长春花内生真菌的分离及其发酵产生药用成分的初步研究△

首次报道从长春花Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ ｒｏｓｅｕｓ （Ｌ．）Ｇ．Ｄｏｎ茎的韧皮部中分离出尖孢镰刀菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏ－ｒｕｍ。为该植物的一种内生真菌,并用ＴＬＣ和ＨＰＬＣ对该菌的９７ＣＧ３菌株培养物进行了分析。初步结果表明该真菌能产生抗癌药长春新碱成分。     

1株滇重楼内生真菌的研究——抑真菌活性及分离鉴定

目的 分离滇重楼内生真菌,研究其抑制病原性真菌的作用并进行分类鉴定.方法 从滇重楼植株中分离培养内生真菌.在体外,用指示菌株金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、普通变形杆菌、痢疾杆菌、大肠埃希菌及白色念株菌进行抑菌活性筛选.对具有抑制白色念珠菌的内生真菌菌株进行培养,观察显微形态特征,确定其分类地位.结果 从滇重楼的根中分离到一株内生真蒲菌株,对白色念株菌有较强抑制作用,鉴定为尤孢菌群.结论 滇重楼内生真菌无孢菌群菌株LRF4具有抑制白色念珠菌的作用.     

桃儿七内生真菌分离及其抑菌活性初步研究

目的 探明桃儿七内生真菌资源多样性及其抑菌活性特征。方法 通过组织块法对内生真菌进行分离,并选择5种植物病原真菌和4种细菌作为指示菌,采用对峙法和改进的菌块法测定抑菌活性。结果 从桃儿七根、茎、叶中分离出49株内生真菌,根部最多,22株,其次为茎部,18株,叶部最少,9株;经形态学分类鉴定归于2个目,3个科,9个属,梭孢霉属为优势菌属;有22株菌对1种或多种供试植物病原真菌有不同程度的抑制作用,占分离菌株数的44.8%,有8株菌对2种或多种供试植物病原真菌有明显的抑制作用,其占所分离菌株总数的16.3%,有3株菌对4种或多种供试植物病原真菌有明显抑制作用,2株内生真菌分别对2种供试指示细菌具有明显的抑制作用。结论 桃儿七内生真菌具有多样性和明显的抗外源真菌活性,抑菌活性菌株主要分布在曲霉属、单孢枝霉属、梭孢霉属,其内生真菌的研究和开发具有重要的生态和经济意义。     

宁前胡内生真菌的培养分离与鉴定

目的 对安徽道地药材白花前胡内生真菌进行培养分离与鉴定。方法 通过组织块法对宁前胡进行内生真菌的分离,采用形态学和分子生物学相结合的手段进行鉴定。结果 从宁前胡中共计分离得到41株内生真菌,分属于10属21种,分别为Fusarium、Penicillium、Aspergillus、Alternaria、Tricladium、Phoma、Collariella、Rhizoctonia、Colletotrichum、Trichoderma。分布最广的类群是镰孢霉属Fusarium sp.,其分离频率为29.27%;其次是青霉属Penicillium sp.和链格孢属Alternaria sp.,其分离频率均为19.51%,为其优势种属。结论 宁前胡中含有丰富的内生真菌资源,进一步开发利用宁前胡中内生真菌资源具有重要意义。     

远志内生真菌分离与鉴定研究

目的 通过对远志内生真菌分离与鉴定揭示远志内生真菌群落结构的生态性,掌握远志内生菌资源状况和远志生长年限、定殖部位的关系.方法 以陕西省合阳县不同生长年限远志为研究材料,分离远志根、茎、叶中内生真菌,通过形态培养结合ITS序列分析,对内生菌进行鉴定,并对不同生长年限、不同定殖部位分离内生真菌进行生态指数分析.结果 从远...     

亳芍内生真菌的分离与鉴定

目的 对亳芍内生真菌进行分离鉴定,旨在丰富其内生真菌资源种类。方法 利用马铃薯葡萄糖琼脂培养基进行亳芍内生真菌的分离、尖端菌丝挑取法进行纯化,利用分子生物学方法对其进行鉴定。结果 从亳芍中分离出24株内生真菌,初步鉴定为9属13种,分别为Fusarium,Talaromyces,Dactylonectria,Myxocephala,Llyonectria,Penicillium,Alternaria,Rhexocercosporidium,Lopadostoma。主要为镰刀属（占33%）。结论 本研究首次从亳芍中分离出内生真菌,呈多样性分布,丰富了芍药内生真菌的种质资源。     

白木香内生真菌Fusarium sp.A2固体发酵产物的化学成分研究

目的 研究分离白木香内生真菌镰刀菌Fusarium sp.A2的次级代谢产物.方法 采用硅胶柱、反相硅胶柱、凝胶柱等方法进行分离纯化,并通过NMR、MS等波谱方法进行结构鉴定.结果 从固体发酵提取物中分离得到7个化合物,分别鉴定为5,4'-二羟基-7-甲氧基黄酮(1)、木犀草素-7,4'-二甲醚(2)、5-羟基-7,4'-二甲氧基黄酮(3)、5-羟基-7,3 ',4'-三甲氧基黄酮(4)、6-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮(5)、6-甲氧基-2-[2-(3'-甲氧基苯乙基)]色酮(6)、β-谷甾醇(7).结论 化合物1～6均为首次从该属真菌中分离得到,其中化合物5～6为沉香的特征性成分.     

厚朴内生真菌的分离鉴定及药理学活性的分析

目的：从要用植物厚朴的枝条的皮质部分离内生真菌,并对抗肿瘤,抑菌等药理学活性进行分析。方法：采用马铃薯葡萄糖培养基（PDA）为分离及发酵培养基,并对分离出的内生真菌进行发酵培养,提取代谢产物进行抑菌活性分析。结果：从来源不同的三种厚朴中共分离出51株内生真菌;分别来自青霉属（Penicillium）,镰刀菌属（Fusarium）,交链孢属（Alternaria）,等20个属。其中青霉属有生长优势。对各菌株发酵液的提取物进行药理学检测,发现各发酵产物均呈现出不同的抗肿瘤及抑菌活性,而其中的13株有抑菌活性。结论：发酵产物中含有大量的抑菌物质。可以并有良好的抑菌效果。可以为下一步开发提供良好的微生物资源基础。     

一株产长春新碱内生真菌的初步研究

目的 通过长春花叶内生真菌的分离，筛选产生长春新碱的菌株。方法 从长春花叶中分离内生真菌，对其发酵提取物进行TLC和HPLC分析。结果 从长春花叶中分离筛选到一株无孢菌群菌株：97CY3。它能产生长春新碱，HPLC测定其长春新碱含量约为0.205μg／L。结论 长春花内生真菌中，有的菌株可产生与宿主所产相同的抗癌物质长春新碱。     

见血封喉内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究

目的 分离和鉴定见血封喉Antiaris toxicaria根韧皮部中的内生真菌,并检测其抑菌活性。方法 以金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)和白色念珠菌Candida albicans作为指示菌,采用杯碟法对内生真菌发酵上清液进行抑菌试验。结果 从见血封喉根的韧皮部中分离出6株内生真菌,经形态鉴定分属于聚端孢霉属(Trichothecium LK. ex Fr.)、枝顶孢霉属(Acremonium LK. ex Fr.)和丝核菌属(Rhizoctonia DC. ex Fr.)。其中内生真菌J6的发酵上清液对MRSA有抑菌活性,抑菌圈直径为18 mm。结论 首次对见血封喉内生真菌进行了研究,内生真菌J6对MRSA有明显的抑菌活性,其抑菌活性成分值得进一步研究。     

杜仲内生真菌的分离鉴定及其对异甜菊醇的生物转化研究

目的:从植物杜仲的根、茎、叶中分离内生真菌并进行初步鉴定,并研究获得的杜仲内生真菌对异甜菊醇的生物转化活性。方法:采用形态学方法对分离菌株进行鉴定,并对其进行异甜菊醇生物转化活性筛选实验。结果:从健康杜仲的根、茎、叶中分离获得52株内生真菌,属于2纲,2目,4科,10属。其中有4株内生真菌对异甜菊醇具有生物转化活性,分别为交链孢霉Alternaria sp.EL3、瘤座霉Tubercularia sp.ER3、镰孢霉Fusarium sp.EL7及青霉Penicillium sp.ES2。结论:杜仲内生真菌多样性丰富,部分内生真菌对异甜菊醇具有生物转化活性,具有很好的研究和应用价值。     

山豆根内生菌发酵苦参的化学成分研究

目的 研究苦参经山豆根内生菌发酵后,其化学成分的变化,分析山豆根内生真菌对苦参化学成分变化的影响。方法 利用硅胶柱色谱、薄层层析硅胶板从发酵苦参中分离得到7 个化合物并利用波谱技术鉴定其结构。结果 从发酵的苦参中分离得到7 个化合物,分别是1H-3-醛基-吲哚（1）、β-谷甾醇（2）、苦参碱（3）、槐定碱（4）、N-苯乙基乙酰胺（5）、氧化苦参碱（6）、胡萝卜苷（7）。结论 1H-3-醛基-吲哚（1）、N-苯乙基乙酰胺（5）首次从发酵苦参中得到,可能为发酵后产生的化合物。     

千层塔内生真菌分离鉴定的初步研究

目的从治疗老年痴呆药用植物千层塔中分离内生真菌，并进行初步鉴定。方法用PDA平板培养基分离菌株，对照真菌鉴定手册，根据菌株的菌落形态、大小、颜色、生长速率、质地、生长培养基颜色变化以及菌丝体和孢子的形态特征进行鉴定。结果从千层塔的茎中分离出4株内生真菌，分别属于顶孢霉属、单轴霉属、酵母和青霉属。结论首次从千层塔中分离和鉴定出4株内生真菌。     

人参内生真菌的分离及其体外抗真菌、抗肿瘤活性

目的:分离人参内生真菌,并探讨其代谢产物粗提物的体外抗真菌、抗肿瘤活性。方法：首次对5年生园参和15年生移山参内生真菌进行了分离,以稻瘟霉（Pyricularia oryzae P-2b）为筛选模型,采用微量稀释法筛选人参内生真菌体外抗病原真菌活性,MTT法检测其体外抗肿瘤活性。结果：从人参中共计分离得到内生真菌48株,其中16株（33.3%）能完全抑制稻瘟霉活性。16株具有活性的内生真菌中11株（22.9%,11/48）抗白念珠菌（Candida albicans）、新生隐球菌（Cryptococcus neoformans）、红色毛癣菌（Trichophyton rubrum）、薰烟曲霉菌（Aspergillus fumigatus）活性较好;5株（10.4%,5/48）抗胃癌细胞（MKN45）、肠癌细胞（LOVO）、肝癌细胞（HepG2）、白血病细胞（HL-60）活性较好。其中,以园参-25（Yuan-25）抗真菌活性最佳,其抗红色毛癣菌的MIC80为4 mg/L,与阳性对照氟康唑的抗菌活性相当;园参-27（Yuan-27）抗肿瘤活性最优,其抗肿瘤细胞的IC50均与阳性对照阿霉素较接近。结论：分离得到的人参内生真菌具有潜在的抗肿瘤、抗真菌活性,值得进一步研究和开发。     

复方苦参注射液配合胸腔灌注化疗治疗肺癌胸腔积液的临床研究

目的：研究复方苦参注射液静脉滴注配合卡铂、胸腺五肽胸腔灌注化疗治疗肺癌胸腔积液的疗效。方法：选取48例肺癌恶性胸腔积液住院患者，随机分为复方苦参注射液静脉滴注配合卡铂、胸腺五肽胸腔灌注化疗组（观察组）和单纯卡铂胸腔灌注化疗组（对照组），从胸腔积液缓解情况、生活质量变化、T细胞亚群变化、血浆sCD44s的变化、毒副反应等方面进行临床疗效观察和评价。结果：观察组胸腔积液缓解疗效优于对照组（P〈0．05）；在改善肺癌胸腔积液患者生活质量（卡氏评分）方面，前者优于后者；对照组治疗后CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋明显低于观察组（P〈0．05）而观察组血浆sCD44s明显低于对照组；观察组较对照组消化道反应轻、骨髓抑制轻，两组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论：苦参注射液静脉滴注配合卡铂、胸腺五肽胸腔灌注治疗肺癌胸腔积液疗效明显，毒副反应轻。     

苦参对鸡胚细胞姐妹染色单体交换率及小鼠骨髓细胞微核率的影响

苦参实验组的鸡胚细胞姐妹染色单体交换率,随着苦参浓度的增加而增高,呈现剂量-反应关系,实验组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率明显高于对照组(p<0.01),呈现剂量-反应关系。     

复方苦参注射液联合EP方案治疗小细胞肺癌的临床研究

目的 探讨复方苦参注射液联合EP方案(VP16+顺铂)治疗小细胞肺癌的近期疗效及不良反应.方法 107例小细胞肺癌患者随机被分成两组,观察组55例采用复方苦参注射液联合EP方案,对照组52例单用EP方案治疗,连用4个周期.结果 观察组疗效优于对照组,有效率分别为69.09%和51.92%,两组比较差异有统计学意义(χ2=4.88,P<0.05);治疗后生存质量有明显改善,改善率分别为73.33%和54.00%,观察组高于对照组(χ2=8.15,P<0.05);观察组胃肠反应Ⅱ度以上发生率为23.64%,对照组为48.08%,观察组低于对照组(P<0.05);白细胞下降Ⅱ度以上观察组为25.45%,对照组为67.31%,观察组低于对照组(P<0.05).结论 复方苦参注射液联合EP方案治疗小细胞肺癌具有较好的的增效减毒作用,值得临床推广使用. Abstract： Objective To observe the efficacy and toxicity of compound radix sophorae flavescetnis injection combined with chemotherapy in the treatment of small cell lung cancer.Methods One hundred and seven patients with small cell lung cancer were randomly divided into two groups,the observation group(55cases) were given of compound radix sophorae flavescetnis injection combined with chemotherapy(EP regimen) and the control group (38 cases) were simply given chemotherapy for 4 cycles.Results The efficiency of the observation group was 69.09%,which was better than the control group(51.92%),the difference was significant (χ2=4.88,P<0.05).The improvement of quality of life was better in observation group than that in control group (χ2=8.15,P<0.05).The main side-effects of the observation group were significantly fewer than that in control group.Conclusions Compound radix sophorae flavescetnis injection combined with EP regimen can obtain a better clinical efficacy in treatment of small cell lung cancer,which greatly relieves the clinical symptoms and improves the life quality.It is worth that the approach could be clinically popularized.     

泰山黄精内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究

目的 研究泰山黄精内生真菌的分布及其多样性,并筛选具有抑菌活性的内生真菌。方法 采用平板分离法分离黄精内生真菌,采用滤纸片扩散法测试黄精内生真菌培养物抗耐药菌活性,同时采用分子生物学方法对筛选出的活性菌株进行鉴定。结果 从泰山野生黄精的根、茎、叶和果实中共分离出32株内生真菌,分属于7个属,分布最广的类群是镰刀菌属Fusarium sp.,占总菌株的31.3%,其次是不产孢真菌Sterile mycelia（28.1%）和链格孢属Alternaria sp.（21.9%）。各组织中内生真菌的分布存在一定的组织差异性,根中内生真菌的分离率最高,茎和叶中次之,果实中最少。共有来自5个属的14株内生真菌至少对1种供试菌株有抗菌活性,其中8株具有广谱抗耐药菌活性。对活性最强、抑菌谱最广的不产孢菌株HJG-10进行分子生物学鉴定,将其确定为裂褶菌Schizophyllum commune。结论 泰山黄精中蕴含着大量具有抑菌活性的内生真菌,为寻找和开发新型抑菌生物制剂开辟了一条新途径。     

苦参合剂对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠细胞免疫应答影响的研究

目的 探讨苦参合剂治疗对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠细胞免疫功能的影响.方法 成年健康雌性SD大白鼠40只,随机分为苦参合剂组和对照组,每组20只.每鼠皮下注射醋酸可的松25 mg/次,2次/周,建立卡氏肺孢子虫肺炎大鼠模型.苦参组除按上述方法外,用苦参合剂3 ml/kg灌胃,2次/d.给药6周后,检测大鼠的脾T淋巴细胞植物血凝素(PHA)刺激转化率及用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-2、INF-γ分泌水平.结果 实验组上述三项指标均高于对照组.结论 苦参合剂有增强患卡氏肺孢子虫肺炎大鼠细胞免疫的功能;可作为肾移植术后等患卡氏肺孢子虫肺炎病人治疗中的辅助用药.