大蒜新素体内外抑制小鼠巨细胞病毒感染诱导的调节性T细胞扩增实验研究

目的在体内外水平研究大蒜新素对小鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)感染导致调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)异常扩增的抑制作用。方法 72只MCMV感染小鼠随机分为安慰剂组和大蒜新素治疗组;并设72只同期模拟感染小鼠为对照,随机分为模拟感染对照组和大蒜新素对照组。分别于大蒜新素处理后1、7、14、28、60、120 d处死小鼠,获得脾细胞待测。采用Western blotting法检测脾细胞中Foxp3的蛋白表达强度;流式细胞术分析CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在脾细胞中所占比率的变化。采用小鼠胚胎成纤维细胞对大蒜新素的最大耐受浓度处理MCMV感染的胚胎成纤维细胞3 d后,采用Real-time PCR法和Westernblotting法分别检测T细胞中Foxp3 mRNA和蛋白的表达水平。结果整体研究发现,大蒜新素对正常小鼠脾细胞中Foxp3蛋白表达和Treg细胞比率均无显著影响;但是在MCMV感染小鼠,大蒜新素可在感染慢性期显著减少Foxp3蛋白表达强度、降低调节性T细胞比率。体外细胞模型发现,最大耐受浓度的大蒜新素加入共培养体系后可部分拮抗MCMV诱导的Foxp3基因和蛋白表达上调。结论大蒜新素在体内外均可显著纠正MCMV感染导致的Treg异常扩增。大蒜新素通过影响Treg增殖进而增强抗病毒免疫而有利于机体清除CMV病毒,可能是大蒜新素诱导抗CMV免疫的另一重要机制。     

从TH1/TH2细胞平衡角度探讨清肺口服液对感染RSV小鼠内T-bet、GATA3水平的影响

目的:从TH1/TH2细胞平衡角度观察清肺口服液对感染RSV肺炎小鼠肺组织内T-bet、GATA3及IL-12的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法:将45只BABL/c小鼠随机分为5组,正常对照组,模型组,利巴韦林组,清肺(3.4 g/mL)组,清肺(10.2 g/mL)组。每组9只,用RSV(Long株)病毒予小鼠滴鼻造模,病毒激发24 h后,分给药72 h后处死小鼠,立即取小鼠肺组织行病理分析,及肺细胞中RT-PCR检测T-bet和GATA3蛋白表达水平,ELISA方法检测肺泡灌洗液(BALF)中IL-12的含量,流式细胞术方法检测小鼠脾脏细胞IL-4和INF-γ表达含量。结果:小鼠模型组与各给药组小鼠肺组织均有T-bet和IL-12(P<0.05,P<0.01)显著升高,GATA3显著降低。结论:清肺口服液具有调节TH1/TH2平衡,并对于感染rsv小鼠体内T-bet及IL-12细胞因子具有明显提升作用,而对GATA3则有明显抑制效果,从而进一步证明了清肺口服液治疗RSV病毒性肺炎有效性。     

肠道白念珠菌感染对脾虚小鼠小肠组织中IFN-γ和IL-10 mRNA及蛋白表达水平的实验研究

目的:观察脾虚小鼠感染白念珠菌后小肠组织中IFN-γ和IL-10 mRNA和蛋白表达水平的变化,探讨脾虚小鼠在白念珠菌感染过程中的部分免疫机制,为临床诊治白念珠菌感染及脾虚证提供一定的参考依据。方法:采用饮食失节加劳倦过度的复合因素制备小鼠脾虚证模型,经肠道感染白念珠菌14 d后,检测粪便中的活菌数,应用RT-PCR方法检测肠组织局部γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素10(IL-10)mRNA的表达水平,应用Westornblot方法检测肠组织中IFN-γ和IL-10的蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,其他三组小鼠粪便中活菌数、肠组织中IFN-γ和IL-10 mRNA及其蛋白的表达水平均显著增高(P0.01);与正常白念感染组比较,脾虚模型组小鼠小肠组织中IFN-γ、IL-10 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P0.01),而脾虚白念感染组显著升高(P0.05或0.01);与脾虚模型组比较,脾虚白念感染组小鼠粪便中活菌数、小肠组织中IFN-γ和IL-10 mRNA及蛋白表达水平也显著升高(P0.01或P0.05)。结论:小鼠脾虚后可发生肠道菌群紊乱,比正常小鼠对白念珠菌的易感性增强,在肠道局部抗白念珠菌的作用主要以细胞免疫为主,Th1类细胞因子发挥主要作用。     

食积因素对FM1流感病毒感染小鼠免疫功能影响的实验研究

目的：通过检测不同时相食积复合流感病毒（FM1）感染小鼠血清免疫球蛋白M（IgM）、IFN-γ、IL-4及TH1/TH2水平,探讨食积对流感病毒感染（FM1）小鼠免疫功能的影响。方法：通过喂饲小鼠高蛋白、高热量特制饲料复制食积模型,在此基础上,经鼻感染FM1甲型流感病毒,复制病毒性感染模型,于感染后第1、3、5天,分别检测各组小鼠血清IgM、IFN-γ、IL-4及TH1/TH2水平。结果：小鼠感染FM1流感病毒后第5天,单纯感染组、食积感染组小鼠血清IgM含量均较正常组下降,且食积感染组结果差异有统计学意义（P〈0.05）,食积感染组较单纯感染组正常组血清IgM含量明显降低,且结果有统计学意义（P〈0.01）;病毒感染后第1、3、5天,单纯感染组、食积感染组小鼠血清TH1（IFN-γ）/TH2（IL-4））水平均较正常组降低,且在第3天差异有统计学意义（P〈0.05）,第3、5天食积感染组较正常组降低更为明显,且差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：食积可能通过影响机体IgM、IFN-γ、IL-4及TH1/TH2水平对流感病毒感染（FM1）小鼠的免疫失衡产生影响,从而提示食积因素可能对流感的发生发展产生了影响。     

白色念珠菌肠道感染对脾虚模型小鼠小肠组织中IL-10和IL-12影响的实验研究

目的:通过观察脾虚小鼠感染白色念珠菌后小肠黏膜病理变化及小肠黏膜组织中IL-10、IL-12 mRNA及蛋白表达水平的变化,探讨脾虚小鼠感染白色念珠菌的部分免疫机制。方法:健康SPF级昆明种小白鼠60只,随机分为两组:空白组(N组,30只);脾虚模型组(M组,30只)。对脾虚模型组小鼠采用饮食不节加劳倦过度的方法复制脾虚小鼠模型。模型复制成功后,再次分别将N组及M组小鼠各随机分为两组:空白对照组(N1组,15只);空白感染白念组(N2组,15只);脾虚模型对照组(M1,15只);脾虚感染白念组(M2,15只)。分别令N2和M2组小鼠感染白色念珠菌,白念菌浓度为2×108CFU/m L,剂量为0.2 m L/10 g体重。于染菌后第21天进行相关指标检测。采用HE染色的方法,观察各组小鼠小肠组织病理变化;采用RT-PCR法检测各组小鼠小肠组织中IL-10、IL-12 mRNA表达水平;采用western-blot法检测各组小鼠小肠组织中IL-10、IL-12表达水平。结果:与空白对照组比较,空白感染白念组、脾虚模型对照组、脾虚感染白念组小鼠小肠组织中IL-12、IL-10 mRNA及蛋白的表达水平均有所上调(P<0.01),脾虚感染白念组IL-12表达水平上调最为明显;空白感染白念组IL-10上调最为明显。结论:脾虚小鼠比正常小鼠对白色念珠菌更加容易发生感染,感染的发生机制可能与机体的总体免疫功能相关,免疫功能正常状态下,可能与IL-10表达水平升高相关,免疫功能低下状态下,可能与IL-12表达水平升高相关。     

理肺通络方对支原体肺炎大鼠肺组织IL-4、IFN-γ基因表达的影响

目的:探讨支原体肺炎大鼠IL-4、IFN-γ基因表达的变化,观察理肺通络方的干预作用。方法:Wistar随机分为4组:正常组、模型组、中药组、西药组,采用一次性滴鼻感染肺炎支原体国际标准株(MPFH)菌液造模。造模第11天起,分别灌胃生理盐水、理肺通络方水煎剂、阿奇霉素溶液。在治疗的第11天处死动物,采用RT-PCR方法检测大鼠肺组织IL-4、IFN-γmRNA表达水平。结果:模型组IL-4mRNA表达显著升高、IFN-γ表达显著下降,与正常组比较有非常显著性差异(P<0.01)。中药组、西药组IL-4mRNA表达下降,IFN-γmRNA表达升高,与模型组比较有非常显著差异(P<0.01),中药组与西药组比较无显著差异(P>0.05)。结论:理肺通络合剂对支原体肺炎的治疗作用可能是通过下调IL-4mRNA、上调IFN-γmRNA的表达来实现的。     

补肾解毒方调控IL-12、IFN-γ水平对辐射后小鼠免疫防护作用研究

目的:探讨补肾解毒方对辐射后小鼠血清白细胞介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)分泌水平的影响。方法:将90只小鼠随机分为空白组、辐射组、氨磷汀组、补肾解毒方防治结合组和补肾解毒方预防组,每组18只,并建立各组小鼠模型。在实验开始后第11天,除空白组外所有小鼠均接受一次性4Gy 60Coγ射线全身辐照,并于辐射后第1天、第7天、第14天每组随机抽取6只进行眼球取血,分离血清,应用ELISA法检测血清中IL-12、IFN-γ水平。结果:辐射后第1天,氨磷汀组IL-12水平高于辐射组(P<0.05),各组间IFN-γ水平无差异;辐射后第7天,防治组IL-12水平高于辐射组(P<0.05),防治组IFN-γ水平高于辐射组与氨磷汀组(P<0.01,P<0.05),预防组IFN-γ水平高于辐射组(P<0.05),空白组IFN-γ水平高于辐射组和氨磷汀组(P<0.05);辐射后第14天,各组IL-12、IFN-γ水平均无差异。结论:辐射后补肾解毒方可通过提高分泌血清中IL-12和IFN-γ的水平,起到增强辐射后小鼠免疫系统防护作用。     

电针对帕金森病模型大鼠黑质区c-Jun氨基末端激酶和TNF-α、IFN-γ、IL-1β蛋白表达的影响

目的:观察电针对帕金森病模型大鼠黑质区c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路及炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的作用,探讨针刺治疗帕金森病的作用机制。方法:健康雄性SPF级SD大鼠32只,随机平均分为正常组、假手术组、模型组、电针组。模型组和电针组经颈背部注射鱼藤酮(1 mg/kg,溶于一定比例二甲亚砜和生理盐水中,浓度0.25 mg/m L)造模14 d。电针组给予电针"风府"(GV16)和"太冲"(LR3)两穴治疗,连续治疗14 d,其余各组不做治疗。假手术组给予相同剂量的二甲亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)和生理盐水混合液。采用免疫蛋白印迹法检测大鼠黑质区酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)、磷酸化的c-Jun和TNF-α、IFN-γ、IL-1β蛋白表达情况。结果:与正常组、假手术组比较,模型组大鼠黑质区TH蛋白表达明显减少(P<0.05),p-c-Jun、TNF-α、IFN-γ、IL-1β蛋白表达明显增加(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠黑质区TH蛋白表达明显增加(P<0.05),p-c-Jun、TNF-α、IFN-γ、IL-1β蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论:电针可以通过调节帕金森病模型大鼠体内MAPK/JNK信号通路,降低p-c-Jun在帕金森病模型大鼠黑质区的表达,进而减少炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β的表达,对帕金森病的发生发展起到一定的调节作用。     

热毒宁调节MCMV感染的肺炎模型小鼠肺组织内IFN-γ和IL-4水平的研究

目的观察热毒宁对鼠巨细胞病毒(MCMV)感染小鼠肺组织干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)细胞因子水平的影响及其抗MCMV作用机制。方法 40只BALB/c鼠随机分5组,每组8只,A为空白对照组,B为免疫低下对照组,C为MCMV肺炎模型组,D为热毒宁治疗组,E为更昔洛韦治疗组。HE染色观察小鼠肺组织的病理改变,荧光定量PCR检测肺组织MCMV DNA的变化,酶联免疫试验(ELISA)法检测肺组织中IFN-γ和IL-4的变化。结果 1)与A组相比,C组肺组织病理染色显示肺泡壁内有大量炎性细胞浸润,肺泡壁增宽,部分肺泡腔内有蛋白渗出;MCMV DNA含量升高,肺组织中炎症因子IFN-γ和IL-4明显增多(P0.05);2)与C组相比,给予药物干预后,D、E组肺组织病理改变较前减轻,MCMV DNA含量降低,炎性因子IFN-γ和IL-4明显下降(P0.05);而D、E两组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论热毒宁干预后,肺组织的病理改变较前减轻,抑制CMV DNA的复制,IFN-γ和IL-4明显下降;此效应可能是通过抑制CMV的复制周期并干预下游细胞因子从而发挥抗病毒作用。     

止喘胶囊对气道变应性炎症小鼠TH1／TH2的调节作用研究

为探讨止喘胶囊治疗气道应变性炎症的机理,将40只小鼠随机分为模型组、止喘胶囊组、必可酮组、正常对照组,通过吸入卵蛋白建立变应性气道炎症模型.采用ELISA法检测外周血和支气管肺泡灌洗液中IL-4、IFN-γ、IL-12水平变化.结果与正常组相比,模型组IL-4水平明显升高(P＜0.01),IFN-γ/IL-4比值明显降低(P＜0.01);与模型组比较,止喘胶囊组IL-4水平明显降低(P＜0.01),IFN-γ、IL-12水平和IFN-γ/IL-4比值明显升高(P＜0.01),P＜0.05).提示止喘胶囊通过促进IL-12分泌,调节T辅助细胞TH1、TH2细胞因子IFN-γ、IL-4的比例,抑制气道变应性炎症.     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

耳鸣(肾精亏损型)临床资料研究

[目的]对2007年11月至2008年11月就诊的主观性耳鸣患者246例,排除其他中医证型,主要研究肾精亏损型耳鸣患者耳鸣的临床特征,变化规律及耳鸣产生的影响等.[方法]选择肾精亏损型耳鸣患者,记录临床症状及体征,采用电测听及耳鸣匹配、听觉脑干诱发电位(ABR)等方法检查,并将资料进行统计分析.[结果]患者年龄以51～60岁最多见,其次为61～70岁.耳鸣响度的自我评分与响度匹配值之间无关联.大多数病例的耳鸣病程在一年之内.大部分患者受耳鸣困扰的程度在中度以下.ABR测试结果听力正常者占25%,右侧和左侧听神经传导至脑干功能障碍患者分别占13%和19%,双侧听神经传导功能障碍占16%.[结论]临床耳鸣患者多数为肾精亏损型,年龄以51～60岁最多见,男女比例相当,大部分患者听神经传导障碍和脑干功能障碍,高音调耳鸣患者居多.     

针灸治疗椎动脉型颈椎病的取穴规律分析

目的:探寻椎动脉型颈椎病针灸取穴规律。方法:检索CNKI、VIP,建立椎动脉型颈椎病针灸取穴数据库,采用SPSS17.0统计软件统计描述。结果:治疗椎动脉型颈椎病的针灸穴位共计72个,使用频次为1005次;所用腧穴归属为督脉、足少阳胆经、经外奇穴、足太阳膀胱经及足阳明胃经频次最多,其累积频率达82.29%;其中风池穴的频率为19.11%;夹脊穴的频率为17.13%;百会穴的频率为12.3%,三穴累积频率达64.28%。结论:针灸治疗本病,以疏通局部经络,调节阴阳气血,临床选取督脉、足少阳胆经、奇穴以及风池、夹脊、百会三穴治疗最多。     

股骨头坏死病因的相关因素分析

目的:基于中国股骨头坏死数据库(China osteonecrosis of the femoral head database,CONFHD)资料分析股骨头坏死(Osteonecrosis of the femoral head,ONFH)病因的相关因素。方法:纳入CONFHD中2016年7月至2018年12月收录的病例资料,由数据库工程师从数据库中导出资料,包括患者的性别、年龄、病因、受伤类型、饮酒史(饮酒年限、饮酒频率、饮酒量)、激素应用史(激素应用时间、原发病类型、激素应用途径、激素种类)。结果:本研究共纳入病因资料完整的ONFH患者1290例。创伤性239例(18.53%),酒精性692例(53.64%),激素性359例(27.83%)。男1011例(78.37%),女279例(21.63%)。男性患者中创伤性138例(13.65%)、酒精性653例(64.59%)、激素性220例(21.79%),女性患者中创伤性101例(36.20%)、酒精性39例(13.98%)、激素性139例(49.82%);男性中酒精性比例最高,女性中激素性比例最高。1290例中,年龄≤30岁169例,激素性71例(42.01%);年龄31~40岁254例,酒精性146例(57.48%);年龄41~50岁324例,酒精性202例(62.35%);年龄51~60岁319例,酒精性185例(58.00%);年龄61~70岁158例,酒精性67例(42.41%);年龄≥71岁66例,创伤性和酒精性均为25例(各占37.88%)。受伤类型资料完整的创伤性ONFH患者144例,股骨颈骨折126例(87.50%)。饮酒史资料完整的酒精性ONFH患者544例,男性537例(98.71%),年龄41~50岁者172例(31.62%),饮酒年限6~10年149例(27.39%),饮酒次数5次≤每周饮酒<6次与每周饮酒≥7次均为127例(各占23.35%),每周饮酒量3001~3500 mL 222例(40.81%)。激素应用史资料完整的激素性ONFH患者210例,男112例(53.33%)、女98例(46.67%);激素应用时间14~10950 d,中位数365 d;原发病中免疫系统疾病50例(23.81%),比例最高,其余依次为皮肤、泌尿及血液系统等疾病;激素应用途径,口服125例(59.50%);激素应用种类,强的松68例(32.38%),比例最高,其余依次为地塞米松、甲强龙、泼尼松龙等。结论:酒精、激素、创伤仍是排在前3位的ONFH发病诱因;酒精性ONFH患者,多数饮酒时间>5年,每周饮酒次数>5次;激素性ONFH患者,激素应用时间中位数为365 d,应用途径主要是口服,排在前3位的药物为强的松、地塞米松、甲强龙,原发病主要为免疫、皮肤、泌尿、血液系统疾病;创伤性ONFH患者受伤类型以股骨颈骨折为主。     

《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变

目的:探讨《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变。结果:1963年版《中华人民共和国药典》中石斛来源为兰科石斛属Dendrobium植物的新鲜或干燥茎;1977—2000年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、环草石斛、马鞭石斛、黄草石斛或铁皮石斛;2005年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、铁皮石斛或马鞭石斛;2010年版《中华人民共和国药典》石斛的来源为金钗石斛、鼓槌石斛或流苏石斛,铁皮石斛也从石斛项下都单列出来。讨论:石斛药材基源的变化、铁皮石斛的单列体现出石斛用药的科学性。但铁皮石斛与石斛的性味、功效一致,值得商榷;DNA条形码、分子标记技术等新方法可以应用到石斛药材的鉴别中。     

老年股骨颈骨折术后的护理

股骨颈骨折是发生于老年人的常见骨科病，以女性多见。因老年人骨质疏松，有机质少，应变力差，所以只需较小扭转暴力就能引起骨折。骨折后，由于骨折部位血供差，骨折不愈合的可能性大，加之患者年老体弱、长期卧床，易发生危及生命的并发症，因此恰当的护理非常重要，现将护理体会介绍如下。     

病性变化和转化的哲理数学原理

病性的变化和转化以及疾病的传变是中医病理学的2个核心问题。它们可分别从阴阳五行数学的公理1和公理2、3得到圆满的解释。病性变化,其症结在于主导属性明晰度的大小发生变化;病性转化,其症结则在于主导属性明晰度的正负号发生变化。     

姜黄根茎不同部位的理化指标分析

目的：研究姜黄根茎不同部位外在物理性状和内在化学成分的差异,为姜黄药材的等级划分提供数据基础。方法：在姜黄道地产区收集样品,每份样品按母姜、子姜一级、子姜二级进行分类,分别测定根茎的长度、宽度、厚度、质量、颜色值［明亮度（L*）、红绿度（a*）和黄蓝度（b*）］及双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素、挥发油含量。结果：不同部位姜黄根茎的长度、宽度、厚度、质量、折干率差异较大,其中宽度、厚度、质量在鲜品和干品间差异均有统计学意义;子姜二级的折干率显著低于母姜与子姜一级。姜黄不同部位颜色值表现出相同的变化趋势,姜黄鲜品断面颜色值a*的变异系数最大,颜色值b*次之,颜色值L*最小,姜黄干品粉末颜色值b*的变异系数最大,颜色值L*、a*变异系数较小。姜黄不同部位的姜黄素类成分含量存在差异,子姜一级的双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素含量均高于母姜和子姜二级。结论：综合以上指标,姜黄子姜一级的理化品质最佳。     

辨证与辨病相结合辨治乳腺增生病

探讨乳腺增生病中医辨证分型的客观依据,泌免疫变化与中医辨证分型的相关性进行了总结和研究,医药辨治乳腺增生病的新思路。对乳腺增生病的红外光扫描诊断、病理分类、内分以期能够使微观医学与宏观辨证相结合,以开拓中医药辨治乳腺增生病的新思路。