基于微乳凝胶新载体的丹皮酚经皮给药系统的构建及药代动力学研究

为构建基于微乳凝胶 (microemulsion-based gels, MBGs) 新载体的丹皮酚经皮给药系统, 采用皮肤、血液双位点同步微透析结合LC/MS联用技术测定丹皮酚微乳、微乳凝胶及市售丹皮酚软膏在大鼠皮肤、血液中的药物浓度随时间的变化过程, 并对其药代动力学参数进行比较分析。方法学研究表明, 丹皮酚线性探针体内回收率 (R_{in vivo}) 为 (69.7 ± 4.8) %, 同心圆探针体内回收率为 (51.6 ± 7.2) %。大鼠腹部脱毛, 分别给予丹皮酚微乳 (1% 丹皮酚)、微乳凝胶和市售丹皮酚软膏, 以PBS (pH 7.4) 溶液作为灌流液, 灌流速度为5 μL·mL⁻¹, 每隔20 min收集1次微透析样品, 共收集12 h, 透析液采用LC/MS进行测定。皮肤药动学结果表明丹皮酚微乳、微乳凝胶与市售软膏相比, 显著提高了药物在皮肤组织中的浓度; 血液药动学结果表明微乳凝胶与市售软膏具有相近的生物利用度, 但前者的血药浓度更平稳。本研究所构建的丹皮酚微乳凝胶有望为皮肤湿疹的治疗提供一种新的制剂; 所建立的微透析/LC-MS联用技术能够在体、同步、实时监测大鼠皮肤、血液中的药物浓度, 为经皮给药药代动力学研究提供了新的方法。     

微透析在药代动力学研究中的应用

微透析是一较新的组织间隙液采样技术，近几年来在体微透析技术在药代动力学和药效学的研究中被广泛应用，本文描述了微透析采样的原理及其在药代动力学中的应用特点，并对其在人体药代动力学研究中的应用进行了介绍。     

微透析取样技术及其在药代动力学中的应用

本文综述了近年来国外有关微透析取样技术在药代动力学中的应用，介绍了微透析取样技术的原理、组成以及微透析探针的类型，重点介绍了在体微透析取样技术在动物和人药代动力学中的应用。表明微透析取样技术在药代动力学中的应用具有广阔的前景。     

基于微透析技术的苦参碱凝胶经皮给药的药动学研究

目的 建立同步测定经皮给药制剂在皮肤、血液中药动学的方法,研究苦参碱凝胶在体内的药动学行为。方法 应用经体外和体内回收率校正建立的基于微透析探针的皮肤血液双位点同步微透析系统,通过在皮肤和颈静脉植入探针,在大鼠腹部脱毛部位给予苦参碱凝胶,连续收集探针中12 h的透析液,并采用LC-MS微量检测技术测定探针透析液中的药物浓度。结果 本研究成功构建了双位点同步微透析药动学评价系统,大鼠皮肤给予苦参碱凝胶后,皮肤中的药物浓度、AUC值、半衰期均显著高于血液中药物浓度。结论 本研究建立的微透析结合LC-MS的取样及检测技术为经皮给药制剂的药动学研究提供了新的技术平台。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中乌头碱的浓度

目的:建立LC-MS/MS法检测大鼠血浆中乌头碱的浓度。方法:以维拉帕米作内标,血浆样品经MTBE液液萃取后,采用HyPURITYCyano(150mm×2.1mm,5μm)柱分离,流动相为乙腈:10mmol/L甲酸铵=(70∶30,V/V),流速为0.30mL/min。然后采用电喷雾离子源(ESI源)正离子多反应监测(MRM)扫描分析,乌头碱和维拉帕米的离子选择通道分别为:m/z646.4→586.4和455.2→164.9。结果:乌头碱的线性范围为9.3～2390pg/mL,最低检测浓度为9.3pg/mL,日内和日间变异均<15%。结论:本方法灵敏度高,适用于乌头碱在鼠内的药物代谢动力学研究。     

微透析技术在药物代谢和药代动力学研究中的应用

本文介绍了近年来有关微透析技术在药物代谢和药动学研究领域中应用的现状入已取得重大进展。微透析技术除应用于动物模型中的研究外,在人体中的研究特别是临床应用方面亦在发展中,该项技术在药物代谢和药代动力学研究领域中有广阔应用前景,但微透析探针校正和对微透析取样获得的少量样品的分析方法是仍需要深入研究的问题。     

辣椒碱经皮给药的研究进展

目的：为辣椒碱透皮制剂的开发和研究提供理论参考。方法：根据文献资料,综述国内、外学者关于辣椒碱透皮给药特性、影响因素及改善其透皮性能方法等方面的研究状况。结果：辣椒碱具有一定的透皮性能,但其单纯透皮不能完全达到疾病的治疗量,有必要采用一些传统方法来改善其经皮通透性;对辣椒碱透皮吸收的影响因素的实验研究,主要集中在对其药物性质及透皮制剂等方面。结论：选择将辣椒碱制备成透皮制剂,在改善其用药刺激性及发挥治疗作用方面具有广阔的前景。     

经皮给药的药代动力学研究进展

经皮给药系统是当今药物传输系统研究的热点。随着该类制剂的广泛应用，其药代动力学的研究也日益深入，取得了一定的进展。本文对经皮给药药代动力学的机制、数据处理模型及其方法学等方面进行了比较详细的介绍。     

微透析法研究罗通定经皮给药在大鼠体内不同部位的浓度分布

目的研究罗通定经皮给药后,药物在大鼠脑、皮下、血管3个部位微透析液和尾静脉血浆的浓度变化。方法采用微透析技术取样,HPLC测定不同时间点大鼠脑、皮下、血管的微透析液的药物浓度以及尾静脉血浆的药物浓度,DAS2．0药动学软件计算药动学参数。结果罗通定20cm^2经皮给药后,在大鼠体内消除缓慢,脑、皮下、血管和血浆AUC0→10h分别为（387．19±162．81）、（245．97±74．60）、（211．41±65．19）和（1677．05±598．83）min·mg·L^-1。体内药物含量血浆中最高,脑微透析次之,血管微透析最低,经皮给药后的AUC脑／AUC血浆、AUC皮下／AUC血浆、AUC血管／AUC血浆分别为（23．45±6．51）％、（15．66±5．03）％和（13．87±5．84）％。结论微透析法能很好地应用于罗通定经皮给药后大鼠不同部位的浓度研究,反映脑、皮下和血管之间的关系。     

犬组织匀浆中乌头碱的高效液相色谱-质谱测定法及体外稳定性研究（英文）

目的建立了犬组织匀浆中有毒生物碱乌头碱的高效液相色谱-质谱测定法,并应用该方法考察了乌头碱在犬主要组织匀浆中的代谢稳定性。方法色谱柱为C18柱,流动相为含有5 mmol/L甲酸铵和0.2%甲酸的乙腈和水,梯度洗脱。三重四级杆串联质谱配备电喷雾电离源（ESI）,正离子模式下以选择离子监测进行检测。乌头碱分别与犬的肝、小肠、胃和肾的组织匀浆温孵,温孵后不同时间点取出,加入内标西酞普兰,乙腈沉淀后取上清液直接进样测定。结果乌头碱浓度在5～500 ng/ml峰面积和内标的比值与浓度呈良好的线性关系;方法的回收率为85.73%～92.12%,其日内、日间的RSD值分别为5.32%～8.95%和5.45%～8.86%。体外孵育2 h后,在犬肝、小肠匀浆中有约20%的乌头碱进行了代谢转化,其t1/2分别为460.6和521.3 min。但在胃和肾中几乎无变化。结论研究提示犬体内的乌头碱主要在小肠、肝脏中代谢转化,但其代谢和清除较慢。     

基于内标微透析技术同步分析尼古丁透皮贴剂在血液与皮肤的药动学

目的：利用内标微透析采样技术,同步研究尼古丁透皮贴剂的血液和皮肤局部药动学特征,获得其较全面的体内药动学规律。方法：以健康SD大鼠为实验动物,将尼古丁透皮贴剂经皮给药,磷酸可待因作为微透析采样的内标物,采集不同时间点血液和皮肤微透析样品,用高效液相色谱法（HPLC）进行测定,利用DAS 2.1药动学软件计算相关药动学参数。结果：尼古丁在血液和皮肤的平均滞留时间（MRT_0-∞）分别为（16 986.00±486.00）min和（1 597.00±851.00）min,药时曲线下面积（AUC_0-∞）分别为（19 235.42±1 801.92）mg·mL^-1·min和（56 328.82±24 900.42）mg·mL^-1·min,达峰浓度（C_max）分别为（2.00±0.50）mg·L^-1和（32.00±5.00）mg·L^-1,达峰时间（t_max）分别为（325±200）min和（570±106）min。尼古丁在血液与皮肤的药动学参数相比,AUC_0-∞、C_max、t_max在皮肤中较大,MRT_0-∞在血液中较大。结论：尼古丁透皮贴剂经皮给药后,在血液与皮肤的药动学规律存在明显的差异与联系,药动学参数证明尼古丁通过透皮渗透在皮肤中以相对较高的浓度蓄积,能达到快速、有效的吸收,进入血液后血药浓度相对较低且维持稳定,发挥显著长效作用。     

用在体皮肤微透析法研究黄芩苷凝胶经大鼠皮肤吸收的局部药动学

目的建立大鼠在体皮肤微透析技术,研究黄芩苷凝胶经皮吸收局部药动学。方法采用HPLC-MS/MS联用技术测定大鼠皮肤微透析液中黄芩苷的浓度。SD大鼠在麻醉状态下做皮肤微透析预处理,然后将黄芩苷凝胶涂于探针所在皮肤表面,收集皮肤微透析液样品进行黄芩苷浓度测定,绘制黄芩苷浓度-时间曲线,计算经皮吸收局部药动学参数。结果用于定量分析的离子对为m/z 447.3→271.2,黄芩苷在检测浓度范围内线性关系良好,色谱的专属性、精密度等测定结果均符合生物样品测定要求。体内皮下探针对黄芩苷的回收率为（24.40±0.91）%,240 min内各取样点回收率保持稳定;黄芩苷经皮给药后8 h内微透析液中均可检测到黄芩苷的存在,且药物在皮肤组织内浓度持续升高,AUC0-t为（50.04±34.17）（mg·min）/L。结论在体皮肤微透析法可用于黄芩苷经皮吸收局部药动学研究。     

Biological activities and pharmacokinetics of aconitine,benzoylaconine, and aconine after oral administration in rats

Aconitine (AC), benzoylaconine (BAC), and aconine (ACN) are three representative alkaloids in Aconitum tubers. Knowing that the drug disposal process in vivo is closely related to the toxicity and efficacy of a drug, it is important to classify the disposal properties of these alkaloids. In this study, the pharmacokinetics of the three alkaloids was investigated. The results showed that the three alkaloids could be quickly absorbed, especially BAC, whose T_max was 0.31 ± 0.17 h. Their C_max was 10.99, 3.99, and 4.29 ng·mL^‐1 respectively, indicating that AC had better absorption than BAC and ACN. Subsequently, we further investigated their absorption mechanism using the Caco‐2 cell monolayer model in vitro. The results showed that they were poorly absorbed, and the absorption of AC and BAC was inhibited by P‐gp, while the absorption of ACN was in a form of passive diffusion. The t_1/2 of AC, BAC and ACN was 1.41, 9.49, and 3.32 h, respectively, indicating that the metabolic or excretion rate of AC was quicker than that of BAC and ACN. Therefore, their metabolic stability was further investigated by using rat liver microsomes in vitro, which showed that AC was easier to be metabolized than BAC and ACN. The excretion experiments showed that AC and ACN were primarily excreted in urine, while BAC was excreted in faeces. In addition, the results of tissue distribution experiments showed that the three alkaloids distributed throughout all the organs, although the distribution rate of AC was slower than that of BAC and ACN. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中瑞格列奈和二甲双胍及其在人体药动学中的应用

目的:建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定人血浆中瑞格列奈和二甲双胍浓度的方法,并进行人体药动学研究。方法:以乙腈沉淀蛋白处理血浆样品,替米沙坦做内标,采用Kromasil 60-5CN色谱柱(2.1 mm×100 mm, 5 μm),流动相为20 mmol·L^-1醋酸铵水溶液(含0.2%甲酸)-乙腈(45:55);质谱采用电喷雾离子化-多反应离子监测(ESI-MRM)。并测定12名健康志愿者单剂量口服瑞格列奈盐酸二甲双胍复方片(2 mg:500 mg)后瑞格列奈和二甲双胍的血浆浓度。结果:瑞格列奈和二甲双胍分别在0.05~50 μg·L^-1、2~2 000 μg·L^-1范围内线性良好,定量下限分别为0.05 μg·L^-1和2 μg·L^-1,日内日间精密度均小于8%,提取回收率分别为77.32%~80.65%和78.98%~82.46%。瑞格列奈和二甲双胍的主要药动学参数C_max分别为(29.50±9.57),(1 167±197.77)μg·L^-1;t_max分别为(0.83±0.39),(1.88±0.64)h;t_1/2分别为(1.11±0.38),(4.31±0.86)h;AUC_0→∞分别为(56.90±20.31),(7 407.32±1 653.25)μg·L^-1·h^-1。结论:建立的分析方法灵敏、准确可靠,样品处理快速、简便,适用于瑞格列奈/盐酸二甲双胍复方片人体药动学和生物等效性研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定健康女性使用塞克硝唑栓后体内塞克硝唑的浓度及其药动学研究

目的：建立快速灵敏高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定健康女性使用塞克硝唑栓后体内塞克硝唑栓的浓度,并研究其在体内的药代动力学特征。方法：色谱柱Welch Ultimate C₁₈（2.1 mm×50 mm,5 μm）;流动相：乙腈-0.1%乙酸+5 mmol·L^-1乙酸铵水溶液（12：88,V/V）;流速：0.5 mL·min^-1,进样量5 μL。采用ESI+源,多重反应监测（MRM）模式,对离子反应m/z 186.3→128.3（塞克硝唑）和m/z 192.4→128.3（Secnidazole-d₆）进行监测。20名健康女性受试者,单次与多次给药试验各10名,分别给予塞克硝唑栓。根据检测的血浆中塞克硝唑浓度,用DAS 3.2.7进行数据处理以及SPSS 19.0对结果进行统计分析。结果：塞克硝唑在0.05~8.0 mg·L^-1范围内线性良好（r>0.99）,定量下限0.05 mg·L^-1,批间、批内RSD皆小于15%。健康女性血浆中塞克硝唑栓单剂量C_max （3.00±0.96）mg·L^-1,t_max（8.90±2.68）h,t_1/2（18.07±2.96）h,AUC_0-96（97.78±35.81）mg·L^-1·h^-1,AUC_0-∞（101.11±36.96）mg·L^-1·h^-1;多剂量C_max,ss（6.01±2.01）mg·L^-1,t_max（7.20±2.86）h,t_1/2（21.87±7.60）h,AUC_ss（107.15±33.62）mg·L^-1·h^-1,AUC_0-96 （202.11±82.07）mg·L^-1·h^-1,AUC_0-∞（217.47±103.50）mg·L^-1·h^-1。结论：该方法灵敏、准确、可靠,专属性强,适用于塞克硝唑栓在人体内的药代动力学研究。     

液-质联用法同时测定大鼠血浆中的乌头碱、新乌头碱、次乌头碱及其药动学

目的:建立HPLC-MS分析方法同时测定大鼠血浆中的乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量,并用于研究大鼠口服附子煎液后乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的药动学。方法:血浆经氨水碱化后用醋酸乙酯进行液-液萃取。色谱柱为Alltima C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-10mmol.L-1醋酸铵水溶液(75∶25)。质谱检测方式为选择性离子监测,选择监测的离子为m/z646.45(乌头碱),m/z632.38(新乌头碱),m/z615.64(次乌头碱)和m/z336.60(盐酸小檗碱,内标)。结果:血浆中乌头碱在0.05~5μg.L-1、新乌头碱在0.5~50μg.L-1、次乌头碱在2.5~250μg.L-1范围内线性关系良好,定量限为0.05μg.L-1,血浆中的平均提取回收率高于90%,批内和批间精密度均小于15%。结论:本法灵敏、可靠、简便,适用于乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的药动学研究。     

HPLC-MS／MS法研究盐酸右美托咪定注射液的人体药物代谢动力学

目的:研究盐酸右美托咪定注射液在健康成年志愿者体内的药代动力学。方法:采用单次给药的开放、平行实验设计。将受试者随机分入3个剂量组,每组包含5名男性和5名女性,分别静脉注射盐酸右美托咪定0.5,1.0,1.5μg·kg~(-1),采用HPLC—MS/MS 法测定给药后不同时间的血药浓度,用 DAS Ver 2.0和 SPSS 进行药动学参数计算和统计分析。结果:健康受试者在10 min 内静脉注射不同剂量盐酸右美托咪定0.5,1.0,1.5μg·kg~(-1)后,盐酸右美托咪定的主要药代动力学参数 C_(max)(ng·L~(-1))分别为105.2±28.3,148.7±35.9,287.1±62.3;t_(1/2α)(min)分别为:3.2±0.7,5.5±3.2,4.0±0.6;t_(1/2β)(min)分别为:92.4±19.0,106.9±20.9,99.8±9.7。结果表明在上述剂量范同内 AUC_(0-360)、AUC_(0-∞)与给药剂量呈线性关系;t_(1/2β)、CL 和MRT 在上述不同剂量组间无显著性差异(P>0.05);t_(1/2α)和 V_d 在上述不同剂量组间差异有显著性(P<0.05),但与给药剂量无关。结论:在0.5～1.5μg·kg~(-1)的剂量范围内,盐酸右美托咪定注射液在健康成年志愿者体内呈线性动力学特征。