中华按蚊和嗜人按蚊不同地理株基因组DNA的限制酶...

Total DNA was extracted from three geographical strains of Anopheles sinensis and two geographical strains of Anopheles anthropophagus and digested respectively with three restriction endonucleases (Bgl II, Hae III and Pst I). The restriction fragment length differences (RFLDs) of repetitive DNA detected after agarose gel electrophoretic separation and ethidium bromide staining were compared among the above-mentioned geographical strains of both An. sinensis and An. anthropohagus. The results indicated that the band patterns are species- specific and strain-specific, their main bands being similar while their minor bands being distinctly different. Pst I digestion produced unique fragments for three geographical strains of An. sinensis while Bgl II digestion produced unique fragments for two geographical strains of An. anthropophagus. In view of the variation in repetitive DNA of different geographical strains of both An. sinensis and An. anthropophagus presented, the RFLDs could be used as a means to distinguish various closely related geographical strains of anopheline mosquitoes.     

用PCR-RFLP技术鉴别嗜人按蚊和中华按蚊的研究

目的　依据嗜人按蚊和中华按蚊rDNA的ITS2区段基因特征 ,建立一种新的嗜人按蚊和中华按蚊基因鉴别技术。方法　对不同地区的嗜人按蚊、可疑嗜人按蚊和中华按蚊样本通过采用特异性ITS2 引物PCR扩增 ,限制性内切酶RsaI和HinfI消化 ,以及琼脂糖凝胶电泳分析进行PCR -RFLP基因鉴别。 结果　不同地区嗜人按蚊rDNA的ITS2 基因PCR扩增产物能被限制性内切酶HinfI酶切 ,并显示一条 4 5 0bp的酶切DNA条带 ;中华按蚊的ITS2 基因PCR扩增产物则能被限制性内切酶RsaI酶切 ,并显示 4 0 0bp和 2 0 0bp两条酶切DNA条带 ;辽宁可疑嗜人按蚊的PCR -RFLP结果与嗜人按蚊相同而广东珠海可疑嗜人按蚊的PCR -RFLP结果与中华按蚊相同。结论　依据rDNA的ITS2 区段基因特征建立的PCR -RFLP技术可用于嗜人按蚊和中华按蚊的基因鉴别。采用该PCR -RFLP基因鉴别技术发现辽宁可疑嗜人按蚊的基因与中国大陆的嗜人按蚊属同种 ,而广东可疑嗜人按蚊的基因与中华按蚊属同种。     

嗜人按蚊和中华按蚊实验种群寿命的比较观察

本文应用简略寿命表的方法在现场实验室内对嗜人按蚊和中华按蚊实验种群的寿命作了比较观察.嗜人按蚊雌、雄蚊的期望寿命分别为16.75d和15.91d,中华按蚊雌、雄蚊分别为21.63d和17.51d.两种按蚊雌蚊期望寿命都足够疟原虫在蚊体内完成孢子增殖.     

DNA探针用于中华按蚊和嗜人按蚊的分类研究

本项研究首次报道了我国中华按蚊和嗜人按蚊DNA基因库的建立,并从中华按蚊DNA基因库中筛选出一特异的DNA片段,以此为DNA探针,分别与中华按蚊DNA和嗜人按蚊DNA进行斑点杂交试验,其结果证明该DNA探针可与任何发育期的中华按蚊DNA杂交而不与嗜人按蚊DNA杂交,该探针敏感性高,可检测出7.5ng的中华按蚊DNA,大约相当于1个蚊虫总DNA的1/150,可用于区别中华按蚊和嗜人按蚊。     

中华按蚊和嗜人按蚊产卵后卵泡管收缩过程观察

共解剖实验室饲养的112只中华按蚊的3476条卵泡管和121只嗜人按蚁的3671条卵泡管。两种按蚊产卵后21—24h,卵泡管收缩完成并出现膨大部,初产蚊各为71.7％和62.0％,而第三次产卵的分别为51.6％和54.0％。系列间隔解剖观察,发现卵泡管的收缩过程是先横向后纵向收缩,在产卵后9—15h,大部分卵泡管还处在横向收缩期,管内的上皮细胞残余呈数难分布,形似几个膨大部,易导致对生理龄期的判断错误。现场捕获的两种按蚊产卵后卵泡管收缩过程与实验室观察的相似。     

中华按蚊和嗜人按蚊的遗传关系和传疟能力的比较研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析中华按蚊和嗜人按蚊Ｅｓｔ，ＬＤＨ和ＰＯＤ３种同工酶谱，表明两蚊存在具有分类特征的酯酶带，但又是遗传系十分相近的近缘种。     

中华按蚊,嗜人按蚊成虫前期发育时间的观察

本文报告了中华按蚊、嗜人按蚊在实验室条件下成虫前期各阶段发育时间的相互关系。在基本相同的饲养条件下，中华按蚊孵化率为７９．４８％，嗜人按蚊为８．５２％，卵期发育时间，中华按蚊平均为２．１６天，嗜人按蚊平均为１６．２７天。中华按蚊幼虫期发育所需时间的长短受卵期发育时间的影响，而嗜人按蚊无明显无关。     

人房内中华按蚊,嗜人按蚊自然感染牛腹腔丝虫的纵向观察

中华接蚊、嗜人按蚊均可感染牛腹腔丝虫和马来丝虫。在马来丝虫病流行区进行蚊媒调查，特别是在马来丝虫病防治后期的蚊媒监测中，蚊体内人、畜丝虫幼虫的鉴别尤为重要[1]。为了排除牛腹腔丝虫幼虫对马来丝虫病防治后期蚊媒监测的干扰，1987～1992年，1995～1996年，我们选定已无微丝蚴血症者的蔡金镇两个原马来丝虫病流行村，总人口1963人为观察区、先后共8年观察人房内中华接蚊和嗜人按蚊自然感染牛腹腔丝虫的情况。材料与方法1．牛腹腔丝虫自然传染原调查：上午抽采观察区村民饲养的水牛耳背静脉血各6大滴（约120μl），涂制成1．5×3．0…     

中华按蚊和嗜人按蚊不同地理株基因组DNA的限制酶切长度差异(RFLDs)

我们制备了上海,广西和郑州三株中华按蚊,江苏和广西两株嗜人按蚊的基因组DNA,分别用BglⅡ,HaeⅢ和PstⅠ消化各基因组DNA,进行琼脂糖凝胶电泳再用溴乙锭染色后,观察比较同种按蚊各株间基因组DNA重复序列DNA的限制酶切长度差异.结果发现,各地理株间的酶切带型,既具有种的特征,即主带相同,稳定;又有株的特异性淡带。三株中华按蚊的PstⅠ,两株嗜人按蚊的BglⅡ的酶切长度差异可以将各地理株区别开来,比较观察限制酶切长度差异是分析种内各地理株变异的敏感可靠的方法.实验结果表明了中华按故三地理株,嗜人按蚊的两地理株间的重复序列DNA的结构有差异,从基因结构上证实了两种按蚊种下的分化。     

四川省嗜人按蚊、中华按蚊的栖息习性和嗜血习性调查

目的　进一步了解嗜人按蚊和中华按蚊的栖息习性和嗜血习性及变化情况。　方法　选择不同类型栖息场所进行按蚊密度调查 ,在人房、牛房分别安装外逸窗阱观察蚊虫外逸情况 ,采取全捕法将人房、牛房、猪房内捕获的吸血蚊作胃血沉淀试验。　结果　人房、牛房、猪房中的嗜人按蚊密度分别为 3 .3 5、18.2 5和 9.3 8只 /人工小时 ;人房、牛房、猪房的嗜人按蚊平均数分别为 0 .63、9.5 5、1.68只 /间。人房、牛房及猪房中的中华按蚊密度分别为 2 .72、88.86、61.2 5只/人工小时 ;人房、牛房、猪房的中华按蚊平均数分别为 0 .3 2、3 3、3 .78只 /间。胃血沉淀试验 ,人房中的嗜人按蚊吸人血率为 94.5 7% (87/92 ) ,牛房为 5 .0 4% (6/119) ,猪房为 6.15 % (4 /65 )。中华按蚊吸人血率在人房、牛房和猪房分别为11.43 % (4 /3 5 )、3 .17% (2 /63 )和 0。　结论　嗜人按蚊和中华按蚊的主要栖息场所为牛房 ,其次为猪房和人房。嗜人按蚊主要嗜吸人血 ,中华按蚊则嗜吸其它动物血。     

用RAPD技术分析中国嗜人按蚊种型

目的　鉴别中国不同地区嗜人按蚊 ,特别是海南岛与内陆嗜人按蚊间有无种型差异。　方法　海南、四川、江苏三地收集嗜人按蚊标本 ,通过对蚊基因组 DNA的提取纯化及 RAPD- PCR扩增和产物检测 ,最终筛选出 3条引物并制定出稳定的 RAPD图谱。　结果　三地嗜人按蚊绝大部分谱带完全相同 ,但又有明显不同的谱带存在。　结论　中国不同地区嗜人按蚊存在一定的种型差异 ,并为解释海南岛与内陆嗜人按蚊在生态习性和传疟作用方面的不同提供了科学依据。     

福建省嗜人按蚊残存分布区的疟疾监测

目的　考核福建省以嗜人按蚊为主要传疟媒介区的疟疾防治效果。　方法　 1988年起对该类区的疟疾与媒介实行监测 ;1998～ 2 0 0 0年按照卫生部 WHO的课题 ,选择建阳市童游镇和邵武市水北乡实施纵向监测。每年在疟疾流行季节 (7～ 10月 ) ,组织专业人员 ,捕捉原嗜人按蚊村人房 (帐内 )按蚊 ,鉴定蚊种并计算密度 ;对发热者采血镜检疟原虫。　结果　对原该蚊分布的 2 63个和 2个村的纵向观察 3年 ,均未再捕到嗜人按蚊。发热病人血检疟原虫阳性者从 1988年的 13 15例降至 2 0 0 1年的 3例。　结论　福建省抗疟措施有效 ,防治成果巩固。     

嗜人按蚊对溴氰菊酯抗性的遗传分析

目的 对实验室选育的嗜人按蚊抗溴氰菊酯品系进行抗性遗传特性分析。方法 采用LC-P线法研究嗜人按蚊对溴氰菊酯抗性的遗传方式。结果 正交和反交F_1代的抗性系数分别为15.19、16.66,接近1∶1。D-0.651,F_1代的LC-P线靠近抗性亲本一方。BC代在死亡率50%处与F_2代死亡率在25%—75%处未出现明显平坡,BC和F_2的实际死亡率和理论死亡率曲线的适合性检验差异具有显著性,P均<0.01。结论 嗜人按蚊对溴氰菊酯的抗性是由常染色体遗传所致的多基因遗传,抗性遗传表现为不完全显性。     

我国雷氏按蚊和嗜人按蚊的分子鉴别和分类地位的探讨

[目的 ]论证我国雷氏按蚊与嗜人按蚊的分类地位。 [方法 ]采用分子鉴别法 (鉴别PCR和rDNA ITS2序列 )检测辽宁及山东两省现场按蚊标本 ,并依据ITS2区序列建立分子系统树。 [结果 ]分子鉴别显示 ,辽宁和山东两省均存在雷氏按蚊和嗜人按蚊。我国雷氏按蚊 (辽宁和山东省 ,n =6 )和嗜人按蚊 (辽宁、云南、河南和四川省 ,n =10 )ITS2序列长度和GC含量分别为 45 1bp、 46 2 % ,44 8bp、 46 0 % ;各地雷氏按蚊和嗜人按蚊序列均无差异 ,但各地嗜人按蚊与对照组江苏的嗜人按蚊相比 ,种内序列差异为 0 88% ;雷氏按蚊与嗜人按蚊种间序列差异为 2 5 7%。分子系统树显示雷氏按蚊与中华按蚊、嗜人按蚊与凉山按蚊亲缘关系较近。 [结论 ]根据分子鉴别 ,确认我国雷氏按蚊与嗜人按蚊为同域分布的 2个独立种     

EFFECT OF ALPHAMETHRIN ON ESTERASE ISOZYME IN LARVAE OF ANOPHELES STEPHENSI AND ANOPHELES ANTHROPOPHAGUS

分别用０。６９７ｎｍｏｌ／Ｌ和１．３９３ｎｍｏｌ／Ｌ顺式氯氰菊酯处理斯氏按蚊和嗜人按蚊３龄幼虫，采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其４龄幼虫酯酶同工酶。与对照组相比，两种蚊幼虫酯酶同工酶均发生明显变化，表明顺式氯氰菊酯对两种蚊幼虫酯酶同工酶均有明显影响。     

奋斗呐对嗜人按蚊血淋巴蛋白和蛋白酶的影响

分别用１．３９３ｎｍｏｌ／Ｌ、０．６９７ｎｍｏｌ／Ｌ奋斗呐处理嗜人按蚊４龄幼虫，用离心法收集成蚊血淋巴，测定其蛋白含量和蛋白酶活性。与对照组相比，用药组血淋巴蛋白含量显著增加，蛋白酶活性显著降低，具有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１），表明奋斗呐对蚊虫血淋巴蛋白含量和蛋白酶活性均有明显的影响。