大网膜脊髓移植治疗实验性脊髓损伤的研究

目的：为验证大网膜是否对脊髓损伤有修复作用。方法：本车实验采用SD雌性大白鼠20只，分实验、对照两组。在同等条件及体感诱发电位监测下造成截瘫。实验组施行带蒂大网膜脊髓移植．对照组截瘫后不作任何处理，动物饲养存活3～8周后进行辣根过氧化酶逆行追踪法研究。结果：发现实验组红核内标记细胞总数为1846个，对照组为556个。P值<0．05，提示差别显。结论：结果表明脊髓损伤后．大网膜脊髓移植对红核脊髓束神经纤维轴浆运输的恢复有促进作用，从形态学的角度进一步肯定了大网膜脊髓移植治疗外伤性截瘫的临床价值．     

带蒂大网膜脊髓移植治疗急性脊髓损伤的护理

目的 探讨带蒂大网膜脊髓移植治疗急性脊髓损伤的护理方法.方法 我院2006-01～2007-06开展应用带蒂大网膜脊髓移植抢救治疗急性脊椎损伤性截瘫19例,我们根据大网膜的特殊生理功能,将大网膜移植于受伤脊髓表面,使其形成侧支循环,从而解决外伤后脊髓的缺血缺氧问题,有利神经功能恢复.结果 经6～8个月随访,除2例手术中发现脊髓部分横断病例,经长期恢复感觉平面下降,大小便自控,但肌力恢复较差.其他病例感觉运动、括约肌功能恢复方面均取得满意的临床效果.结论 正确的护理工作在带蒂大网膜脊髓移植治疗急性脊髓损伤中起着重要作用.     

大网膜脊髓移植治疗急性脊髓损伤的神经生化和运动功能实验研究

带蒂大网膜移植于兔损伤的脊髓,观察脊髓组织中5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺含量的改变,并观察脊髓运动功能恢复情况。实验显示大网膜脊髓移植可以早期吸收脊髓损伤后异常升高的五羟色胺和去甲肾上腺素。大网膜移植组动物运动功能恢复显著优于损伤组。作者认为大网膜的吸收功能在治疗急性脊髓损伤中可能有一定的作用。     

狗大网膜转移治疗实验性脊髓损伤的研究

我院自1982年6月在临床开展大网膜脊髓移植治疗外伤性截瘫以来,至今共手术200余例。通过观察,发现对运动、感觉、括约肌、植物神经系统、性机能等功能均取得不同程度的恢复。为此,本实验用狗作大网膜转移治疗实验性脊髓损伤的研究,现将结果报告如下:材料和方法     

甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤截瘫后肠道细菌移位的抑制作用

背景：我们以往的研究显示急性脊髓损伤截瘫后,自主神经紊乱导致的肠道动力障碍促使细菌移位的发生。目前认为大剂量甲基强的松龙可促进脊髓损伤患者神经功能的恢复。但不清楚甲基强的松龙能否通过促进神经功能的恢复,从而抑制急性脊髓损伤后肠道细菌的移位？本实验的目的为明确上述问题。方法：建立大鼠脊髓损伤截瘫模型。实验组大鼠脊髓损伤截瘫后立即给予大剂量甲基强的松龙,对照组大鼠脊髓损伤截瘫后立即给予生理盐水作为对照,在急性脊髓损伤后24、72小时及1周评估BBB运动功能得分,采血行细菌培养和内毒素检测。同时采集肠系膜淋巴结、脾脏、肝脏标本行细菌培养。脊髓损伤后1周行肠系膜淋巴结、脾脏、肝脏、空肠和回肠组织学观察。结果：急性脊髓损伤后1周,实验组大鼠BBB运动得分显著高于对照组(10.36±0.86 vs 6.32±1.02, P <0.05)。两组动物在脊髓损伤后24小时均发现内毒素血症及细菌生长。然而,脊髓损伤后72小时及1周,实验组大鼠血浆内毒素水平显著低于对照组(损伤后72小时：216.15±12.90 vs 435.54±10.76 , P <0.05,损伤后1周：106.58±18.56 vs 368.85±17.35, P <0.05)。脊髓损伤截瘫后移位细菌主要为大肠杆菌、阴沟杆菌、大肠埃希氏菌、普通变形杆菌、肠粪球菌等。脊髓损伤后1周实验组大鼠肠系膜淋巴结、脾脏、肝脏、空肠和回肠组织学变化程度较对照组轻。结论：大剂量甲基强的松龙冲击疗法可抑制急性脊髓损伤后肠道细菌的移位。急性脊髓损伤患者立即给予甲基强的松龙和抗生素可能有助于抑制潜在的细菌移位。     

组织工程脊髓移植治疗大鼠脊髓半切块状损伤

目的 研究组织工程脊髓移植治疗大鼠脊髓半切块状损伤的疗效.方法 以聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)为细胞支架,多聚赖氨酸为细胞外基质,神经十细胞(NSCs)为种子细胞,体外构建组织工程脊髓.制作大鼠T10脊髓右半切块状损伤模型,随机分成3组:实验组在损伤区移植组织工程脊髓,对照组A移植NSCs,对照组B移植PLGA.移植治疗12周,每周均行BBB评分定量评价肢体运动功能.伤后第12周辣根过氧化物酶(HRP)神经逆行示踪评价脊髓传导束的恢复程度,并取损伤处脊髓组织行免疫组织化学染色,观察移植区的形态结构修复.结果 伤后12周实验组的BBB运动功能评分较对照组明显提高,差异有统计学意义(P＜0.05).HRP神经逆行示踪显示:实验组鼠右侧大脑组织中可见大量的HRP标记阳性神经元,而两对照组仅见有少量HRP阳性神经元;免疫组织化学染色显示:实验组移植区NF阳性神经元和GAP-43阳性神经轴索数量较多,修复了缺损,而对照组极少,仍留下不同程度的缺损.结论 组织工程脊髓移植治疗促进了半切块状损伤脊髓的形态结构修复和功能恢复,疗效明显优于单纯的NSCs移植和PLGA移植.     

改良大网膜脊髓移植术治疗外伤性截瘫二例报告

我院自1984年9月至1985年6月对10例外伤性截瘫患者施行了大网膜脊髓移植手术。最初我们做后路减压加大网膜脊髓后方移植,术后患者感觉平面下降、大小便功能及性功能有不同程度改善,但肌力恢复不够理想。此后我们有2例改做脊柱侧前方减压加大网膜脊髓前方移植,随访半年,病人肌力均有较明显恢复。现报告如下: 例1 男,23岁,战士。患者于1983年8月施工时砸伤腰部,致下肢瘫痪,大小便失禁,住院拍X片示胸12腰1压缩骨折,急诊行钢板内固定手术,术后3个     

脊髓重建术

目前常用的几种脊髓重建术有:脊髓吻合、神经组织移植、许旺氏膜移植、神经架桥、大网膜移植等等.本文对上述各种手术操作进行了详细的叙述.对术后治疗和目前对各种脊髓重建术的评价作了介绍.     

大网膜脊髓移植术治疗外伤性截瘫的临床观察

自1982年6月至1984年5月对44例外伤性截瘫患者采用大网膜脊髓移植术。胸腰段占86.4％,病程23小时至103个月(6个月～36个月48％),术前做过椎板减压56.8％。术后随访13天～18个月(平均4个月20天)。疗效:感觉平面下降者31.8％,肌力不同程度恢复52.2％,括约肌功能改善79.55％。疗效机理:主要是大网膜为损伤脊髓提供了血供、血管活性物质和对电解质,PH、生物化学物质的调整等“激活受伤脊髓”的作用,促进了脊髓功能的恢复。因此认为对急性脊髓轻度挫伤的病例疗效较好,晚期脊髓萎缩病例也有一定效果。     

大网膜脊髓移植术治疗非外伤性截瘫的临床观察

非外伤性脊髓损害造成的截瘫,目前尚无特效治疗方法,我们根据大网膜生理功能的特点及大网膜脊髓移 植术的动物实验研究及临床应用的结果,用于治疗椎管内及脊髓某些病变所致的原发性与继发性脊髓损害并发截瘫.作了探索性的临床治疗观察,1987年11月～1990年3月治疗这类患者32例,总结报告如下。 临床资料 一般资料 本组男22例,女10例,年龄17～49岁平均25.5岁,病程3个月～23年,平均18.5个月。脊髓损害节段T_(2～12)。脊髓炎后遗症24例,脊髓胶质瘤术     

骨髓间充质干细胞尾静脉移植脊髓损伤大鼠脑源性神经营养因子及神经生长因子的表达

背景：骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤有治疗作用,但其机制尚不完全清楚。 目的：应用免疫组织化学方法观察骨髓间充质干细胞静脉移植损伤脊髓局部脑源性神经营养因子及神经生长因子的表达,分析骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的作用途径。 方法：运用改良Allen法制备T10脊髓外伤性截瘫大鼠模型,假手术组6只,脊髓损伤组24只随机分为对照组和骨髓间充质干细胞移植组。骨髓间充质干细胞移植组、假手术组接受骨髓间充质干细胞单细胞悬液1 mL(1×106 cells)自大鼠尾静脉缓慢注射移植,对照组静脉注射PBS 1 mL。 结果与结论：脊髓损伤后损伤局部的脑源性神经营养因子、神经生长因子表达增加,骨髓间充质干细胞静脉注射移植后能促进脊髓损伤局部脑源性神经营养因子、神经生长因子更进一步的表达,这可能是促进神经结构及神经功能恢复的因素之一。     

Combined transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells and pedicled greater omentum promotes locomotor function and regeneration of axons after spinal cord injury in rats*★

BACKGROUND： According to previous studies, the neuroprotective effect of the pedicled greater omentum may be attributed to the secretion of neurotrophic factors and stimulation of angiogenesis. The neurotrophic factors released from the pedicled greater omentum, such as brain-derived neurotrophic factor and neurotrophin 3/4/5 could exert a neuroprotective effect on the damaged host neural and glial cells, and also could induce the transdifferentiation of transplanted bone marrow mesenchymal stem cells （BMSCs） into neural cells. OBJECTIVE： Based on the functions of the omentum of neuro-protection and vascularization, we hypothesize that the transplantation of BMSCs and pedicled greater omentum into injured rat spinal cord might improve the survival rate and neural differentiation of transplanted BMSCs and consequently gain a better functional outcome. DESIGN, TIME AND SETFING： A randomized, controlled animal experiment. The experiments were carried out at the Department of Anatomy, the Secondary Military Medical University of Chinese PLA between June 2005 and June 2007. MATERIALS： Fifteen male inbred Wistar rats, weighing （200±20） g, provided by the Experimental Animal Center of the Secondary Military Medical University of Chinese PLA were used and met the animal ethical standards. Mouse anti-BrdU and mouse anti-NF200 monoclonal antibody were purchased from Boster, China. METHODS： Cell culture： We used inbred Sprague-Dawley rats to harvest bone marrow for culture of BMSCs and transplantation to avoid possible immune rejection. BMSCs were cultured via total bone marrow adherence. Experimental grouping and intervention： The rats were randomly divided into a control group, cell group and combined group, five rats per group. Rats in the control group underwent spinal cord injury （SCI） only, during which an artery clamp with pressure force of 30 g was employed to compress the spinal cord at the Tl0 level for 30 seconds to produce the SCI model. 5 μ L PBS containing 10^5 BMSCs was injected in     

脊髓慢性压迫性损伤后细胞凋亡和BDNF表达的观察

目的 探讨大鼠脊髓在遭受到持续进行性压迫损伤后神经细胞凋亡以及脑源性神经营养因子（BDNF）及其TrkB受体的变化。方法 将75只SD大鼠分为模型组、对照组和正常组,各25只;根据造模后取材时间,各组再分为1、7、14、21、28 d 5亚组,每亚组5只。胸11~12椎板和硬脊膜之间置入缓膨材料（3 mm×5 mm,厚0.8 mm）制作大鼠慢性压迫性脊髓损伤模型,BBB评分评估行为学变化,TUNEL染色检测细胞凋亡,免疫组化染色检测BDNF及其TrkB受体表达变化。结果 造模后7、14、21、28 d,模型组大鼠BBB评分均明显低于对照组和正常组（P<0.05）,而对照组和正常组均无统计学差异（P>0.05）。模型组大鼠可观察到从脊髓受压开始,神经细胞开始出现凋亡,中央管及前角区域的神经细胞凋亡明显,邻近灰质的白质部分神经胶质细胞凋亡明显;而对照组和正常大鼠未见明显凋亡细胞。模型组大鼠脊髓内BDNF及其TrkB受体呈强阳性,尤其是神经元部位,BDNF及其受体TrkB表达明显,且主要表达在运动类神经元中,随压迫进行,表达逐渐增强,至相对稳定;对照组和正常组大鼠脊髓内BDNF及其TrkB受体表达较少。结论 大鼠脊髓在受到慢性压迫性损伤时,神经细胞凋亡明显,BDNF、TrkB受体表达明显增强。     

不完全性脊髓缺血损伤动物模型的建立及价值

目的 探讨不完全性脊髓缺血损伤动物模型的建立方法,为不完全性脊髓缺血损伤机制研究提供理想的载体. 方法 24只新西兰大白兔按照随机数字表法分为对照组及3根组、4根组,每组8只.对照组用于排除麻醉和手术对运动诱发电位的影响;3根组、4根组分别结扎3根、4根腰动脉.各组麻醉后记录基线诱发电位,手术/结扎后30 min、2d、7d记录诱发电位;麻醉清醒后、手术/结扎后2d、7d进行运动功能评分;手术/结扎后7d后取缺血中心区标本进行HE染色,镜下观察. 结果 3根组动物结扎后30 min诱发电位波幅与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),结扎后2d、7d与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);4根组动物结扎后30 min、2d、7d3个时间点诱发电位波幅与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).3组动物手术/结扎后30min、2d、7d3个时间点的潜伏期与对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).各组动物运动功能评分结果与诱发电位波幅变化一致. 结论 结扎3根腰动脉可以造成可逆性不完全性脊髓缺血损伤,结扎4根腰动脉可以造成不可逆性不完全性脊髓缺血损伤.     

高压氧预处理对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响

目的探讨高压氧预处理对急性脊髓损伤后不同时期神经细胞凋亡的影响及神经保护机制。方法将55只SD大鼠随机分为高压氧预处理组（25只）、正常损伤组（25只）及对照组（5只）。大鼠急性脊髓损伤模型制作采用改良Allen＇s法，分别于伤后1d、5d、7d、10d和14d在脊髓损伤部位取材，应用苏木精-伊红染色、原位缺口末端标记（TUNEL）方法检测大鼠脊髓损伤后的神经细胞凋亡情况。结果预处理组和单纯损伤组均见TUNEL阳性凋亡细胞，而预处理组凋亡细胞数减少；在各时间点预处理组与单纯损伤组差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论高压氧预处理可减少继发性脊髓损伤细胞凋亡，因而可促进脊髓损伤后修复，对中枢神经系统损伤具有保护作用。     

Correlation of injury severity and tissue Evans blue content, lipid peroxidation and clinical evaluation in acute spinal cord injury in rats

OBJECTIVE: To demonstrate the changes in microvascular permeability occurring in association with graded acute spinal cord injury and to determine whether tissue Evans blue content is a useful indicator of the severity of spinal cord injury. The study also aimed to test the ability of the Evans blue method to demonstrate secondary injury after spinal cord contusion. METHODS: In step one of the study, spinal cord lipid peroxidation levels and spinal cord Evans blue content were evaluated at 2 h post-injury in five groups of rats: a control group, a laminectomy-only group and three trauma groups (10, 50, and 100 gcm). In step two, these rats were used for Evans blue assessment following clinical examination at 24 h post-injury. RESULTS: The laminectomy-only group showed no difference from the control group with regard to spinal cord lipid peroxidation levels, tissue Evans blue content, and clinical findings. Increase in spinal cord tissue Evans blue content and lipid peroxidation was correlated with increasing intensity of trauma. There was a negative correlation between trauma intensity and clinical findings, and there was an increase in spinal cord tissue Evans blue content at 24 h compared with that at 2 h. CONCLUSIONS: Determination of spinal cord tissue Evans blue content is a reliable, rapid, simple and inexpensive method that can be used in experimental spinal cord injury to assess the severity of injury and to evaluate neuroprotection studies. The present study is the first to show that the Evans blue technique is a useful method to demonstrate secondary injury of spinal cord tissue and vasculature.     

构建脊髓慢性压迫损伤模型大鼠巢蛋白的表达规律*

背景：既往应用的脊髓损伤动物模型难以达到一种慢性渐进性的压迫效果,与人体慢性脊髓压迫损伤机制有很大的不同。 目的：构建一种新的脊髓慢性压迫性损伤模型大鼠,探究慢性压迫损伤后脊髓损伤区域巢蛋白的表达规律及其意义。 方法：Wistar大鼠40只随机分为实验组30只和对照组10只。实验组大鼠取下胸7、8椎板,植入压迫材料,形成慢性压迫脊髓损伤模型。植入后第1,3,7,14,28天,取压迫处脊髓组织,行病理学检查及巢蛋白免疫组织化学染色,半定量反转录PCR反应测定巢蛋白mRNA的表达,同时测量压迫段椎管直径及缓膨胀材料侵占厚度。 结果与结论：随压迫时间的延长,实验组大鼠椎管侵占率逐渐增加,脊髓组织出现坏死等情况,大鼠BBB评分降低,压迫处脊髓组织中Nestin mRNA及蛋白表达至伤后7 d时达到高峰,而后表达逐渐下降,说明实验成功建立慢性脊髓压迫损伤动物模型,且慢性脊髓压迫损伤大鼠脊髓组织Nestin mRNA及蛋白呈动态变化。     

一定剂量X线照射对大鼠脊髓损伤模型组织结构及功能恢复的影响

目的探讨一定剂量X线照射对大鼠压迫型脊髓损伤模型组织结构及功能恢复的影响。方法采用动脉瘤夹建立大鼠压迫型脊髓损伤模型,70只SpragueDawley大鼠均接受T2节段的脊髓损伤,然后被随机分为2组,照射组在损伤后14d接受X线照射,对照组则不接受任何治疗。所有大鼠分别在脊髓损伤后第3、7、14、21、28、35和42天接受后肢运动及斜板测定,43d将所有实验大鼠处死后取出脊髓损伤标本,进行组织学检查。结果70只实验鼠中符合设计要求的共62只,其中照射组32只,对照组30只。X线照射组大鼠的后肢运动恢复及斜板测定均明显优于对照组,两者之间的差异有统计学意义(P<0.01)。照射组大鼠脊髓损伤部位的水肿及坏死区域明显少于对照组,胶质原纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)阳性细胞数明显少于对照组,而神经元数目则明显多于对照组。结论一定剂量X线照射可以改善脊髓损伤区的组织结构并促进大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复。     

Protective effects of prostaglandin E1 perfusion againstspinal cord ischemia-reperfusion injury in a rabbit model

BACKGROUND: Prostaglandin E1 (PGE1) is known to be protective in ischemia-reperfusion of heart, lung, renal, and liver tissue. It still remains to be determined whether PGE1 exhibits similar protection against spinal cord ischemia-reperfusion injury in a rabbit model. OBJECTIVE: To observe the large, ventral horn, motor neurons of the spinal cord, as well as limb function, and to investigate whether perfusion of PGE1 exhibits protective effects against spinal cord ischemia-reperfusion injury in a rabbit model. DESIGN, TIME AND SETTING: Controlled observation. The experiment was performed at the Department of Orthopedics, First Affiliated Hospital of Liaoning Medical University between June and October 2007. MATERIALS: Twenty male, New Zealand white rabbits, weighing 2.0 kg and of mixed gender, were used in the present study. The following chemicals and compounds were used: prostaglandin El injectable powder, as well as malondialdehyde and ATPase kits. Animal intervention was in accordance with animal ethical standards. METHODS: We separated rabbits into control and experimental groups randomly, with 10 rabbits in each group. Rabbits were used as spinal cord ischemia models by segmentally cross-clamping the infrarenal aorta. The control group was subsequently perfused for five minutes with blood and saline solution, and the experimental group was perfused for 5 minutes with blood and saline solution containing PGE1 (100 ng/kg/min). MAIN OUTCOME MEASURES: The neurological function of the hind limbs was assessed 12, 24, and 48 hours after model establishment. All animals were sacrificed and spinal cords were harvested for histological analyses. The large motor neurons in the ventral horn of L1-7 were observed by inverted microscope. RESULTS: All 20 rabbits were included in the final analysis, without any loss. In the ventral horn of the L5-7 segments, there were more large motor neurons that appeared viable in the experimental group than the control group (P<0.05). The scores of hind limb functions were greater in the experimental group after 12, 24, and 48 hours (P<0.01). CONCLUSION: Perfusion of PGEI reduced the amount of neuronal damage in the spinal cord ischemia-reperfusion injury rabbit model. These results correlated with increased numbers large motor neurons in the ventral horn of the spinal cord, as well as improved hind limb function.     

香芹酚对大鼠急性脊髓损伤的保护作用

目的 探讨香芹酚对大鼠脊髓损伤（SCI）后神经功能的影响及其机制。方法 将60只雄性SD大鼠（200~250 g）随机分为5组:假手术组（n=12）、SCI组（n=12）、香芹酚组（n=36）,香芹酚组根据香芹酚剂量分为低、中、高剂量3个亚组,每亚组12只。低、中、高剂量香芹酚组SCI后30 min腹腔注射香芹酚,剂量分别为10、20、40 mg/kg,每日一次;假手术组和SCI组每日腹腔注射等量生理盐水。采用Allen法建立大鼠SCI模型;假手术组只行椎板切除手术。SCI后24、48、72 h,采用BBB评分评估大鼠神经功能;SCI后72 h,采用ELISA法检测损伤脊髓组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、过氧化氢酶（CAT）、caspase-3活性;Western-blot法检测损伤脊髓组织Bax,Bcl-2蛋白表达水平。结果 SCI后,大鼠BBB评分均明显降低（P<0.05）,损伤脊髓组织水肿指数以及MDA、caspase-3和Bax水平均明显增高（P<0.05）,而SOD、GSH、CAT、Bcl-2水平均明显降低（P<0.05）;香芹酚能明显改善大鼠BBB评分（P<0.05）,明显降低水肿指数以及MDA、caspase-3和Bax水平（P<0.05）,而显著增加CAT、SOD、GSH、Bcl-2水平（P<0.05）。结论 香芹酚可通过减轻脊髓水肿、抑制氧化应激反应以及抗凋亡作用而对SCI大鼠发挥神经保护作用。