HPLC-ECD法测定小鼠脑组织内去甲肾上腺素的含量

目的:建立小鼠脑内去甲肾上腺素含量的高效液相色谱-电化学（HPLC-ECD）测定方法。方法:小鼠脑组织采用70%高氯酸沉淀蛋白后,以HPLC-ECD法进行分析。使用汉邦lichrospher C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为醋酸钾缓冲液-甲醇（95:5,pH 4.5）,流速为1.0 ml·min^-1,温度为25℃;电化学检测器电压为0.6 V,电流为100 nA,频率为0.05 Hz。结果:去甲肾上腺素在0.1～25μmol·L^-1范围内线性关系良好,日内、日间RSD分别小于7.81%和3.61%,回收率为75.05%,测得小鼠脑内去甲肾上腺素含量为（8.94±0.71）μg·g^-1。结论:该方法快速、准确,适用于小鼠脑内去甲肾上腺素的测定     

HPLC-ECD法测定大鼠脑组织中单胺类神经递质的含量

目的:建立测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质含量的方法。方法:采用高效液相色谱-电化学法,以2,5-二羟基苯甲酸为内标,测定大鼠大脑皮层、小脑、海马组织、下丘脑、嗅球中以去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)为代表的单胺类神经递质的含量。色谱柱为DIKMAC18,流动相为缓冲盐溶液(醋酸钠、庚烷磺酸钠、乙二胺四乙酸二钠和柠檬酸)-甲醇(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,工作电压为+0.7 V。结果:NE、5-HT的检测质量浓度线性范围分别为0.084⁴.2μg/ml(r=0.999 9)和0.0054.2μg/ml(r=0.999 9)和0.005⁰.25μg/ml(r=0.999 1),平均加样回收率分别为98.85%(RSD=2.89%,n=3)和101.5%(RSD=2.41%,n=3),日内(n=5)和日间(n=3)RSD均不大于3%;NE在小脑中的含量最低[(0.343±0.14)mg/g],在下丘脑中含量最高[(3.062±1.51)mg/g];5-HT在小脑中的含量最低[(0.059±0.04)mg/g],在大脑皮层中含量最高[(0.383±0.21)mg/g]。结论:本方法灵敏、简便、快速,可用于大鼠脑组织中NE、5-HT含量的测定。     

HPLC法测定人血浆中替硝唑的浓度

目的建立测定人血浆中替硝唑浓度的HPLC法。方法采用Diamomil C_(18)(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-水(20:80,V/V);流速1.0 mL·min~(-1);检测波长310 nm;内标为甲硝唑。结果替硝唑血药浓度在0.5～50mg·L~(-1)内线性关系良好(r=0.9990);替硝唑低、中、高3种浓度的方法回收率为94.89%～99.53%,提取回收率为89.55%～95.60%,日内RSD<2%(n=5),日间RSD<5%(n=5)。结论本方法操作简便,准确可靠,可用于替硝唑临床血药浓度监测和药动学研究。     

HPLC法测定人血浆中甲氨蝶呤的浓度

目的:建立一种快速、灵敏及检测范围大的高效液相色谱测定人血浆中甲氨蝶呤（MTX）浓度的方法。方法:以氨蝶呤（aminopterin）为内标,采用HP1100型高效液相色谱仪,以HP Hypersil ODS column（12 mm×4mm,5μm）为分析柱,前加HPLichrosphere　C18保护柱;流动相为乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（10:90）,流速为0.8mL·min-1进样量20μL;检测波长为313nm;室温25℃。血浆样品经甲醇沉淀蛋白、氯仿除脂后进样。结果:色谱峰分离良好,无干扰。测定数据分2段进行回归,线性方程为:低浓度时,Y=939.5X-0.04049,r=0.999 9（10～200ng·mL-1）;高浓度时,Y=543.3X 40.77,r=1.000（200～10 000 ng·mL-1）。检测范围:10～10 000 ng·mL-1。结论:本法是一种可靠的。快速灵敏的检测方法,适用于包含MTX的化疗方案的监测及药动学的研究。     

HPLC法测定人血浆中头孢布烯浓度

目的：测定血浆中头孢布烯的浓度。方法：采用Hypersil-ODS柱,流动相为乙腈：乙酸铵（pH4.98,0.05mol/L)=2：98（V/V）,流速为1.00ml/min。结果：标准曲线范围0.3125-20.00μg/ml(r=0.9999),回收率试验大于95%,日内和日间变异（RSD%）小于4%。结论：本法专属性好,操作简便,可用于临床血药浓度的监测。     

HPLC法测定人血浆中氨苄青霉素浓度

目的：测定血浆中氨苄青霉素的浓度。方法：采用ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＯＤＳ柱，流动相为ＰＢ（００５ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ＝４０）∶乙腈（７８∶２２Ｖ／Ｖ），流速为１ｍｌ／ｍｉｎ。结果：标准曲线范围０２２～１３８９μｇ／ｍｌ，ｒ＝０９９９７，保留时间为７３ｍｉｎ，回收率试验大于９５％，日内和日间变异（ＲＳＤ％）小于７％，最小检测浓度为０２２μｇ／ｍｌ。结论：本法无内源性杂质干扰，可用于一般血药浓度的监测     

RP-HPLC法测定人血浆中盐酸氨溴索的浓度

目的建立RP-HPLC测定人血浆中盐酸氨溴索含量的方法。方法选用Hypersil-BDS C18柱(5.0mm×150mm,粒径5μm),流动相:乙腈-pH值7.5磷酸钠缓冲液(65∶35),流速:0.9mL/min,检测波长:248nm,柱温:25℃。结果该方法低、中、高3种浓度的提取回收率为85.2%～97.7%,日内、日间相对标准差为0.77%～12.2%(n=6),在20～640ng/mL范围内线性关系良好。结论本法简便、灵敏、专属性强,能满足含量测定及体内药代动力学研究的需要。     

HPLC法测定人血浆中麦考酚酸的浓度

目的建立人血浆中麦考酚酸酯活性代谢物麦考酚酸的HPLC测定法。方法色谱柱为HYPERSIL C18(150 mm×5.0mm,5μm),预柱为岛津ODS(5.0 mm×3.9 mm,10μm)。流动相为甲醇-磷酸二氢钠缓冲液(pH=3.25)-乙腈(40∶40∶20,V/V),流速0.8 mL.min-1,检测波长254 nm,柱温25℃。结果麦考酚酸的血浆样品为0.23~46.13 mg.L-1时线性良好(r=0.999 7)。方法回收率96%~106%,日内RSD<6%,日间RSD<7%。结论本方法简单、灵敏、重现性好,适用于临床血药浓度监测,以及人体药动学的研究。     

HPLC法测定大鼠血浆中马钱子碱的浓度

目的：建立HPLC测定大鼠血浆中马钱子碱浓度的方法。方法：以士的宁为内标，血浆用液-液2次萃取进行处理。采用Phenomenex C18（250mm&#215;4．6mm，5μm）和汉邦c18预柱；流动相：乙腈-0．01mol&#183;L-1庚烷磺酸钠与0．02mol&#183;L-1。磷酸二氢钾等量混合（用10％磷酸调pH2．8）（24：76）；检测波长：264nm；流速：1．0mL&#183;min-1；柱温：30℃。大鼠静脉注射马钱子碱溶液10mg&#183;kg-1。应用3P97药动学软件程序对数据进行计算机处理。结果：血浆内源性杂质对样品测定无干扰。马钱子碱定量限为50ng&#183;mL-1，在50—5000ng&#183;mL-1范围内线性关系良好（r=0．9978）。血浆中的马钱子碱的绝对回收率为86．3％～97．6％，方法回收率为97．7％-107．0％，日内RSD≤6．3％，日间RSD≤7．0％。样品多次冻融后稳定性良好。主要药动学参数A=2589ng&#183;mL-1，α=0．06min-1，B=926ng&#183;mL-1，β=0．008min-1，Vc=2907mL&#183;KG-1，t1／2α=16min，t1／2β=80min，K21=0．022min-1，K10=0．020min-1，K12=0．022min-1，AUC：187min&#183;μg&#183;mL-1，CL=57mL&#183;kg-1&#183;min-1。结论：该法快速、灵敏、准确，可用于马钱子碱在大鼠体内的药代动力学研究。     

HPLC法测定皮下植入的VP-16血药浓度

目的血浆中的VP-16以氯仿萃取,HPLC法测定.方法使用国产仪器及C18柱,甲醇-水(52:48)为流动相,检测波长228nm,外标法定量.结果检出限低达0.02mg@L-1,绝对回收率80.4%,相对回收率94.7%,日内日间精密度RSD均约8%,与血中内源性干扰物达到良好分离.结论方法灵敏度高,准确性和重复性好,为临床应用提供了可靠的检测方法.     

HPLC-ECD测定重酒石酸去甲肾上腺素的有关物质

目的:建立重酒石酸去甲肾上腺素有关物质的高效液相色谱-电化学检测方法(HPLC-ECD)。方法:采用TSK C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);以0.05%庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调节pH至2.2)-乙腈(925∶75)为流动相,玻碳圆盘电极为工作电极,银-氯化银电极为参比电极,工作电位为+0.6 V。结果:去甲肾上腺素、肾上腺素、去甲肾上腺酮、多巴胺和2-氯-1-(3,4-二羟基苯基)乙酮均在0.05～5μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9998,0.9999,1.0000,0.9999,0.9994(n=7);检测限分别为0.07,0.07,0.08,0.1和0.2 ng(S/N≥3)。4种有关物质的平均加样回收率为97.2%,100.4%,98.2%,103.1%;RSD为1.6%,1.5%,1.3%,2.8%(n=6)。结论:采用高效液相色谱-电化学检测法测定重酒石酸去甲肾上腺素有关物质,方法灵敏度高,选择性强,重现性好,能够用于重酒石酸去甲肾上腺素的质量控制。     

RT-HPLC法同时测定血清中利福平和利福喷丁的血药浓度

目的:建立HPLC法同时测定血清中利福平和利福喷丁的血药浓度。方法:以对硝基酚为内标,采用Shim-pack VP-ODS(150 mm×4.6 mm)为分析柱,以甲醇-水(70∶30)为流动相,流速为1 ml/min,检测波长为336 nm。结果:利福平和利福喷丁的线性范围分别为0.25～32.0 mg/L(r=0.999 5)和0.25～32.0 mg/L(r=0.999 6),平均回收率分别为100.4%和99.8%。日内及日间RSD均小于5%。结论:方法、简便准确,适用于对利福平和利福喷丁同时进行治疗药物监测的需要,测定时可以有效地降低成本、提高效率。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中马来酸氟伏沙明浓度

目的:建立高效液相色谱法测定人血浆中马来酸氟伏沙明浓度。方法:以安定为内标,待测血浆样品经乙醚萃取后,用高效液相色谱法紫外进行检测。色谱柱为 Discovery~(?)RP Amide C_(16)(5μm,150 mm×4.6 mm),柱温35 ℃;流动相为乙腈-0.05 mol·L~(-1)醋酸铵(40:60),流速1.2 mL·min~(-1);检测波长250 nm。结果:血浆中马来酸氟伏沙明浓度线性范围为1.56～99.6 ng·mL~(-1),最低定量浓度1.56 ng·mL~(-1);回收率为95.7%～106.1%。结论:本法分离效果良好,灵敏度高,回收率高,能满足于人体血药浓度测定及药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中芬太尼浓度

目的:建立高效液相色谱测定人血浆中芬太尼浓度的方法.方法:采用外标法,以Kromasil-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为固定相,舍0.02 mol·L-1磷酸二氢钠水溶液-乙腈(65:35)为流动相,流速1 mL·min-1,检测波长为220 nm.结果:血浆芬太尼浓度在6～300μg·L-1范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 6),最低检测浓度为5 μg·L-1,方法回收率为(92.6±1.5)%,提取回收率为(84.9±1.4)%,日内RSD为1.8%,日间RSD为2.6%.结论:本方法具有较高的准确度,线性范围宽,方法灵敏,专一性好,操作简便,适用于临床芬太尼血药浓度的测定及临床药动学研究的要求.     

反相高效液相色谱法检测齐多夫啶的血药浓度

目的　建立齐多夫啶血药浓度的反相高效液相色谱检测方法。方法　以shim pack ,VP ODS 5 μm 4 6× 15 0mm为分离柱 ,流动相∶四氢呋喃∶水∶三氟酸 (10∶89 8∶0 2 ) ,流速 1 0ml·min-1;检测波长 2 67nm。结果　齐多夫啶浓度在 0 0 2～ 2 0mg·L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系 ,日内及日间差均小于 5 % ,平均回收率为 96 4% ,血浆中最低检测极限为 10 μg·L-1。结论　本方法具有快速、灵敏、稳定的特点 ,能满足血药浓度检测的需要     

HPLC法检测万古霉素血药浓度

目的利用单因素实验法建立和优化临床万古霉素HPLC分析方法,为临床监测万古霉素血药浓度、调整万古霉素临床给药剂量和个体化差异给药提供定量分析方法。方法比较国内外已报道的万古霉素HPLC测定方法,利用本院WA—TERS液相系统进行方法验证,以40％的硫酸锌沉淀处理血液标本,最终选择Waters0DS2（250mm×4．6mm,5ttm）色谱柱为分析柱。实验设计通过梯度改变柱温、pH、流动相的组成比例,验证每种条件对实验结果的容量因子（K）,拖尾因子（T）,分离度（R）的影响,最终得到最佳色谱条件为流动相0．05mol·L-1 KH2P04缓冲溶液（用磷酸调pH至2．85）-乙腈-甲醇（91．5：8：0．5）,紫外检测波长为200nm,流速为1mL·min-1,柱温30℃,进样量为20止。结果万古霉素的最低检测质量浓度为O．05mg·L-1,在0．1～64．0mg·L。时线性较好（r=0．9992）,相对回收率为97．5％～100．1％,日内、日问RSD均〈2％,R为2．1。结论该方法灵敏,快速,简便,特异性且稳定可靠,适用于临床万古霉素血药浓度的监测及临床药学的研究。