科手术切除的150例胶质瘤病人的病理及临床资料,组织学观察、分析.结果 150例胶质瘤中共有69例(46%)瘤细胞出现2种以上胶质细胞分化特征,5%星形细胞瘤、77%间变性星形细胞瘤、26%少突胶质细胞肿瘤、60%胶质母细胞瘤及全部7例混合型胶质细胞瘤内部均出现2种以上组织学分化特征;8例复发型星形细胞肿瘤中,6例(75%)出现2种以上组织学分化特征.结论 星形细胞肿瘤在不断演进的过程中,其异质化的组织学分化特征也不断明显,进一步研究胶质瘤的组织学分化特征将会对胶质瘤的临床治疗及预后产生积极影响.     

培养大鼠星形胶质细胞牵张损伤后超微结构的变化

目的研究体外培养星形细胞牵张损伤后超微结构的变化。方法取新生1~2 d大鼠的皮层细胞原代培养,经纯化后传代培养于乳胶膜培养皿中。采用计算机控制的牵张损伤装置,分别以50、150、250 kPa压力牵张损伤培养于乳胶膜上的大鼠皮层星形胶质细胞。用3%戊二醛固定后,行扫描电镜和透射电镜观察。结果当用50 kPa驱动压力进行牵张损伤时,细胞结构即有明显破坏,表现为细胞间隙增宽,部分胞体和突起被撕裂;以50 kPa牵张损伤后1 h,透射电镜下可见线粒体肿胀、嵴减少;损伤后6 h可见线粒体致密、细胞器减少等。当牵张应力增大,星形细胞损伤程度加重,细胞器明显减少,线粒体空泡化,微丝、微管明显减少,直至水样胞质或致密胞体。结论较小的应力即可致星形细胞紧密连接的破坏和超微结构的改变,可能与脑外伤后产生广泛的脑水肿有关。     

Ultrastructural features of cultured rat cortical astrocytes with stretch-induced injury]

OBJECTIVE: To investigate the changes of ultrastructural features of cultured rat cortical astrocytes after stretch-induced injury. METHODS: Rat cortical astrocytes isolated from 1- to 2-day-old rats were cultured till confluency, and then plated in tissue culture wells with flexible silastic bottom after purification. A computer-controlled device was used to produce stretch-induced injury in the astrocytes with the imposed pressure of 50, 150, and 250 kPa respectively, followed by observation of the ultrastructural changes in the astrocytes with light and electron microscopy. RESULTS: Obvious ultrastructural destruction of the astrocytes occurred when the imposed stretch pressure was 50 kPa, and scanning electron microscopy demonstrated increased intercellular space and laceration of the cell body and its processes. Transmission electron microscopy revealed mitochondria swelling 1 h after stretch-induced injury and 6 h after the injury, vacuolar degeneration of the mitochondria occurred. Increased stretch pressure caused further decrease in the amount of glial filaments and densification of astrocytes. CONCLUSIONS: Stress, even at a relatively small scale, can cause disruption of intercellular juncture and ultrastructural change of the cultured astrocyte, which may be related with extensive brain edema after traumatic brain injury.     

Apoptin对C6胶质瘤细胞凋亡的诱导作用

目的：探索apoptin对C6胶质瘤细胞凋亡的诱导作用。 方法：构建荷C6胶质瘤Wistar大鼠的肿瘤模型,随机分为荷瘤对照组、化疗对照组和pvVP3组,给予不同的药物,通过超微结构分析、TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡率,观察apoptin诱导C6胶质瘤细胞的凋亡情况。 结果：pvVP3组肿瘤细胞异染色质边集,细胞核固缩,凋亡小体形成,而荷瘤对照组则未见明显凋亡改变。TUNEL法检测肿瘤细胞pvVP3组凋亡率为51.11%,明显高于荷瘤对照组(28.96%)(P<0.01)。 结论：apoptin能够诱导C6胶质瘤细胞凋亡。     

星形细胞瘤及其瘤细胞凋亡的研究:透射电镜与原位细胞凋亡检测

目的 :探讨星形细胞瘤瘤细胞及其凋亡的超微结构变化 ,为阐述肿瘤内在的生物学行为寻找形态学依据 ,分析瘤细胞凋亡与肿瘤恶性转化的关系。方法 :收集本院神经外科手术标本 ,应用透射电镜及原位细胞凋亡试剂盒对星形细胞瘤进行观察和检测。结果 :电镜下发现瘤细胞胞浆内胶质丝与发育不良 /幼稚的细胞器并存 ;瘤细胞核核内假性包涵体 ;瘤细胞间缺乏细胞连接。原位细胞凋亡检测显示 ,星形细胞瘤中低分级组瘤细胞凋亡的细胞密度明显高于高分级组 (P <0 .0 1)。结论 :瘤细胞凋亡的细胞密度随着肿瘤级数的增高而降低 ,提示星形细胞瘤瘤细胞的增殖和凋亡失衡 ,即瘤细胞无限制性增生和 /或瘤细胞不能进入凋亡。这可能是星形细胞瘤发生发展的重要因素。     

α-Synuclein immunoreactivity and ultrastructural study of glial cytoplasmic inclusions in multiple system atrophy

Objective To understand the possible pathogenesis of sporadic multiple system atrophy (MSA). Methods The immunoreactivity and ultrastructural features of glial cytoplasmic inclusions (GCIs) in 12 autopsy patients with MSA and 4 normal control groups were studied. All regional sections from each subject were evaluated with HE staining, Klüver-Barrera (KB), Holzer’s, modified Gallyas-Braak’s (GB) methods and immunohistochemical staining with α-synuclein and ubiquitin antibodies. Pontine white matter with abundant GCIs from case 1 was examined, using conventional electron microscopy, Gallyas-Braak’s]electron microscopy and immunoelectron microscopy. Results The presence of GCIs as constantly demonstrated in all MSA patients. Strong α-synuclein immunoreactivity was observed in all of the ubiquitinated GCIs. However, the density of α-synuclein positive GCIs differed from case to case, and there was no relationship between the density of GCIs and age, sex, or MSA subtype. Ultrastructural features indicated that argyrophilic granule-associated filaments of about 25 nm in diameter were the predominant constituents of GCIs, and the anti α-synuclein antibody selectively labeled in these filaments. No GCIs and α-synuclein immunoreaction were found in control brain tissues. Conclusions GCI was a pathognomonic change in sporadic MSA patients. Accumulation of α-synuclein in GCIs may occur during the early stags of MSA. Seletcive α-synuclein positive abnormal microtubules in GCIs therefore play an important role in the pathogenesis of MSA.     

放射性粒子125I对胶质瘤细胞治疗作用的实验研究

目的探讨放射性粒子125I在动物体内抗人脑胶质瘤的效果及其作用机制。方法建立人胶质瘤的动物模型,瘤内植入放射性粒子125I,观察肿瘤生长情况,在电镜下观察其超微结构的变化,采用TUNEL技术检测肿瘤组织的凋亡情况,流式细胞仪检测Bax/Bcl-2的表达,并应用免疫组化染色检测血管密度和VEGF、bFGF的表达。结果成功建立了人胶质瘤细胞U251的动物模型,植入放射性粒子125I后,胶质瘤生长较对照组明显受到抑制(P<0.05,P<0.01),电镜下可呈现核断裂、染色质边聚等细胞凋亡的形态特征。检测显示:和对照组相比,肿瘤组织的Bax/Bcl-2(1.88±0.47vs1.11±0.52,P<0.01)和组织凋亡率的IHS评分(3.64±0.89vs0.81±0.45,P<0.01)明显增高;肿瘤组织的微血管密度IHS评分(1.40±0.55vs3.23±0.87,P<0.01)、VEGF的IHS评分(1.58±0.55vs4.19±0.45,P<0.01)和bFGF的IHS评分(2.44±0.89vs3.52±0.79,P<0.05)明显降低。结论放射性粒子125I对在体人胶质瘤U251有明确的抑制作用,促进...     

脂膜微囊承载紫杉醇靶向性治疗C6胶质瘤的体内外实验研究

目的：在体内外研究脂膜微囊（LCM）承载紫杉醇（Taxol）治疗大鼠颅内C6胶质瘤的机制。方法：体外实验应用紫杉醇－脂膜微囊 （Taxol-LCM）或单用LCM处理 C6细胞系,采用免疫荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察LCM在肿瘤细胞内的分布特点,用药前后肿瘤细胞形态的改变和细胞内超微结构的变化,动态观察LCM进入细胞的全过程;体内实验建立大鼠C6胶质瘤动物模型12只,成瘤大鼠分为4组:注射LCM-Taxol组、注射LCM组、注射Taxol组及载瘤动物组,每组取一只在最后一次尾静脉注射相应药物后处死,获取大鼠脑组织标本,进行油红O染色,观察LCM在肿瘤位点分布的特点;同时观察不同处理组大鼠的生存期。结果：体外实验表明,Taxol可结合于LCM并被胶质瘤细胞内吞,起到很强的的杀伤肿瘤细胞作用。其内吞过程为LCM先结合于细胞膜表面,后在细胞内重新分布,最终被细胞浆内的酸性成分所降解。体内油红O染色显示,注射LCM-Taxol组肿瘤区域有LCM聚集,胶质瘤明显坏死;而注射LCM组,肿瘤区域有LCM出现,但肿瘤区域无明显坏死;注射Taxol组及载瘤动物组肿瘤区域无明显坏死;生存期结果示,Taxol-LCM组生存期明显长于其他3组,而与其他3组生存期比较差异不明显。结论：LCM可承载Taxol在体内外起到杀伤胶质瘤细胞的作用。     

脊索样脑膜瘤及脊索样胶质瘤临床病理诊断对比分析及文献复习

目的探讨脊索样脑膜瘤及脊索样胶质瘤各自临床病理学特征及两者的鉴别诊断要点,提高诊断的准确性。方法对两组病例进行光镜、免疫组化观察,分析患者的临床及相关影像学资料,并复习两种疾病的相关文献。结果脊索样脑膜瘤及脊索样胶质瘤病理形态相同点为：不同区域可表现为脊索瘤样组织学改变,黏液样背景中出现条索状或簇状排列的肿瘤细胞,同时见大量淋巴细胞、浆细胞等炎细胞浸润。不同点为：脊索瘤样脑膜瘤往往部分区域见有脑膜瘤细胞特征,而脊索样胶质瘤瘤细胞常可见胶质细胞分化,并有胶质纤维突起。免疫组化显示EMA、PR、GFAP等抗体在两种肿瘤细胞中表达不同。结论两种肿瘤的组织形态相似,容易混淆,需要结合临床资料、组织学形态及免疫表型综合诊断。     

裸鼠胶质瘤模型的建立及其病理

目的 建立裸鼠胶质瘤动物模型。方法 采用瘤细胞悬液接种法和瘤组织块接种法制作裸小鼠皮下移植瘤,并研究肿瘤的病理组织学特征。结果 两种方法所建肿瘤模型其成功率均为１００％,肿瘤生长状况良好,裸鼠无明显恶异质变化,肿瘤病理形态检查符合胶质瘤细胞的形态学特征,免疫组化证实体外培养的胶质瘤细胞和体内胶质瘤组织胶质纤维酸性蛋白均高表达。结论 该方法所建裸鼠皮下移植瘤模型能作为研究胶质瘤发病机制、生物学特性以     

C6脑胶质瘤模型大鼠MRI影像及形态学观察及其意义

目的:建立稳定可靠的大鼠C6胶质瘤模型,对模型动物脑瘤体进行磁共振成像（MRI）影像动态观察及病理形态学观察,为抗脑胶质瘤药效学研究提供实验基础。方法：选择10只健康成年雄性Wistar大鼠,用立体定向将20 μL含有1×106个C6胶质瘤细胞的悬液缓慢接种于大鼠左侧尾状核区;接种后对10只大鼠进行一般状况观察,并分别于接种后第2、3和4周进行MRI影像动态学观察,同时对自然死亡荷瘤大鼠脑组织进行大体和病理组织学检查,计算荷瘤大鼠生存期。结果：大鼠术后2周出现活动和进食量减少、皮毛污秽及结膜充血等表现;3周后,有的大鼠出现肢体抽搐、偏瘫、身体扭曲和自身旋转等神经系统症状,10只荷瘤大鼠分别于8~30 d自然死亡。本组荷瘤大鼠中位生存期为18 d,平均生存期为(18.3±7.3) d。荷瘤大鼠脑瘤体随着瘤龄的增加而增大,病理学检查显示肿瘤细胞排列混乱致密,核分裂相易见,肿瘤内可见有血管组织增生,肿瘤浸润性生长呈指状突入周边正常组织。肿瘤细胞胶质酸性纤维蛋白(GFAP)表达呈阳性。结论：采用立体定向技术成功建立大鼠C6胶质瘤动物模型,MRI动态及病理形态学观察结果为选择适当的时间窗进行抗胶质瘤药物药效学研究提供实验基础。