化积方胶囊抗肿瘤活性研究

目的:研究化积方胶囊体内外抗肿瘤活性方法:采用MTr法观察化积方对S180细胞生长抑制情况;鼠肝癌H22细胞株接种小鼠体内观察化积方对肿瘤抑制率和对小鼠的体质量抑制率;流式细胞仪定量检测其细胞周期和凋亡发生率的影响.结果:10,100,500 μg· ml-1化积方对小鼠S180肿瘤细胞的增殖抑制率(％)分别为23.44,40.35,48.79(P＜0.05),小鼠S180细胞的半数抑制浓度(IC50)为(0.554±0.027)mg·ml-1;5,15,45 mg·kg-1·d-1化积方均对H22细胞产生了抑制作用,抑制作用(％)分别为26.94,48.34,68.27 (P＜ 0.05).10,100,500μg· ml-1的化积方给药组的细胞凋亡率分别为5.77％,12.03％和15.48％,均明显高于阴性对照组,两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论:化积方胶囊具有抗肿瘤作用,这一作用可能与促进肿瘤细胞凋亡有密切联系.     

马甲子叶提取物的抗肿瘤活性研究

目的 研究马甲子叶提取物的体内外抗肿瘤活性.方法 采用系统溶剂萃取法萃取马甲子叶醇提物,采用MTT法分别检测马甲子叶水提物、醇提物、石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位对人肝癌HepG-2、人胃癌MGC-803、人宫颈癌Hela细胞的体外抗肿瘤活性;考察马甲子叶乙酸乙酯部位对S180荷瘤小鼠的体内抗肿瘤活性.结果 马甲子乙酸乙酯部位对3种肿瘤细胞均有明显抑制作用,呈一定量效关系,IC50分别为23.68、24.91、75.32 μg·mL-;乙醇提取物和石油醚部位对3种肿瘤细胞均有一定抑制作用;正丁醇部位和水提物的抑制作用不明显.乙酸乙酯部位对S180荷瘤小鼠的体内抗肿瘤作用明显,中剂量的抑瘤效果与环磷酰胺的相当,抑瘤率达49.38％.结论 马甲子叶乙酸乙酯部位的抗肿瘤活性最强.     

美法仑-甘草次酸复合物的合成及其体外抗肿瘤活性研究

目的设计合成美法仑–甘草次酸复合物,并对其体内外抗肿瘤活性进行研究。方法以美法仑和18α-甘草次酸为原料,通过酯化、氧化、酰化和缩合反应制备目标化合物3a和3b,结构经元素分析、MS、1H-NMR确证,并采用MTT法对其体外抗肿瘤活性进行研究,同时考察了其对正常大鼠肝细胞BRL和小鼠成纤维细胞L929的细胞毒性。结果目标化合物3a、3b的体外抗肿瘤活性明显优于母体药物18α-甘草次酸和美法仑,且对正常细胞的毒性小于氮芥类药物美法仑。结论美法仑–甘草次酸复合物3a和3b抗肿瘤活性良好,具有开发成抗肿瘤候选药物的前景。     

甲基丙烯酰紫草素的抗肿瘤作用及其机制的研究

目的 研究甲基丙烯酰紫草素(MA)在体内外的抗肿瘤作用,并探讨其作用机制.方法 用MTT法和生长曲线法研究不同浓度的MA对SGC-7901细胞的生长抑制作用;应用S180荷瘤小鼠模型进行其体内抗瘤实验;免疫组化法检测凋亡相关蛋白NF-κB p50的表达.结果 MA对SGC-7901细胞具有抑制作用,且呈明显的量效和时效关系,其IC50=14.12±1.83 mg·L-1;0.375、0.750、1.500 mg·kg-1的MA对小鼠移植性肉瘤S180的抑制率分别为25.00%、41.20%、61.11%,呈剂量依赖性;随着MA浓度的增大,NF-κB p50蛋白的表达下调.结论 MA具有较好的体内外抗肿瘤作用,可能与诱导细胞凋亡和抑制NF-κB p5O的活性有关.     

艾迪注射液抑制肿瘤细胞生长及诱导肿瘤细胞凋亡的研究

目的:对艾迪注射液体外抗癌活性进行研究,探讨其抗肿瘤作用及机制。方法:应用四甲基偶氮盐(MTT)法检测艾迪注射液在体外对小鼠S180,H22及人HepG2细胞的生长抑制作用;流氏细胞仪(FCM)分析其诱导HepG2细胞凋亡和对周期的阻滞作用;用荧光显微镜观察其诱导HepG2细胞凋亡作用。结果:艾迪注射液对小鼠S180、H22及人HepG2细胞的IC50分别为(9．82±0．272),(4．25±0．333),(6．78±0．268)mg·ml-1。4．1 mg·ml-1艾迪注射液作用48 h后的HepG2细胞凋亡率达到12．43％。结论:艾迪注射液对肿瘤细胞具有直接杀伤和促进肿瘤细胞凋亡的作用。     

参麦注射液的抗肿瘤作用研究

目的 研究参麦注射液体内外抗肿瘤作用.方法 以小鼠肉瘤S180、肝癌H22、Lewis肺癌实体瘤模型考察参麦注射液的体内抑瘤作用;通过MTT法考察参麦注射液体外对人宫颈癌HeLa细胞和人肝癌HepG 2细胞的增殖抑制作用.结果 参麦注射液在体内对小鼠肉瘤S180、肝癌H22、Lewis肺癌均有显著的抑制作用,且呈剂量相关性,中、高剂量抑瘤率可达35％以上;体外对人宫颈癌HeLa细胞和人肝癌HepG 2细胞亦有增殖抑制作用,且呈浓度-时间相关性,48 h的IC50值分别为0.36、0.72 g/mL,72h的IC50值分别为0.21、0.29 g/mL.结论 参麦注射液体内外均有显著的抗肿瘤活性.     

艾迪冻干粉抗肿瘤作用的实验研究

目的 研究艾迪冻干粉的抗癌活性，为临床应用提供实验依据。方法应用小鼠S180、H22肿瘤体内抗肿瘤试验和体外MTT法检测艾迪冻干粉对S180、H22、HepG2等3种不同来源肿瘤细胞的生长抑制作用；采用Hoechst 33342/PI双染法检测药物对人肝癌细胞株HepG2诱导凋亡的作用。结果艾迪冻干粉可以通过直接的细胞毒作用和诱导细胞凋亡对小鼠肿瘤细胞S180、H22 和人肝癌细胞HepG2 起到生长抑制作用；MTT法研究结果表明，该药物对S180、H22、HepG2细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(0.521±0.272)，(0.801±0.333)，(0.588±0.376) mg·mL^-1。结论艾迪冻干粉具有抗肿瘤作用，可能成为临床治疗癌症的有效药物。     

阿魏酸磷脂复合物的理化性质及抗肿瘤活性研究

目的:制备阿魏酸磷脂复合物,对其进行理化性质研究和抗肿瘤活性测定.方法:应用光谱分析法对复合物进行了鉴别;用紫外分光光度法测定阿魏酸磷脂复合物的溶解度;利用MTT法测定阿魏酸磷脂复合物抑制肿瘤细胞生长的活性.结果:光谱分析显示,阿魏酸与磷脂可以结合形成复合物;阿魏酸磷脂复合物明显改善阿魏酸在氯仿中的溶解性能;100 μg·mL-1阿魏酸磷脂复合物(相当于19 μg·mL-1阿魏酸)对于人结肠癌细胞HT-29和肝癌细胞BEL-7402的抑制肿瘤生长效果与100 μg·mL-1阿魏酸的效果一致.结论:与阿魏酸相比,阿魏酸磷脂复合物的脂溶性有显著提高,阿魏酸磷脂复合物的抗肿瘤活性也有所增强.     

楤白皮总皂苷体内外的抗肿瘤作用

目的:研究楤白皮总皂苷的体内外抗肿瘤活性。方法:采用MTT体外测定楤白皮总皂苷对小鼠B16黑色素瘤、小鼠H22肝癌细胞和小鼠FBL3红白血病细胞的增殖抑制作用;采用小鼠移植性肿瘤S180和H22观察楤白皮总皂苷的体内抑瘤活性。结果:楤白皮总皂苷体外对B16细胞、FBL3细胞的IC50分别为0.077 4 g.L-1和0.199 g.L-1;在0.02～3.2 g.L-1范围内,对H22细胞体外抑制率均为80%以上。在100、200、300 mg.kg-1剂量下,楤白皮总皂苷对S180小鼠肉瘤的抑瘤分别为16.9%、37.1%和27.0%,对H22小鼠肝癌的抑瘤率分别为23.7%、10%和13.4%。结论:楤白皮总皂苷在体内、外均具有一定的抗肿瘤活性。     

鹅绒委陵菜多糖抗肿瘤作用研究

目的探讨鹅绒委陵菜多糖（PAP）的抗肿瘤作用。方法采用MTT法研究PAP对体外培养人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用;并将s180荷瘤小鼠随机分组,灌胃给予50,100,200mg·kg-1剂量的PAP,研究PAP对荷瘤小鼠的抑瘤率和免疫功能的影响。结果体外实验结果显示PAP对SMMC-7721细胞的体外增殖有显著抑制作用,400mg·L-1PAP组抑制率最高,为43．57％;PAP对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用呈剂量依赖性,拟合曲线呈线性相关。动物实验结果显示低、中、高3个剂量的PAP对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为46．41％,52．29％和59．48％,其中环磷酰胺和低剂量的多糖组合抑瘤率与中、高剂量的多糖抑瘤率相当,并显著高于单用环磷酰胺组的抑瘤率;同时PAP能够显著提高T-淋巴细胞和巨噬细胞吞噬率。结论PAP具有抗肿瘤活性和增强免疫的功能。     

人骨髓来源内皮前体细胞体外培养和鉴定的研究

目的:明确人骨髓单个核细胞中是否存在内皮前体细胞(EPCs),探讨从人骨髓中分离、培养EPCs的方法及体外进行EPCs的鉴定。方法:采集正常人骨髓单个核细胞进行体外培养,应用流式细胞术进行内皮细胞表面标记物检测,应用免疫荧光术对培养细胞进行内皮细胞功能特性检测。结果:人骨髓单个核细胞经体外培养,收获细胞可以表达内皮细胞的特异性抗原,包括CD34、VWF、KDR等,并显示出能摄取乙酰化低密度脂蛋白(ac-LDL),结合荆豆凝集素(UEA-1)等内皮细胞的特性。结论:人骨髓中存在具有内皮细胞潜能的EPCs,其具有内皮细胞的表型特征和功能,有希望作为种子细胞用于冠心病的血管新生治疗。     

Immunological changes in the intestines and skin after senna administration

Abstract

Context: It has been reported that chronic sennoside use is associated with the development of melanosis coli, colonic adenoma, and/or carcinomas.

Objectives: In this study, we investigated the immunological changes in the colon and skin after the administration of senna.

Materials and methods: In this study, we investigated the colon and epidermis of C57/BL6j mice after a single administration of 10?mg/kg of senna [Cassia angustifolia (Caesalpiniaceae); 3, 6, 12, and 24?h after administration] and after repeated once per week administrations (on days 3, 5, 7, 14, and 21 of administration). The LD₅₀ and ED₅₀ of senna used in this experiment were 165?mg/kg and 13?g/kg, respectively.

Results: We demonstrated that the DOPA-positive cells in the colon increased at 12?h after single administration and were further increased from at 5–28?d after repeated administration. We also studied the physiological changes of the small intestine using the charcoal meal test. We found that there was a tendency for peristalsis to be inhibited after repeated senna administration. In the epidermis, we investigated the number of Langerhans cells, because they are important immune cells of the skin. The number of these cells decreased, especially after repeated administration.

Discussion and conclusion: The present findings suggested that it is necessary to pay attention to not only the intestine but also the skin, during long-term senna treatment.     

干细胞样SP细胞研究进展

摘要： 干细胞样 SP 细胞是近年来在很多正常组织和恶性肿瘤组织及细胞系中发现的一种具有不同程度分化潜能和自我更新能力的细胞群体。虽然 SP 细胞在总体细胞中所占比例很低, 但这部分具有干细胞特性的细胞在干细胞以及肿瘤干细胞研究方面起着越来越重要的作用。本文综述了 SP 细胞的发现、 生物学特性、 与肿瘤干细胞之间的关系以及 SP 细胞的未来临床应用等。最后对 SP 细胞的发展进行了展望。     

Differential cytotoxic effects of mono-(2-ethylhexyl) phthalate on blastomere-derived embryonic stem cells and differentiating neurons

Potential applications of embryonic stem (ES) cells are not limited to regenerative medicine but can also include in vitro screening of various toxicants. In this study, we established mouse ES cell lines from isolated blastomeres of two-cell stage embryos and examined their potential use as an in vitro system for the study of developmental toxicity. Two ES cell lines were established from 69 blastomere-derived blastocysts (2.9%). The blastomere-derived ES (bm-ES) cells were treated with mono-(2-ethylhexyl) phthalate (MEHP) in an undifferentiated state or after directed differentiation into early neural cell types. We observed significantly decreased cell viability when undifferentiated bm-ES cells were exposed to a high dose of MEHP (1000 μM). The cytotoxic effects of MEHP were accompanied by increased DNA fragmentation, nuclear condensation, and activation of Caspase-3, which are biochemical and morphological features of apoptosis. Compared to undifferentiated bm-ES cells, considerably lower doses of MEHP (50 and 100 μM) were sufficient to induce cell death in early neurons differentiated from bm-ES cells. At the lower doses, the number of neural cells positive for the active form of Caspase-3 was greater than that for undifferentiated bm-ES cells. Thus, our data indicate that differentiating neurons are more sensitive to MEHP than undifferentiated ES cells, and that undifferentiated ES cells may have more efficient defense systems against cytotoxic stresses. These findings might contribute to the development of a new predictive screening method for assessment of hazards for developmental toxicity.     

来源于干细胞的树突细胞激活免疫细胞对同源白血病干细胞的杀伤作用

目的:探讨白血病干细胞(LSC)来源的树突细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共同培养对自身LSC的杀伤作用.方法:提取慢性粒细胞白血病加速期(CML-AP)患者的骨髓单个核细胞(BMMC),再应用CD34+CD38CD44+标记BMMC,流式分选仪分选出LSC并扩增、诱导出DC.取同源的单个核细胞诱导出CIK.用流式细胞技术检测DC和CIK细胞免疫表型、DC的p-糖蛋白(P-gp)耐药蛋白表达.荧光原位杂交(FISH)技术检测BCR/ABL融合基因在LSC及DC中的表达,乳酸脱氢酶释放法测定效应细胞对靶细胞的杀伤效应.结果:CIK与DC共培养后,CD40、CD80、CD83及人类白细胞抗原(HLA-DR)的构成均高于共培养前;CD3、CD3CD8、CD3CD56的成熟表型表达率高于共培养前,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01).干细胞来源DC的P-gp表达阳性率为(60.61±12.38)％.3种效靶比对应的杀伤率差异有统计学意义(P＜0.01),随着效靶比的增加,细胞杀伤作用增强.结论:白血病干细胞来源DC功能正常,与CIK共培养对自身LSC有杀伤作用.     

胎盘间充质干细胞向神经细胞诱导的实验研究

目的间充质干细胞(MSCs)具有自我更新和多向分化能力的特点，尽管其主要来源骨髓间充质干细胞(BMSCs)已被认为是治疗多种疾病的良好细胞来源。但在严重感染或随着年龄的增长骨髓细胞数及增殖、分化能力均明显下降等情况下，就无法顺利获得足量可用于治疗的BMSC，有必要寻找MSC的新来源。方法消化胎盘组织、贴壁培养获得基质细胞；用流式细胞仪检测其细胞表面标志；比较叔丁对甲氧酚(butylated hydroxyanisole，BHA)、复方丹参注射液、β-巯基乙醇(BME)等对培养的基质细胞向神经细胞分化的作用；采用免疫细胞化学的方法对分化的细胞进行鉴定。结果胎盘组织中分离出的基质细胞与骨髓间充质干细胞有相似形态和细胞表面标志，并可诱导表达神经元和星型胶质细胞标志神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolasen，NSE)、神经微丝(neurofilament，NF)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrilament acidic protein，GFAP)。结论胎盘组织中存在能分化为神经元样细胞的间充质干细胞。胎盘间充质干细胞可能是一种可为临床治疗提供丰富新来源的间充质干细胞。     

干细胞研究进展

干细胞不仅存在于胚胎发育时期 ,而且在成体内也广泛分布于各种不同组织器官的特定部位。在胚胎时期干细胞的功能主要是参与机体的发育 ,成年后则对维持组织器官的新陈代谢有重要作用。随着胚胎干细胞 ,神经干细胞等方面研究的不断深入 ,有关干细胞的研究已日益成为一个全球性的热点。本文仅就其进展做一简要综述。     

对肿瘤干细胞的认识和可调控的意义

恶性肿瘤严重地威胁着人类的健康，是危害人类生命的重要原因之一。尽管有关研究报告很多，遗憾的是其机制尚不清楚，至今尚无确切有效的抗癌、控癌措施。局部复发和远处转移一直是导致最终治疗失败的主要问题。WHO提出的新目标和理念——肿瘤属于可调控的慢性疾病。新的研究发现在肿瘤组织中有一类具有自我更新及分化潜能的细胞亚群，而且是肿瘤复发及转移的根源。这部分细胞被称马肿瘤干细胞。国内外相继从血液系统肿瘤及多种实体瘤中分离、鉴定了肿瘤干细胞。随着肿瘤干细胞学说的提出及确认，人们对肿瘤复发、转移机制和对策有了新的认识和期望，从而为恶性肿瘤治疗後的复发转移的预防提供了一个全新的途径。现综述如下。     

转移因子片剂对免疫功能的调节作用

目的观察转移因子片对小鼠免疫功能的影响。方法采用NK细胞功能测定、巨噬细胞功能测定、T细胞亚群测定。结果转移因子100~500 mg/kg,经每日口服给药,能明显增强小鼠NK细胞和巨噬细胞功能,血液中CD3+细胞、CD4+细胞以及C4+/CD8+比值升高。结论转移因子片对动物免疫功能有增强作用。     

Stem cell-derived hepatocytes and their use in toxicology

Better prediction of safety risk and understanding of mechanism of action of drug candidates remain a major challenge in order to prevent late stage attrition. Continuous efforts are made to improve and develop new models, especially in some areas such as hepatotoxicity. Besides primary hepatocytes and transformed liver cell lines, stem cells either isolated from embryos or adult tissues or obtained by reprogramming somatic cells are emerging as a new potential source of unlimited numbers of hepatocytes. Presently, only hepatocyte-like cells expressing low levels of liver-specific markers, especially drug metabolizing and detoxifying enzymes, are usually obtained, making them still unsuitable as metabolically competent cells for toxicity studies. The only exceptions are some hepatoma cell lines, particularly the HepaRG cell line that can differentiate from a bipotent progenitor stage to attain the functional capacity of normal adult hepatocytes in primary culture without losing the indefinite growth property of transformed cells. Since the research field on stem cells is growing fast marked advances might be expected in the next future.