乳腺癌组织多药耐药相关蛋白表达及其与化疗敏感性关系的研究

目的：探讨3种耐药相关蛋白P-gp、GST-π和TopoⅡ在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌新辅助化疗敏感性的相关性。方法：乳腺癌患者80例,随机分为应用新辅助化疗（CEF）组（A组）和未化疗组（B组）,A组应用新辅助化疗2周期,化疗前后分别行B超检查测量肿瘤大小。采用S-P免疫组织化学法检测80例乳腺癌组织中P-gp、GST-π和TopoⅡ的表达情况。结果：P-gp的表达在A组较B组有显著升高（P〈0.05）;GST-π和TopoⅡ的表达在A组及B组的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。A组P-gp的表达情况与乳腺癌肿瘤的缩小呈直线相关（P〈0.05）;GST-π、TopoⅡ的表达情况与乳腺癌瘤体的缩小无明显相关（P〉0.05）。P-gp的表达与腋窝淋巴结阳性有显著相关;GST-π的表达与肿瘤的分级有显著相关,与雌激素受体呈负相关;TopoⅡ的表达与肿瘤的分级呈正相关。结论：P-gp的表达可能与乳腺癌的获得性耐药有关,GST-π和TopoⅡ的表达可能与乳腺癌的天然耐药有关。     

胆管癌耐药相关蛋白LRP和P170的表达及临床意义

目的：探讨胆管癌组织中肺耐药蛋白（LRP）和P糖蛋白（P170）的表达情况及其临床意义。方法：收集手术切除的21例胆管癌标本,采用免疫组织化学方法检测组织中LRP及P170的表达及其与临床病理因素的关系。结果：LRP和P170在胆管癌组织中的表达阳性率分别为61.9%和66.7%,显著高于对照组的12.5%和25.0%（P〈0.05）。上述指标与性别、年龄、病理分期、分化程度、淋巴结转移均无关（P〉0.05）。结论：LRP和P170在未经化疗的胆管癌组织中均有不同程度的高表达,胆管癌的原发性多药耐药可能与LRP和P170有关。     

CD326在乳腺癌细胞系的表达及其与乳腺癌细胞耐药的关系

目的 探讨上皮细胞黏附分子(CD326)在乳腺癌细胞系中的表达及其与乳腺癌细胞耐药的关系.方法 流式细胞仪分析MCF-7、MCF-7/ADR及MDA-MB-231中cD326表达情况;细胞计数法(CCK-8法)检测流式细胞仪分选获得的CD326阳性和阴性细胞亚群体外对表阿霉素、多西他赛耐药情况;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同细胞亚群中多药耐药基因(MDR1)及乳腺相关耐药基因(BCRP)的表达情况.结果 MCF-7/ADR中CD326的表达(31.03%)明显高于亲本株MCF-7(27.02%),MDA-MB-231中CD326的表达(33.43%)明显高于MCF-7及MCF-7/ADR;MCF-7和MDA-MB-231中CD326阳性细胞亚群对表阿霉素及低浓度多西他赛(0.25～1.0*IC50)的体外耐受性明显高于阴性细胞亚群(P＜0.01),但对高浓度多西他赛(1.5～2.0* IC50)的体外耐受性差异无统计学意义(P＞0.05);CD326阳性与阴性细胞亚群间MDR1、BCRP基因表达差异元统计学意义(P＞0.05).结论 CD326与乳腺癌化疗药物的耐药有关,其诱导耐药并不是通过经典的耐药途径.     

胃癌组织中多药耐药和多药耐药相关蛋白基因的表达及其意义

我们通过检测胃癌组织中多药耐药(multidrug resistance，MDR1)和多药耐药相关蛋白(multidrug resistanceassociated protein，MRP)基因表达，探讨其与肿瘤临床病理特征及其预后的关系。     

肿瘤多药耐药及其基因治疗

肿瘤细胞多药耐药性（multidrug resistance，MDR）是肿瘤化疗失败的一个主要原因。MDR是指肿瘤细胞对一种化疗药物产生耐药现象后会对其他结构、细胞靶点和作用机制迥然不同的化疗药物产生交叉耐药。     

P-糖蛋白和多药耐药相关蛋白在胃癌中的表达及其与化疗敏感性的关系

目的:分析胃癌组织 P-糖蛋白(P-Glycoprotein,P-gp)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达及其与肿瘤化疗敏感性和化疗方案选择的关系.方法:将40例胃癌标本(标本组)行肿瘤细胞化疗敏感性测定(H3-TDR法), 并分析其与肿瘤P-gp、MRP1表达的关系;另随访P-gp、MRPI阳性表达率相近的30例(化疗组)术后化疗的胃癌患者,了解化疗效果与P-gp、MRP1表达的关系.结果:40例胃癌标本P-gp表达阳性率47.5%(19例),阴性率52.5%(21例);MRPI阳性率22.5%(9例),阴性率77.5%(31例).化疗组30例,P-gp阳性率40%(12例),阴性率60%(18例);MRPI阳性率23.3%(17例),阴性率76.7%(23例).化疗药物对胃癌细胞均有一定的抑制生长作用.MDR1表达会影响肿瘤细胞对ADM和VP-16的敏感性;MRP1表达会影响肿瘤细胞对ADM和5-Fu的敏感性.随访的30例胃癌术后化疗患者,死亡11例.P-gp和MRP1均阴性者存活期最长,其次为其中一个阳性表达,P-gp和MRP1均阳性者无存活.结论:P-gp和MRP1表达对化疗的效果有重要影响,其检测可能有助于临床的抗癌药物选择.     

c-jun氨基末端激酶与多药耐药蛋白在胃癌组织中的表达及其意义

目的 研究c-jun氨基末端激酶(e-jun N-terminal kinase,JNK)的磷酸化活性形式p-JNK与多药耐药蛋白P糖蛋白(p-glycoprotein,P-gP)、多药耐药相关蛋白1(multidrng resistance associated proteinl,MRP1)和肺耐药相关蛋白(lung resistance protein,LRP)在胃癌组织中的表达及p-JNK在胃癌耐药中的作用.方法 通过免疫组化方法研究168例胃癌和27例正常胃组织的组织芯片中p-JNK和P-gP、MRP1、LRP的表达及其关系.结果 p-JNK和耐药蛋白P-gP、MRP1、LRP在胃癌组织中的阳性表达率分别为45.8%、51.8%、45.8%和55.4%,均明显高于在正常胃组织中的表达.p-JNK与肿瘤大小、浸润深度、脉管浸润、淋巴结转移和远处转移显著相关.p-JNK与P-gP和MRPl表达正相关(P＜0.01).Kaplan-Meier分析显示p-JNK和P-gp、MRP1阳性组的预后较阴性组差(P＜0.01).结论 p-JNK高表达参与胃癌的恶性生物学行为,通过上调耐药蛋白P-gp和MRP1的表达参与胃癌化疗耐药的形成;p-JNK可成为评价胃癌预后和耐药的有价值指标.     

p-JNK在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的 研究c-jun氨基末端激酶(JNK)的磷酸化活性形式p-JNK在乳腺癌组织中的表达及其在乳腺癌耐药中的作用.方法 通过免疫组化法研究60例乳腺癌和20例乳腺癌旁组织切片中p-JNK的表达,并探讨p-JNK与P糖蛋白(p-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺耐药相关蛋白(LRP)表达的相关性.结果 p-JNK在乳腺癌中的阳性表达率为70.0%,高于癌旁组织的35.0%,两者差异有统计学意义(P＜0.01).P-gp,MRPP1,LRP在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为36.7%,81.7%,83.3%,均高于癌旁组织.LRP与腋窝淋巴结转移有关;该指标分组间差异有显著性(P＜0.05).p-JNK表达与P-gp和MRP1表达呈正相关(r=0.272,0.348;P＜0.05),与LRP表达无关(P＞0.05).结论 p-JNK高表达在乳腺癌发生中发挥了作用,与P-gP和MRP1的协同表达提示p-JNK与乳腺癌多药耐药有关.     

耐药蛋白差异性表达与肿瘤个体化化学治疗关系的研究进展

肿瘤细胞多药耐药的产生是导致肿瘤化疗失败的主要原因。耐药蛋白在不同个体肿瘤组织中的表达具有差异性。耐药蛋白表达特征是判断恶性肿瘤化学治疗敏感性的一个极重要的指标。研究并检测这种差异性表达，选择合理的个性化治疗方案，对提高肿瘤化学治疗成功率具有重要临床意义。     

耐药相关蛋白P糖蛋白、多药耐药相关蛋白及谷胱甘肽S转移酶π在胰腺癌中的表达及其意义

胰腺癌化疗效果不佳 ,多药耐药 (multidrugresistance,MDR)是重要的原因。我们应用免疫组化技术分析P糖蛋白 (P gp) ,多药耐药相关蛋白 (MRP)及谷胱甘肽S转移酶π(GST π)在胰腺癌中的表达及其与预后的相关性。资料与方法1.临床资料 :所有标本来自手术切除 ,经病理确诊为胰腺癌。本组共 6 8例 ,其中男 4 4例 ,女 2 4例 ,年龄 30～ 74岁。TNM分期 :Ⅰ +Ⅱ期 4 6例 ,Ⅲ +Ⅳ期 2 2例 ;组织学分型 :管状腺癌 5 2例 ,乳头状腺癌 12例 ,囊腺癌 4例 ;病理分级 :高分化 18例 ,中分化 2 0例 ,低分化 30例 ;有淋巴结转移者30例 ,无转移者 38例。…     

不同分子亚型乳腺癌中癌干细胞量的研究

目的研究乳腺癌不同分子亚型中癌干细胞量的差别。方法根据分子亚型将乳腺癌组织标本分为A(乳腺腔内A型),B(乳腺腔内B型),C(HER-2过表达型),D(基底样型),E(正常细胞样型)5组,通过集落细胞法计数各组癌干细胞球,分析乳腺癌干细胞量与乳腺癌不同分子亚型的关系。结果 A,B两组的癌干细胞球数分别为(1.1±0.2)/1 000细胞和(1.3±0.1)/1 000细胞,组间差异无统计学意义(P>0.05);C组的癌干细胞球数为(8.6±1.0)/1 000细胞,明显多于A,B组(均P<0.05);D,E两组的癌干细胞球数分别为(22.4±1.2)/1 000细胞和(17.7±2.0)/1 000细胞,两组间差异无统计学意义(P>0.05),但均明显多于前3组(均P<0.05)。结论不同分子亚型乳腺癌组织中含有不同量的癌干细胞,对预测乳腺癌预后可能有一定意义。     

Luminal A型和HER-2阳性乳腺癌的肿瘤干细胞生物学行为比较

目的:比较人Luminal A型和HER-2阳性乳腺癌的肿瘤干细胞的生物学行为差异。方法:用Luminal A型和HER-2阳性乳腺癌组织培分离并培养原代乳腺癌细胞,获取富含肿瘤干细胞的微球体(MS);用胰酶将MS消化成单细胞(微球体细胞,MSDC),比较两类乳腺癌MSDC的体外增殖和自我更新能力、ALDH1+表型肿瘤干细胞含量,以及移植NOD/SCID小鼠后的成瘤情况。结果:Luminal A型和HER-2阳性乳腺癌组织分离的原代乳腺癌细胞均能培养出MS,但相对于Luminal A型乳腺癌,HER-2阳性乳腺癌来源的MS形成时间短,生成的MS体积大;HER-2阳性乳腺癌来源的MSDC无论在无血清或添加血清的培养基中的增殖与再生能力均明显强于Luminal A型乳腺癌来源的MSDC,且前者含ALDH1表型干细胞比例明显高于后者(均P0.05);HER-2阳性乳腺癌的MSDC在NOD/SCID小鼠体内成瘤能力也强于Luminal A型乳腺癌来源的MSDC。结论:Luminal A型和HER-2阳性乳腺癌分离出来肿瘤干细胞生物学行为存在明显的差异,两者可能有不同肿瘤干细胞起源。     

电穿孔法和化学法在多药耐药胃癌细胞转染中的效果比较

目的:比较电穿孔法和化学法在多药耐药(MDR)胃癌细胞中转染效果。方法:将表达抑癌基因WTX的质粒分别用电穿孔法和两种化学法(Lipofectamine2000、Attractene)转染MDR胃癌SGC7901/VCR细胞,观察转染后细胞中增强型绿色荧光蛋白(e GFP)和目的基因WTX m RNA的表达情况。结果:e GFP分析结果显示,与无耐药的亲代SGC7901细胞比较,两种化学转染法对SGC7901/VCR细胞的转染效率明显降低(均P0.05),而电穿孔转染法未见明显降低(P0.05),且明显高于两种化学转染法对SGC7901/VCR细胞的转染效率(均P0.05)。RT-PCR结果显示,电穿孔转染的SGC7901/VCR细胞中WTX m RNA表达量明显高于两种化学法转染的SGC7901/VCR细胞中的WTX m RNA表达量(均P0.05)。结论:对于MDR胃癌细胞,电穿孔转染法不易受其细胞膜成分的影响,可以保持较好的转染效率。     

胰腺癌干细胞研究进展

胰腺癌干细胞（PCSC）在胰腺癌的发生、发展过程中起着重要作用,且与胰腺癌的耐药、转移机制关系密切。PCSC的表面标志物、分离、鉴定、信号通路、微环境、耐药、转移和靶向治疗等方面的研究,将为临床胰腺癌的治疗提供新的方向。     

siRNA特异性靶向沉默Livin基因对人乳腺癌MCF－7多药耐药细胞耐药性的研究

目的研究siRNA特异性靶向沉默Livin基因对人乳腺癌MCF－7多药耐药细胞耐药性的影响。 方法采用ADM低浓度梯度递增结合大剂量间歇诱导方法建立5－FU诱导的多药耐药细胞系,采用ATP生物荧光肿瘤体外药物检测技术(ATP－TCA)法检测细胞耐药性,采用免疫组织化学方法检测Livin蛋白在MCF－7耐药细胞株系中的表达情况,采用Livin SiRNA联合表柔吡星、5－氟尿嘧啶、多西他赛、健择诱导乳腺癌MDR细胞的凋亡。采用SPSS 20.0处理数据,耐药情况、细胞的凋亡情况用( ±s)表示,采用t检验,当P<0.05时差异具有统计学意义。 结果结果显示,MCF－7多药耐药细胞存在多药耐药问题;联合组MCF－7增敏(19.48±12.00) μM、MCF－7/MDR增敏(35.62±2.37) μM,与转染组与加药组对比,数据差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论siRNA特异性靶向沉默Livin基因可增强人乳腺癌MCF－7多药耐药细胞的敏感性,提高细胞凋亡率。     

甲状腺癌肿瘤干细胞的研究进展

肿瘤干细胞(CSC)学说得到了越来越多的关注,已有研究证实在甲状腺癌中存在CSC。甲状腺癌CSC可能是甲状腺癌发生、转移、复发及耐药的根源,因此,甲状腺癌CSC的研究对甲状腺癌的诊断、治疗及预防具有重要意义。笔者对甲状腺癌CSC的最新研究进展进行综述。     

胃肠道肿瘤干细胞生长相关信号转导通路

根据目前肿瘤的干细胞起源理论,肿瘤的生长是极少量肿瘤干细胞增殖的结果,而肿瘤干细胞的生长调控与多种信号转导通路有关.笔者就胃肠道肿瘤干细胞生长相关信号转导通路的研究进展做一综述.     

microRNA-200c在胰腺癌干细胞中的表达及作用

目的：探讨microRNA-200c（miRNA-200c）在胰腺癌干细胞中的表达及作用。方法：应用流式细胞术在人胰腺癌PANC-1细胞中以CD24+CD44+ESA+为标记物分选胰腺癌干细胞,并通过NOD/SCID小鼠移植瘤实验验证其肿瘤干细胞特性;分别用RFQ-PCR法Transwell试验检测PANC-1细胞、胰腺癌干细胞以及转染miRNA-200c前体片段或阴性对照序列的胰腺癌干细胞的miRNA-200c表达与侵袭能力。结果：PANC-1细胞中分选出CD24+CD44+ESA+细胞（占0.8%）具有肿瘤干细胞特性,其在小鼠皮下移植后的移植瘤体积明显大于同期移植的PANC-1细胞[（1 725.14±261.29）mm3 vs.（479.65± 99.67）mm3,P<0.05];胰腺癌干细胞中miRNA-200c的表达量明显低于PANC-1细胞（0.15±0.01 vs. 1.00±0.09,P<0.05）,平均穿膜细胞数明显多于PANC-1细胞[（321±7.62）个vs.（70±16.47）个,P<0.05],但转染miRNA-200c前体片段后,胰腺癌干细胞中miRNA-200c表达量明显升高,平均穿膜细胞数明显减少（P<0.05）。结论：胰腺癌干细胞中miRNA-200c的表达降低,miRNA-200c具有抑制胰腺癌干细胞生长及侵袭力的作用。

     

吉西他滨诱导胰腺癌细胞ABCG2表达其化疗耐药的关系研究

目的：探讨吉西他滨诱导胰腺癌细胞ABCG2的表达及与其化疗耐药的关系。 方法：吉西他滨不同浓度、不同时间作用胰腺癌SW1990细胞后,用CCK-8法检测细胞的增殖抑制率,并计算吉西他滨不同作用时间的半数抑制浓度（IC50）;根据IC50值选择合适浓度的吉西他滨,作用SW1990细胞24、48、72 h后,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,并用Western blot和RT-PCR法检测ABCG2蛋白与mRNA的表达。 结果：吉西他滨作用后,SW1990细胞增殖明显抑制,并呈浓度与时间依赖性,但IC50值呈时间依赖性增加（均P<0.05）;3.9 mg/mL吉西他滨作用24、48、72 h后,SW1990细胞总凋亡率逐渐增加,但晚期凋亡率呈降低趋势,ABCG2蛋白与mRNA的表达明显升高,并呈时间依赖性（均P<0.05）。 结论：吉西他滨能抑制胰腺癌细胞SW1990的增殖,但作用呈时间依赖性减弱,这可能与其诱导ABCG2上调表达有关。     

乳腺癌中ALDH1的表达与其分子亚型及ABCG2的关系

目的探讨乙醛脱氢酶1(ALDH1)表达在乳腺癌中的表达及与各分子亚型、ATP结合膜转运蛋白超家族G成员2(ABCG2)的关系。方法根据免疫学标志物(ER,PR,HER2,CK5/6)把179例乳腺癌标本分为5类分子亚型:管腔A型,管腔B型,HER2过表达型,基底样型和正常乳腺样型。应用免疫组织化学检测ALDH1及ABCG2表达情况,并分析两者之间的相互关系以及两者与乳腺癌各临床病理因素之间的关系。结果 179例乳腺癌中43例(24.0%)呈ALDH1阳性表达。ALDH1的表达率在乳腺癌各分子亚型有明显差异(P=0.003),在管腔A型,管腔B型,HER2过表达型,基底样型和正常乳腺样型中的阳性表达率分别为16.7%(17/102),21.4%(3/14),54.5%(13/22),33.3%(8/24)和17.6%(3/17)。ALDH1阳性表达与ABCG2的表达之间无明显关系(P=0.052)。ALDH1和ABCG2的表达均与术前化疗与否有关(P=0.027和P=0.033),ALDH1的表达与HER2表达有关(P=0.006)。结论小部分乳腺癌呈ALDH1阳性表达,且ALDH1表达率在乳腺癌各分子亚型中表...