106例成人急性白血病流式细胞术免疫分型分析

OBJECTIVE: To study the immunophenotyping of adult patients with acute leukemia and its association with the prognosis. METHODS: Immunophenotyping was performed in 106 adult patients with acute leukemia by three-color flow cytometry analysis using CD34/SSC gating. RESULTS: The antigens expressed in 71 patients with acute myeloid leukemia (AML) were mainly CD13, CD33, HLA-DR, CD34 and CD117. Lymphoid antigen expression was identified in 23.9% adult AML patients and CD56 antigen expression in 15.5% of the AML patients. In 29 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL), the expressed antigens were mainly HLA-DR, CD10, CD19, CD34 and CD7, and 34.5% of these patients were found to be positive for myeloid antigen expression. Complete remission (CR) rate in AML patients with lymphoid antigen expression after chemotherapy was lower than that in AML patients without lymphoid antigen expression (52.9% vs 77.8%, P<0.05), and no significant impact was noted of myeloid antigen expression in ALL on the CR of the patients (70.0% vs 94.7%, P>0.05). The CR rate in AML with CD56 antigen expression was lower than that in AML without CD56 expression (36.4% vs 78.3%, P<0.025), and the CR rate in CD34+ AML was lower than that in CD34- AML (56.0% vs 80.4%, P<0.05). CONCLUSIONS: Gating of CD45/SSC can eliminate the interference of normal cells to render more reliable immunophenotyping results. The expressions of CD56+, CD34+, lymphoid antigen in adult AML patients, who have lower CR rate, often signify poor prognosis.     

成人急性髓细胞系白血病免疫分型特点

目的：探讨成人急性髓细胞系白血病（AML）三色流式细胞术免疫分型特点及AML抗原表达规律.方法：采用CD45/侧散射（SSC）双参数散点图设门方法对156例成人AML进行三色流式细胞术免疫表型分析.结果：156例AML主要表达CD117（90.4%）、CD13（87.2%）、CD33（71.8%）、CD34（64.7%）、HLA-DR（60.9%）.34.0%的AML患者伴有淋系抗原表达,最常见为CD7（24.4%）.结论：流式细胞仪三色荧光标记法进行AML免疫分型,对白血病的准确分型诊断、发生发展和预后判断有重要的指导意义.     

218例急性白血病流式细胞术免疫表型分析

目的研究急性白血病（AL）免疫表型特征及诊断价值。方法采用流式细胞术（FCM）对218例初诊急性白血病患者进行免疫分型。结果急性髓系白血病（AML）患者均表达两种以上髓系抗原,其中部分伴有淋系抗原（CD7）表达。急性淋系白血病（ALL）患者均表达淋系抗原,部分表达一种或两种髓系抗原。14例混合型白血病同时表达两种以上淋系和髓系抗原标志。4例慢粒急淋变既表达髓系抗原又表达淋系抗原。结论 FCM免疫分型是在细胞形态学和细胞化学染色基础上对急性白血病诊断与分型的重要补充。     

102例急性白血病流式细胞仪免疫分型结果分析

为了探讨急性白血病的免疫表型特征与诊断价值,各系相关抗体的敏感性和特异性,利用流式细胞仪进行三色免疫荧光标记技术检测白血病患者,根据抗体体积分系统进行分型.结果显示,三染色标记检测急性白血病患者中,急性淋巴细胞白血病（ALL）患者除均表达淋系抗原外,同时伴髓系抗原（CD13、CD33）的表达,其中cCD79a敏感性和特异性均较高.急性髓细胞性白血病（AML）患者除表达髓系抗原外,同时伴淋系抗原（CD19、CD7）表达,其MPO、CD117中特异性较高.结论：流式细胞仪三色免疫荧光直接标记法进行白血病免疫分型能够确诊一些特殊类型的白血病,对于急性白血病的诊断治疗和预后判断均有帮助.     

流式细胞仪分析76例成人急性粒细胞白血病免疫分型特点

目的探讨流式细胞仪在急性粒细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)免疫分型中的特点和规律。方法利用流式细胞术中CD45/SSC双参数散点图设门法,对四色荧光素(FITC、PE、PC5、ECD)标记的骨髓血细胞免疫表型分析。取初发患者骨髓单细胞悬液100μl加入到测试管中,再加入特定抗体,室温避光1 h,然后经溶血处理,上机检测。每管均设置同型对照。结果在76例AML中,髓系相关抗原MPO、CD33、CD65表达最高,总阳性率分别为96.1%、94.7%和93.4%,CD13、CD15、CD16的表达率较低,总阳性率分别为50.0%、63.2%和89.5%;CD14、CD64在M4、M4EO、M5中阳性率最高;CD41、CD61在M7中的阳性率最高;CD34在M1和部分M2中强表达,但总阳性率约为46.1%。结论本研究成功分析不同亚型AML的CD45/SSC散点图异常细胞分布的特定位置,同时结合各种不同系列分化特异性抗原的表达综合分析,实现与FAB法在AML分型比较符合率高达97%。     

19例抗原异表达急性白血病免疫表型分析及预后观察

目的：分析１９例抗原异表达急性白血病的免疫表型,并观察其与预后的关系。方法：应用流式细胞术,选用单抗ＣＤ５、ＣＤ７、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ１３、ＣＤ３３对白血病细胞进行免疫分型,同时配合治疗观察预后。结果：１９例经ＦＡＢ定型的急性白血病中,６例ＡＭＬ表达淋巴系统原（Ｌｙ＾＋ＡＭＬ）,９例ＡＬＬ表达髓系抗原（Ｍｙ＾＋ＡＬＬ）,３例ＡＬＬ同时表达Ｔ、Ｂ两系抗原,１例为双系列双表型。１９例患者仅１例缓解,１例部分缓解。结论：免疫表型分析有利于对急性白血病进行分型,该类白血病缓解率低,其治疗方案有待探讨。     

成人急性白血病细胞三色流式细胞术的免疫分型

目的:探讨成人急性白血病(AL)细胞三色流式细胞术免疫分型的特点.方法:采用CD45/SSC双参数散点图设门方法、三色流式细胞术对197例急性白血病细胞进行免疫表型分析.结果:急性淋系白血病细胞均表达淋系抗原,46.7%和11.1%的成人ALL细胞表达CD13和CD33;急性髓系白血病细胞均表达髓系抗原,M3中只有1例表达CD34,HLA-DR均无表达;同时AML中有12例表达淋系抗原CD7,21例表达CD10;197例急性白血病中有11例(占5.6%)为杂舍型急性白血病(HAL),其中有6例B/M型.结论:CD45/SSC设门方法能排除骨髓中正常细胞的干扰,免疫表型的检测和研究对急性白血病的分型和明确诊断有帮助.     

106例成人急性白血病流式细胞术免疫分型分析

目的研究成人急性白血病免疫分型及与预后的关系。方法以CD45/SSC双参数散点图设门,采用流式细胞术检测106例成人急性白血病患者免疫分型情况。结果(1)71例急性髓系白血病(AML)患者主要表达CD13、CD33、HLA-DR、CD34和CD117抗原,23.9%的AML患者伴有淋系抗原表达,15.5%的AML病人伴有CD56抗原的表达。(2)29例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者主要表达HLA-DR、CD10、CD19、CD34和CD7,34.5%的ALL患者伴有髓系抗原的表达。(3)伴有淋系抗原表达的AML患者化疗完全缓解(CR)率为52.9%(9/17),显著低于未伴有淋系抗原表达的AML病人(77.8%)(P<0.05);伴有髓系抗原表达的ALL患者化疗后CR率为70.0%,而未伴有髓系抗原表达的ALL患者CR为94.7%,两者差异无显著性(P>0.05);CD56 AML患者化疗后CR率仅36.4%,显著低于CD56- AML患者(78.3%)(P<0.025);CD34 AML患者化疗后CR率为56.0%,显著低于CD34- AML患者(80.4%)(P<0.05)。结论采用CD45和SSC双标记设门可较好地排除正常骨髓细胞的影响,较准确地反映病人的免疫学分型;伴淋巴系抗原表达的AML、CD56 AML及CD34 AML化疗后CR率低,预后差。     

流式细胞术在急性白血病免疫分型中的应用探讨

目的应用多参数流式细胞术检测急性白血病细胞表面CD抗原分子的表达水平,探讨AML和ALL中CD抗原的表达规律,为临床个体化治疗累积分子机制研究材料。方法应用流式细胞术检测44例急性髓细胞白血病患者和18例急性淋巴细胞白血病患者,以CD45/SSC设门,应用13种单克隆抗体对CD45弱表达的细胞群进行免疫分型,测定多种CD分子的表达率,并通过χ~2检验比较不同的高表达CD分子的相关性。结果 44例AML患者中表达且高表达CD33(79.6%),CD38(70.5%),CD117(52.3%),cyt-MPO(50.0%);16例B-ALL患者中CD10(75.0%),CD19(81.25%)以及CD22(81.25%)阳性表达率较高;比较AML患者高表达CD抗原,结果显示CD33/CD38、CD33/cyt-MPO的抗原表达差异均有统计学意义(P0.05)。结论不同的CD分子在急性白血病细胞上表达有差异性,或将为靶向治疗和临床个体化治疗提供有用的线索。     

自配试剂在Coulter流式细胞仪检测急性白血病免疫分型中的应用

目的分析自配Coulter流式细胞仪试剂在检测急性白血病免疫分型中的应用效果。方法将自配全血溶解试剂和鞘液及清洗液的理化性质、准确度和精密度以及对检测急性白血病免疫表型抗原的应用效果与原装试剂进行比较分析。结果自配试剂与原装试剂理化性质基本一致;两种试剂分别测定同一白血病免疫分型标本20次,结果各胞膜抗原批内CV值均〈2%;检测急性白血病免疫分型胞膜和胞浆多种抗原,分别与原装试剂比较,两者差异均无统计学意义（P〉0.05）,且检测胞浆抗原cMPO和cCD79a结果均呈高度正相关（r〉0.970）。结论自配Coulter流式细胞仪试剂对白血病免疫分型的检测效果好,可代替原装试剂进行应用并推广。     

118例急性白血病五色流式细胞术免疫分型与FAB分型的结果分析

目的：探讨急性白血病五色流式细胞术免疫分型与FAB分型的关系和表达规律。方法通过CD45/SSC设门的五色流式细胞仪检测118例急性白血病患者骨髓细胞的表面抗原,并进行免疫表型分析。结果在88例AML患者中髓系相关抗原的表达率依次为CD33(93.2%)>CD13(88.6%)>CD117(86.4%),部分AML患者伴表达淋系相关抗原,主要为CD56(25.2%)、CD7(11.3%)、CD19(2.2%)、CD20(2.2%);M3中高表达CD117(83.7%)、CD13(83.7%)、CD33(83.7%),但均不表达CD34、HLA-DR,且SSC较大;M4、M5中可见CD64、CD4、CD14明显表达高于AML其他亚型(P<0.01)。19例B-ALL患者中CD19的表达率最高(100%),其次为CD34(90.1%)、HLA-DR (90.1%)、CD10(90.1%);9例T-ALL患者中CD7的表达率最高(100%),其次为CD4(77.8%)、CD5(77.8%)、CD2(66.7%)、CD3(66.7%)、CD34(55.6%)。结论通过五色流式细胞术进行白血病免疫分型是形态学分型诊断重要的补充,能够提供更客观的诊断依据,对提高急性白血病的诊断正确率、预后判断和治疗方案的选择有重要的意义。     

72例儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型分析

目的：探讨儿童急性淋巴细胞白血病（ acute lymphoblastic leukemia ,ALL）免疫表型特点。方法：应用流式细胞术（ flow cytometry ,FCM）分析72例儿童急性淋巴细胞白血病患者骨髓或外周血标本的免疫表型。结果：72例儿童ALL患者中, B－ALL（88．9％,64／72）发病率较T－ALL（11．1％,8／72）高。64例儿童B－ALL患者中普通型B－ALL（ common B－ALL）（52例,72．2％）发病率较前B－ALL （ Pre－B－ALL ）（6例,9．4％）、早B－前体－ALL（ Pro－B－ALL）（6例,9．4％）高。髓系抗原阳性率B－ALL（62．5％）较T－ALL（25％）高,但两者并无统计学差异（p＞0．05）。 CD13是ALL中最常见的髓系抗原（55．6％）,其次为CD33（13．9％）,CD15（2．8％）、CD117（1．4％）的表达率极低,说明其髓系特异性优于CD13和CD33。结论：免疫表型对ALL的诊断、分型与预后判断至关重要。     

156例儿童急性白血病免疫分型研究

目的研究儿童急性白血病免疫分型特点,了解儿童急性白血病抗原表达规律和免疫亚型分布情况。方法采用CD45／SSC双参数设门方法的三色流式细胞术检测白血病细胞膜表面及胞浆内分化抗原。结果156例儿童急性白血病免疫可分为4类：未分化型占0．7％,急性淋巴细胞白血病69-2％,急性髓细胞白血病25％,急性混合型白血病5．1％。108例儿童ALL中,B淋巴细胞白血病（B—ALL）占90．7％,T淋巴细胞白血病占9．3％,CD10、CD19、CD20在B—ALL中表达较高,阳性率分别为83．5％、98．9％、21．6％。CD13、CD33、CD117、胞浆内MPO在AML各亚型中有较高的表达率,阳性率分别为94．8％、94．8％、67．6％、86．5％,AML—M3患者CD34及HLADR呈低表达,均明显低于其他髓系白血病,差别有统计学意义（P〈0．05）。结论免疫分型技术在儿童急性白血病患者诊断中具有重要意义。是骨髓形态学诊断的有力补充。     

47例急性淋巴细胞白血病免疫表型分析

目的探讨免疫分型在急性淋巴细胞白血病（ALL）诊断及预后判断中的价值。方法采用流式细胞术对47例急性淋巴细胞白血病患者进行免疫表型检测和分析。结果 （1）47例ALL中,B-ALL36例（76.6%）,T-ALL9例（19.1%）,T/B-ALL2例（4.3%）。B-ALL中cCD79a和CD19表达率均为100.0%,明显高于CD20（83.3%）和CD10（77.8%）（P〈0.01）;9例T-ALL cCD3和CD7的表达率均为100%,明显高于CD5（77.8%）（P〈0.01）;47例ALLcMPO表达均阴性。（2）伴髓系抗原表达阳性者（My＋ALL）完全缓解（CR）率为66.7%,低于髓系抗原表达阴性者（My-ALL）（87.0%）,但无统计学意义（P〉0.05）;14例CD34＋的患者CR率为64.3%,18例CD34-的患者CR率94.4%,两者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论免疫表型分析有助于ALL的诊断和预后判断。     

急性髓系白血病四色流式细胞术免疫学分型特点分析

目的探讨急性髓系白血病(AML)的免疫表型特征与意义。方法采用流式细胞术四色免疫荧光直接标记技术与CD45/SSC设门分析技术,检测105例AML患者,根据抗体积分系统进行分型。结果 105例AML病例中免疫表型分析显示,各种抗原的阳性表达依次为CD13(97.1%)、CD33(90.5%)、MPO(79.0%);干/祖细胞分化抗原表达依次为CD117(77.1%)、HLA-DR(72.4%)、CD34(54.3%)。其中跨系表达:淋系抗原表达阳性的AML(36.4%),主要表达CD19、CD7、CD2、CD10、CD8;跨阶段表达(36.4%):以CD34+CD11b+和CD34+CD11c+共表达2种异常最多见。缺失表达(27.3%):以CD13、CD33及HLA-DR等抗原缺失表达易见。结论流式细胞术四色免疫荧光直接标记法对某些特殊类型的白血病有重要的意义,有助于指导临床诊断、治疗及判断预后。     

流式细胞术在急性白血病细胞免疫表型分析中的价值

目的研究应用流式细胞技术对急性白血病进行免疫表型分析,为临床治疗和预后提供有价值的信息。方法运用双色免疫荧光抗体标记患者骨髓或外周血单个核细胞,用流式细胞仪分析白血病细胞膜免疫表型。结果分析75例急性白血病患者中,急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者12例,占16.0%;急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者24例,占32.0%;急性髓细胞白血病(AML)患者37例,占49.3%。混合型急性HALL/B有2例,占2.6%。ALL患者除均表达淋系抗原外,同时伴有髓系统抗原的表达;AML患者除均表达髓系抗原外,少部分同时伴有淋系抗原的表达。AML细胞表面抗原表达百分率成人明显高于儿童(73%/27%)。结论流式细胞技术能准确地分析并鉴别出急性白血病各型别,是白血病诊断分型的重要手段之一。