MTSS1蛋白在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤转移抑制因子1（MTSS1）基因的表达与结直肠癌生物学行为及预后之间的关系。方法应用免疫组织化学的方法分析MTSS1蛋白在60例结直肠癌患者组织,以及60例同一患者癌旁10cm正常黏膜组织标本中的表达情况,并应用SPSS13．0软件对实验数据进行统计学分析,MTSS1在癌旁正常黏膜和结直肠癌组织中的表达采用卡方检验四格表,MTSS1蛋白的表达与结直肠癌患者临床病理参数的数据采用RxC表的x2检验,校正使用Fisher确切概率法,以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果MTSS1在癌旁10cm正常黏膜和结直肠癌组织中的表达率分别为：100％（60／60）和28．3％（17／60）,在结直肠癌组织中的表达显著低于癌旁10em正常黏膜,其差异有显著统计学意义x2=67．013,P〈O．01）;MTSS1的表达与性别、年龄、病灶位置、癌组织大体分型和远处转移等因素均无明显关系钟=0．134、0．019、0．002、0．334、1．433、P〉0．05）;MTSS1表达下调与结直肠癌浸润深度、分化程度、淋巴结转移以及Dukes分期等因素相关（x2=9．520、13．849、7．171、8．026、P〈0．05）。结论MTSS1蛋白异常表达可能在结直肠癌的发生发展及其浸润转移中起着重要作用。     

癌性锚蛋白重复序列在结直肠癌组织的表达及临床意义

目的：探讨癌性锚蛋白重复序列（gann ankyrin repeats, Gankyrin）在结直肠癌和正常黏膜组织的表达情况及与各临床病理因素之间的关系。方法通过免疫组织化学SP法对55例结直肠癌组织、30例癌旁黏膜组织检测Gankyrin蛋白的表达,检测所得的数据采用SPSS13．0统计软件包进行分析,各组资料的比较均采用卡方检验,以P＜0．05表示差异具有统计学意义。结果 Gankyrin蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为78．2％,在癌旁黏膜组织中的阳性表达率为23．3％,其癌组织的阳性表达率明显高于癌旁黏膜组织（χ2＝24．109, P＜0．01）;Gankyrin蛋白在同一结直肠癌患者的癌组织阳性表达高于癌旁黏膜组织的阳性表达（χ2＝6．722, P＜0．05）;在伴有淋巴结转移的组织中Gankyrin蛋白的阳性表达率明显高于无淋巴结转移的癌组织（χ2＝6．139, P＜0．05）,在TNM分期中,（Ⅲ＋Ⅳ）期的癌组织Gankyrin蛋白的阳性表达率明显高于（Ⅰ＋Ⅱ）期阳性表达率（χ2＝5．130, P＜0．05）;Gankyrin蛋白在结直肠癌的阳性表达与年龄、性别、有无浆膜浸润和肿瘤的分化程度无显著关系（P＞0．05）。结论 Gankyrin蛋白在结直肠癌组织中呈阳性表达,可能与肿瘤的发生发展有密切关系,对判断预后的意义有待进一步研究。     

载脂蛋白M在结直肠癌组织中的表达及其临床病理相关性

目的探讨载脂蛋白M（apoM）在结直肠癌组织中表达水平的变化及其临床相关性。方法采用荧光定量PCR检测20例结直肠癌组织及其癌旁组织中apoM的mRNA表达：采用免疫组织化学方法检测7例正常肠黏膜、6例肠炎组织、10例肠息肉、20例结直肠癌及其癌旁组织中apoM的蛋白表达水平。结果apoMmRNA在结直肠癌组织和癌旁组织中均有表达．前者相对表达量显著低于后者（0．05±0．01比0．19±0．05,P〈0．05）。无淋巴结转移者apoMmRNA表达水平显著低于有淋巴结转移者（P〈0．01）。结直肠癌组织中apoM蛋白表达中位分值为5．50．显著低于癌旁组织（10．5,P〈0．05）、肠炎组织（9．75,P〈0．05）、肠息肉组织（11．0,P〈0．01）及正常黏膜组织（10．5,P〈0．05）。未见结肠癌组织中apoM蛋白水平与患者临床病理特征有关（P〉0．05）。结论载脂蛋白apoM在肠癌组织中的mRNA及蛋白水平较正常组织及良性病变组织显著降低。结直肠癌组织中apoMmRNA表达水平与淋巴结转移有关。     

Bmi-1及Mel-18反向调节结直肠癌的形成和发展

目的探讨Bmi-1和Mel-18在结直肠癌组织中的表达和临床意义。方法采用免疫组织化学染色法和RT—PER检测Bmi一1和Mel一18基因与蛋白在50例结直肠癌组织、20例结直肠腺瘤组织及20例正常结直肠组织中的表达。分析两者在结直肠癌组织中的表达情况和相关性,以及两者表达与临床病理因素的关系。结果Bmi-1mRNA和蛋白的表达在正常结直肠组织、结直肠腺瘤组织、结直肠癌组织均呈明显依次递增（均P〈0．05）,而Mel-18则呈反向趋势;结直肠癌组织中Bmi．1与Mel-18mRNA及蛋白表达之间均明显呈负相关（r=-0．551,P=0．000;r=-0．579,P：0．000）;Bmi-1基因表达和蛋白阳性率水平与远处转移及临床分期呈正相关（P〈0．05）。Mel-18基因表达水平与远处转移及临床分期呈负相关（P〈0．05）。结论Bmi-1高表达与Mel-18低表达可能是结直肠组织恶性转变以及结直肠癌发生浸润转移的重要生物学诊断指标。     

结直肠癌组织中胃泌素的表达与Fas／FasL和天冬半胱氨酸蛋白酶的关系

目的了解胃泌素（GAS）mRNA及其蛋白在结直肠癌组织中的表达情况，并探讨其与结直肠癌细胞凋亡指数（AT）和凋亡调控基因Fas／FasL、天冬半胱氨酸蛋白酶（easpases）的关系。方法采用巢式RT-PCR方法检测79例结直肠癌组织中GAS的mRNA表达．用TUNEL法检测细胞凋亡情况，结直肠癌组织中GAS、Fas／FasL、caspase-3、caspase-8的蛋白表达采用免疫组织化学SP法。结果结直肠癌组织中GASmRNA与其蛋白表达呈正相关（rGAS=0．99，P〈0．01）．高、中分化结直肠癌组织中GASmRNA及其蛋白的表达明显低于低分化者（χ^2，（高与低）=10．47、10．23，均P〈0．01；χ^2（中与低）=6．68、4．95，均P〈0．05）；GASmRNA及其蛋白在乳头状腺癌、管状腺癌的阳性表达率明显低于黏液印戒细胞癌及未分化癌（χ^2（乳与黏印）=4．80、6．22，χ^2（乳与未）=5．44、8．43，χ^2（管与黏印）=4．40、4．38．χ^2（管与未）=4．92、6．43，均P〈0．05）；DukesA、B期的GASmRNA及其蛋白阳性表达率明显低于C、D期（χ^2=4．84、4．45，均P〈0．05）。GAS高、中表达组的细胞AI明显低于低表达组，差异有统计学意义（q（高与低）=6．71，q（中与低）=4．60，均P〈0．01）；FasL阳性表达率在GAS低、中、高表达3组间相比。差异具统计学意义（χ^2=9．35，P〈0．011，其中FasL在GAS高、中表达组的阳性表达率明显高于低表达组（χ^2（高与低）=6．24．χ^2（中与低）=4．74，均P〈0．05）：结论GAS对结直肠癌细胞凋亡的调控可能与Fas／FasL的表达失衡及其功能和信号系统的紊乱有关。GAS的检测可作为临床结直肠癌生物学行为的评估指标之一．     

组织芯片检测结直肠癌中HGF/c-met的表达及其与肿瘤血管生成的关系

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）及其受体（c-met）在结直肠癌和非肿瘤性大肠黏膜组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法制作结直肠癌和非肿瘤性结直肠黏膜组织各80例的组织芯片,采用免疫组化技术检测HGF和c-met的表达;以CD105为标记,计数肿瘤组织中微血管密度（MVD）。结果在结直肠癌组织中,HGF高表达者48例,c-met高表达者63例,两者之间有相关性（r=0.231,P〈0.05）。HGF和c-met在结直肠癌组织中的高表达率明显高于非肿瘤性结直肠黏膜（χ^2=35.387,P〈0.05;χ^2=59.854,P〈0.05）。HGF高表达与结直肠癌有无淋巴结转移及TNM分期有关（χ^2=4.743,P〈0.05;χ^2=5.576,P〈0.05）;c-met高表达与结直肠癌分化程度和有无淋巴结转移有关（χ^2=15.767,P〈0.05;χ^2=5.765,P〈0.05）。在中分化肿瘤中,有淋巴结转移者HGF和c-met高表达明显高于无淋巴结转移者（χ^2=13.154,P〈0.05;χ^2=5.371,P〈0.05）。HGF和c-met高表达者MVD明显多于低表达者（t=2.150,P〈0.05;t=2.052,P〈0.05）。HGF高表达和c-met高表达有相关性（r=0.259,P〈0.05）。结论 HGF和c-met的高表达可能与结直肠癌组织的血管生成有关。结直肠癌中HGF和c-met的表达对判断肿瘤恶性程度有一定的价值。     

抑癌基因KLF-6和APC在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的 研究抑癌基因KLF-6和APC在结直肠癌中的表达规律及其临床意义。方法 应用RT-PCR和免疫组织化学法对32例结直肠癌组织和正常黏膜组织中KLF-6和APC基因mRNA及蛋白的表达进行检测和分析。结果 KLF-6与APC的mRNA阳性表达率在结直肠癌组织中分别为37、5％和34，3％，明显低于正常结直肠黏膜组织的96．9％和93．8％（P〈0．05）。KLF-6与APC的免疫组化染色阳性表达率在结直肠癌组织中分别为28．1％和25．0％，明显低于正常结直肠黏膜组织的81．3％和84．4％（P〈0．05）。KLF-6与APC在结直肠癌中的表达存在相关性（P〈0．05），并与肿瘤组织的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均有明显相关性（P〈0．05）。结论 抑癌基因KLF-6和APC的低表达可能与结直肠癌的发生、发展、转移及预后有关，且两者存在相关性。     

结缔组织生长因子在结直肠癌组织中的表达及其与患者预后的关系

目的探讨结直肠癌组织中结缔组织生长因子（CTGF）mRNA和蛋白的表达及其与患者临床病理因素及5年生存率的关系。方法采用实时定量PCR技术检测92例结直肠癌及其相应远端正常结肠组织中CTGFmRNA的表达情况,再从中随机选取30对组织进行免疫组织化学检测CTGF蛋白表达．并对该组患者进行生存分析。结果CTGFmRNA在结直肠癌组织中高表达,其CTGF蛋白阳性率73．3％（22／30）高于正常结肠组织的23．3％（7／30）（P〈0．01）。合并淋巴结转移和肿瘤分期为Ⅲ、Ⅳ期者。CTGFmRNA表达水平和蛋白阳性率降低（均P〈0．05）;CTGF蛋白阳性表达率低者浸润深度越深（P〈0．05）。癌组织CTGFmRNA高表达组患者的5年生存率高于低表达组（68.3％比29．3％．P〈0．01）。癌组织CTGFmRNA相对表达水平是患者生存期的独立影响因素（RR=2．960,95％CI：1．49-5．877,P〈0．01）,其预测患者预后的敏感性为64．9％,特异性为74．5％。结论CTGF的异常表达与结直肠癌恶性生物学行为有关,CTGF低表达的结直肠癌患者预后不良。     

结直肠腺瘤—腺癌组织微阵列制作及上皮钙黏附素和β—链接素的检测

目的 建立结直肠癌组织微阵列,探讨上皮钙黏附素和β－链接素的表达在结直肠癌发生、发展过程中的作用。方法 应用微阵列制作机制作结直肠正常黏膜－腺瘤－腺癌微阵列,用免疫组织化学法检测组织微阵列22例结直肠腺瘤和结直肠癌63例中上皮钙黏附素和β－链接素的表达。结果 制作了85例患的结直肠腺瘤－腺癌组织微阵列;原发各层腺癌组织及其转移灶中出现不同程度的β－链接素核阳性表达,与正常黏膜相比（远处转移灶除外）,β－链接素细胞核内表达增加,差异有显性意义（P＜0．01）;上皮钙黏附素和β－链接素膜表达在结直肠癌的发生、发展过程中呈下降趋势,肌层内癌、浆膜层内癌和淋巴结转移癌灶与正常黏膜、腺瘤及黏膜、黏膜下癌相比,β－链接素膜表达减少（P＜0．01）,差异有显性意义;正常黏膜与各癌灶,淋巴结转移灶与原发各层癌组织之间上皮钙黏附素的膜表达差异有显性意义（P＜0．05）。结论 结直肠腺瘤－腺癌组织微阵列的建立使得结直肠癌相关基因或蛋白的筛选工作快捷、简便,黏附分子上皮钙黏附素和β－链接素的表达水平及表达部位异常与结直肠癌的发生、浸润转移有密切的关系。     

趋化因子受体CXCR4在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的观察趋化因子受体CXCR4在结直肠癌组织中的表达及其临床意义,探讨基质衍生因子SDF-1（CXCL12）-CXCR4生物学轴在结直肠癌侵袭转移中的作用。方法免疫组织化学法检测53例结直肠癌组织及27例正常黏膜组织中CXCR4的表达及分布,并分析高表达CXCR4与结直肠癌患者临床病理特征的关系。反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、Western印迹方法检测27例结直肠癌肿瘤组织、正常黏膜及5例肝转移灶内CXCR4 mRNA表达及CXCR4蛋白表达水平。结果53例结直肠癌组织中CXCR4表达阳性率为73．6％,高表达率（表达超过50％细胞）为45．3％;有淋巴结转移组CXCR4高表达率（65．4％）明显高于无淋巴结转移组（25．9％）（P〈0．01）。并与肿瘤血管淋巴管浸润有关。随着临床分期的增加,肿瘤组织中CXCR4高表达率有升高趋势,但差异无统计学意义（P〉0．05）。CXCR4的表达与患者肿瘤部位、大小、浸润深度无关（P〉0．05）。27例新鲜结直肠癌组织中CXCR4mRNA及蛋白表达水平明显高于相应的正常黏膜组织（P〈0．01）;5例肝转移灶组织中CXCR4表达显著高于对应的原发灶（P〈0．01）。结论趋化因子受体CXCR4是一类参与结直肠癌病程进展的重要分子,CXCL12-CXCR4信号通路有望成为结直肠癌治疗的新靶点。     

miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的研究miR-196b和HoxB8在结直肠癌组织中的表达及与其临床病理特征的关系,并探讨在结直肠癌组织中miR-196b与靶基因HoxB8表达的关系。方法用实时荧光定量PCR技术检测30例结直肠癌组织及对应的正常黏膜组织中miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA的表达量,用Western blot法检测HoxB8蛋白的表达。结果 miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中的表达量均高于其在对应的正常黏膜组织中的表达量（P〈0.05）。miR-196b mRNA的表达与结直肠癌的淋巴结转移、肿瘤分期（Ⅰ＋Ⅱ与Ⅲ＋Ⅳ）及远处转移均有关（P〈0.05）,而与肿瘤部位、大小、大体类型、浸润深度、组织分化程度、患者的年龄及性别均无关（P〉0.05）;HoxB8mRNA的表达与结直肠癌的上述临床病理特征均无关（P〉0.05）。miR-196b mRNA与HoxB8 mRNA的表达存在负相关（r=-0.458,P〈0.05）,而与HoxB8蛋白的表达无明显相关性（r=-0.236,P〉0.05）。结论 miR-196bmRNA及HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中均呈高表达,miR-196b mRNA的高表达与结直肠癌的发生、发展及预后有关。miR-196b可能通过与靶基因HoxB8 mRNA的3′非编码区结合抑制HoxB8 mRNA的表达。     

Claudin-1和Claudin-4在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨紧密连接蛋白Claudin-1和Claudin-4在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色法．检测60例结直肠癌组织和20例正常结直肠黏膜组织中claudin-1和claudin-4的表达水平．分析其临床意义。结果Claudin-1和Claudin-4在结直肠癌组织中表达阳性率分别为76．6％（46／60）和85．0％（51／60）,显著高于正常结直肠黏膜组织的20．0％（4／20）和30．O％（6／20）,差异有统计学意义（均P〈0．01）。Claudin-1和Claudin-4蛋白表达阳性率与肿瘤分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关（均P〈0．05）。结论Claudin-1和Claudin-4在结直肠癌组织中的高表达．可能对其发生发展起促进作用。Claudin-1和Claudin-4可能成为结直肠癌判断预后的标志物．     

Twist 蛋白在结直肠癌和肝转移组织中的表达及临床意义

目的：探讨Twist蛋白在结直肠癌及肝转移组织中的表达及其临床意义。方法选取2001年1月至2012年12月伴有肝转移的结直肠癌患者成套组织标本（原发灶、肝转移灶、距肿瘤边缘10 cm以上的正常结直肠黏膜组织）54例患者。采用免疫组织化学SP法检测54例患者标本的原发灶、肝转移灶及正常结直肠黏膜组织中Twist蛋白的表达,数据分析处理采用SPSS 19．0统计软件包,计数资料采用R ＆#215;C表资料的χ2检验,生存分析采用Kaplan-Meier生存曲线法,Log-rank检验分析肿瘤浸润程度、淋巴结转移、组织学分型及Twist蛋白在原发灶及肝转移灶中表达的情况,采用Cox回归模型进行独立预后因素分析。结果 Twist蛋白在结直肠癌原发灶中的阳性表达率明显高于肝转移灶、正常结直肠黏膜组织（P＜0．001）;原发灶中Twist蛋白在不同浸润深度T2、T3、T4的阳性表达率分别为30．0％、64．9％、85．7％,其差异有统计学意义（P＝0．049）;单因素分析显示,原发灶及肝转移灶中Twist蛋白阳性表达组患者的总体生存率均显著低于阴性表达组（P＝0．034,P＝0．031）;多因素生存分析证实肿瘤浸润深度、淋巴结转移和肿瘤组织学分型为影响患者总体生存率的独立因素（P＜0．001,P＝0．002,P＝0．005）,而Twist蛋白在原发灶及肝转移灶中的表达不是总体生存率的独立因素（ P＝0．548,P＝0．742）。结论 Twist蛋白在结直肠癌肝转移患者的原发灶高表达,其可能参与结直肠癌肝转移的发生,对评价结直肠癌肝转移患者预后具有一定临床意义。     

结直肠癌组织中成纤维细胞激活蛋白的表达及临床意义

目的探讨成纤维细胞激活蛋白（FAP）在结直肠癌组织中的表达及其与各病理学指标之间的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测55例结直肠癌组织和50例正常结直肠组织中FAP的表达,观察阳性细胞在不同组织中的分布数量,结合肿瘤分期、有无淋巴结转移及不同浸润深度等病理学指标,评价FAP表达与结直肠癌病理特征的相关性。结果正常结直肠组织中几乎无FAP表达,少数癌细胞有微弱表达。FAP阳性细胞主要为结直肠癌间质组织中的肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）。TNMⅢ～Ⅳ期标本中FAP阳性细胞为（40．1±15．9）个,多于Ⅰ-Ⅱ期的（18．3±7．7）个（P〈0.01）;且阳性细胞数量与分期程度相关（r=0．544,P〈0．01）。淋巴结转移组中阳性细胞为（44．4±13．3）个,多于无淋巴结转移的（18．5±8．1）个（P〈0．01）;且阳性细胞数量与有无淋巴结转移相关（r=0．793,P〈0．01）。不同浸润深度T2、T1和T4组标本中FAP阳性细胞数分别为（25．2±8．9）、（32．4±19．3）和（29．2±16．5）个（P〉0．05）;阳性细胞数量与浸润深度无关（r=0．003,P〉0．05）。结论FAP在正常结直肠组织中无表达．而主要表达于结直肠癌组织中的CAFs中。FAP阳性细胞与结直肠癌的TNM分期及淋巴结转移相关。     

Galectin-3蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义

目的研究Galectin-3蛋白在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用快捷免疫组化MaxVi-sionTM法对50例正常结肠黏膜组织、60例结肠腺瘤性息肉组织、152例结直肠癌中Galectin-3蛋白进行检测。结果 Galec-tin-3蛋白在结直肠癌中的阳性率与正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤性息肉组织相比,其差异均有统计学意义（P〈0.05）。在结直肠癌中,Galectin-3蛋白的表达与肿瘤的临床分期、组织的分化程度及有无淋巴结转移有关,临床分期越晚、组织分化越差,Galectin-3蛋白表达越高,有淋巴结转移组的表达率高于无淋巴结转移组,其差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 Galec-tin-3蛋白在结直肠癌的发生发展中起着重要作用。     

乙酰肝素酶、CD222在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的探讨膀胱癌中乙酰肝素酶和CD222的表达水平及其与膀胱癌发生、发展、转移及预后的关系。方法应用免疫组化SP法研究95例膀胱癌标本中乙酰肝素酶和CD222的表达水平。采用x2检验、Kaplan-Meier法、Logrank检验等统计学方法分析乙酰肝素酶、CD222的表达水平与膀胱癌临床病理特征及5年生存率的关系。结果乙酰肝素酶在膀胱癌中阳性表达65例（68．42％）,其表达率与膀胱癌患者的肿瘤直径、病理分级、病理学分期、淋巴结转移等情况明显相关（P〈0．05）。CD222在膀胱癌中阳性表达58例（61．05％）,其表达率与膀胱癌患者的肿瘤病理分级、病理学分期、淋巴结转移等情况明显相关（P〈0．05）。乙酰肝素酶和CD222的表达呈正相关（P〈0．05）。生存曲线分析显示乙酰肝素酶阳性表达组患者的5年生存率明显低于阴性表达组。CD222阳性表达组患者与其阴性组相比5年生存率无明显差异（P〉0．05）。乙酰肝素酶、CD222共表达阳性组与其阴性组比较,5年生存率有统计学意义（P〈0．05）。结论乙酰肝素酶及CD222在膀胱尿路上皮癌中的表达与肿瘤的发生、发展、转移和预后相关。其中乙酰肝素酶及CD222的共表达对膀胱癌生存预后的预测更具参考价值。