流式细胞仪检测人脾LAK细胞

目的：探索ＬＡＫ细胞对白血病疗效的监测手段。方法：用流式细胞仪测定５例成人脾淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）和２１例正常人外周血淋巴细胞的ＤＮＡ指数（ＤＩ）及增殖周期。结果：人脾ＬＡＫ细胞的增殖活力明显高于未激活的脾淋巴细胞和外周血淋巴细胞。培养（１￣１４ｄ）期间人脾ＬＡＫ细胞的增殖活力高，并且稳定。在人脾ＬＡＫ细胞中，未找出非整倍体细胞，ＤＩ指数在正常范围。结论：流式细胞仪可用于判断人脾ＬＡ     

外周血血小板动态监测和MBDIs联合应用对化疗效果的预测

本文观察了外周血血小板动态监测联合第一疗程间歇期末骨髓白血病细胞减少指教（ＭＢＤＩｓ）指导急性白血病（ＡＬ）治疗３３例，并与诱导化疗第一疗程后一周左右骨髓白血病细胞减少指数（ＭＢＤＩ）指导治疗３６例进行对照。结果发现，ＭＢＤＩｓ＞６１。诱导化疗第一疗程后外周血血小板最高值＞１００×１０￣９／Ｌ，ＡＬ完全级解率达１００％，与对照组相比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。表明外周血血小板动态监测联合ＭＢＤＩｓ对预测ＡＬ疗效更加准确，可提高ＡＬ缓解率，且方法简便、适于推广。     

白血病患者血清酶活性初探

目的：探讨不同类型白血病和不同病期白血病的血清酶活性变化，以及酶活性与外周血白细胞总数、白血病细胞数的关系。方法：采用酶联法测定７５例白血病患者轿清乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、谷丙转氨酶（ＧＰＴ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）活性，并与正常人组３８例比较。结果：白血病组ＬＨＤ、ＡＫＰ活性明显高于正常人组，且急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）者的ＬＤＨ活性与外周血白血病细胞数呈正相关（Ｐ〈０．０１）；白血病完全缓解期（     

硒酸酯多糖对CD3AK细胞活性的增强作用

目的：研究硒酸酯多糖（ＫＳＣ）对ＣＤ３ＡＫ细胞增殖活性和杀瘤活性的增强效应。方法：应用ＣＤ３单抗（ＣＤ３ＭｃＡｂ）和小剂量ｒＩＬ－２从正常外周血单个核细胞中诱生ＣＤ３ＡＫ细胞；观察ＫＳＣ在诱生和扩增阶段对ＣＤ３ＡＫ细胞增殖特性（增殖指数、激活率、克隆率和分裂指数）、ＩＬ－２Ｒ表达水平和对Ｒａｊｉ、Ｌ４２１０细胞杀伤活性的影响。结果：ＫＳＣ（５μｇ／ｍｌ）单独对ＣＤ３ＡＫ细胞的殖无明显作用，但增强Ｉ     

淋巴因子对人PBMNC的LAK细胞形成、增殖和细胞毒作用的影响

应用乳酸脱氢酶释放法对重组白介素２，粗制天然白介素２，重组肿瘤坏死因子和天然免疫活性肽等淋巴因子诱导人ＰＢＭＮＣ为ＬＡＫ细胞以及ＬＡＫ细胞对靶细胞（人外周血淋巴细胞，人食管癌１０９细胞株和人红白血病细胞株＿（５６２）的细胞毒作用分别于培养的第４ｄ和第７ｄ进行了检测。结果显示：①四个配伍组和一个重组白介素２组的多克隆ＬＡＫ细胞攻击溶解１０９细胞株和Ｋ＿（５６２）细胞株的水平波动子２８％和６６％之间，中位数为４７％，而对正常人外周血淋巴细胞均无细胞毒作用；②重组白介素２和粗制天然白介素２配伍培养ＬＡＫ细胞的增殖协力约高于重组白介素２和重组肿瘤坏死因子组，以及重组白介素２和免疫活性肽组增殖协力的３倍，③在诱导ＬＡＫ细胞的过程中其增殖量和其细胞毒活性可以不同步。建议临床上治疗晚期肿瘤病人除用ＬＡＫ细胞和重组白介素２外，首先选用天然白介素２。     

进展期贲门癌患者脾脏免疫状态的研究

为了探讨进展期贲门癌患者脾脏的免疫状态，分别检测了７０例患者的外周血，脾静脉血与脾脏的ＮＫ细胞活性及Ｔ－淋巴细胞亚群。结果显示：（１）与正常人外周血淋巴细胞相比，进展期贲门癌患者的ＰＢＬ，脾静脉血淋巴细胞及脾细胞的ＮＫ细胞性，ＣＤ＾＋５，ＣＤ＾＋４细胞降低，ＣＤ＾＋８细胞增多，致ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋８细胞比值明显下降；（２）从进展期贲门癌患者ＰＢＬ、ＳＶＬ与ＳＣ三者之间比较结果可见，后二者的ＮＫ细     

用IL—2／LAK细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响

为了探讨ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响，用＾２Ｈ－ＴｄＲ掺入ＤＮＡ法测定了１７例中晚期癌闰病人在ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后外周血加ＰＨＡ或不加ＰＨＡ淋巴细胞外增殖试验，结果显示无论空白对照（１１／１６）还是ＰＨＡ诱Ｔ淋巴细胞增殖试验（１２／１６），ｃｐｍ值较治疗前均事明显的提高（Ｐ〈０．０５，Ｐ〈０．０１）；在 Ｔ细胞亚群的测定中，ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后比较，ＣＤ＾＋和     

CD3AK细胞的培养与抗肿瘤活性研究

目的 体外扩增经ＣＤ３单抗（ＣＤ３ＭｃＡｂ）活化的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ），并测定其抗肿瘤细胞作用和表型变化。方法 取１３例肺癌和２例肝癌病人外周血，经密度梯度离心获取淋巴细胞，以ＣＤ３ＭｃＡｂ和ＩＬ－２作为诱导剂，采用液相三步扩增方法扩增培养，并分别用ＭＴＴ和ＩＦＡ法与自体ＬＡＫ对照细胞比较细胞动力学、细胞毒作用和表型变化。结果 ＣＤ３ＡＫ细胞扩增速度、数量和抗肿瘤活性均优于自体ＬＡＫ细胞，其表型     

胃癌患者脾脏细胞免疫功能的临床研究

作者检测１６例进展期胃癌患者脾静脉血淋巴细胞（ＳＶＬ）和脾细胞（ＳＣ）的自然杀伤细胞（ＮＫ），ＬＡＫ细胞的杀伤活性及Ｔ细胞亚群（ＴＣ），与胃良性病变的ＳＶＬ及外伤性脾破裂（ＳＣ）对照，探讨了进展期胃癌脾脏细胞免疫功能，结果表明：胃癌患者脾脏ＮＫ，ＬＡＫ细胞杀伤尖性显著降低（Ｐ〈０．０２，Ｐ〈０．０１），ＣＤ４减少，ＣＤ８增加，ＣＤ４／ＣＤ８比值显著降低（Ｐ〈０．０２～０．０１）。提示进展期胃癌患者     

LAK和TIL细胞的表型测定

应用多种抗人淋巴细胞的单克隆抗体和流式细胞仪，分析用ＩＬ－２诱生患者淋巴细胞２周形成的ＬＡＫ和ＴＩＬ细胞的表型。结果：ＬＡＫ细胞中ＣＤ＿３￣＋细胞为（８５．０±２．５３）％，ＣＤ＿（１６）细胞为（８．３±１．０）％，证实ＬＡＫ细胞是以Ｔ细胞为主，包括有ＮＫ细胞的混合群体。双标记表型分析ＣＤ＿８￣＋Ｌｅｕ７￣－的ＣＴＬ细胞占８１．４８％，因而推测ＬＡＫ细细胞中，抗原特异性和ＭＨＣ限制性的ＣＴＬ细胞占有很大比例。ＴＩＬ细胞中ＣＤ＿３￣＋细胞为（６４．７±９．７）％，ＣＤ＿（１６）￣＋细胞为（１．６±０．２）％，Ｌｅｕ７￣＋细胞为（６．８±１．１）％。双标记表型分析ＣＤ＿８￣＋Ｌｅｕ７￣－的ＣＴＬ细胞占ＣＤ＿８￣＋细胞的８６．７６％，证实ＴＩＬ细胞主要是Ｔ细胞，ＮＫ细胞极少。     

曲古抑菌素A对外周血自然杀伤细胞活性和功能的影响

目的探讨曲古抑菌素A（TSA）对正常人外周血自然杀伤细胞(NK)活性和功能的影响。方法从正常人外周血单个核细胞（PBMCs）分离淋巴细胞（PBLs）（主要包括T细胞和NK细胞）或纯化NK细胞。体外应用白介素 2（IL 2）诱导PBLs 72?h产生淋巴因子激活的杀伤（LAK）细胞。将PBLs, LAK或NK细胞进行体外培养,给予不同浓度的TSA处理12、24、48?h。流式细胞术检测NK细胞和T细胞的凋亡;采用51Cr释放试验检测NK细胞的杀伤功能。结果TSA以剂量和时间依赖方式诱导PBLs和LAK细胞凋亡,TSA处理组淋巴细胞及LAK细胞凋亡百分率明显高于对照组（P＜0.05）;TSA同样可诱导静止期NK细胞的凋亡,0.1?μmol/L TSA作用于NK细胞24?h后,36%NK细胞凋亡,显著高于未处理组（P＜0.05）;0.1?μmol/L TSA作用于NK细胞１2?h后,其杀伤白血病细胞的能力明显低于对照组（P＜0.01）。结论TSA能够诱导人外周血静止期NK细胞及LAK细胞发生凋亡,并影响NK细胞的细胞毒作用。     

白血病细胞系中B-Raf与Raf-1的表达及活性

目的：研究白血病细胞及正常人外周血淋巴细胞中的Ｂ－Ｒａｆ和Ｒａｆ－１表达水平及激酶活性。方法：利用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测Ｂ－Ｒａｆ和Ｒａｆ－１表达水平,利用免疫沉淀及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测Ｒａｆ－１及Ｂ－Ｒａｆ的激酶活性。结果：Ｒａｆ－１在白血病细胞及正常人外周血淋巴细胞中均有表达,表达水平基本相似,其激酶活性较低;Ｂ－Ｒａｆ仅在白血病细胞中表达,且在Ｊｕｒｋａｔ和Ｋ５６２细胞中的表达水平较高,其激酶活性也较高。结论：在白血病细胞中,Ｂ－Ｒａｆ的高表达及活化可能是白血病发病的机制之一。     

抗原致敏DC联合LAK细胞对肺腺癌细胞杀伤作用的研究

目的：观察抗原致敏树突状细胞（DC）联合淋巴因子激活的杀伤（LAK）细胞对肺腺癌细胞的杀伤作用。方法：采用密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞（PBMC）,常规诱导出DC、LAK细胞。倒置显微镜观察细胞的形态和增殖情况;应用流式细胞仪（FCM）测定细胞表型上变化鉴定这两种细胞。流式细胞仪检测DC经抗原冲击和未经抗原冲击后其表型变化;利用四甲基偶氮唑蓝（MTT）检测法把DC-LAK细胞和DC-LAK-A549细胞作为效应细胞,肺腺癌A549细胞作为靶细胞,进行杀伤试验。结果：①体外诱导单个核细胞培养出DC和LAK细胞。②共培养后DC-LAK细胞的免疫表型表达增加。抗原致敏DC联合LAK细胞（DC-A549-LAK）组的免疫表型表达与对照组相比更有显著性意义。③共培养细胞在增殖倍率上有显著意义。④MTT显示共培养后的LAK细胞杀伤肿瘤细胞活性增强,抗原致敏后DC-A549-LAK抗肿瘤效应增强更显著。结论：从外周血单个核细胞中诱导出具有典型形态和免疫表型的DC和LAK细胞。DC和LAK细胞共培养细胞,增殖活性、免疫表型、杀伤活性方面高于单纯培养的LAK细胞。抗原致敏后DC-A549-LAK抗肿瘤效应增强更显著。     

淋巴因子活化杀伤细胞抗恶性肿瘤的研究

由人外周血分离单个核细胞,在体外与白细胞介素2、植物血球凝集素及辅助细胞共同培养4周,获得大量活化的LAK细胞。表型及体内外生物学实验结果表明,LAK细胞为CD_3~+淋巴细胞,伴不同比例的CD_4~+与CD_8~+亚群,其抗肿瘤功能表现在体外对多种肿瘤靶细胞的溶解作用,在裸小鼠体内则能有效地抑制高转移癌系的成瘤及实验性转移。     

LAK细胞对白血病多药耐药细胞的杀伤作用

目的:研究淋巴因子激活的杀伤(LAK) 细胞对白血病多药耐药细胞的杀伤效应。方法:采用改良的四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测LAK细胞对白血病多药耐药细胞株K562/VCR的杀伤率,并与敏感株K562 相比较。结果:LAK 细胞对K562/VCR 细胞的杀伤率明显高于对K562 细胞的杀伤率,并且当效靶比为40∶1 时,这种杀伤率最高。结论:LAK细胞在体外对白血病多药耐药细胞株具有显著的杀伤作用,提示临床上用LAK细胞治疗多药耐药的白血病是可行的     

LAK细胞对Hela细胞杀伤作用的初步探讨

IL-2诱导正常人 PBL 后,所产生的 LAK 细胞在体外对 Hcla 细胞的杀伤作用,以90u/ml 的 IL-2诱导 PBL 产生的 LAK 细胞对 Hela 细胞杀伤作用较明显。实验揭示出 LAK 细胞的作用比单独使用 IL-2效果好,而 IL-2与 LAK 细胞的联合作用,其效果更佳。     

Significance of FCM-DNA measurement in detecting minimal residual disease in leukemia.

Using flow cytometry (FCM), we measured the DNA content of bone marrow from 25 patients with acute leukemia (AL) in complete remission (CR) and followed them up for 0.5 to 1 year. Five of 13 patients in early relapse had normal DNA index (DI), while the remaining 8 showed DNA aneuploidy 1.5 to 5 months (mean 2.6 months) before relapse. The relapse rate was higher in CR patients with DNA aneuploidy (88.9%) than in those with normal DI (31.3%, P less than 0.05). Intensive chemotherapy was helpful to prolong CR duration in CR patients with DNA aneuploidy. DNA measurement by FCM was considered a reliable method for detecting minimal residual disease (MRD), and the appearance of DNA aneuploidy might predict a relapse of CR.

     

急性白血病患者外周血LAK活性的诱导

本文对急性白血病患者外周血LAK活性进行了研究。大多数患者外周血可诱导出LAK活性,但较正常人为低。外周血幼稚细胞比例较高和近期接受化疗的患者LAK活性明显减低。急性淋巴细胞性白血病和急性非淋巴细胞性白血病患者之LAK活性无明显区别。     

黄芪脂多糖、金钱草多糖和山茱萸糖促进免疫作用的研究

本文对黄芪脂多糖、金钱草多糖、山茱萸糖及黄芪人参注射液的增强免疫作用,进行了体外和体内研究。本研完表明,金钱草多糖和黄芪脂多糖除刺激免疫器官增重和淋巴细胞增加,还增加 IL-2产生,故淋转和 LAK 生成能力随着显著提高,说明这两种多糖的抗肿瘤作用值得研究。