马桑内酯致痫大鼠海马内c—fos原癌基因表达及谷氨酸免疫反应的变化

用免疫细胞化学双重染色法对马桑内酯致痫大鼠齿状回及海马回ＣＡ３区内原癌基因表达、谷氨酸免疫反应的变化及其相互关系进行了研究。一侧侧脑室内注射马桑内酯诱发癫痫后，在双重免疫细胞化学染色的切片上，齿状回及海马回ＣＡ３区内均有３种不同类型的细胞：谷氨酸的单标细胞、Ｆｏｓ单标细胞和Ｆｏｓ／Ｇｌｕ双标细胞。癫痫发作后１ｈ，注射侧齿状回有大量Ｆｏｓ／Ｇｌｕ双标细胞，而海马回ＣＡ３区仅有散在的双标细胞；癫痫发作     

自发性脑卒中诱导原癌基因c－fos在大鼠脑内的表达

用免疫组织化学（ＡＢＣ）方法，对易卒中型肾血管性高血压大鼠高血压晚期自发形成脑卒中时以及高血压早期和中期脑内ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白（ＦＯＳ）的表达进行了观察．在高血压晚期，假手术组不出现脑卒中，但个别大鼠的扣带皮质和梨状皮质出现微弱的ＦＯＳ表达；手术组都出现脑卒中，其中３例脑内未见ＦＯＳ表达，４例则于大脑皮质、海马、黑质和下丘脑等处出现程度不等的ＦＯＳ表达．高血压早期，手术组和假手术组的下丘脑、隔核、中脑中央灰质和丘脑室旁核出现分布状态和强弱都相似的ＦＯＳ表达．高血压中期，手术组和假手术组脑内未见ＦＯＳ表达．本研究结果提示：（１）高血压晚期，自发性脑卒中能诱导ｃ－ｆｏｓ在脑内的广泛表达，脑内不同部位ＦＯＳ表达的机制和功能意义不同，本文对其进行了讨论；（２）腹部手术能诱导下丘脑等与内脏功能调节有关的功能区ＦＯＳ的表达；（３）高血压早期和中期，通过ｃ－ｆｏｓ表达的方法未能发现高血压对大鼠脑功能活动的影响。     

自发性脑卒中诱导原癌基因c－fos在大鼠脑内的表达

用免疫组织化学（ＡＢＣ）方法，对易卒中型肾血管性高血压大鼠高血压晚期自发形成脑卒中时以及高血压早期和中期脑内ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白（ＦＯＳ）的表达进行了观察．在高血压晚期，假手术组不出现脑卒中，但个别大鼠的扣带皮质和梨状皮质出现微弱的ＦＯＳ表达；手术组都出现脑卒中，其中３例脑内未见ＦＯＳ表达，４例则于大脑皮质、海马、黑质和下丘脑等处出现程度不等的ＦＯＳ表达．高血压早期，手术组和假手术组的下丘脑、隔核、中脑中央灰质和丘脑室旁核出现分布状态和强弱都相似的ＦＯＳ表达．高血压中期，手术组和假手术组脑内未见ＦＯＳ表达．本研究结果提示：（１）高血压晚期，自发性脑卒中能诱导ｃ－ｆｏｓ在脑内的广泛表达，脑内不同部位ＦＯＳ表达的机制和功能意义不同，本文对其进行了讨论；（２）腹部手术能诱导下丘脑等与内脏功能调节有关的功能区ＦＯＳ的表达；（３）高血压早期和中期，通过ｃ－ｆｏｓ表达的方法未能发现高血压对大鼠脑功能活动的影响。     

马桑内酯致痫后大鼠海马生长抑素mRNA表达的变化

为探讨马桑内酯致痫与生长抑素的关系，用原位杂交组织化学法研究了马桑内酯致痫后大鼠海马生长抑素ｍＲＮＡ阳性神经元的变化，结果表明：致痫组大鼠ＣＡ１，ＣＡ２区及齿状回生长抑素ｍＲＮＡ的反应明显增强，以上各区的中，小神经内生长抑素ｍＲＮＡ神经元的数目及强度明显高于正常对照组，两者有显著性差异。     

SOMAN诱发惊厥大鼠丘脑内c－fos的表达

用ＡＢＣ免疫组化技术研究了Ｓｏｍａｎ诱发大鼠产生强直阵挛性惊厥后的ｃ－ｆｏｓ原癌基因在丘脑中的表达。结果显示：在低剂量Ｓｏｍａｎ中毒但未出现惊厥的动物和戊巴比妥抗惊厥的动物丘脑内都未见ｃ－ｆｏｓ表达的增加。而致惊厥的动物则从惊厥１ｈ至３ｈ，丘脑内ｃ－ｆｏｓ表达均有显著增加，表达呈恒定的核特异定位分布。出现群集ＦＯＳ样免疫阳性神经元的核团是：丘脑中线核群的丘脑室旁核、菱形核、粘合核；板内核群的中央旁核、中央内侧核和中央外侧核；丘脑前核诸亚核以及丘脑网状核。上述结果表明，丘脑非特异性核团的协同活动以及丘脑前核可能参与惊厥活动的整合。     

SOMAN诱发惊厥大鼠丘脑内c－fos的表达

用ＡＢＣ免疫组化技术研究了Ｓｏｍａｎ诱发大鼠产生强直阵挛性惊厥后的ｃ－ｆｏｓ原癌基因在丘脑中的表达。结果显示：在低剂量Ｓｏｍａｎ中毒但未出现惊厥的动物和戊巴比妥抗惊厥的动物丘脑内都未见ｃ－ｆｏｓ表达的增加。而致惊厥的动物则从惊厥１ｈ至３ｈ，丘脑内ｃ－ｆｏｓ表达均有显著增加，表达呈恒定的核特异定位分布。出现群集ＦＯＳ样免疫阳性神经元的核团是：丘脑中线核群的丘脑室旁核、菱形核、粘合核；板内核群的中央旁核、中央内侧核和中央外侧核；丘脑前核诸亚核以及丘脑网状核。上述结果表明，丘脑非特异性核团的协同活动以及丘脑前核可能参与惊厥活动的整合。     

马桑内酯致痫大鼠海马神经元丢失及化学性质的研究

为观察癫痫发作过程海马神经元丢失细胞的主要死亡方式 ,用马桑内酯建立慢性致痫大鼠模型 ,以 Nissl染色、免疫组化、TUNEL法以及后二者相结合的技术 ,对海马神经元及其中的抑制性神经元的丢失进行了分区观察、统计、分析。结果发现 :致痫组海马各区神经元较对照组明显减少 ,不同区域减少程度不同 ,以齿状回减少最为明显 ;免疫组化结果显示 ,致痫组的抑制性神经元 GABA-IR神经元、PV-IR神经元、CB-IR神经元在海马各区有不同程度的减少 ,其中 GABA-IR神经元减少最明显。在海马各区所有丢失的神经元中 ,三种抑制性神经元所占的比例不同 ;并在海马各区均可见到 TUNEL -GABA、TUNEL-PV、TU NEL-CB双重反应阳性神经元。提示 :马桑内酯所致的癫痫发作 ,可引起海马神经元丢失 ,且不同区域丢失的程度不同 ,丢失的神经元可能以凋亡方式为主 ;海马抑制性神经元 GABA-IR、PV-IR、CB-IR神经元在癫痫发作过程中也有不同程度的丢失 ,丢失很可能也是以凋亡形式为主     

海马内微量注射硫酸镁对马桑内酯诱发大鼠痫样放电的影响

目的和方法:采用皮层应用或海马内注射马桑内酯的方法致痫大鼠,用钙离子选择性微电极检测了致痫动物皮层、海马细胞外Ca2+浓度的变化,观察了海马CA2区注射硫酸镁对致痫大鼠脑电图和皮层、海马诱发电位的影响.结果:马桑内酯致痫时,皮层、海马细胞外Ca2+浓度分别降低了0.61 mmol·L-1和0.74 mmol·L-1,海马内注射硫酸镁能明显地抑制致痫动物皮层、海马诱发电位和脑电图痫样放电.结论: 镁盐的上述作用可能与抑制Ca2+流入神经元内有关.     

钙通道激动剂诱发小鼠中枢神经系统c—fos表达的研究

本实验用免疫组织学方法了Ｌ型钙通道激动剂ＢａｙＫ８６４４皮下注射后小鼠中枢神经系统原癌基因ｃ－ｆｏｓ的表达特点，结果表明，给Ｂａ６Ｋ８６４４后１＝２ｈ ｃ－ｆｏｘ的表达产物Ｆｏｓ蛋白在前嗅核１嗅结节、梨状皮质、 回、感觉运动皮质，丘脑室旁核、大脑视皮质纹关讴，颞叶听区、中缝核群等区域出现，给给后２－４ｈ表达达高峰，之后进行性消退，１６ｈ恢复正常水平。使用钙通道拮抗剂ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ对ＢａｙＫ６     

癫痫大鼠海马和大脑皮质糖皮质激素受体变化的观察

为了探讨糖皮质激素受体（ＧＲ）与癫痫发病机制间的关系，本研究应用免疫细胞化学ＰＡＰ法显示马桑内酯致痫大鼠海马和大脑皮质内ＧＲ的变化，并用显微图像分析仪进行检测分析。结果显示：ＧＲ主要表达在海马回的锥体细胞层、齿状回颗粒细胞层及大脑皮质各层，特别是Ⅳ、Ⅴ层。ＧＲ免疫反应主要定位于细胞核内，胞浆内有较弱的免疫反应。图像分析及统计学处理表明：癫痫大鼠海马回、齿状回、大脑皮质含ＧＲ免疫反应阳性细胞数目、平均总面积、平均光密度均明显低于对照鼠，有极显著性差异。结果提示：ＧＲ的减少可能与癫痫的发病机制有密切关系     

海人酸诱导大鼠海马nestin的表达

为了探讨海人酸(kainicacid,KA)侧脑室注射后大鼠海马内nestin的表达变化,本文选用成年雄性SD大鼠,并随机分成实验组和对照组。实验组大鼠侧脑室注射1μl(0.5μg/μl)KA,分别于术后1、3、7、14、30、60、90d处死动物,并应用免疫荧光方法观察神经前体细胞标记物nestin、神经元特异烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。实验组大鼠海马的nestin阳性细胞在KA注射后3d开始出现于齿状回、CA3和CA1区,到7d达到高峰,然后逐渐减少。注射侧的nestin阳性细胞数均较非注射侧多(P<0.01);对照组仅有散在阳性细胞。本结果提示,海人酸可诱导和增强大鼠海马nestin的表达,而这些表达nestin的细胞主要为星形胶质细胞。     

马桑内酯所致慢性癫痫大鼠海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白的表达

用免疫组织化学方法研究了系统应用马桑内酯所致的慢性癫痫大鼠海马中星形胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白的表达。结果证明,整个海马的胶质纤维酸性蛋白免疫反应明显增强,并可见阳性细胞增生、胞体肥大,尤以齿状回门区和海马分子腔隙层及始层为甚。此外,本实验还发现海马胶质纤维酸性蛋白的阳性反应强度随发作后不同时间间隔（２ ｈ～９ ｄ）而不同,且直至发作后９ ｄ,胶质纤维酸性蛋白阳性反应程度仍高于对照组。此结果表明,马桑内酯所致癫痫反复发作可使海马星形胶质细胞内胶质纤维酸性蛋白的表达长期保持在较高水平。     

马桑内酯和糖皮质激素对培养脑神经元Glu和GABA免疫反应阳性的影响

为了探讨糖皮质激素与抗癌作用的关系，本研究利用培养的大鼠大脑皮质神经元，在经致痫剂马桑内酯和糖皮质激素处理后，进行Glu和GABA免疫细胞化学染色，观察它们对免疫反应阳性细胞的影响，并对实验结果进行了图象分析。结果发现：马桑内酯处理可使Glu免疫反应阳性神经元增多，使GABA免疫反应阳性神经元减少；而先加马桑内酶再加糖皮质激素，则可使Glu阳性神经元大为减少,GABA阳性神经元比只加马桑内酯组增多。上述改变均有统计学意义。此结果提示：马桑内酯诱发的癫痫可能与Glu和GABA的含量变化有关，糖皮质激素在致痫状态下，可能有降低Glu升高GABA含量的作用，从而具有抗痫效应．     

体内和体外实验中马桑内酯对大鼠大脑皮质神经元白细胞介素-2受体表达的影响

为了探讨免疫调质与癫痫发病机制的关系，本文应用免疫细胞化学PAP法对体内和体外实验中马桑内酯（致痫剂）对大鼠大脑皮质种经元白细胞介素-2受体表达的影响进行了研究．在体内实验中，对照经大鼠大脑皮质仅见少量弱阳性白细胞介素-2受体免疫反应神经元，其免疫反应性定位于种经元膜上．大鼠一侧侧脑室注射马桑内酯诱发癫痫后，大脑皮质白细胞介素-2受体阳性神经元明显增多，免疫反应增强．在体外实验中，用马桑内酯温育培养大双皮质神经元24h，其白细胞介素2受体阳性神经元也比对照组增加了1．5倍，免疫染色加深．本实验结果提示，大脑皮质神经元上的白细胞介素-2受体可能参与癫痫的病理机制．     

谷氨酸脱羧酶抗体和胰岛细胞抗体在IDDM诊断中的价值

用放射免疫法测定７９例胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）和５３例非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）病人的血清谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ）抗体，用ＥＬＩＳＡ法测定ＩＤＤＭ组的胰岛细胞抗体（ＩＣＡ）和胰岛素抗体（ＩＡＡ）。结果ＩＤＤＭ组ＧＡＤ抗体的阳性率为４６．８％，初发ＩＤＤＭ（病程不超出１年）与病程超出１年的ＧＡＤ抗体一率分别是６２．９％和３４．１％。ＮＩＤＤＭ及正常对照组未见阳性的ＧＡＤ体。ＩＣＡ和ＩＡＡ     

维甲酸诱导大鼠胚胎脑神经干细胞P450RAI基因的表达

目的 探索全反式维甲酸(RA)对神经干细胞和分化细胞P450RAI表达的影响。方法 从大鼠胚胎脑中分离神经干细胞，用EGF促进其增殖，再用不同浓度的RA单独处理，在不同时间用RT-PCR测定神经干细胞及分化细胞的P450RAI表达水平。结果1μmol／L RA处理神经干细胞，P450RAI mRNA水平最高。1μmol／L时2h就可检测到神经干细胞P450RAI mRNA的生成，4～12h达到高峰，随后迅速下降，24h几乎检测不到P450RAI mRNA。间断给予RA，P450RAI的表达随之下降。在EGF诱导生成的分化细胞中无P450RAI表达，而在RA处理的分化细胞中有少量表达。结论 神经干细胞表达P450RAI对RA有浓度依赖性并需要RA的持续存在，随着神经干细胞分化为神经细胞，其表达量下降。     

NMDA受体1和雌激素受体在白细胞介素-2致痫大鼠脑内的表达变化和共存

目的 探讨白细胞介素2(IL-2)致痫与NMDA受体(NMDAR)和雌激素受体(ER)的关系.方法 应用免疫组织化学、免疫荧光双标和激光共焦显微镜技术研究IL-2致痫大鼠及经免疫抑制剂预处理后再致痫大鼠脑内NMDAR-1、ER的表达变化以及NMDAR/ER和NMDAR/IL-2R共存情况.结果 大鼠侧脑室注射IL-2以后,动物出现明显的癫痫发作,其大脑皮质和海马部位NMDAR-1及ER表达较对照组明显增多,免疫反应平均吸光度(A)值与对照组相比有极显著性差异;而用IL-2抑制剂环胞霉素(CsA)或糖皮质激素(G)预处理后再注射IL-2,动物未出现或仅出现轻微的癫痫发作,其NMDAR-1和ER表达较IL-2组明显减少(P＜0.05).研究还观察到大鼠脑内大脑皮质和海马部位NMDAR/ER或NMDAR/IL-2R之间存在着广泛共存.结论 IL-2有致痫作用,NMDAR-1、IL-2R和ER在致痫活动中可能存在协同和互动作用.