灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及bax、bcl-2表达的影响

目的探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及对bax和bcl-2 mRNA表达的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组（NC）、糖尿病组（DM）和灯盏花治疗组（EB）,EB组行灯盏花素20mg·kg^-1·d^-1腹腔内注射。给药后2周和6周处死,检测肾脏细胞凋亡、肾脏bax和bcl-2 mRNA的表达。结果与NC组比较,（1）DM组及EB组肾小管凋亡细胞数明显增多,且DM组高于EB组;（2）DM组肾脏bax、bcl-2 mRNA的表达显著增强,bax／bcl-2值明显升高;EB组与DM组比较bcl-2 mRNA表达增强,bax mRNA减弱,bax／bcl-2比值降低;（3）EB组及DM组体重下降,肾指数、肾小球面积、体积升高,且EB组较DM组体重增加,肾指数、肾小球面积、体积下降。血尿素氮、肌酐比较：DM组〉EB组〉NC组。结论灯盏花素可能通过影响凋亡相关基因bcl-2和bax的表达而抑制。肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用。     

糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡与Bax和Bcl-2基因表达

目的　观察糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡、Bax和 Bcl- 2表达及二者的相关性。　方法　单侧肾切除大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病 ,采用原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡 ;流式细胞术和免疫组化检测肾皮质 Bax和 Bcl- 2表达水平 ;原位杂交检测 Bax和 Bcl- 2 m RNA表达 ,并观察尿蛋白、BU N、尿肌酐等反映肾功能的有关指标。　结果　在制模后 2、4、8、12周时 ,糖尿病组大鼠较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多 ,Bax、Bcl- 2蛋白和 m RNA的表达显著增强 (P<0 .0 5 )。随着大鼠糖尿病病程延长 ,肾功能恶化 ,肾脏凋亡细胞数逐渐增多 ,Bax表达亦逐渐增强 ,Bax/Bcl- 2比增加 ,且肾脏凋亡细胞数与 Bax及 Bax/Bcl- 2比具有相关性 (P<0 .0 5 )。　结论　肾脏凋亡细胞的不断增加可能是糖尿病肾病发生、发展的原因之一 ,Bax和 Bcl- 2可能参与肾脏细胞凋亡的调控。     

原花青素对a-淀粉样肽(25-35)诱导 PC12 细胞bax和bcl-2基因表达的影响

目的 探讨原花青素 (Procyanidins,PC) 对a-淀粉样肽(25-35)(Aa25～35) 诱导凋亡PC12细胞bax和bcl-2基因表达的影响.方法 采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变,RT-PCR 检测bax和bcl-2基因 mRNA 表达,Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达.结果 不同剂量PC预处理 PC12细胞 1 h,可剂量依赖性对抗Aa25～35引起的细胞凋亡,增加细胞存活率,减少Aa25～35引起的细胞核固缩、核碎裂,降低bax mRNA及Bax蛋白表达,增加bcl-2 mRNA及Bcl-2蛋白表达.结论 PC可剂量依赖性对抗Aa25～35诱导的 PC12细胞凋亡,其机制可能与下调凋亡基因bax和上调抗凋亡基因bcl-2表达有关.     

原花青素对β-淀粉样肽（25—35）诱导PC12细胞bax和bcl-2基因表达的影响

目的探讨原花青素（Procyanidins，PC）对β-淀粉样肽（25-35）（hi325弗）诱导凋亡PCI2细胞bax和bcl-2基因表达的影响。方法采用MTT比色法分析细胞存活率，Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变，RT—PCR检测bax和bcl-2基因mRNA表达，Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达。结果不同剂量PC预处理PC12细胞1h，可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的细胞凋亡，增加细胞存活率，减少Aβ25-35引起的细胞核固缩、核碎裂，降低baxmRNA及Bax蛋白表达，增加bcl-2mRNA及Bcl-2蛋白表达。结论PC可剂量依赖性对抗Aβ25-35诱导的PCI2细胞凋亡，其机制可能与下调凋亡基因bax和上调抗凋亡基因bcl-2表达有关。     

左归丸对大鼠胸腺细胞凋亡及Bcl-2,Bax表达的影响

目的 观察左归丸干预皮质酮致大鼠胸腺细胞凋亡及对Bcl-2、Bax表达的影响.方法 1×10-5mol/L皮质酮处理乳鼠胸腺细胞.实验分为正常对照组,模型组,左归组.Annexin V-PI双染色法结合FCM检测胸腺细胞凋亡情况;Real time PCR和Western印迹法检测Bcl-2、Bax的表达变化.结果 胸腺细胞经皮质酮处理后,胸腺细胞凋亡率显著升高(P<0.01);Bcl-2 mRNA表达显著降低;Bax表达显著升高(P<0.01),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.01).与模型组比较,左归组胸腺细胞凋亡率降低(P<0.01);Bax mRNA表达降低,Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05).结论 左归丸鼠血清能通过调节bcl-2/bax比率的异常变化,抑制胸腺细胞过度凋亡.     

淫羊藿苷对5/6肾切除大鼠Bcl-2、Bax表达的影响

目的 探讨淫羊藿苷对5/6肾切除大鼠肾脏凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA表达的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组、5/6肾切除模型组、淫羊藿苷治疗组(20和40 mg/kg)和苯那普利治疗组(n=8).连续灌胃给药12w,收集24 h尿液和血清,测定尿蛋白、血肌酐和尿素氮;新鲜肾脏组织制备单细胞悬液,流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡率;荧光定量PCR检测肾组织中Bcl-2和Bax的mRNA表达.结果 与5/6肾切除模型组相比,淫羊藿苷可显著降低24 h尿蛋白量、血肌酐和尿素氮,减少S期细胞百分比,提高G0/M期细胞百分比,降低细胞凋亡率,并抑制Bcl-2和Bax的mRNA表达.结论 淫羊藿苷对5/6肾切除大鼠肾功能具有保护作用,其机制可能与改变细胞周期分布、影响凋亡相关基因表达有关.     

二黄糖肾康对糖尿病肾病模型大鼠肾脏细胞凋亡及Bax和Bcl-2表达的影响

目的观察二黄糖肾康对糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾脏功能、细胞凋亡及Bax和Bcl-2表达的影响。方法SD大鼠单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素复制DN模型,每日灌胃二黄糖肾康,8w后检测肾功能,流式细胞术检测肾脏细胞周期、凋亡数目及Bax和Bcl-2蛋白表达。结果二黄糖肾康明显改善DN大鼠肾功能,减少肾脏皮质细胞凋亡数目,影响肾脏细胞周期,降低Bax的表达,Bcl-2的表达增加。结论二黄糖肾康能通过降低肾脏凋亡数目,调节Bax和Bcl-2在肾脏细胞凋亡中的表达而保护肾功能。     

糖尿病大鼠组织非酶糖化、细胞凋亡与糖尿病肾病的关系

目的 探讨非酶糖化、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax与糖尿病肾病(DN)的关系.方法 雄性Wistar大鼠30只,随机平均分为3组,正常对照组、DN组、糖尿病氨基胍(10mg·kg<'-1>·d<'-1>)治疗组,腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)诱发糖尿病.16 w后,处死大鼠,分离肾脏,测定组织非酶糖化,观察Bcl-2、Bax的表达,取部分肾皮质电镜细胞计量、观察细胞凋亡的形态学变化.结果 ①与正常对照组相比,DN组肾脏皮质非酶糖化明显升高(P<0.001),氨基胍治疗组非酶糖化明显较DN组降低(P<0.01),而血糖无明显变化.②DN组肾脏Bcl-2蛋白表达减少、Bax蛋白表达增加,治疗组的Bcl-2蛋白表达较DN组增多,而Bax蛋白表达较DN组减少.③透射电镜下见DN组肾脏肾小管上皮细胞呈典型的凋亡形态学改变,治疗组大鼠肾组织细胞凋亡改变明显减轻.④DN组肾小球基底膜增厚,系膜区域扩大,治疗组病变减轻.结论 ①非酶糖化通过调节Bcl-2,Bax蛋白的表达诱导细胞凋亡,而参与DN的发生与发展.②非酶糖化抑制剂可调节Bax,Bcl-2的表达抑制细胞凋亡,明显改善糖尿病大鼠肾脏结构与功能,延缓DN的发展.     

棕榈酸对大鼠胰腺腺泡细胞AR42J细胞凋亡的影响

目的探讨棕榈酸(palmitic acid,PA)对大鼠胰腺腺泡细胞AR42J的凋亡率的改变及凋亡相关基因bcl-2、bax、caspase-3mRNA表达的影响。方法 PA浓度分别为0 mmol/L(正常对照组)、0.1 mmol/L、0.5 mmol/L、1.0 mmol/L刺激AR42J细胞后,应用流式细胞术AV/PI双染法检测细胞的凋亡率,荧光定量PCR法检测凋亡相关基因bcl-2、bax、caspase-3 mRNA的表达水平。结果与正常对照组(0 mmol/L)相比,PA在0.1mmol/L低浓度时对AR42J细胞不具损伤作用,从0.5 mmol/L开始,PA对AR42J细胞的凋亡率呈浓度、时间依赖性增强,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。荧光定量PCR结果显示PA下调抗凋亡基因bcl-2 mRNA的表达,同时上调促凋亡基因bax、caspase-3 mRNA的表达。结论不同浓度PA对AR42J细胞的损伤作用不同,主要表现为凋亡与剂量、时间相关,其机制可能是抑制bcl-2 mRNA的表达及促进bax、caspase-3 mRNA的表达。     

甘草酸对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡的影响及防治糖尿病肾病的临床意义

雄性Wistar大鼠30只,随机平均分为3组,正常对照组、糖尿病组、糖尿病甘草酸（30mg／kg／d）治疗组,腹腔注射链脲佐菌素（60mg／kg）诱发糖尿病。16周后,处死大鼠,分离肾脏,观察Bcl-2、Bax的表达,取部允肾皮质电镜病理观察。结果①糖尿病组肾脏Bcl-2蛋白表达减少、Bax蛋白表达增加,甘草酸治疗组的Bcl-2蛋白表达较糖尿病组增多,而Bax蛋白表达较糖尿病组减少,电镜观察糖尿病组呈明显细胞凋亡形态学改变,甘草酸治疗组减轻。②糖尿病肾小球基底膜增厚,系膜区域扩大,甘草酸治疗组病变减轻。结论①糖尿病血糖升高可能调节Bcl-2、Bax蛋白的表达诱导细胞凋亡,而参与DN的发生与发展。②甘草酸可调查Bax、Bcl-2的表达抑制细胞凋亡,明显改善糖尿病大鼠肾脏结构与功能,延缓DN的发展。     

兔甲亢性心肌病不同左室构型心肌细胞的凋亡

目的:观察兔甲亢性心肌病不同左室构型心肌细胞的凋亡情况及相关bcl 2、bax蛋白表达的变化。方法: 将30只新西兰纯种白兔分为实验组(n=20)和对照组(n=10),实验组兔每日腹腔注射左旋甲状腺素(45 μg/kg体质量)共4周建立甲亢动物模型,对照组兔每日腹腔注射同等剂量的生理盐水共4周。4周后,对两组兔行常规超声心动图参数测定。实验组依据超声参数又分为向心性肥厚亚组(CH亚组)和离心性肥厚亚组(EH亚组)。第4周末处死所有兔,取心肌组织,在透射电镜下观察心肌细胞,应用原位末端标记法标记凋亡的心肌细胞,应用免疫组织化学染色法检测bcl 2、bax蛋白的表达。结果: ①透射电镜观察CH亚组和EH亚组均有大量的凋亡细胞,且凋亡指数(AI)显著高于对照组(均P<001),EH亚组的AI又显著高于CH亚组(P<001)。②CH亚组和EH亚组bcl 2蛋白的表达显著低于对照组(均P<001),EH亚组又显著低于CH亚组(P<001);CH亚组和EH亚组bax蛋白的表达显著高于对照组(均P<001),EH亚组又显著高于CH亚组(P<001)。CH亚组和EH亚组bcl 2/bax的比值显著低于对照组(均P<001)。结论: 兔甲亢性心肌病不同左室构型具有不同程度的心肌细胞凋亡,说明细胞凋亡机制参与了该病的病理过程,其作用与下调bcl 2蛋白的表达、上调bax蛋白的表达有关。     

小剂量阿司匹林对糖尿病大鼠肾脏保护作用研究

目的 研究小剂量阿司匹林对糖尿病大鼠肾脏的保护作用,并探讨可能的机制.方法 雄性SD大鼠,尾静脉注射链脲佐菌素30 mg/kg,造成1型糖尿病动物模型,随机分为糖尿病模型组和9mg/kg阿司匹林治疗组,每组8只,另选8只健康雄性大鼠为正常对照组.各组大鼠灌服给药12周后,检测各组大鼠空腹血糖、血尿素和肌酐,以及尿蛋白含量,HE染色法检查肾组织病理显微结构,免疫组织化学法检测分析Caspase-3、Bax和Bcl-2的表达情况.结果 与正常对照组比较,糖尿病模型组大鼠空腹血糖、血尿素和肌酐,以及尿蛋白含量均升高,肾小球萎缩明显,肾组织Caspase-3、Bax表达增强,肾组织Bcl-2的表达减弱,Bcl-2/Bax比值降低;阿司匹林治疗组大鼠上述指标均有改善.结论 小剂量阿司匹林对糖尿病大鼠肾脏有保护作用,可能与调节细胞凋亡相关蛋白表达有关.     

洛沙坦对大鼠糖尿病模型肾脏转化生长因子βⅠ型、Ⅱ型受体表达的影响

目的　观察洛沙坦对大鼠糖尿病模型肾脏转化生长因子 βⅠ型受体 (TGFβRⅠ )、Ⅱ型受体 (TGFβRⅡ )表达的影响。 方法　 30只大鼠按体重随机分为 3组 ,每组 10只。A组 :健康对照组 ;B组 :糖尿病模型组 ,尾静脉注射链脲佐菌素 5 0mg/kg体重制成糖尿病模型 ;(3)C组 :洛沙坦治疗组 ,按B组方法建立大鼠糖尿病模型后第 2天给予洛沙坦 10mg·kg体重 -1·d-1灌胃。 8周后半定量逆转录 聚合酶链反应检测 3组肾皮质TGFβRⅠ、TGFβRⅡ和纤维连接蛋白 (FN)mRNA的表达。免疫组化测 3组肾皮质TGFβRⅠ、TGFβRⅡ和FN蛋白的表达。生化法测血糖、尿素氮和肌酐水平。放射免疫法测血胰岛素和血管紧张素Ⅱ。磺基水杨酸法测 2 4h尿蛋白。结果　B组大鼠平均肾小球体积、肾重 /体重增加 ,2 4h尿蛋白、血尿素氮和肌酐水平上升 (P <0 0 5 ) ;肾皮质TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、FNmRNA和蛋白表达显著增加 (P <0 0 5 )。C组大鼠平均肾小球体积、肾重 /体重减少 ,2 4h尿蛋白、血尿素氮和肌酐水平下降 (P <0 0 5 ) ;肾皮质TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、FNmRNA和蛋白表达显著降低 (P <0 0 5 )。 结论　洛沙坦下调大鼠糖尿病模型肾脏TGFβRⅠ、TGFβRⅡ的表达 ,抑制肾脏细胞肥大 ,减少细胞外基质成分的合成。     

全反式维甲酸诱导胰腺癌细胞凋亡机制研究

目的 维甲酸类药物调节肿瘤细胞生长、分化和凋亡是其防治肿瘤的基础。本研究观察全反式维甲酸(ATRA)诱导体外胰腺癌细胞凋亡的可能机制。方法 胰腺癌细胞Patu8988与ATRA共同孵育。通过DNA断裂分析、TUNEL标记证实凋亡存在，并用流式细胞仪检测凋亡细胞比例。用RT-PCR和Western blot方法检测凋亡诱导过程中p53、bcl-2和bax基因的水平及其表达变化。结果 ATRA处理组细胞凋亡比例明显增加。TUNEL标记和DNA断裂分析发现典型凋亡特征。ATRA处理组bax和phospho-p53(Ser 46)表达上调，但bcl-2表达下调。结论 ATRA能诱导胰腺癌细胞凋亡，其分子机制可能与bcl-2/bax和p53的表达相关。     

压力超负荷下bcl—2、bax蛋白对兔左室细胞凋亡的影响

目的：探讨超负荷时兔左室心肌细胞bcl-2和bax蛋白表达对兔左室心肌细胞凋亡的影响。方法：采取末端脱核苷酸转移酶介导的dUTP－生物素平移末端标记（TUNEL）技术和链酶亲和素－生物素－过氧化物酶复合物（SABC）免疫组化方法，观察持续压力超负荷下免左室心肌凋亡的动态变化及bcl-2和bax蛋白的表达。结果：对照组出现极少量凋亡细胞，表达少量bcl-2蛋白，不表达bax蛋白。术后凋亡阳性心肌细胞数和bcl-2蛋白阳性表达心肌细胞数迅速增加，两者在心衰组最高，凋亡阳性心肌细胞数在术后第3天多于术后第7天。左室心肌细胞仅在术后第1组和心衰组表达bax蛋白。结论：在持续压力负荷所致心力衰竭的全过程，bcl-2蛋白都以与了抑制心肌细胞凋亡的调节，bax蛋白可能只以与了心肌细胞凋亡的启动。     

脑缺血再灌注后神经细胞bcl-2、bax和p53mRNA的表达

目的　研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞 bcl- 2、bax和 p53m RNA表达的变化规律。方法　利用大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型 ,原位杂交技术分别观察缺血 1 .5 h再灌注后 2 h、 6 h、 1 2 h、 1 d、 2 d、 3 d、 7d和 1 4 d不同时间点神经细胞 bcl- 2、 bax和 p53 m RNA的表达。结果　脑缺血再灌注 2 h在缺血周围区 bcl- 2 m RNA开始表达 ,1 d达高峰 ,之后逐渐减弱 ,再灌注 1 4 d接近假手术组水平 ;bax m RNA与 p53 m RNA均于缺血再灌注 6 h出现 ,bax m RNA于 1 d达高峰 ,3 d降至假手术组水平 ,p53 m RNA于 1～ 2 d达高峰 ,7d降至假手术组水平。结论　脑缺血再灌注后 bcl- 2、 bax和 p53m RNA的表达与缺血性损伤有一定关系 ,参与了神经细胞凋亡的调节     

血管紧张素ⅡⅠ型受体阻断剂抑制大鼠缺血-再灌注模型心肌细胞凋亡

目的观察血管紧张素ⅡⅠ型受体阻断剂losartan对大鼠心肌缺血-再灌注模型心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白P53和Bcl-2表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为三组(1)假手术组(5只);(2)缺血-再灌注组(6只)结扎左冠状动脉45min,再灌注4h;(3)losartan组(6只)缺血前15min和再灌注1h分别静脉注射losartan10mg/kg。采用TUNEL和DNA电泳方法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学方法检测心肌组织P     

苯那普利对糖尿病肾小球细胞外基质增生的抑制作用及机制

目的 :了解血管转换酶抑制剂苯那普利对单侧肾切除糖尿病大鼠肾脏结构和功能改变的保护作用及机制。　 方法 :应用生物化学分析 ,RT- PCR方法检测苯那普利治疗对糖尿病大鼠血尿素氮、肌肝、血脂、肾小球细胞外基质 (ECM)以及肾皮质内金属蛋白酶 - 3(MMP- 3)的m RNA表达的影响。　 结果 :糖尿病大鼠的尿素氮、肌酐及甘油三酯、胆固醇水平均较非糖尿病大鼠明显增加 ,PAS染色发现肾小球系膜区 ECM明显积聚。苯那普利治疗后肾功能指标、甘油三酯水平明显下降 ,升高的胆固醇也有下降趋势 ,ECM积聚显著被抑制 ,苯那普利治疗组大鼠肾皮质内金属蛋白酶 3m RNA表达明显增加。　 结论 :单侧肾切除加重了糖尿病大鼠的肾脏病变 ,苯那普利治疗可通过多种途径发挥显著的防治作用 ;其中对组织学改变的保护作用可能与其上调金属蛋白酶的表达 ,促进 ECM降解密切相关。