弓形体抗原的免疫化学研究

本文应用4种免疫血清学方法和免疫印迹技术分析了3种不同毒力弓形体株(RH、Beverley和Fukaya)感染小鼠后诱导血清IgM和IgG抗体产生的速殖子表膜抗原及株间的抗原差异。速殖子膜有3种主要功能性抗原,分子量分别为120、35和27kd。P_(27)除被IgG抗体识别外,同时还可被IgM抗体所识别。用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离并部分纯化的抗原进行ELISA检测发现,含有P_(35)的洗脱抗原组分与小鼠多克隆抗体反应最为强烈,其次为含有P_(27)的洗脱组分。用洗脱各抗原组分免疫小鼠后证明,血清IgG抗体主要与P_(35)和P_(27)结合。用部分纯化的P_(35)抗原免疫小鼠可使受试鼠获得抗攻击感染的部分保护性免疫力。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血吸虫病患者的IgM及IgE抗体

最近证明在ELISA试验中联合使用血吸虫尾蚴和成虫抗原可以从血清学上区别急性或慢性血吸虫病患者。急性感染患者血清中对尾蚴抗原的IgG抗体多于成虫抗原,而在慢性感染患者则相反。IgM抗体的产生是宿主对许多急性感染反应的特征,蠕虫感染免疫反应的特征是IgE抗体的产生,因之作者探索ELISA试验对检测确诊为急性或慢性血吸虫病患者的特异性IgM及IgE抗体的用途,并对这些抗体水平和尾蚴/成虫     

日本血吸虫不同抗原检测家兔感染及治疗前后IgG/IgM抗体动态

目的探索特异性抗体检测在日本血吸虫病诊断和疗效考核中的潜在应用价值。方法ELISA方法采用可溶性虫卵抗原(SEA)、成虫抗原(AWA)检测人工感染家兔治疗前后血清中特异性IgGI、gM抗体,评价特异性抗体检测的诊断和疗效考核价值。结果用SEA抗原检测IgM抗体,发现感染后7周不管治疗与否,抗体水平均快速下降。与SEA相比,感染后AWA特异性IgM抗体上升时间早,且治疗后5个月仍为阳性。SEA特异性IgG抗体水平最高,但治疗后5个月仍为阳性。结论采用SEA抗原检测IgG用于血吸虫病诊断效果较好;对早期感染的诊断可以考虑SEA抗原检测IgM抗体作辅助。AWA抗原检测IgM,对急、慢性血吸虫感染均有较好诊断效果。采用这两种抗原检测IgG和IgM,均无考核疗效意义。     

抗曼氏血吸虫肠上皮抗原的荧光抗体研究 Ⅳ.IgM单克隆抗体的免疫封闭作用

作者用IgM单克隆抗体进行免疫封闭研究。所用的IgM单克隆抗体是作者以前已提及的抗曼氏血吸虫肠上皮抗原的抗体。于BALB/c小鼠腹腔内注射0.5ml福氏不完全佐剂及杂交瘤细胞;腹水过柱纯化,各分部用0.15mol/L NaCl洗脱液洗脱,IgM抗体取自’第一个小峰,将浓度调整到4mg/ml。抗体被动转移试验:用20g Swiss小鼠,     

恶性疟原虫cDNA克隆的丝氨酸重复抗原的氨基酸序列

人们已在寻求用恶性疟原虫红内期的基因表达抗原作为疟疾疫苗的可能性。本文作者先前曾鉴定出一种恶性疟原虫红内期抗原,它能诱导产生抑制原虫的小鼠单克隆抗体(mMAb43ES)。后用此抗体筛选红内期原     

两种抗原检测弓形虫病IgM的效果

目的观察弓形虫P30重组抗原及可溶性抗原检测弓形虫病IgM的效果。方法建立斑点免疫金渗滤法（DIGFA）。采用2种抗原分别包被在两条硝酸纤维素膜（NC）上,与待检血清中的相应IgM抗体结合,通过金标记兔抗人IgM直接显色,以检测弓形虫病IgM。2种抗原的DIGFA分别检测弓形虫IgM抗体阳性、类风湿、支原体肺炎、血吸虫病人和正常人血清。结果两种抗原建立的DIGFA检测试剂共检测5种血清样本166份,其中弓形虫感染IgM抗体阳性病人血清38份,弓形虫P30DIGFA敏感性为92.1%（35/38）,可溶性抗原DIGFA敏感性为81.6%（31/38）,差异无统计学意义（P〉0.05）。正常人群对照血清63份,检测全部阴性,特异性为100%。检测类风湿病人血清30份、血吸虫病人血清25份及支原体肺炎病人血清10份,仅类风湿病人血清出现阳性交叉反应,其中弓形虫P30DIGFA阳性2例,可溶性抗原DIGFA阳性3例。结论弓形虫P30重组抗原检测弓形虫病人血清IgM的DIGFA试剂可用于临床早期或急性期弓形虫病的诊断。     

对日本血吸虫抗原免疫应答的基因控制

众所周知,尽管某些寄生虫感染在小鼠体内较易产生IgE抗体,而感染血吸虫的小鼠未必诱发IgE抗体应答。本研究表明,有些小鼠对日本血吸虫抗原(Sj)可重复地产生高滴度的IgE抗体,并证明IgE抗体应答受连接于主要组织相容性复合位点的基因控制。作者在实验室以远交系繁殖的白色家兔和小鼠保持日本血吸虫日本株的生活循环。日本血吸虫抗原按Chaffee等(1954)改良法制备,研究中使用了4批抗原。作者将10μg日本血吸虫抗原混合于含     

重组抗原检测戊型肝炎病毒IgM抗体及其意义

用戊型肝炎病毒(HEV)重组抗原建立酶联免疫吸附试验(ELISA)，检测肝炎患者和健康供血人群血清中抗戊型肝炎病毒IgM类抗体(抗-HEV IgM)，并评价其检测意义。在与合成肽抗原比较检测的77份急性戊型肝炎患者血清中，有54份(70.1%)由重组抗原捡测抗-HEV IgM阳性。其阳性率明显高于台成酞抗原(21/77,27．3％)。15例戊型肝炎患者双份血清用重组抗原ELISA检铡，急性期血清有11份抗-HEV IgM阳性，恢复期血清仅1份阳性。抗-HEV IgG阳性的健康供血者(8人)和甲、乙、丙型肝炎患者(11例)无1例IgM抗体阳性。结果表明，抗-HEV IgM可以作为戊型肝炎病毒新近感染的标志。HEV重组抗原检铡抗-HEV IgM敏感性高，特异性强，有助于戊型肝炎病毒感染的早期诊断。     

抗环瓜氨酸肽抗体和葡萄糖-6-磷酸-异构酶抗原对类风湿关节炎诊断价值的比较

目的评价抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体和葡萄糖-6-磷酸-异构酶（GPI）抗原对类风湿关节炎（RA）的诊断价值。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）法分别测定RA患者112例、非RA其他风湿病患者44例以及健康志愿者119名血清中的抗CCP抗体、GPI抗原和IgM—RF，应用ROC比较抗CCP抗体和GPI抗原对RA的诊断价值，用Spearman方法分析上述指标与lgM—RF的相关性。结果在诊断RA时．抗CCP抗体和GPI抗原的ROC曲线下面积均大于IgM—RF（P均〈0．05）。抗CCP抗体、GPI抗原与IgM—RF显著相关。CCP抗体与GPI抗原的联合试验的灵敏度达到0．946。结论联合测定抗CCP抗体和GPI抗原对RA具有较高的诊断价值，具有良好的应用前景。     

巨细胞病毒pp65抗原血症检测

目的：评估巨细胞病毒（CMV）pp65白细胞抗原血症在骨髓移植或外周血干细胞移植后活动性CMV感染早期诊断和CMV 病的预测、指导CMV亚临床期感染的抗病毒治疗及抗病毒疗效判断中的价值。方法：1999年9月－2000年4月共收集 210份乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝血，骨髓移植或外周血干细胞移植患者36例。移植前用ELISA法检测患者CMV特异性抗体IgG和IgM，移植后3周起采用CMV Brite试验盒每周检测1次CMV pp65抗原血症，并计数抗原 阳性细胞，直到移植后100d或治疗后抗原阴转、死亡或出院。移植后患者第1次检测到bp65抗原阳性细胞即开始更昔洛韦抗病毒治疗。结果：36例骨髓移植或干细胞移植患者于移植前CMV特异性抗体IgG均阳性，IgM均阴性；移植后16例出现CMV pp65抗原血症，其中15例 出现有症状的CMV感染或CMV病，14例接受更昔洛韦抗病毒治疗，12例治疗后抗原血症阴转、症状消失、死亡2例（病死率14．2％），未经抗病毒治疗者2例均死亡（P＜0．01）。16例pp65抗原阳性患者中，仅2例CMV特异性抗体IgM阳性。10名健康对照组的CMV特异性抗体IgG均阳性，IgM均阴性；pp65抗原血症 检测均阴性。结论：本研究结果提示，人CMV pp65白细胞抗原血症检测可作为骨髓移植后CMV病的预测指标，指导移植后抗病毒治疗的开展和疗效评价。pp65白细胞抗原症出现即开始抗病毒治疗可明显降低病死率。     

日本血吸虫感染小鼠组织内的抗原,抗体定位

应用间接荧光抗体试验(IFAT)检测小鼠感染血吸虫后肝、肠内抗原,结果感染后4wk未检出抗原,6wk抗原水平显著升高,10—12wk达到高峰、其几何均数倒数分别高达512和483。组织内虫卵肉芽肿的病变,亦最为显著,而肝内虫卵肉芽肿的直径显著大于肠内的。用直接荧光抗体试验(DFAT)及IFAT测定小鼠感染血吸虫后肝、肠组织内抗体,结果在感染6wk后,三种抗体(IgG、IgM和IgA)均达低水平,10—12wk均显著上升,而肝、肠组织内IgG抗体则非常显著地高于IgM和IgA的。提示血吸虫虫卵肉芽肿的免疫应答,主要是IgG抗体。     

结核分枝杆菌融合抗原38F和64F诊断活动性肺结核的价值

目的 探讨结核分枝杆菌融合抗原38F和64F对活动性肺结核患者血清中IgG、IgM和IgA抗体检测的诊断价值。 方法 利用结核分枝杆菌抗原优势肽段融合抗原38F和64F,通过ELISA法对223例活动性肺结核患者进行结核分枝杆菌特异性IgG、IgM和IgA抗体水平检测。223例活动性肺结核患者分为三组,第一组为涂片和培养共同阳性组（86例）,第二组为涂片阴性且培养阳性组（51例）,第三组为涂片和培养共同阴性组（86例）。 结果223例活动性肺结核病患者,第一组IgG、IgM和IgA的联合检出率为79.07%（68/86）;第二组IgG、IgM和IgA的联合检出率为62.75%（32/51）;第三组IgG、IgM和IgA的联合检出率为69.77%（60/86）。全部样本血清学方法的检出率为71.75%（160/223）。结论 结核分枝杆菌融合抗原38F和64F对于活动性肺结核具有较高的辅助诊断价值,并且IgG、IgM和IgA抗体联合检测可以提高检出率。     

结核菌抗原在酶联免疫试验中的应用

自Van Weemen和Engvall等推荐酶联免疫吸附法(ELISA)以来,经此法检测结核病人血清中特异性抗体已成为结核病诊断的辅助方法。ELISA是一种敏感性较高的免疫测定法,可定量测定抗原和抗体。已知结核病患者常伴有不同程度的抗体水平增高,其中主要为IgG,IgA和IgM含量较少。近年来许多研究者认为,采用ELISA测定这些抗体时,抗原的质量对检测结果影响甚大,因而从纯化抗原方面做了大量工作。本文介绍几种结核菌抗原的性质及其应用     

用巴西疟原虫抗原作间接血凝试验

巴西疟原虫(Ptasmodium brasilianum)是美洲猴体的三日疟原虫,与人体三日疟原虫的进化有密切关系。曾用这种猴疟原虫作抗原进行间接荧光抗体试验(IFA)检验人体三日疟的抗体。Sulzer等用巴西疟原虫抗原和三日疟原虫抗原作IFA试验,测出人体血清中抗体的效价无显著差异,提示这两种原虫在IFA试验中有同种的抗原性。本文作者曾用恶性疟原虫和间日疟原虫的裂殖体溶性抗原作间接血凝试验(IHA),均与感染同种疟原虫的人血清有同样明显的反应性。最近本     

班氏丝虫在体内和体外释放抗原的检测及其在诊断上的价值

最近不少学者的研究证实,班氏丝虫微丝蚴在无血清的199培养液(加有机酸和糖类)中释放的代谢(ES)抗原,用于检测丝虫抗体,具有高度的敏感性和特异性。抗体类型分析,微丝蚴血症者均存在IgM抗体,晚期丝虫病人存在IgG抗体,某些人同时存在IgM和IgG抗体。丝虫病血清抗体滴度为     

血吸虫感染小鼠早期诊断抗原的研究

目的对已知的6种日本血吸虫抗原的早期诊断价值进行评价,为研制用于哨鼠早期诊断的免疫试剂提供候选抗原。方法用日本血吸虫尾蚴感染小鼠,收集感染前及感染后不同时间的小鼠血清。采用重组日本血吸虫中国大陆株23kDa膜蛋白大亲水性肽段与谷胱甘肽的融合表达蛋白（GST-HD）、可溶性虫卵抗原（SEA）、血吸虫四跨膜蛋白第二亲水基团（TSP2HD）、血吸虫虫卵蛋白（IPSE）、日本血吸虫虫卵毛蚴抗原（SjMP-10）及日本血吸虫信号蛋白（Sj14-3-3）作为诊断抗原,采用酶联免疫吸附试验检测感染血吸虫后不同时间小鼠血清中特异性抗体IgM和IgG水平,通过分析感染后不同时间点抗原特异性抗体水平变化及阳性率,筛选具有血吸虫感染早期诊断价值的抗原分子。采用免疫印迹试验进一步验证其对血吸虫急性感染早期诊断的价值。结果感染后第18、21、28天,抗GST-HD抗体IgM阳性率分别为60%、70%、100%,特异性IgG阳性率分别为40%、60%、90%;抗SEA抗体IgM阳性率为50%、60%、90%,特异性IgG阳性率为20%、50%、70%;抗TSP2HD抗体IgM阳性率为30%、40%、50%,特异性IgG阳性率为20%、30%、70%;抗IPSE抗体IgM阳性率为20%、30%、50%,特异性IgG阳性率为20%、30%、60%;抗SjMP-10抗体IgM阳性率为10%、20%、20%,特异性IgG阳性率为10%、20%、30%;抗Sj14-3-3抗体IgM阳性率为0、10%、20%,特异性IgG阳性率为0、10%、30%。以GST-HD融合蛋白和SEA为抗原,检测小鼠早期感染血吸虫的敏感性高于Sj14-3-3、IPSE、TSP、MP-10,检测IgM的敏感性高于IgG。免疫印迹试验结果显示,SEA中分子量在73kDa左右的蛋白条带可被感染后1周小鼠血清所识别,并随着时间推移反应加强。GST-HD最早出现反应的血清是感染后第10天小鼠血清,反应强度在感染后第5周达到最强。结论重组GST-HD融合蛋白与SEA中分子量约73kDa的蛋白分子具有血吸虫感染早期诊断价值,免疫印迹试验的敏感性比酶联免疫吸附试验高。     

人唾液、尿液中弓形虫抗原抗体的检测

目的探讨用唾液、尿液替代血清进行弓形虫感染免疫学诊断的可行性。方法用ELISA法对血清进行弓形虫循环抗原(CAg)、IgM、IgG抗体的检测,取上述各项免疫学指标阳性的血清样本80例,并随机抽取3项指标均为阴性的血清样本102例,分别与其唾液和尿液标本在同一反应板上同步进行测定,比较其阳性和阴性符合率。结果(1)554份血清样本中,CAg、IgM和IgG3项的阳性率分别为4.51%(25/554)、3.61%(20/554)、6.32%(35/554)。(2)唾液中检出IgM抗体阳性16例,与血清的阳性符合率为80%(16/20),检测CAg、IgG抗体均为阴性。(3)检测尿液中的抗原抗体均无一例阳性。结论采用唾液标本检测弓形虫IgM抗体,在弓形虫感染的诊断及流行病学调查中均具有一定的应用前景。     

寄生虫抗原皮内试验的本质及其应用

蠕虫类寄生虫抗原皮内反应属于即时型过敏反应,它的基本原理为抗原抗体结合后作用于组织肥大细胞,产生脱颗粒现象,释放组织胺,引起血管透性的改变,因而产生丘疹与红晕。作者对皮内反应的基本条件进行研     

恙虫病东方体平潭岛株重组抗原的制备及快速诊断试剂的研制

目的制备重组抗原,利用胶体金技术研制恙虫病快速诊断试剂。方法用PCR扩增出Ptan株编码56kD外膜蛋白长约1352bp的DNA,克隆至原核载体pET28a,构建了表达载体。表达产物经SDS-PAGE及Western-blot进行鉴定分析。将Ptan株和Gilliam56kD截短重组抗原混合作为诊断抗原,研制胶体金免疫层析诊断试纸检测血样中的恙虫病特异性总抗体、IgM和IgG。结果SDS-PAGE表明重组蛋白在相对分子质量约52kD处有表达目的条带,Western-blot证实该蛋白具有免疫活性。胶体金免疫层析法检测抗恙虫病东方体总抗体、IgM、IgG和IFA法检测IgG的敏感性分别为94.5%,81.4%,91.6%和86.2%,胶体金免疫层析法检测总抗体、IgM、IgG特异性分别为98.1%,100%,98.9%。结论胶体金层析法可替代常规IFA法用于恙虫病诊断。     

Knops血型系统抗原研究进展

正Kn抗原是1970年发现的,先证者是Knops,抗原名取自先证者。此人Kna抗原(-),血浆中有抗Kna抗体。1992年由国际输血协会(ISBT)确认为独立的系统抗原,当时确认只有3个抗原,到2018年确认这个系统有9个抗原。以前Kn系统抗原都是用一些没有临床意义的抗体鉴定的,而且这些抗体鉴定非常困难。现在所用的抗体都是单克隆技术产生的,所以在研究Kn抗原上有了很大的进展。本文就Kn抗原的最新研究进展,做一简