烫伤大鼠组织ICE mRNA表达对IFN-γ影响的实验研究

为探讨烫伤后组织白介素-1β转换酶(IL-1βconverting enzyme,ICE)mRNA的动态表达规律及其对IFN-γ的影响,采用大鼠30%体表面积Ⅲ度烫伤模型,肠、肺、肝、肾等组织ICE、IL-18、IFN-γmRNA含量采用逆转录聚合酶链式反应检测.结果显示,烫伤后2h肠、肺、肝、肾等组织ICE、IL-18、IFN-γmRNA表达较伤前值即有显著升高,8h达高峰,且一直持续至伤后24h,给予选择性消化道脱污染SDD预治疗后可不同程度抑制ICE、IL-18、IFN-γmRNA的表达.提示组织ICEmRNA表达在烫伤逐渐升高,对IL-18、IFN-γmRNA基因表达具有重要影响.     

放射损伤和放烧复合伤影响小鼠脾脏T细胞IFN-γ和IL-4基因表达的实验研究

目的 阐明机体免疫功能的放烧复合效应，为放烧复合伤免疫功能障碍的调控提供依据。方法 于不同时相点测定放烧复合伤小鼠（5Gy γ射线照射合并12％Ⅱ度烧伤）的脾体比，脾脏组织学观察，分离脾脏T细胞，RT－PCR检测其IFN－γ和IL－4的基因表达水平。结果 ①伤后放烧组的脾脏指数和组织结构的恢复明显快于单放组；②放射损伤后T细胞IFN－γ和IL－4的基因表达均受到抑制，但与IL－4比较，IFN－γ表达量的降幅小、恢复快；③放射损伤后脾脏指数和T细胞IL－4的基因表达呈双向变化；④放烧组IFN－γ表达量明显高于单放组，而两伤组IL－4表达量无区别。结论 ①放射损伤是放烧复合伤的主导损伤因素；②IL－4的辐射敏感性高于IFN－γ；③烧伤因素能促进放烧复合伤后脾脏淋巴细胞的增殖及IFN－γ的表达，不能促进IL－4的表达；④受照机体内仍然存在着促进IL－4表达恢复的有效机理。     

烟雾吸入伤大鼠肺组织细胞凋亡及凋亡调控基因表达的变化

探讨细胞凋亡及凋亡调控基因在大鼠烟雾吸入性损伤发生、发展中的作用及意义。以大鼠烟雾吸入伤为模型，应用TUNEL、免疫组化及RT－PCR技术，观察烟雾吸入伤后不同时相肺组织中Bcl-2、Bax、Fas、Fas配体（FasL)基因mRNA及蛋白的表达状态及其与细胞凋亡异常之间的关系。结果显示，烟雾吸入伤后细胞凋亡指数升高；烟雾吸入伤后可上调Bcl-2、Bax、Fas、FasL表达，mRNA表达在12h达峰值，蛋白表达在24h最高。在各时相点Bax、Fas、FasL基因表达与肺组织细胞凋亡有正相关关系。提示烟雾吸入伤后细胞凋亡增加，细胞存活同时受生存基因（Bcl-2)和死亡基因（Bax、Fas、FasL)的双重调控，凋亡相关基因参与了烟雾吸入伤过程细胞凋亡的调控。     

烫伤脓毒症大鼠细胞因子信号转导抑制因子基因表达的改变及其意义

目的　观察烫伤后金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )脓毒症大鼠重要脏器细胞因子信号转导抑制因子 (SOCSs)基因表达的规律及其与细胞因子变化的关系。　方法　采用大鼠 2 0 %体表面积Ⅲ度烫伤后金葡菌攻击致脓毒症模型 ,检测动物肝、肺组织中SOCS1、SOCS2和SOCS3mRNA表达 ,并测定组织中干扰素 -γ(IFN -γ)水平。　结果　烫伤后金葡菌感染大鼠肝、肺组织IFN -γ产生均显著增多 ,分别于伤后 0 .5和 6h达峰值 (P <0 .0 1 )。同时 ,动物肺组织SOCS1、SOCS2和SOCS3mRNA表达均明显上调 ,其中SOCS2和SOCS3mRNA表达改变较为迅速 ,伤后 0 .5h即明显高于对照组 ,2h达峰值。肝组织SOCS1mRNA表达于伤后 2h明显增强 ,2 4h仍维持于较高水平 ;而肝脏SOCS2和SOCS3mRNA表达仅呈现升高趋势。金葡菌肠毒素B单克隆抗体早期干预后 ,随着肺脏IFN -γ产生减少 ,肺组织SOCS1、SOCS2和SOCS3基因表达亦明显降低。　结论　烫伤后金葡菌感染可诱导体内SOCSs表达上调 ,其改变与IFN -γ的“消涨”密切相关 ,提示它们可能参与了金葡菌脓毒症时炎症反应平衡的调节过程。     

乳果糖对严重烫伤大鼠血浆循环内毒素及组织中白细胞介素- 18 mRNA基因表达的影响

 目的探讨乳果糖对烫伤大鼠组织中白细胞介素-18 mRNA表达的影响.方法将大鼠致30%体表面积Ⅲ度烫伤,随机分成烫伤对照组(C组)及乳果糖预防组(L组).采用逆转录PCR技术检测肠、肺、肝、肾等组织中IL-18 mRNA水平.结果烫伤后两组体循环内毒素含量显著升高,用乳果糖予处理后可显著降低循环内毒素含量(P＜0.05或P＜0.01).烫伤后,肠、肺、肝、肾等组织中IL-18 mRNA表达较伤前显著升高(P＜0.01),伤后8 h达峰值,24h内居高不下.给予乳果糖予处理后可明显抑制IL-18 mRNA的过度表达(P＜0.05或P＜0.01).结论乳果糖可明显降低体循环内毒素的含量,并明显抑制肠、肺、肝、肾组织中IL-18 mRNA的过度表达.     

卡巴胆碱对烫伤休克大鼠脏器血流量的影响

目的研究烫伤休克大鼠液体复苏时给予卡巴胆碱对脏器血流量的影响。方法Wistar大鼠分为4组：假烫组，单烫组，烫伤＋补液组，烫伤＋补液＋卡巴胆碱组。采用35％体表面积Ⅲ。烫伤模型（100℃，12秒），应用激光多谱勒测定伤前及伤后4、8、12小时肝、肾、肠组织血流量的改变。结果烫伤后各组脏器血流量均较假烫组显著降低（P〈0．01），卡巴胆碱治疗组较烫伤补液组各脏器血流量均显著升高（P〈0．01）。结论卡巴胆碱能改善休克早期脏器血流量，有助于烧伤休克及并发症的防治。     

休克期切痂对大鼠肝组织ICAM—1及TNF—α mRNA表达的影响

为研究烧伤后肝组织细胞间粘附分子－1（ICAM－1）及肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的表达及肝组织髓过氧化物酶（MPO）的规律，论证及早切除焦痂的重要性，取大鼠176只，30％Ⅲ度烫伤，观察伤后不同时相点及8不同时机切痂后肝组织ICAM－1、TNF－α mRNA的表达及肝组织MPO活性变化。结果显示，汤伤后肝组织ICAM－1及TNF－α的mRNA表达在伤后4h即已升高，8h和24h切痂组动物伤后96h恢复正常。未切痂组和96h切痂组在伤后7天仍未恢复正常；休克期切痂组MPO活性96h恢复正常，未切痂组和非休克期切痂组伤后7天仍未恢复正常。提示及早切痂去除了坏死组织，减轻了由粘附分子介导的中性粒细胞对内皮细胞的进一步损害。     

烫伤大鼠组织脂多糖结合蛋白mRNA表达的动态变化

目的探讨烫伤后不同组织脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）ｍＲＮＡ的动态表达及其与内毒素血症的关系。方法采用大鼠３５％体表面积Ⅲ度烫伤模型，实验动物随机分为正常对照组、烫伤组和多粘菌素Ｂ治疗组。血浆内毒素水平测定采用改良过氯酸预处理血浆、偶氮显色法鲎实验定量测定，组织ＬＢＰｍＲＮＡ含量采用ＲＴ－ＰＣＲ法。结果烫伤后门静脉及体循环内毒素水平均显著升高，８小时达峰值。给予多粘菌素Ｂ治疗可不同程度地降低血浆内毒素水平。正常组织可表达少量ＬＢＰ，烫伤后２小时不同组织ＬＢＰｍＲＮＡ表达较对照值有显著升高（Ｐ＜０．０５～０．０１），８小时达峰值，约为对照值的２～２．５倍，且一直持续至伤后２４小时。给予多粘菌素Ｂ抗内毒素治疗，可不同程度抑制肺、肠、肾组织ＬＢＰｍＲＮＡ的表达（Ｐ＜０．０５～０．０１）。相关分析显示，门静脉内毒素水平与肺组织ＬＢＰｍＲＮＡ呈显著正相关（ｒ＝０．４１２，Ｐ＜０．０５），但与肝、肠、肾组织无显著相关性。结论组织ＬＢＰｍＲＮＡ表达在烧伤后显著增多，肠源性内毒素血症可能是刺激组织ＬＢＰ基因表达的重要因素之一     

细胞因子对人扁桃体淋巴细胞亚群bcl-2表达的影响

目的：观察IL－2、4、6、7和INF－γ对γ射线诱导的人扁桃体淋巴细胞凋亡的调节作用。方法：取手术切除的扁桃体组织,经Ficoll分离得单核细胞,采用4Gy^60Co γ射线照射,用凝胶电泳显示细胞凋亡;体外用IL－2、IL－4、IL－6、IL－7及INF－γ与单核细胞共培养24h后流式细胞仪测CD4^ 、CD8^ T细胞及CD19^ B细胞的凋亡率及表面bcl-2的表达。结果：照射后4－24h有明显的梯形条带出现,CD8^ T细胞和B细胞的辐射敏感性较CD4^ T细胞高;IL－2、IL－4和IL－7对CD4^＋、CD8^ T细胞凋亡及IL－4B细胞凋亡有明显的保护作用,同时可观察到bcl-2明显的高表达,IL－6和INF－γ无此作用。结论：细胞因子IL－2、IL－4与IL－7可促进放射病病人免疫功能恢复。     

卡巴胆碱对烫伤休克大鼠脏器血流量的影响

目的 研究烫伤休克大鼠液体复苏时给予卡巴胆碱对脏器血流量的影响.方法 Wistar大鼠分为4组: 假烫组,单烫组,烫伤 补液组,烫伤 补液 卡巴胆碱组.采用35%体表面积Ⅲ°烫伤模型(100℃,12秒),应用激光多谱勒测定伤前及伤后4、8、12小时肝、肾、肠组织血流量的改变.结果 烫伤后各组脏器血流量均较假烫组显著降低(P＜ 0.01),卡巴胆碱治疗组较烫伤补液组各脏器血流量均显著升高(P＜ 0.01).结论 卡巴胆碱能改善休克早期脏器血流量,有助于烧伤休克及并发症的防治.