SLE患者可溶性抗原及自身抗体检测与临床意义研究

目的：探讨ＳＬＥ患者免疫发病机理及其临床意义。方法：免疫印迹技术测定ＥＮＡ抗体,免疫金标法测定ｄｓ－ＤＮＡ抗体,ＥＬＩＳＡ法测ＡＮＡ、ｓＣＤ１０６、ｓＣＤ９５、ｓＣＤ２５、ｓＣＤ５４。ＥＳＲ按临床检测常规进行。结果：活动性ＳＬＥ患者ｓＣＤ１０６、ｓＣＤ５４、ｓＣＤ２５水平均高于非活动性ＳＬＥ患者的相应值（Ｐ〈０．０５）;而后者又分别高于正常对照组的相应值（Ｐ〈０．０５）;活动期ＳＬＥ患者ｓＣＤ９５水平高于非活动期或正常对照组,后两者ｓＣＤ９５水平无差别（Ｐ〉０．０５）。相关分析表明,ｓＣＤ１０６和ｓＣＤ５３相关（ｒ＝０．５４９,Ｐ〈０．０５）,ｓＣＤ９５与ｓＣＤ２５正相关（ｒ＝０．５６８,Ｐ〈０．０５）,ＥＳＲ与ｓＣＤ１０６、ｓＣＤ５４、ｓＣＤ９５及ｓＣＤ２５均相关,ＡＮＡ只与ｓＣＤ９５相关,ｄｓ－ＤＮＡ在活动     

SLE患者外周血单个核细胞中IL-6 IL-10表达研究

目的 探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中Ｔｈ２型细胞因子ｍＲＮＡ的表达。方法 用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了１０例正常人和１５例活动期ＳＬＥ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素６（ＩＬ－６）和白介素１０（ＩＬ－１０）ｍＲＮＡ表达的水平。结果 与正常相比,活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－６和ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的表达水平均增高（均Ｐ〈０．０１）。结论 ＳＬＥ患者中Ｔｈ２型细胞因子Ｉ     

变应性疾病患者血清IL-4、sCD23的研究

目的 为了解几组变应性疾病患者血清ＩＬ－４和ｓＣＤ２３水平及ＩＬ－４对ｓＣＤ２３（ＣＤ２３）产生的影响。方法 采用ＥＬＩＳＡ法对荨麻疹、湿诊及过敏性鼻炎患者血清、外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）及培养条件下ＩＬ－４、ｓＣＤ２３（ＣＤ２３）水平及调控关系进行了研究。结果 ①３组疾病血清ＩＬ－４及ｓＣＤ２３水平均明显高于正常人对照组（Ｐ〈０．０５￣０．０１），ｓＣＤ２３与ＩＬ－４之间具有明显的正相关关系（     

SLE患者外周血单个核细胞中IL—10与γ干扰素的表达

为了探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中ＴＨ２／ＴＨ１型细胞因子自然表达的趋势,用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了１０名正常人和１５例活动期ＳＬＥ患外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素１０（ＩＬ－１０）和γ干扰素（ＩＦＮγ）ｍＲＮＡ表达的水平。结果,与正常人相比,活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的表达水平增高,而ＩＦＮγｍＲＮＡ的表达水平降低（均Ｐ〈０．０１）,表明活动性ＳＬＥ     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞bcl-2的表达及临床意义

目的 为了探讨ｂｃｌ－２基因在系统红斑狼疮（ＳＬＥ）发病机制中的作用及临床意义。方法 应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测３１例ＳＬＥ患者外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达水平和流式细胞仪双标记法分析其Ｔ、Ｂ细胞ｂｃｌ－２蛋白表达。结果 活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达水平明显升高,占５５．６％,且活动期ＳＬＥ患者ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋Ｔ细胞亚群Ｐ     

活动性系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞白介素6信使RNA（IL－6mRNA）表达水平的研究

应用反转录／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）方法检测了２１例ＳＬＥ患者及１４例正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）中白介素６信使ＲＮＡ（ＩＬ－６ｍＲＮＡ）表达水平，结果表明活动性ＳＬＥＰＢＭＣｓ中ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达明显高于非活动性患者及正常对照，而非活动期ＳＬＥ与正常组比较无显著统计学差异，提示ＩＬ－６可能参与活动性ＳＬＥ的发病机制。     

结缔组织病

２００１１０４０ 　ＳＬＥ病人外周血白细胞Ｂｃｌ－２和Ｂｃｌ－ＸｍＲＮＡ表达研究／孙保东（上海二医大仁济医院风湿科）… ／／上海免疫学杂志．－２０００， ２０（ ４）．－２３９～ ２４０，２４７ 采用高度敏感和特异性的荧光标记ＰＴ－ＰＣＲ方法对 ５０例 ＳＬＥ、２４例 ＲＡ和 ２４例健康者的外用血白细胞凋亡相关基因 Ｂｃｌ－２、Ｂｃｌ－ＸＩ和 Ｂｃｌ－Ｘｓ　 ｍＲＮＡ表达进行了半定量研究。结果显示，ＳＬＥ病人Ｂｃｌ－２表达低于健康者（Ｐ＜０．０１），Ｂｃｌ－Ｘｓ表达明显高于健康者（Ｐ＜０．０００１），亦高于…     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞产生白细胞介素2活性测定

我们检测了５０例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生白细胞介素２（ＩＬ－２）的活性，发现活动期ＳＬＥ患者产生ＩＬ－２活性低于正常对照（Ｐ＜０．０５），而缓解期患者与正常对照比较差异无显著性（Ｐ＞０．０５），同时还观察了离体环境对ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２活性的影响，并对结果进行了分析。     

正常胎儿及成人皮肤凝集素亲和组织化学研究

用１７种生物素化凝集素研究了２９例胎儿和２３例成人皮肤细胞表面复合糖的糖基的变化。结果表明：在胎儿、成人表皮细胞之间ＢＳＬ－Ｉ、 ＤＢＡ、 ＵＥＡ－Ｉ、 ＳＴＬ、 ＳＪＡ、 ＷＧＡ、 ＤＳＬ，在皮脂腺之间ＲＣＡ－Ｉ、 ＲＣＡ－ 、ＥＣＬ，在汗腺之间 ＷＧＡ、 ＤＳＬ、 ＰＨＡ－Ｅ、 ＣｏｎＡ的凝集素受体阳性率差异有显著性（Ｐ＜０．０５或０．０１）。提示在皮肤分化发育过程中，其细胞表面复合糖的糖基发生了有意义的变化。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中IL-6与TNF-α的表达

目的：探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）中某些具炎症介质作用细胞因子的自然表达。方法：用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了１０例正常人和１５例活动期ＳＬＥ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）ｍＲＮＡ表达的水平。结果：与正常人相比,活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－６和ＴＮＦ－αｍＲＮＡ的表达水平均增高（均Ｐ〈０．０１）。结论：ＳＬＥ患者中ＩＬ－６与ＴＮＦ－α的表达上调,可能在发病机制中起一定作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CD40/CD40配体mRNA的表达

目的探讨CD40及其配体(CD40L)在系统性红斑狼疮(SLE)发病机制中的作用及临床意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测34例SLE患者外周血单一核细胞(PBMC)中CD40和CD40配体mRNA的表达水平。结果活动期SLE患者PBMC中CD40配体的阳性表达率为88.24％(30/34),明显高于正常人对照组(50.00％,15/30),差异有非常显著性(P<0.01);活动期SLE患者PBMC中CD40配体mRNA表达的平均水平(0.6970±0.1214)亦明显高于正常人对照组(0.2684±0.0795),差异有非常显著性(P<0.01)。活动期SLE患者PBMC中CD40的阳性表达率和CD40mRNA的表达水平与对照组相比差异均无显著性(P>0.05)。结论CD40配体的异常表达可能在SLE疾病活动和发展过程中起重要作用,检测SLE患者PBMC中CD40配体的表达水平可作为疾病的活动性指标之一。     

系统性红斑狼疮病人外周血淋巴细胞CD38的表达

目的：探讨CD38在系统性红斑狼疮（SLE）发病中的作用以及与抗双链DNA（dsDNA)抗体间的关系。方法：采用流式细胞仪检测23例活动期SLE病人和20例正常对照者外周血淋巴细胞（PBL）CD38表达,免疫印迹法检测抗dsDNA抗体,结果：SLE病人PBL CD38表达水平明显高于对照组,治疗后虽有下降,但仍高于对照组（P＜0．01）,治疗前后无显著差异（P＞0．05）,CD38的升降与抗dsDNA抗体的水平呈正相关（r=0.68),结论：CD38可能参与了SLE的发病过程,它可以作为反映病情的有效指标。     

系统性红斑狼疮外周血单一核细胞Fas和FasL mRNA的表达

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞Fas及其相应配体FasL的表达水平及在SLE发病中的作用。方法：应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测34例活动期SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞（PBMC）中Fas和FasL mRNA的表达水平。结果：活动期SLE患者PBMC中FasL的阳性检出率为91.18%,明显高于正常对照组（63.30%),差异非常显著（P＜0.01);Fas的阳性检出率与对照组相比无明显差异（P＞0.05)。活动期SLE患者PBMC中Fas和FasL mRNA的平均表达水平均高于正常对照组,差异显著（P＜0.05)。结论：Fas和FasL的高水平表达可能与SLE患者外周血T淋巴细胞活化、凋亡增加有关,Fas介导的淋巴细胞凋亡可能参与了SLE的发病过程。平表达可能与SLE患者外周血T淋巴细胞活化、凋亡增加有关,Fas介导的淋巴细胞凋亡可能参与了SLE的发病过程。     

B淋巴细胞激活因子及其受体mRNA与系统性红斑狼疮关联性研究

目的:研究建立实时荧光定量(RFQ)-PCR法测定B淋巴细胞激活因子(BLyS)及其受体mRNA含量的方法,探讨其在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)中表达的检测价值。方法:在BLyS及其受体基因保守区设计特异性的引物和荧光探针,用反转录(RT)-PCR扩增目的片段实时检测产物的荧光强度,用所建立的RFQ-PCR方法检测23例SLE患者、23名正常人外周血BLyS及其受体mRNA表达。结果:SLE患者B淋巴细胞成熟抗原(BCMA)、穿膜蛋白活化物(TACI)和B淋巴细胞活化因子受体(BAFF)-RmRNA的表达明显高于正常人(P<0.01),活动期患者的表达高于缓解期(P<0.01),抗ds-DNA抗体阳性和尿蛋白阳性的SLE患者BCMA、TACI和BAFF-RmRNA的表达高于阴性患者(P<0.01)。结论:RFQ-PCR检测BLyS及其受体mRNA含量的方法具有较好的灵敏度和重复性;SLE患者BLyS、TACI和BAFF-RmRNA表达含量升高,提示BLyS、TACI和BAFF-R可能与SLE的发病有关。     

甲基结合蛋白MeCP2与mbd2在SLE患者中的表达

目的　探讨甲基结合蛋白MeCP2及去甲基化酶mbd2基因的表达异常在SLE发病中的作用。方法　以RT-PCR方法检测SLE缓解期、活动期患者与正常人外周血单一核细胞（PBMC）中MeCP2及mbd2基因的表达水平,并进行相关性分析。结果　SLE活动期、缓解期及正常人对照组PBMC中MeCP2的表达差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。SLE缓解期患者PBMC中mbd2的表达水平显著高于正常人对照组（t = 12.8,P ＜ 0.01）;SLE活动期患者PBMC中mbd2表达显著高于SLE缓解期（t = 20.0,P ＜ 0.01）。SLE患者PBMC中mbd2的表达与SLEDAI评分呈正相关（r = 0.737,P = 0.0001）。正常人对照组PBMC中mbd2的表达与MeCP2的表达呈正相关（r = 0.550,P = 0.0222）。结论　在正常情况下,MeCP2和mbd2的表达相互制约,在SLE患者中这种关系被破坏。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CD80/CD86和CTLA-4mRNA的表达

目的 探讨CD80/CD86和CTLA-4在系统性红斑狼疮(SLE)发病机制中的作用及临床意义。方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测32例SLE患者外周血单一核细胞(PBMC)中CD80、CD86、CTLA-4mRNA的表达水平。结果 活动期SLE患者PBMC中CD86的阳性表达率为90.63%,正常人对照组为60%,两组差异有非常显著性(P<0.01)。CD86的mRNA表达的平均水平(0.6410±0.0174)亦明显高于正常人对照组(0.4510±0.0402),差异有非常显著性(P<0.001);活动期SLE患者PBMC中CTLA-4的阳性表达率为81.25%,其mRNA表达的平均水平为1.0020±0.0624,均明显高于正常人对照组,差异有显著性(P<0.01);活动期SLE患者PBMC中CD80的阳性表达率和CD80mRNA的表达水平与正常人对照组差异均无显著性(P>0.05)。结论 CD86和CTLA-4的异常表达可能在SLE疾病活动和发展过程中起重要作用。     

人纤维介素在系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞中的表达及意义

目的 探讨人纤维蛋白原样蛋白/人纤维介素(HFGL2)与SLE中存在的凝血功能障碍之间的关系。方法 采用免疫组化方法检测32例SLE患者和15例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中HFGL2蛋白的表达情况,并用高清晰度彩色医学图文分析系统对SLE患者PBMC中HFGL2的表达进行半定量分析。结果 与正常人对照组相比,活动期SLE患者PBMC中HFGL2的表达明显增高,并与疾病活动性呈正相关。结论 PBMC中HFGL2的表达可能与SLE的发病和疾病的活动有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞NF-kB信号通路活化检测

目的：检测系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单一核细胞（PBMC）NF－kB信号通路活化情况,并探讨其临床意义。方法：NF－kB活性检测采用电泳迁移率改变试验,IkBα蛋白及其磷酸化产物采用蛋白印迹,抗dsDNA抗体、IgG、IgM测定采用ELISA方法。结果：SLE患者PBMC NF－kB活性显著高于正常对照组（P＜0.05）,活动期显高于缓解期（P＜0.05）,SLE组IkBα蛋白表达显著低于正常对照组（P＜0.05）,活动期患者低于缓解期（P＜0.05）。SLE组IkBα磷酸化产物显著高于正常对照组（P＜0.05）,活动期患者高于缓解期（P＜0.05）。NF－kB活性和IkBα磷酸化产物均与抗dsDNA抗体、IgG和SLE疾病活动指数呈正相关,而与IgM无相关关系。结论：SLE患者PBMC存在NF－kB信号通路异常活化,且与抗dsDNA抗体、IgG分泌密切相关。检测SLE PBMC内NF－kB信号通路蛋白表达可能有助于SLE疾病活动的判断。     

5-氮杂胞苷与雌二醇对SLE患者CpG基序甲基化状态与DNMT1表达的影响

目的 探讨5-氮杂胞苷与雌二醇对SLE患者与正常人CpG基序甲基化状态与DNA 甲基转移酶1（DNMT1）表达的影响。方法 分离12例SLE患者与11例正常人外周血淋巴细胞,经植物血凝素刺激1天后,分为未处理组、5-氮杂胞苷组、雌二醇组,继续培养3 d后分别用5-甲基胞嘧啶抗体与流式细胞仪检测CpG基序甲基化水平和实时定量逆转录－聚合酶链反应（RT-PCR）分析DNMT1的mRNA表达水平。结果 与非处理组相比,5-氮杂胞苷组SLE患者（t = 18.60,P < 0.01）与正常人（t = 5.63,P < 0.01）的CpG基序甲基化水平均下降。DNMT1表达水平（正常人t = 2.17,P > 0.05,SLE患者t = 1.56,P > 0.05）的下降无统计学意义。雌二醇组SLE患者与正常人的CpG基序甲基化水平（正常人t = 1.93,P > 0.05;SLE患者t = 1.53,P > 0.05）与DNMT1的mRNA（正常人t = 0.11,P > 0.05;SLE患者t = 0.93,P > 0.05）表达水平的差异均无统计学意义。结论 5-氮杂胞苷可抑制CpG基序甲基化状态,其抑制作用的产生与DNMT1表达水平的下降无明显相关性。雌二醇对CpG基序甲基化状态与DNMT1的表达水平的影响无统计学意义。