川芎嗪对宫内生长受限幼鼠学习记忆能力的影响

目的:探讨川芎嗪对宫内生长受限(FGR)幼鼠学习记忆能力的影响。方法:被动吸烟法建立大鼠FGR模型。孕鼠随机分为5组:对照组、模型组、川芎嗪高、中、低剂量治疗组。记录幼鼠出生体重;于23日龄开始Mor-ris水迷宫试验,29日龄开始消极回避试验,测试其学习记忆能力,30日消极回避试验后测量幼鼠体重。结果:①模型组幼鼠出生体重低于对照组及各川芎嗪治疗组,差异有显著性(P<0.01)。②Morris水迷宫试验中,训练第2-6天,模型组幼鼠平台潜伏期均高于对照组及川芎嗪各剂量组;消极回避试验中,模型组幼鼠所受电击次数高于对照组及川芎嗪各剂量组(低剂量组P<0.05;中、高剂量组P<0.01)。模型组24 h后保持潜伏期低于对照组及川芎嗪各剂量组(低剂量组P<0.05;中、高剂量组P<0.01)。③30 d体重模型组明显低于对照组及川芎嗪各剂量组(低剂量组P<0.05;中、高剂量组P<0.01)。结论:FGR幼鼠存在生长发育障碍及学习记忆能力下降,川芎嗪可促进幼鼠生长发育及学习记忆能力。     

生长相关蛋白43在宫内发育迟缓胎鼠脑组织中表达的研究

目的:探讨生长相关蛋白43(GAP-43)在胎儿宫内发育迟缓(IUGR)鼠脑发育过程中的表达情况.方法:钳夹一侧供应子宫的血管30 min,制成IUGR模型,不钳夹侧为对照组.通过免疫组化方法检测GAP-43在两组鼠脑中顶叶皮质分子层及海马CA1区的表达水平.结果:IUGR组胎鼠大脑顶叶皮质分子层GAP-43的表达水平显著低于对照组(P＜0.05),海马CA1区GAP-43的表达在IUGR组与对照组相比无显著差异.结论:慢性宫内缺血在导致IUGR的同时可引起胎鼠大脑顶叶皮质分子层中GAP-43的表达显著减低,间接反应出IUGR胎鼠有宫内神经系统损伤存在.     

碱性成纤维细胞生长因子对宫内生长受限胎鼠脑保护作用的研究

目的:研究宫内发育阶段的神经系统损伤及其防治,探讨外源性给孕鼠应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对宫内生长受限(FGR)胎鼠脑损伤的保护作用。方法:利用子宫动脉钳夹法制作FGR胎鼠模型。将孕鼠分为3组:FGR模型组、假手术对照组和bFGF治疗组。经腹腔给予bFGF4u/g。采用RT-PCR法测定脑组织S100-β及生长相关蛋白43(GAP-43)mRNA的表达。结果:FGR组胎鼠体质量(3.312±0.469)g,明显低于对照组(4.263±1.016)g(P<0.001);bFGF治疗组胎鼠体质量(3.357±0.429)g,较FGR组略有增高。S100-βmRNA的表达,FGR组(1.213±0.273)明显高于对照组(0.989±0.279,P<0.01);bFGF组(1.037±0.390)与对照组较为接近(P>0.05),略低于FGR组(P<0.05)。GAP-43 mRNA的表达,FGR组(1.152±0.222)与对照组(1.307±0.191)相比显著减少(P<0.01);bFGF组减少不明显(1.241±0.214),与对照组相比无差异(P>0.05)。结论:子宫动脉钳夹法复制出的FGR胎鼠脑组织中S100-β及GAP-43 mRNA表达异常可能与胎鼠神经系统损伤有关。外源性给母鼠应用bFGF治疗后可能对胎鼠的神经系统损伤起到一定的保护性作用。     

托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马生长相关蛋白-43 mRNA和蛋白表达的影响

目的：观察托吡酯（TPM）对戊四氮点燃大鼠海马生长相关蛋白．43（GAP-43）蛋白和mRNA表达的影响。方法：健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只。模型对照组大鼠灌胃给予生理盐水（10mL／kg）,低、高剂量TPM组分别按40mg／kg和100mg／kg给予10g／LTPM生理盐水溶液,空白对照组给予等量生理盐水,1h后,前3组大鼠腹腔注射10g／L戊四氮（35mg／kg）建立戊四氮点燃大鼠癫痫模型,空白对照组给予等量生理盐水。当模型对照组大鼠行为达到点燃时,应用RT．PCR方法半定量检测GAP-43mRNA的表达,应用免疫组织化学方法检测齿状回、海马CA3区和CA1区内GAP-43蛋白的表达强度。结果：与空白对照组相比,模型对照组,低剂量TPM组和高剂量TPM组大鼠齿状回与CA3区的GAP-43mRNA和蛋白表达强度升高（P〈0．05）;与模型对照组相比,低剂量TPM组和高剂量TPM组大鼠齿状回和CA3区的GAP-43mRNA和蛋白表达强度降低（P〈0．05）。结论：戊四氮点燃大鼠海马GAP-43表达增强,表明突触重建参与了癫痫发生的病理过程。TPM可抑制GAP-43的过表达,2种剂量的抑制作用无差异。     

石菖蒲有效成分对APP/PS1双转基因小鼠GAP-43表达的影响

目的:观察石菖蒲有效成分β-细辛醚对APP/PS1双转基因小鼠生长相关蛋白43(growth-associated protein 43,GAP-43)表达的影响,探讨β-细辛醚对APP/PS1双转基因小鼠神经突触可塑性的保护作用及对阿尔茨海默病(AD)的治疗作用机制。方法:选取2019年3-4月40只2月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组,盐酸多奈哌齐组,低剂量组及高剂量组,每组10只,选用10只相同月龄C57BL/6小鼠为空白对照组。空白对照组与模型组分别给予0.1 mL/10 g 0.9%氯化钠溶液,盐酸多奈哌齐组给予0.33 mg/(kg·d)盐酸多奈哌齐,低剂量组给予β-细辛醚25 mg/(kg·d),高剂量组给予50 mg/(kg·d)β-细辛醚,五组均连续灌胃4周。采用Morris水迷宫法检测并比较各组学习记忆能力,采用免疫荧光法检测并比较各组海马区GAP-43蛋白的表达变化,采用RT-PCR技术检测并比较各组海马区GAP-43mRNA表达水平。结果:模型组、盐酸多奈哌齐组、低剂量组与高剂量组逃避潜伏期均高于空白对照组,且跨越平台次数均低于空白对照组(P0.05)。盐酸多奈哌齐组、低剂量组与高剂量组逃避潜伏期均低于模型组,且跨越平台次数高于模型组(P0.05)。盐酸多奈哌齐组与高剂量组逃避潜伏期均低于低剂量组(P0.05)。盐酸多奈哌齐组与高剂量组跨越平台次数均高于低剂量组,且高剂量组高于盐酸多奈哌齐组(P0.05)。模型组、盐酸多吗哌齐组、低剂量组与高剂量组GAP-43蛋白与GAP-43mRNA表达量均高于空白对照组(P0.05)。盐酸多奈哌齐组、低剂量组与高剂量组GAP-43蛋白与GAP-43mRNA表达量均低于模型组(P0.05)。结论:β-细辛醚具有改善AD的作用,并且作用机制与调控小鼠海马神经突触可塑性相关因子GAP-43的表达相关。     

米诺环素对大鼠脑缺血再灌注损伤后学习记忆能力及海马神经元PSD-95蛋白表达的影响

目的:探讨静脉用低剂量米诺环素对局灶性脑缺血再灌注大鼠认知功能障碍及缺血侧海马生长相关蛋白-43(growth associated protein-43,GAP-43)和突触后致密物质-95(postsynaptic density 95,PSD-95)表达的影响。方法:采用线栓法建立Sprague-Dawley大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型,将45只雄性大鼠随机分为假手术组、模型组及米诺环素组(n=15)。分别采用免疫组织化学及免疫印迹法检测术后2周大鼠缺血侧海马GAP-43和PSD-95蛋白的表达,Morris水迷宫实验评价大鼠的行为学改变。结果:同假手术组相比,模型组大鼠缺血侧海马GAP-43(0.49±0.03)和PSD-95(0.92±0.04)表达明显增高(P=0.000);大鼠逃避潜伏期明显延长[(44.2±10.0)s],穿过原平台次数(2.6±0.9)和在目标象限探索时间百分率明显降低[(19.2±2.1)%,P=0.000)]。同模型组相比,尾静脉给予3 mg/kg米诺环素治疗后,大鼠缺血侧海马GAP-43(0.72±0.05)表达明显增加,PSD-95表达降低(0.67±0.05,P=0.000),大鼠逃避潜伏期明显缩短[(30.8±7.6)s,P=0.020]、穿过原平台次数(4.4±1.1,P=0.012)和在目标象限探索时间百分率明显增加[(30.4±2.7)%,P=0.000)]。结论:低剂量米诺环素能显著改善脑缺血再灌注后大鼠学习记忆能力,其机制可能与上调GAP-43和下调PSD-95表达有关。     

氯胺酮对SD幼鼠海马GAP-43蛋白的影响

目的观察氯胺酮对7d龄SD幼鼠海马神经元细胞GAP-43表达的影响。方法对7d龄SD幼鼠注射氯胺酮25mg/kg(k1组)、50mg/kg(k2组),对照组注射生理盐水50 ml/kg(k0组),24h后取材,采用免疫组化染色和Western blot技术检测SD幼鼠海马GAP-43蛋白的表达,进行图像分析。结果注射氯胺酮后24h,免疫组化染色GAP-43蛋白阳性细胞计数:k0组为(85.4±15.2)个/mm2,k1组为(67.6±11.5)个/mm2,k2组为(36.6±9.7)个/mm2。Western blot GAP-43蛋白电泳条带灰度值k0组为186.375±7.45,k1组为165.754±7.012,k2组为158.852±8.721。k1组和k2组GAP-43蛋白的表达明显减少。结论注射氯胺酮后24h,SD大鼠海马神经元细胞GAP-43蛋白的表达下调,可能和氯胺酮神经毒性有关。     

新生鼠脑缺血预处理后海马CA1区GAP-43的表达

目的:观察新生Wistar鼠脑缺血再灌注后海马CA1区生长相关蛋白43(GAP-43)的表达和意义. 方法:通过阻断7日龄新生Wistar大鼠右侧颈总动脉45 min制备脑缺血模型,设置假手术组、缺血再灌注组和预缺血-缺血再灌注组. 采用免疫组化方法和计算机图像分析技术检测三组新生鼠不同时点海马CA1区脑组织GAP-43的动态变化及三组光镜下脑组织病理改变. 结果: ①脑组织病理改变:假手术组大鼠无异常病理改变,缺血再灌注组神经细胞变性、坏死,预缺血组-病理损伤较缺血再灌注组轻. ②GAP-43表达:缺血再灌注组海马GAP-43表达在再灌注后24 h时开始增高,7 d达高峰,至14 d与假手术组比较差异有统计学意义(P＜0.05);预缺血-缺血再灌注组GAP-43表达较缺血再灌注组增加更明显,与假手术组和缺血再灌注组比较均差异有统计学意义(P＜0.05). 结论: 新生鼠脑缺血预处理可减轻再次严重脑缺血对神经细胞的损伤,脑缺血预处理后海马CA1区GAP-43表达和合成增加,GAP-43表达增加可能与神经元再生和轴突重塑有关,是脑缺血后神经细胞内源性代偿机制之一.     

甘草甜素对周围神经损伤模型大鼠神经再生的干预效果及其可能机制

目的探讨甘草甜素对周围神经损伤模型大鼠的干预效果及其可能机制。方法选取50只SD健康雄性大鼠,建立周围神经损伤模型,随机分为对照组、模型组、低剂量、中剂量、高剂量组各10只。低、中、高剂量组大鼠分别给予10 mg/kg、20 mg/kg、30 mg/kg甘草甜素溶液灌胃,对照组、模型组大鼠灌胃等体积生理盐水。检测各组大鼠有髓神经纤维直径和数量,计算比目鱼肌肌肉指数;并检测脊髓组织生长相关蛋白43(GAP-43)、神经营养因子受体p75(p75NTR)蛋白表达水平,T、B淋巴细胞增殖率,神经元细胞凋亡率。结果模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、对照组大鼠脊髓GAP-43相对表达量依次升高,p75NTR相对表达量依次降低,比目鱼肌肌肉指数及有髓神经纤维直径、数量依次升高(P<0.05);各个时间段,模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、对照组大鼠T、B淋巴细胞增殖率、神经元细胞凋亡率依次降低(P<0.05)。结论甘草甜素可能通过调控GAP-43、p75NTR蛋白的表达,来抑制周围神经损伤模型大鼠T、B淋巴细胞增殖以及神经元细胞凋亡,从而促进周围神经再生,减轻比目鱼肌萎缩程度。     

早期丰富环境干预对缺氧缺血性脑损伤新生鼠海马GAP-43表达的影响

目的 探讨早期丰富环境干预对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain injury, HIBI)新生大鼠海马生长相关蛋白(Growth-associated protein-43, GAP-43)表达的影响.方法 按Rice法制备SD大鼠HIBI模型,随机分为干预组和非干预组,假手术大鼠作为对照组.干预组大鼠于HIBI后第2天开始丰富环境干预,分别于术后第3、7、14、21、28天取各组大鼠脑组织进行免疫组织化学染色和RT-PCR检测,观察不同时间点各组大鼠海马GAP-43及其mRNA表达的差异.结果 非干预组大鼠海马GAP-43及其mRNA表达强于对照组(P＜0.01),干预组海马GAP-43表达于术后第14、21、28天强于非干预组,差异显著(P＜0.05),GAP-43mRNA表达于术后第7、14、21、28天强于非干预组,差异显著(P＜0.05). 结论 早期丰富环境干预可以增强HIBI新生大鼠海马GAP-43及其mRNA的表达,提示GAP-43表达的增多可能参与了丰富环境影响HIBI新生大鼠损伤修复的机制.     

神经节苷脂对脑外伤大鼠大脑皮质和海马区GAP-43表达的影响

目的观察神经节苷脂（GM1）对脑外伤大鼠大脑皮质和海马区神经生长相关蛋白-43（GAP-43）表达的影响,探讨GM1促进脑外伤神经修复的可能机制。方法选择出生10周雄性SD大鼠200只,随机分为假手术组60只,无脑外伤,术前腹腔注射生理盐水3 d。脑外伤模型140只,分为模型组70只,术前腹腔注射生理盐水3 d;GM1组70只,术前腹腔注射GM13 d。应用酶联免疫法检测大鼠大脑顶叶皮质和海马区GAP-43于0～24 h不同时间点的表达情况,并在术后1～5 d不同时间点进行行为学检测。结果 （1）GM1组大鼠大脑顶叶皮质0～16 h和海马区0～24 h GAP-43的表达均明显低于模型组（P〈0.01）,而与假手术组比较,大鼠顶叶皮质区8～24 h GAP-43的表达,差异有统计学意义（P〈0.01）。（2）GM1组大鼠大脑顶叶皮质GAP-43的表达,术后随着时间的增加而升高,至24 h已达模型组水平。（3）假手术组的行为学表现1～5 d均优于模型组和GM1组（P〈0.01）,GM1组在术后2～5 d运动能力逐步增强,行为学表现优于模型组（P〈0.05）。结论预防性使用GM1有效地促进大鼠大脑皮质GAP-43的表达升高,降低脑外伤大鼠脑损伤程度,从而发挥其对实验性脑外伤大鼠的神经保护作用。     

阻断子宫动脉建立FGR大鼠模型的研究

目的通过暂时阻断妊娠期大鼠子宫血供的方法建立子宫缺血引起胎儿生长受限的动物模型。方法根据大鼠子宫动脉是卵巢动脉的一个分支的解剖特点,于孕鼠妊娠第15天时施行手术暂时阻断卵巢动脉并于第21天行剖宫产术,术后称量新生胎仔体重及胎盘、脑、心、肝、肺、肾等重要脏器重量,对比各组间新生胎仔的预后的不同,并对照研究阻断血供10、20、30及40 min对胎仔的不同影响。结果妊娠晚期阻断孕鼠卵巢动脉20min可成功构建胎儿生长受限模型,这种方法与阻断动脉血流30或40 min相比,手术时间短,技术要求不高,胎仔死亡率与对照组差异无显著性(P>0.05)。各实验组较对照组新生胎仔体重及胎盘、各重要脏器重量均明显降低(P<0.05)。结论通过阻断卵巢动脉从而阻断子宫动脉血流,成功建立缺血缺氧性FGR孕鼠模型。该模型重复性好,操作简便,并可成功设立同体对照,为进行FGR相关的产科理论研究提供了一个有利的技术平台。     

饮水砷暴露对子代雌性大鼠海马组织神经生长因子、神经生长相关蛋白mRNA表达的影响

目的 探讨孕期和哺乳期大鼠亚砷酸钠暴露后,对第一子代雌性大鼠海马神经生长因子(NGF)和神经生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA表达的影响。 方法 12只雌鼠于受孕后第6 d开始以自由饮水方式分别暴露于0、10、50、100 mg/L NaAsO₂水溶液,连续染毒直到仔鼠出生后第21 d,取子代雌性大鼠脑海马组织进行HE、尼氏体染色观察海马CA1、CA3、DG区神经元的形态及数目改变;应用RT-PCR检测各组仔鼠海马NGF、GAP-43 mRNA的表达。 结果 HE结果显示对照组仔鼠CA1、CA3区海马神经元细胞结构正常,各染砷组仔鼠可见海马神经元边缘欠清晰,胞体皱缩,有核固缩等凋亡征象。尼氏体染色:对照组海马神经元胞浆富含尼氏体,随着染毒剂量的增加,尼氏体减少,其中以CA1区损伤最为明显。RT-PCR结果显示,各剂量组仔鼠NGF、GAP-43 mRNA表达降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。各砷暴露组之间NGF、GAP-43 mRNA的表达随砷剂量增高而下降(P均<0.05)。 结论 大鼠孕期和哺乳期砷暴露,可以损伤第一子代雌性大鼠海马神经元细胞,抑制海马区NGF、GAP-43 mRNA的表达,从而损害学习记忆能力。     

川芎嗪治疗胎儿生长受限的临床疗效

目的:探讨川芎嗪防治胎儿生长受限(FGR)的临床疗效。方法:将34例FGR孕妇随机分为川芎嗪组17例(A组)和营养支持组17例(B组),另外选择同期在我院定期产检并分娩的正常孕妇30例作为正常妊娠对照组(C组)。A组给予营养支持治疗的同时加用川芎嗪注射液治疗,B组仅予以相同的单纯营养支持治疗,7 d为1疗程;C组除左侧卧位外,不予以其他处理。监测胎儿生长发育参数、脐动脉血流及围产儿结局。结果:治疗后,A组测量的胎儿各生长径线值、新生儿出生体重明显高于B组,而脐血流阻力指标与B组相比明显下降,均有显著性差异。结论:川芎嗪能明显改善FGR孕妇子宫胎盘血流灌注,促进胎儿生长发育,川芎嗪结合营养支持较单纯的营养支持治疗具有更好的临床疗效。     

不同剂量托吡酯对癫大鼠海马组织中NCAM和GAP- 43 mRNA表达的影响

目的 研究不同剂量托吡酯(TPM)干预下,大鼠海马组织中神经细胞黏附分子(NCAM)和生长相关蛋白- 43(GAP- 43)mRNA的表达变化.方法 将48只大鼠随机分成正常对照组、海人酸(KA)组、10 mg/kg TPM组、40 mg/kg TPM组、100 mg/kg TPM组和400 mg/kg TPM组,每组8只;建立不同剂量的TPM干预癫大鼠模型.观察大鼠行为学改变;通过Real-time PCR测定各组大鼠海马组织中NCAM和GAP- 43的mRNA表达.结果 KA组大鼠海马NCAM及GAP- 43的mRNA表达水平明显高于正常对照组(P<0.01),10 mg/kg TPM组和40 mg/kg TPM组与KA组的差异无统计学意义,100 mg/kg TPM组和400 mg/kg TPM组明显低于KA组(P<0.01),其中400 mg/kg TPM组明显低于100 mg/kg TPM组(P<0.01).结论 KA诱导癫大鼠海马NCAM和GAP- 43 mRNA表达上调,较大剂量TPM能够抑制NCAM和GAP- 43 mRNA的表达,且抑制作用与TPM剂量有关.     

生长相关蛋白在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马中的表达变化

目的 研究7日龄新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage, HIBD)后海马神经组织生长相关蛋白(growth-associated protein,GAP-43)及其mRNA的表达变化.方法 按Rice法制备SD大鼠HIBD模型,并以正常新生大鼠为对照.以免疫组织化学和RT-PCR法检测不同时相点海马组织GAP-43及其mRNA的表达.结果 新生大鼠HIBD后海马GAP-43及其mRNA表达较同日龄正常大鼠明显增高,表达高峰分别在损伤后第2周和第3周.结论 新生大鼠HIBD后海马GAP-43及其mRNA表达增高,可能与海马损伤后修复有关.     

胎鼠血清胰岛素样生长因子水平改变与宫内生长迟缓的关系研究

目的　观察胎鼠血清胰岛素样生长因子 和 (IGF- 和 IGF- )的变化 ,探讨 IGFs与胎儿宫内发育迟缓 (IUGR)发生的关系。方法　 2 1只 SD孕鼠被随机分为对照组 9只 ,实验组 (IUGR) 12只。实验组于第14天行双侧子宫动、静脉钳夹 2 0分钟以建立胎鼠 IUGR模型。对照组仅行开腹和关腹术。比较两组胎鼠血清 IGFs的浓度及体重、身长和肝、肺、脑及胎盘的重量。结果　实验组血清 IGF- 、 浓度分别为 117.92± 2 6 .5 8ng/ ml和2 33.19± 33.35 ng/ ml,明显低于对照组 (分别为 2 34 .43± 70 .6 5 ng/ m l和 397.74± 2 3.6 9ng/ m l) (P均 <0 .0 1) ,其体重、身长及肝、肺、脑、胎盘组织的重量亦明显低于对照组 (P均 <0 .0 5 )。结论　胎鼠血 IGF- 和 IGF- 水平的降低是 IU GR发生的内在因素之一 ,IGFs在胎儿生长发育中有重要的作用。     

羊膜上皮细胞移植对脑缺血缺氧新生大鼠脑神经元及生长相关蛋白43的影响

目的探讨羊膜上皮细胞移植对缺氧缺血新生大鼠脑生长相关蛋白43和神经元烯醇化酶(N SE)表达情况的影响。方法 7 d龄大鼠随机分为假手术组、模型组和移植组,移植组和模型组经侧脑室注入1×106BrdU标记人羊膜上皮细胞悬液和PBS治疗;假手术不治疗,移植后1、2和3周观察大鼠神经功能的变化,免疫组织化学法检测脑BrdU阳性细胞、生长相关蛋白43、N SE的表达。结果移植组和模型组大鼠的神经功能评分明显改善,移植后第3周脑切片检出BrdU阳性细胞存在,模型组生长相关蛋白43和N SE在第3周的表达均低于假手术组,移植组较模型组增加。结论羊膜上皮细胞移植入脑缺血缺氧大鼠脑内后,可减轻缺氧缺血大鼠神经元的损伤,G AP-43和N SE蛋白表达增强,促进神经轴突的生长与延伸,从而改善神经功能。