干细胞因子与粒细胞集落刺激因子联合用于外周血干细胞移植动员的研究

粒细胞集落刺激因子(granulocyte-colony-stimulat-ing factor,G-CSF)和干细胞因子(stem cell factor,SCF)是人类血细胞生成过程中的两个重要的细胞因子,G-CSF早已用于外周血干细胞移植(peripheral blood stemcells transplantation,PBSCT)时外周血干细胞(PBSC)的动员并且取得确切的效果.近年来SCF与G-CSF协同用于PBSC动员的研究不断增多,现就此作一综述.     

干细胞因子与粒细胞集落刺激因子联合用于外周血干细胞移植动员的研究

粒细胞集落刺激因子(granulocyte-colony-stimulat-ing factor,G-CSF)和干细胞因子(stem cell factor,SCF)是人类血细胞生成过程中的两个重要的细胞因子,G-CSF早已用于外周血干细胞移植(peripheral blood stemcells transplantation,PBSCT)时外周血干细胞(PBSC)的动员并且取得确切的效果.近年来SCF与G-CSF协同用于PBSC动员的研究不断增多,现就此作一综述.     

化疗联合G-CSF动员外周血造血干细胞疗效观察

目的:探讨化疗联合粒细胞集落刺激因子动员外周血造血干细胞(PBSC)的效果。方法:12例恶性血液病患者采用化疗联合G-CSF进行PBSC动员和采集,并检测采集物中单个核细胞计数(MNC)和CD34+细胞。结果:12例患者均一次即获足量干细胞,获MNC平均5.7(2.2~7.6)×108/kg,CD34+细胞平均15.2(2.5~26.9)×106/kg。未出现严重不良反应。结论:化疗联合G-CSF能安全、高效地动员PBSC,满足移植的需要。     

同胞供者经G—CSF动员后外周血干细胞与幼稚粒细胞关系的研究

目的：研究供者经粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员后,采集的外周血干细胞（PBSC）移植物中的幼稚粒细胞与CD34^ 细胞及单个核细胞（MNC）之间的相关性。方法：10例异基因外周血干细胞移植（allo-PBSCT)供者用G-CSF（仅2例用G-CSF GM-CSF）7.25-10ug.kg^-1.d^-1进行动员,于动员前及动员后,对外周血及收集的外周血干细胞（PBSC）收集物中幼稚粒细胞及CD34^ 细胞进行检测计数。结果：（1）动员后白细胞主数及细胞计数及幼稚粒细胞逐渐增加,至5天达高峰;（2）外周血MNC中幼稚粒细胞增加与CD34^ 细胞增加有较好的相关性;（3）经2次单采后供者血小板约降低60%,但一周后基本恢复正常,结论：G-CSF7.25-01ug.kg^-1.d^-1分两次皮下注射能有效动员PBSC;allo-PBSCT供者经G-CSF动员后,外周血MNC中幼稚粒细胞数结合可做为allo-PB-SCT的剂量阈标准。     

健康供者外周血造血干细胞动员的临床研究

目的:探讨造血生长因子(HGFs)对健康供者外周血干细胞(PBSC)的动员作用,并比较粒细胞集落刺激因子(G-CSF)单用及G-CSF联合粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的动员效果.方法:52例健康供者分成G-CSF单用组(34例)及与GM-CSF合用组(18例),分别采用G-CSF(5 μg·kg-1·d-1)及G-CSF(3 μg·kg-1·d-1)+GM-CSF(2 μg·kg-1·d-1),连续皮下注射5～6 d动员,采集PBSC.动员前后动态检测外周血及采集物MNC、CD34+细胞、CFU-GM计数.52例血液病患者接受上述供体动员之PBSC并行异基因PBSC移植(Allo-PBSCT).结果:动员后CD34+细胞及CFU-GM分别较动员前增加10.83及8.7倍,并在第5～6天达到高峰;G-CSF单用及与GM-CSF合用均可有效动员CD34+细胞和CFU-GM,但合用较单用更有效(P<0.05);所有患者接受Allo-PBSCT后均满意获得造血重建;随访观察至今应用HGFs对健康供者无明显不良反应.结论:采用中小剂量G-CSF单用和与GM-CSF合用均能安全、有效动员健康供者PBSC,但以合用更为有效.     

外周血干细胞的采集与应用体会

外周血干细胞 (PBSC)是骨髓造血重建重要的干细胞来源。由于外周血干细胞移植 (PBSCT)造血恢复快 ,采集不需全身麻醉等优点 ,PBSC临床应用范围不断扩大。目前PBSCT越来越多地被用于临床多种血液病及实体瘤的治疗 ,其中外周血干细胞的有效采集是移植的首要条件 ,有了一定数量的造血干细胞才能在受者体内增殖分化 ,使大剂量化疗损伤的造血功能重新恢复。为此 ,作者采用美国BaxterCS- 30 0 0 puls血细胞分离机采集经动员的恶性淋巴瘤患者的PBSC 1例 ,初步分析了采集方案与效率和移植后的造血重建 ,为今后进一步广泛应用PBSC打下基…     

自体骨髓间充质干细胞和外周血造血干细胞共移植治疗恶性淋巴瘤(附1例报告)

目的探讨自体骨髓间充质干细胞(bone marrow-mesenchymal stem cell,BM-MSC)和外周血造血干细胞(PBSC)共移植治疗恶性淋巴瘤(NHL)的安全性和疗效.方法对1例确诊为NHLⅡ期A组的患者,采用CHOP方案(环磷酰胺750 mg/m2、阿霉素40 mg/m2、长春新碱1.4 mg/m2,第1天静滴;强的松60mg/m2,第1～5天口服)化疗4次.自体PBSC动员前取自体骨髓培养BM-MSC,扩增后计数1×107,冻存.动员方案为美罗华、环磷酰胺加粒系集落刺激因子(G-CSF).采集结果单个核细胞(MNC)2.61 ×10s/kg,CD细胞4.27×106/kg,予-80℃低温冻存.CHOP方案预处理后24h先回输自体PBSC,次日回输自体BM-MSC.结果移植后白细胞计数(WBC)和血小板计数(BPC)低谷时间为移植后第6(+6)天和+9天,恢复中性粒细胞绝对计数(ANC)>0.5×109/L和BPC＞20×109/L的时间分别为5天和1天.除口腔溃疡和皮肤感染外,无其他严重的移植相关并发症.结论自体BM-MSC和自体PBSC共移植治疗恶性淋巴瘤安全可行,移植后造血重建快,长期疗效有待进一步积累.     

自体外周血干细胞移植治疗急性心肌梗死的随访观察

目的观察经皮经腔冠状动脉内移植自体外周血干细胞(PBSC)治疗急性心肌梗死(AMI)的随访情况。方法 AMI患者70例,分为干细胞移植组和对照组各35例,干细胞移植组在常规急性心肌梗死治疗(药物与介入治疗)基础上加用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)皮下注射动员自体骨髓干细胞,连续5 d,第6天分离外周血干细胞悬液,将采集后的干细胞悬液经overthe wire球囊导管中心腔注入梗死相关动脉(IRA),进行外周血干细胞移植;对照组反给予常规方法(药物与介入)治疗。2组患者在移植前及移植后5.2年(4.8⁵.5年)应用超声心动图评价左室形态及心功能变化、室壁节段性运动积分、生存率及心脏事件发生率,并进行比较。结果随访5.2年,干细胞移植组完成随访30例,对照组28例。2组均无死亡病例,对照组因急性左心衰住院6例(21.4%),高于移植组1例(3.3%)(P<0.05)。干细胞移植组左室射血分数(LVEF)由(50.0±8.2)%升高至(56.0±8.9)%(P<0.05),左室壁节段性运动积分指数WMSI由(1.219±0.190)下降至(1.111±0.108)(P<0.05),左室收缩末容积(LVESV)由(63.8±24.9)ml减少至(53.1±24.6)ml(P<0.05),左室舒张末容积(LVEDV)无显著性变化,由(134.2±36.7)ml降至(119.2±30.3)ml(P>0.05)。对照组介入术前及术后5.2年LVEF、WMSI、EDV及ESV均无显著性变化。结论经皮经腔冠状动脉内移植自体外周血干细胞治疗AMI可减轻左室重构,改善心功能。     

异基因外周血干细胞移植后发生溶血、纯红再障（附2例报告）

目的 探讨mA相合,ABO血型不合的异基因外周血干细胞移植(Allo-PBSCT)存在的血液免疫及对造血功能恢复的影响问题。方法 对2例ABO血型主要不合、主次要均不合,mA相合的患应用CTX TBI预处理方案及CsA MTX预防GVHD方案行Allo-PBSCT後发生的溶血、纯红细胞再生障碍(纯红再障)进行分析。结果 ABO血型不合的Allo-PBSCT患,输注PBSC后无1例发生急性溶血;受为“O”型血的主要不合患发生纯红再障,持续约6mo。经停用CsA,应用Epo后逐渐恢复;主次要均不合移植后3wk,主要不合15wk发生严重的免疫性溶血,可能与经G-CSF动员的PBSC中高淋巴细胞含量及应用CsA使T、B淋巴细胞失衡有关。结论 ABO血型不合可以进行Allo-PBSCT,但对受为“O”型的主要不合宜慎用;为避免移植后发生的免疫性溶血,应争取纯化造血干细胞的移植。     

异基因外周血干细胞移植治疗白血病4例

外周血干细胞(PBSC)多用于造血系统恶性肿瘤及某些实体瘤的自体移植.近几年来,用异基因PBSC移植(Allo-PBSCT)治疗造血系统恶性肿瘤也日渐增多,为探讨Allo-PBSCT的动员及临床移植效果,现对4例白血病患者的Allo-PBSCT资料作如下分析.     

单采治疗的临床应用

1血液成分采集（血细胞分离机） 1.1外周血造血干细胞采集外周血造血干细胞（ PBSC）是存在于外周循环血液中的一种具有自我更新、分裂增收和分化功能的细胞。正常成人PBSC 占外用血液单个核细胞的1‰左右,经适当动员处理可提高至10‰。 PBSC的比重在1.058~1.060,直径为6~7μm。①适应证：作为同种异体 PBSC 移植的供体,经白细胞配型和PBSC动员后,自身PBSC移植或自身PBSC单病种治疗的患者,经PBSC动员后;采集的PBSC主要用于治疗肿瘤性疾病,如白血病、实体肿瘤以及一些非肿瘤性疾病,如再生障碍性贫血、地中海贫血、重症免疫缺陷病、急性放射病等。②禁忌证：同种异体PBSC移植的供体动员前具有血源性传染性疾病;同种异体PBSC移植的供体生命体征不平稳;同种异体PBSC移植的供体具有不适合PBSC动员或采集的基础疾病;需自身PBSC移植的患者血液系统恶性疾病未缓解期;需自身PBSC单病种治疗的患者具有不适合PBSC动员或采集的基础疾病。     

关于急性心肌梗死患者中粒细胞集落刺激因子诱导干细胞动员的随机对照研究

背景:实验研究和早期临床试验提示,血源性或骨髓源性干细胞移植可促进急性心肌梗死后心脏恢复和新生血管形成。粒细胞集落刺激因子(G-CSF)可诱导骨髓干细胞动员。目的:评估G-CSF诱导骨髓干细胞动员对急性心肌梗死患者的治疗价值。设计、地点和患者:2004年2月24日至2005年2月2日期间,在德国以症状出现12h内行经皮冠状动脉介入治疗成功再灌注的ST段抬高型急性心肌梗死患者为对象进行了一项随机、双盲、安慰剂对照试验。干预措施:患者被随机分配接受G-CSF每日10μg/kg或安慰剂皮下注射,共治疗5d。主要观察指标:一级研究终点为基线时与随…     

慢性缺血性心脏病患者接受冠状动脉内高剂量CD34^＋干细胞移植：12个月的随访结果

由于通过骨髓抽吸仅可获取少量细胞,当前的缺血性心脏病干细胞治疗方案受限。为了增加慢性缺血性心脏病(CIH D)患者中的骨髓干细胞心肌移植,作者用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员骨髓CD34 细胞,得以冠状动脉内注入大量CD34 干细胞。与年龄匹配的对照者相比,CIH D患者(n=5)中由G     

自体外周血干细胞移植治疗糖尿病下肢缺血性血管病

目的:观察自体外周血干细胞(PBSC)移植治疗糖尿病下肢缺血性血管病的临床疗效.方法:4例自愿接受自体PBSC移植的糖尿病足患者,均有足部溃疡或坏疽,合并感染.下肢动脉CT血管造影三维重建显示4例患者均累及双下肢血管病变,单侧溃疡或坏疽,共移植5次,有一患者移植2次.全部患者均给予重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-csf)150～300 μ g/d,皮下注射,行PBSC动员3～5 d,然后用百特CS-3000 Plus型血细胞分离机采集外周干细胞,总量60 ml,干细胞数量约(178.1～239.0)×109/L.将干细胞悬液按3 cm×3 cm距离进行患侧肢体移植术,术后第1天至6个月定期观察各项指标综合评估.结後果:PBSC移植后7～14 d4例疼痛的患者疼痛明显缓解;1～6 w感染得到控制;12～16 w4例溃疡或足趾坏疽明显好转或愈合,无一例患者行截肢术;1例下肢动脉CT血管造影三维重建复查比较结果显示新侧支血管形成明显增加.移植后2～24 w所有患者均未出现并发症和明显不良反应.结论:自体PBSC移植治疗糖尿病下肢缺血性血管病是一种安全、有效的手段,可使一部分患者免除截肢或降低截肢平面,改善生活质量.     

骨髓干细胞移植治疗糖尿病兔下肢缺血效果观察

目的:对比骨髓干细胞移植、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员及局部骨髓干细胞移植联合G-CSF动员3种方法对糖尿病兔缺血组织血管新生的作用.方法:40只健康新西兰兔,用四氧嘧啶(ALX)诱导成为糖尿病兔后,均结扎右后肢股动脉,建立糖尿病下肢缺血动物模型,然后随机分为4组,每组10只.其中1组不进行治疗作对照(A组),余3组分别用G-CSF动员(B组)、局部骨髓干细胞移植(C组)及G-CSF动员联合局部骨髓干细胞移植(D组)进行治疗.28 d后均以右侧股内侧正中部位为中心等距离取局部肌肉组织,免疫组织化学染色检测肌组织微血管密度及血管内皮生长因子(VEGF)表达水平.结果:上述A、B、C、D 4组缺血组织微血管密度(1)分别为(22.0±6.0)、(35.8 4±7.5)、(38.1±7.2)和(48.7±9.1)个/高倍视野,VEGF蛋白表达水平(2)分别为(8.87 4-1.51)%、(11.83 4-1.65)%、(12.32±1.34)%和(17.13±2.73)%,局部干细胞移植(1)和G-CSF动员(2)对微血管密度和VEGF的表达有影响(F1分别为50.599、35.930,F2分别为39.846,25.435,P均<0.001,但F1x2分别为2.256,0.437,P>0.05).结论:G-CSF动员和局部骨髓干细胞移植均可用于治疗糖尿病下肢缺血性疾病.     

外周造血干细胞移植后及出现GVHD时T细胞β链CDR3谱型分析

目的 初步探讨外周造血干细胞(PBSC)移植后以及出现移植物抗宿主疾病(GVHD)时,外周血T细胞a链的CDR3谱型变化和特征.方法 采用免疫扫描谱型分析技术,监测1例重型β-地中海贫血移植前、移植后23 d、GVHD时(移植后28 d)患者外周血单核细胞(PBMC)及供者PBSC标本T细胞a链的CDR3谱型变化,基因扫描(GeneScan)和测序分析克隆性增生T细胞TCR分子特征.结果 患者移植前PBMC的24个TCR BV家族CDR3谱型均呈高斯分布,部分家族在移植后23 d、和GVHD时呈现为寡峰和单峰,同时部分家族消失,单克隆增生T细胞TCR beta链的测序结果 显示不同的CDR3区组成,设计特异的CDR3引物进一步分析提示其可能来源于干细胞移植后的分化.结论 PBSC移植后23 d,PBMC中的多数24TCRBV家族CDR3谱型表现为多克隆,GVHD时,部分家族出现明显的单、寡克隆增生,这些特异T细胞可能在GVHD中发挥重要作用.对移植前后TCRCDR3谱型和特异TCR分子特征的分析将有助于PBSC移植后免疫重建的评估和出现排斥反应时的特异性治疗.     

自体外周血干细胞移植治疗糖尿病足坏疽临床观察

目的 观察由于糖尿病下肢动脉闭塞硬化症引起的糖尿病足坏疽,经自体外周血干细胞(PBSC)移植后,耱尿病足创面的愈合情况.方法 对18例糖尿病合并下肢动脉闭塞硬化及糖尿病足坏疽的患者,采用单纯粒细胞集落刺激因子(G-CSF)注射治疗后,分离、采集外周血中的干细胞注射于患侧下肢,同时观察对糖尿病足创面愈合的影响.结果 观察指标包括主观指标和客观指标,患肢发凉、疼痛情况明显改善;足坏疽愈合时间明显缩短:双下肢血管超声、踝/肱指数(ABI)、皮温、血管核磁有不同程度改善.结论 糖尿病下肢动脉闭塞硬化症合并糖尿病足坏疽的患者,可以采用自体干细胞移植的方法治疗,在临床上收到较好的疗效,而且经济、方便、患者痛苦小,是临床可以选择的方法.     

造血干细胞移植治疗血液肿瘤的临床研究

目的探讨造血干细胞移植(HSCT)治疗血液肿瘤的造血重建、疗效和移植相关并发症.方法①8例血液肿瘤患者中,采用自体外周血干细胞移植(APBSCT)2例,自体骨髓移植(ABMT)1例,HLA 1～2个位点不合无关脐血移植(UCBT)3例,异基因外周血干细胞移植(Allo-PBSCT)2例,分别采用CBV、Bu/Cy、Bu/Cy/BCNU和Cy/TBI 4种方案进行预处理.②患者自体外周血干细胞(PBSC)动员方案采用Cy/G-CSF,异基因供者PBSC动员方案采用G-CSF/GM-CSF.③在异基因HSCT中采用环孢霉素A(CsA)和霉酚酸酯(MMF)预防急性GVHD(aGVHD).④应用小剂量肝素预防肝静脉闭塞病(VOD).结果①3例接受自体HSCT的患者移植后均获得完全缓解(CR),2例移植后淋巴瘤复发.5例接受异基因HSCT治疗的患者中有1例未植入,异基因HSCT的植入率为80%.8例移植成功率为87.5%.②8例患者移植后于3～7 d(中位时间为4.5 d)开始骨髓脱空,骨髓脱空时间持续3～9 d(中位时间为5 d),外周血中性粒细胞绝对值(ANC)＞0.5×109/L的时间为9～27 d(中位时间为14 d),血小板计数(BPC)＞20×109/L的时间为10～41 d(中位时间为14 d),BPC＞50×109/L的时间为11～53 d(中位时间为14 d).在不同类型的HSCT中以APBSCT和Allo-PBSCT造血重建较快,ABMT和UCBT造血重建相对较晚.③5例异基因HSCT中有3例发生Ⅰ～Ⅱ度aGVHD,GVHD的发生率为60%.8例患者移植后仅1例发生咽部感染,1例发生晚期出血性膀胱炎(HC),感染和HC的发生率均为12.5%.无VOD和移植相关死亡发生.结论 HSCT可以提高血液肿瘤的CR率和治愈率,延长血液肿瘤患者的无病生存(DFS)时间.     

黄芪注射液促进造血干细胞移植后造血重建的临床研究

目的:研究黄芪注射液对造血干细胞移植后造血重建的影响。方法:选取26例行造血干细胞移植的恶性血液病患者,随机分为治疗组和对照组。治疗组移植后采用黄芪注射液联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、白细胞介素-11(IL-11)促造血治疗,对照组则只采用G-CSF、IL-11治疗。在移植后不同时期监测血常规、网织红细胞计数及骨髓常规的变化,计算移植后3月内血小板输注量及感染率,并进行组间比较。结果:移植后60d治疗组外周血中性粒细胞和血小板计数均显著高于对照组(P<0.05),血小板≥50×109/L所需时间显著低于对照组(P<0.05)。移植后60d、90d治疗组外周血网织红细胞计数均显著高于对照组(P<0.05),骨髓常规巨核细胞计数达到2～5个/片的时间及≥10个/片的时间均显著低于对照组(P<0.05)。移植后2～3月治疗组血小板输注量显著低于对照组(P<0.05)。结论:黄芪在造血干细胞移植后造血重建的后期具有促造血作用,黄芪与G-CSF、IL-11三药联用促进移植后造血重建疗效明显。     

粒细胞集落刺激因子动员自体骨髓干细胞促进大鼠部分肝移植物的肝再生

目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员自体骨髓干细胞是否会促进部分肝移植物的再生,减轻肝损伤。方法建立性别交叉的大鼠(雌性→雄性)50%部分肝移植模型(PLTx),移植前动员组:移植前受体皮下注射G-CSF5d;移植后动员组:移植后3h,注射G-CSF5d;未动员组:移植后3h,皮下注射生理盐水5d。分别与1、3、5、7和14d取肝脏。检测移植物内CD34干细胞标志,确定干细胞迁移入肝脏的情况,观察肝脏的有丝分裂相和溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)掺入检测肝再生情况,并检测sry+细胞确认细胞来源。结果用G-CSF动员后发现,移植后动员组14d生存率(90%)较移植前动员组(60%)和未动员组(50%)高,差异有统计学意义。与未动员组相比,移植后第3天,肝坏死灶少,有丝分裂指数高(30%±5%vs24%±6%,P<0·05),BrdU掺入高(42%±6%vs34%±4%,P<0·05),差异有统计学意义。移植后第3至14天,移植后动员组汇管区可见较多的CD34+的成堆或散在分布的淋巴细胞样细胞;移植后第3天,移植前动员组见汇管区较多的CD34+细胞。移植后第5天各组在肝窦和汇管区偶见sry阳性细胞,第14天,G-CSF动员两组汇管区周围sry阳性细胞增多,未动员组较少。结论移植后用G-CSF动员自体骨髓干细胞,受体生存率高,移植肝再生明显,肝损伤轻。