短葶山麦冬多糖质量控制方法研究

目的 建立短葶山麦冬多糖质量控制方法.方法 采用高效凝胶渗透色谱(HP-GPC)法测定短葶山麦冬多糖相对分子质量及其分布和样品中多糖含量.色谱条件:Ultrahydrogel 250(300mm×7.8mm,5μm)凝胶色谱柱,流动相为水,流速0.5mL·min-1,柱温35℃,进样量20μL,检测器为示差检测器.结果 短葶山麦冬多糖的主峰出现在16.23~18.75min,重均分子量约为1831~1910Da,分子量分布系数1.31~1.35;在0.01~2.0mg·mL-1呈良好的线性关系(r=0.9991);短葶山麦冬多糖的含量约为80%(以葡聚糖标准品(Fluka)为对照).多糖检测限和定量限分别为0.1μg和0.2μg.结论 所建立的方法简单、快速、准确、重现性好、灵敏度较高,可作为短葶山麦冬多糖质量控制的方法.     

短葶山麦冬皂苷C药理作用研究进展

短葶山麦冬皂苷C是短葶山麦冬的主要活性成分之一,现代药理研究表明短葶山麦冬皂苷C有着广泛的药理活性如抗炎、抗肿瘤、抗血栓、心肌保护、免疫调节等。短葶山麦冬皂苷C对短葶山麦冬的进一步研究开发有着重要的学术价值。     

UPLC-MS/MS快速检测生脉饮系列中山麦冬

目的 建立生脉饮系列药品中山麦冬的超高效液相色谱-串联电喷雾三重四级杆质谱快速检查方法。方法 样品经甲醇提取,采用Inertsil ODS-3色谱柱(150 mm×4.6 mm, 2μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液(50∶50)为流动相,柱温：40℃,流速：0.4 mL·min^-1,进样量：5μL。ESI⁺模式,山麦冬皂苷B检测离子对为m/z 723.5→415.2和m/z 723.5→251.0,短葶山麦冬皂苷C检测离子对为m/z 871.5→431.3和m/z 871.5→413.3。结果 51批次样品中,有3批样品同时检出山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C,有2批次检测出山麦冬皂苷B,有7批次检测出短葶山麦冬皂苷C。结论 建立方法准确性高,重复性好、耐用性强,可用于快速准确筛查生脉饮系列中山麦冬掺伪的现象。     

比色法测定短葶山麦冬药材中总皂苷含量

目的 探讨一种较为简便的方法对短葶山麦冬药材中甾体皂苷类化合物进行含量测定，建立一种总皂苷含量测定方法。方法 采用L9(3^4)。正交试验设计法对茴香醛比色法进行试验条件的优化．以短葶山麦冬中主要甾体皂苷类化合物短葶山麦冬皂苷C为指标性成分，考察显色剂浓度、反应温度、显色剂体积、反应时间等四因素，优化显色条件。结果 优化条件后，测得结果为福建泉州产短葶山麦冬中总皂苷含量为1.48％，平均加样回收率为95．8％。结果 以文献方法-高氯酸比色法验证可靠。结论 采用此种比色方法结果较为简便、可靠，能够用于短葶山麦冬总皂苷含量测定，可作为传统方法的有效补充。     

石斛夜光丸中麦冬掺伪情况考察

摘要：目的:建立眼科经方石斛夜光丸中麦冬的混淆品山麦冬（湖北麦冬、短葶山麦冬）的检查方法,考察样品中麦冬的投料状况。方法:应用超液相色谱-串联电喷雾三重四级杆质谱（HPLC-MS-MS）技术,采用Waters CORTECS??C18色谱柱（2.1 mm×100 mm, 2.7μm）,以0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速:0.25 ml·min-1,柱温:35℃,采用电喷雾离子源（ESI±）,以多反应监测（MRM）模式进行正、负离子分别扫描。结果:山麦冬的特征成分山麦冬皂苷B与短亭山麦冬皂苷在相应线性范围内线性关系良好（r>0.999）,平均加样回收率为99.03%、97.96%,RSD均小于3.9%（n=9）,91批石斛夜光丸样品检出山麦冬22批。结论:石斛夜光丸中存在麦冬和山麦冬的混用情况。     

短葶山麦冬多糖和皂苷成分的研究进展

对近年来研究短葶山麦冬的文献进行了回顾分析,对其主要的多糖、皂苷类成分的化学结构、药理活性、提取分离和含量测定等进行了总结,发现短葶山麦冬有广泛的研究价值和应用前景。     

短葶山麦冬多糖提取纯化及组分的研究

目的建立短葶山麦冬多糖的提取纯化方法,以及对多糖组分的初步研究。方法采用水提醇沉法提取短葶山麦冬粗多糖,SephadexG-100凝胶柱(16mm×800mm)对粗多糖进行纯化,将纯化所得的麦冬多糖完全水解,分别以木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等单糖色谱纯为标准品,采用高效液相色谱法对上述全水解产物进行比对分析。结果 HPLC-ELSD定性分析发现麦冬多糖中单糖组成主要是果糖和葡萄糖,以果糖和葡萄糖的质量浓度对数与HPLC-ELSD峰面积对数的线性关系定量分析出其组分的含量。由果糖的线性回归方程和葡萄糖的线性回归方程计算出两者的摩尔浓度比。结论短葶山麦冬中多糖的糖单元基本组成是果糖和葡萄糖,并确定了其摩尔浓度比约为10∶1。     

湖北地产麦冬、湖北麦冬和短葶山麦冬的SDS-PAGE研究

目的：研究湖北地产麦冬、湖北麦冬与短葶山麦冬蛋白的十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）,为三种麦冬的分类和品质鉴别研究提供新的方法和依据。方法：用SDS—PAGE技术对湖北地产麦冬、湖北麦冬与短葶山麦冬的块根进行分析比较,用BIO一1D凝胶成像分析仪对电泳结果进行了摄影分析,测定了各品种水溶性蛋白的相对分子量,聚类分析图则显示了几种麦冬亲缘关系的远近。结果：湖北地产麦冬、湖北麦冬与短葶山麦冬的SDS—PAGE谱带、水溶性蛋白相对分子量和聚类关系均有明显的区别。结论：SDS—PAGE（十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳）研究可用于三种麦冬的分类和品质鉴别研究。     

短葶山麦冬总多糖对小鼠免疫功能的影响

目的观察短葶山麦冬总多糖对小鼠免疫功能的影响。方法短葶山麦冬多糖以0.11、0.33、1.0g·kg-1 3个剂量对小鼠连续灌胃30d,检测短葶山麦冬总多糖对小鼠碳廓清能力、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力及NK细胞活性等免疫指标。结果短葶山麦冬总多糖对胸腺指数、碳廓清能力、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、NK细胞活性均有显著作用。结论短葶山麦冬总多糖能增强小鼠非特异性免疫功能。     

短葶山麦冬多糖含量测试中单糖标准品的选择

目的：研究短葶山麦冬多糖含量测试中不同单糖标准品对测试结果的影响。方法采用硫酸－蒽酮法,分别以果糖和葡萄糖作标准品,对短葶山麦冬多糖的含量进行测试。结果采用果糖做标准品,多糖含量测量结果稳定,数据波动小;而采用葡萄糖测量结果波动大。结论选择果糖做标准品,测试短葶山麦冬多糖含量准确、稳定。     

基于安全监管的玄麦甘桔制剂中麦冬投料真实性的考察

目的 建立玄麦甘桔制剂中山麦冬的掺伪检测方法,考察样品中麦冬的投料状况。方法 应用超液相色谱-串联电喷雾三重四级杆质谱技术,采用Ultimate LP-C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.2 mL·min^-1,柱温为30℃,进样量3μL,采用电喷雾离子源(ESI⁺),多反应监测(MRM)模式。结果 山麦冬(湖北麦冬)的特征成分山麦冬皂苷的线性范围为0.0247～6.185μg·mL^-1(r=0.9985),加样回收率为92.50%,RSD为1.88%。同时,以掺伪山麦冬(湖北麦冬)10%作为依据,拟定了检出限度,结果237批次样品中有25批检出山麦冬皂苷B,均为含糖型颗粒剂,检出率为10.5%。结论 所用方法准确可靠,可作为玄麦甘桔制剂中山麦冬掺伪的检测方法。     

HPLC法同时测定麦冬药材中麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定麦冬药材中麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A含量的方法。方法:色谱柱为Waters C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(35∶65),流速为1.0mL·min-1,检测波长为208nm,柱温为室温。结果:麦冬皂苷Ra、慈溪麦冬皂苷A的进样量分别在1.88～9.40μg(r=0.9996)、1.96～9.80μg(r=0.9995)范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系;平均回收率分别为100.2%、99.7%,RSD均为1.7%(n=6)。结论:本方法简便、快速、准确,可用于麦冬药材的质量控制。     

基于液相色谱-串联质谱法的养阴清肺丸中麦冬投料情况研究

目的：建立养阴清肺丸中同时测定甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B、山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C的分析方法,判断麦冬的投料情况。方法：应用高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(HPLC-MS/MS)技术,采用Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈(3.0 mm×100 mm,2.7μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,流速0.3 mL·min^-1,柱温35℃,进样量5μL;采用电喷雾离子源(ESI),正、负离子2种模式,以多反应监测模式(MRM)进行分析。结果：4个成分在相应的范围内线性关系良好(r>0.9991),平均回收率为96.61%～98.65%。59批养阴清肺丸样品中有39批存在以山麦冬替代或者混入麦冬投料问题。结论：建立的方法简单、准确、可靠,可用于判断养阴清肺丸中麦冬的投料情况及市场监管。     

短葶山麦冬皂苷C的细胞内分布研究

制备纯化短葶山麦冬皂苷C(DT-13)单克隆抗体,选用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及人宫颈癌细胞(HeLa)为研究对象,通过MTT法筛选给药浓度,以细胞免疫荧光定位法探索DT-13在细胞内的作用分布和蓄积情况及其特点。结果显示,在对细胞无显著毒性作用的DT-13浓度下,DT-13能迅速透过细胞膜进入胞浆,逐渐进入细胞核并长时间蓄积。DT-13(5.0μmol/L)在给药30 min前主要分布于人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞的胞浆,给药12 h后主要蓄积于细胞核内且持续时间可达24 h。而对人宫颈癌细胞(HeLa),与HUVEC细胞相比,DT-13(2.5μmol/L)能更快进入并蓄积于细胞核。提示DT-13可能通过作用于细胞核而发挥其主要的生物活性。该方法能直观、可靠、便捷地观察DT-13在细胞内的定位及动态变化,为中药皂苷类活性成分的药效及作用机理研究提供新的技术方法。     

短葶山麦冬皂苷C固体脂质纳米粒的制备

目的:制备短葶山麦冬皂苷C固体脂质纳米粒(DT-13-SLN)并考察其理化性质。方法:以乳化-蒸发法制备DT-13-SLN,通过正交设计优化处方和制备工艺条件,测定其粒径、zeta电位、药物包封率和载药量,以透射电镜观察纳米粒形态,并考察DT-13-SLN的稳定性,对DT-13-SLN的冻干粉进行差示扫描量热(DSC)分析,以确定DT-13-SLN的生成。结果:纳米粒的平均粒径为128.8 nm,zeta电位为-30.0 mV,包封率为57.43%,载药量为3.48%。DSC分析表明有新的物相生成。DT-13-SLN于4℃放置1个月,粒径和包封率无明显变化。结论:本研究制备的DT-13-SLN粒径分布范围窄,稳定性良好。     

高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱快速检查消渴灵片中山麦冬

目的:建立消渴灵片中山麦冬的专属性检测方法.方法:样品经甲醇-氨水超声提取,利用高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱(RRLC-QQQ/MS)检测山麦冬.采用Thermo Accla imTM RSLC 120 C18色谱柱(2.1 mm × 100 mm,1.8μm),以乙腈(A)-20 mmol·L-1乙酸铵溶...     

HPLC-UV-ELSD测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量

目的:建立同时测定传统中药山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量的HPLC分析方法。方法:采用Phenomenex Luna C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相0.4%醋酸(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~12 min,80%A;12~13min,80%A→67%A;13~30 min,67%A→65%A;30~35 min,65%A→80%A),流速0.5 mL.min-1;UV检测:检测绿原酸,λ=326nm;ELSD检测:检测灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙,雾化室温度88℃,漂移管温度108℃,N2气流量1.0 L.min-1。结果:线性范围内3个化合物呈良好的线性关系(R2>0.9959),加样回收率在99%~101%之间(n=6),该方法精密度、稳定性和重复性良好,RSD<2%。结论:该方法能够方便、准确地测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量。     

短葶山麦冬多糖对免疫抑制小鼠的免疫功能的影响

目的研究短葶山麦冬多糖(LMP)对环磷酰胺致免疫低下小鼠的影响。方法应用环磷酰胺建立免疫低下小鼠模型,连续21天灌胃给予不同剂量(0.5、1.0、2.0g·kg-1)LMP后,测定小鼠胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、血清溶血素、细胞因子IL-2、TNF-α、IL-6含量、脾淋巴细胞增殖、NK细胞活性等免疫指标。结果 LMP能升高免疫低下小鼠胸脏指数,明显增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率,增加血清溶血素和细胞因子(IL-2、TNF-α)含量,同时能明显提高脾淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性。结论 LMP能够增强免疫抑制小鼠机体免疫功能。     

不同生长期独一味中山栀苷甲酯和8-O-乙酰山栀苷甲酯的含量研究

目的:研究分析不同生长期独一味中山栀苷甲酯和8-O-乙酰山栀苷甲酯含量。方法:采用HPLC反相色谱柱Waters Symmetry C18(5μm,4.6 mm×250 mm),梯度洗脱[0~10 min,乙腈-水(10∶90);10~30 min,乙腈-水(18∶82)],流速1.0mL.min-1,检测波长235 nm,柱温25℃。结果:不同生长期的独一味中山栀苷甲酯和8-O-乙酰山栀苷甲酯的总含量有明显差异,从6月份到9月份呈近似于正态分布的趋势,以7月中旬到8月初期间的含量为最高。结论:本方法结果准确,重现性好,易于操作,可用于不同生长期独一味中山栀苷甲酯和8-O-乙酰山栀苷甲酯的含量研究。     

HPLC法测定血塞通分散片中三七皂苷R_1及人参皂苷Rg_1、Rb_1的含量

目的建立血塞通分散片中三种皂苷含量的高效液相色谱法。方法C18柱(4.6×150mm,5μm);乙腈-水0~20min(20∶180→36∶164),20~27min(36∶164→20∶180),流速为1mL.min-1二元线性梯度洗脱,检测波长为203nm。结果R1、Rg1、Rb1三种皂苷的加样回收率分别为98.66%、99.14%、98.40%;线性范围分别为0.764~3.82μg、3.072~15.36μg、2.402~12.01μg。结论本方法简便可行,结果可靠,可用于血塞通分散片的质量控制。