LC-MS法测定人血浆中雷米普利及其活性代谢产物雷米普利拉的浓度

目的建立LC-MS-MS法测定人血浆中雷米普利及其活性代谢产物雷米普利拉的浓度。方法以依那普利为内标,采用甲醇-0.1%甲酸溶液(75∶25)为流动相,以Waters Atlantis C18色谱柱为分析柱,通过电喷雾电离源(ESI),以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z417.3→234.3(雷米普利)、m/z389.3→206.2(雷米普利拉)和m/z377.3→234.2(依那普利)。结果雷米普利和雷米普利拉分别在0.103~102.7 ng.mL-1和0.106~106.4 ng.mL-1浓度范围内线性良好。最低检测限分别为0.05 ng.mL-1和0.10 ng.mL-1(S/N=5)。雷米普利和雷米普利拉的日内、日间精密度(RSD)均小于9%,低、中、高3个浓度的方法回收率均大于90%。结论本法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于雷米普利临床药物动力学研究。     

雌激素及其代谢产物分析方法的研究进展

目的综述雌激素及其代谢产物的分析方法。方法查阅相关文献36篇,系统阐述了生物样本中雌激素及其代谢产物的前处理方法,包括水解法、萃取法、衍生化方法以及其分析方法,包括免疫分析法、气相色谱-质谱联用法及液相色谱-质谱联用法。结果免疫分析法具有高灵敏度、高通量等特点,但是容易出现交叉反应,准确性欠佳;气相色谱-质谱联用法在生物样品的雌激素类成分分析中应用广泛,但其预处理过程较为繁琐;液相色谱-质谱联用法具有强专属性、高灵敏度、高准确性和强重复性等特点,特别适用于体系组分复杂、干扰严重的样品中痕量组分的分析测定。结论液相色谱-质谱联用技术为临床上检测内源标志性雌激素类化合物提供了一种简便、快速、可靠的定性、定量分析方法,对乳腺癌的预测、预防和治疗有重大意义。     

LC-MS／MS法测定人血浆中的帕珠沙星

目的：建立一种快速灵敏检测帕珠沙星血药物浓度的液相色谱－串联质谱方法。方法色谱柱为 Agilent Eclipse XDB－C18（4．6mm ×150mm,5μm）;流动相为乙腈：水（0．005mol· L－1甲酸铵,0．1％甲酸）＝（30∶70）;流速：0．5mL· min －1;质谱条件为电喷雾电离源（ESI）;采用选择反应监测（SRM）对帕珠沙星（m／z 319．0→301．1）和环丙沙星（m／z 332．2→314．2）进行测定。样本处理采用乙腈沉淀蛋白法,吸取上清液1μL进样。结果帕珠沙星的线性范围为0．02～20μg· mL －1,提取回收率为82％～92％,日内和日间精密度均小于15％。结论本方法简便、灵敏,该方法经考察符合血浆样品的测定要求,可以应用于临床药物浓度的测定和药代动力学的研究。     

LC-MS/MS法测定比格犬血浆中的磷酸可待因

目的建立灵敏、快速的LC-MS/MS法测定比格犬血浆中磷酸可待因浓度的方法。方法血浆样品经乙醚-二氯甲烷(60∶40)萃取后,以甲酸-10 mmol·L-1乙酸-甲醇(0.2∶62∶38)为流动相,盐酸利多卡因为内标,采用Phenomenex C18(150 mm×2 mm,3μm)色谱柱进行分离,流速0.2 mL·min-1,进样量10μL;LC-MS/MS法选择反应监测方式,定量分析的离子反应分别为m/z 300→165(磷酸可待因)和m/z 235→86(盐酸利多卡因)。结果 0.08～16 ng·mL-1磷酸可待因与峰面积的线性关系良好(r=0.9977);其最低定量下限为0.08 ng·mL-1,绝对回收率大于85%,批间和批内的变异系数小于15%。结论所用方法操作简便、快速、选择性好、灵敏度高,适用于磷酸可待因的生物等效性及药物动力学的研究。     

叔丁基对苯二酚在大鼠体内的代谢研究

目的利用液相色谱/质谱联用仪(LC/MS)分析叔丁基对苯二酚(TBHQ)在大鼠血清中的代谢物,探讨了TBHQ在大鼠体内的代谢途径。方法通过一级质谱分析,对大鼠血清中TBHQ的代谢物进行鉴别;通过多级质谱分析,对大鼠血清中的TBHQ及其代谢物进行鉴定。结果在大鼠血清中检测到TBHQ(3.5%),TBHQ的代谢物包括硫酸型结合物(93.2%)、葡萄糖醛酸型结合物(1.5%)和一种极性不明代谢物(推测为TBHQ二羟基化物的谷氨酸结合物,1.8%)。结论TBHQ在大鼠血清中主要经Ⅱ相反应(与硫酸或葡萄糖醛酸结合)代谢,此外少量TBHQ会发生Ⅰ相反应,推测为氧化反应,生成的二羟基化物与谷氨酸结合。     

液相色谱-质谱联用法检测体液中三唑仑及其代谢产物

建立了鉴别体液中三唑仑及其主要代谢物的液相色谱 质谱联用法。采用液相色谱 电喷雾离子阱质谱法 ,得到三唑仑和羟基化代谢物及其葡萄糖苷酸型结合物的色谱、质谱信息以及特征碎片离子。三唑仑的最低检测限小于 0 1ng。用本法分析了一例怀疑服用过量三唑仑的麻醉抢劫案例所取证的血样及尿样 ,并与健康受试者服药后尿样及家兔灌胃三唑仑后所取的血样及尿样比较 ,得到了当事人服用三唑仑的可靠数据。该方法可靠、快速、简便 ,尤其适用于需快速响应的法医学和毒理学分析     

HPLC-ESI-ITMSn法鉴定麻黄碱及其大鼠体内主要代谢产物

目的建立快速灵敏的LC-ESI-ITMSⁿ分析检测麻黄碱及其大鼠体内代谢物的方法。方法以麻黄碱对照品对LC-ESI-ITMS²色谱及质谱条件进行了优化，分析总结其电喷雾质谱的一级电离规律和多级质谱裂解规律，以此作为麻黄碱大鼠体内代谢物分析鉴定的依据。健康大鼠空腹灌胃麻黄碱10 mg·kg^-1，收集0~48 h的尿样，经C₁₈小柱固相萃取分离纯化后，直接采用LC-ESI-ITMSⁿ方法对尿样进行测定。结果根据生物体内药物代谢转化规律及母体药物的色谱-质谱行为规律，在尿样中鉴定出3个第I相代谢产物，未发现第II相代谢产物。结论本方法灵敏、快速、选择性高、专属性好，可用于麻黄碱的代谢产物研究。     

LC-MS/MS法测定SD大鼠血浆中紫杉醇前药含量及其在临床前药代动力学研究中的应用

本实验建立了一种液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法快速、灵敏测定Sprague-Dawley (SD)大鼠血浆中紫杉醇前药(Pro-PTX)及紫杉醇(PTX)的浓度。血浆样本以乙腈(0.1%甲酸)沉淀蛋白后,选用Ultimate AQ-C18色谱柱(50 mm×3.0 mm, 3μm),以乙腈-1 mmol·L^-1甲酸铵(含0.1%甲酸)为流动相,选用三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,选择监测离子反应分别为m/z 983.4→415.2 (Pro-PTX)、m/z 854.4→286.1(PTX)和m/z 808.3→527.2 (多西他赛,内标)。方法验证结果表明,血浆中Pro-PTX和PTX的线性范围分别为2.00～500 ng·mL^-1(r> 0.99)和4.00～1 000 ng·mL^-1(r> 0.99),定量下限分别为2.00和4.00 ng·mL^-1; Pro-PTX和PTX低、中、高三浓度的质控样本批内、批间相对标准差(RSD)均小于9%...     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中可乐定的浓度

目的建立一种LC-MS/MS法,测定Beagle犬血浆中可乐定的质量浓度,从而对盐酸可乐定缓释片在犬体内的药物动力学行为进行研究。方法采用液-液萃取法制备血浆样品;色谱柱:Luna C_(18)柱,采用梯度洗脱方式,流动相:A为甲醇(含体积分数为0.3%的甲酸溶液),B为5 mmol·L~(-1)醋酸铵缓冲溶液(含体积分数为0.3%的甲酸溶液);采用多反应监测扫描方式,测定Beagle犬口服给予盐酸可乐定缓释片后血浆中可乐定的质量浓度。结果 Beagle犬血浆中可乐定的质量浓度在25~1 000 ng·L~(-1)内线性关系良好,相关系数r=0.998 6;日内和日间精密度不大于13.2%;犬血浆样品中可乐定的提取回收率在76.0%~82.3%内,基质效应在100.3%~112.0%内。结论该方法适合于犬体内可乐定的药物动力学的研究。     

LC-MS／MS法测定人血浆中单硝酸异山梨酯的浓度

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中单硝酸异山梨酯浓度。方法:选用 Zorbax Eclipse XDB—C_(18)色谱柱,以甲醇-10 mmol·L~(-1)醋酸铵为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样品用甲醇进行蛋白沉淀后进样,选用3200QTRAP 型质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测。结果:单硝酸异山梨酯的线性范围为5.0～1000.0ng·mL~(-1),定量下限和最低检测限分别为5.0和0.5 ng·mL~(-1)。准确度与精密度结果显示方法日间、日内变异均小于15%,相对偏差-4.5%～4.6%,方法提取回收率大于85%,稳定性较好。结论:本研究所建立的方法快速、灵敏、专属性强、重现性高,可用于单硝酸异山梨酯人体药物动力学试验。     

液质联用测定人血浆中伪麻黄碱的浓度

目的:建立液质联用法测定人血浆中伪麻黄碱的浓度。方法:采集到的血浆样品以苦参碱为内标,经0.2 mL 0.02 mol·mL~(-1)碳酸钠溶液碱化后氯仿萃取进行 LC-MS 分析。色谱条件为 Kromasil C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸(13:87),流速为1.0 mL·min~(-1);质谱条件为大气压电喷雾离子源(ESI 源),正离子方式检测;扫描方式为选择离子监测(SIM),用于定量分析的离子分别为 m/z 166(伪麻黄碱)和 m/z 249(苦参碱)。结果:方法的线性范围为5～300 ng·mL~(-1),定量下限为5 ng·mL~(-1),提取回收率均大于77.9%,日内、日间精密度(RSD)均小于12.7%。结论:本方法灵敏、专属,适于伪麻黄碱人体血浆药物浓度的测定。     

液相色谱-质谱联用法测定大鼠血浆中木通皂苷D的浓度

目的建立液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS）测定大鼠血浆中木通皂苷D的浓度。方法选用XDB-C18色谱柱,以5 mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）-甲醇溶液为流动相,采用梯度洗脱进行分离。样本经甲醇沉淀后进样,选用3200QTRAP型质谱仪的多重反应监测扫描方式进行检测。结果木通皂苷D线性范围为10～1000 ng/ml,最低定量限为10ng/ml。准确度与精密度结果显示方法日间、日内变异均小于15%,相对误差为-2.8%～4.6%,低、中、高3个浓度提取回收率为95.3%～108.1%。结论本研究所建立的方法快速、灵敏、专属性强、重现性好,可用于大鼠血浆中木通皂苷D浓度的测定和药代动力学研究。     

LC-MS法测定犬血浆中冬凌草甲素含量

目的:建立犬血浆中冬凌草甲素浓度的LC-MS测定方法,为深入研究冬凌草甲素在犬体内的药代动力学特征提供有效、可靠的检测手段。方法:采用Shim-pack VP-ODS(150 mm×2.0 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(50∶50)为流动相,HPLC/电喷雾离子源质谱检测(HPLC/ESI-MS),乙酸乙酯作为萃取剂,检测犬血浆中冬凌草甲素的含量,并评价方法的稳定性和重现性。结果:本方法在0.0125~6.4μg.mL-1浓度范围内线性关系良好(R2=0.9994),定量限为0.0125μg.mL-1,平均回收率为71.18%~76.99%,日内精密度为2.4%~5.0%,日间精密度为1.2%~6.3%。室温放置30 min,样品预处理后放置24 h、-24℃贮存14 d及反复冻融3次稳定性良好。其RSD均小于15%。结论:该分析方法可行性高,重现性好,可用于研究冬凌草甲素在犬体内药代动力学特征。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中forsklin的浓度及其药代动力学（英文）

目的建立了测定大鼠血浆中forsklin的液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。方法血浆样品经叔丁基甲醚萃取后,以水（0.1%甲酸）-乙腈为流动相梯度洗脱,BetaBasic-C18柱分离。通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 411→375.3（forsklin）和285→193（地西泮）。结果在本实验条件下,forsklin血浆浓度测定方法的线性范围为0.5~1000 ng/ml,定量下限为0.5 ng/ml。日内、日间精密度（相对标准差RSD）均小于14.4%;准确度（相对误差RE）在-3.5%和3.8%之间。方法的专属性,绝对回收率,稳定性和基质效应均符合要求。结论该法快速、灵敏、准确,可用于forsklin的药代动力学研究。     

液-质联用法测定大鼠血浆中异烟肼及其代谢产物乙酰异烟肼的浓度

目的：建立应用LC-MS/MS测定大鼠血浆中异烟肼及其体内代谢物乙酰异烟肼浓度的方法,并将其应用于异烟肼及乙酰异烟肼在大鼠体内过程的研究。方法：血浆样品采用甲醇沉淀蛋白进行提取,以ESI电离源在正离子模式下检测,用Waters Cortecs C₁₈（4.6 mm×100 mm,2.7 μm）色谱柱,甲醇-水溶液为流动相等度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1。结果：异烟肼及乙酰异烟肼在大鼠血浆中的线性范围及定量限均符合测定要求,日内、日间精密度及基质效应均<15%。结论：本方法快速、灵敏、专属性强且重现性好,可用于大鼠血浆中异烟肼及乙酰异烟肼药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中布地奈德

建立液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中布地奈德。血浆样品碱化后，经乙酸乙酯液-液萃取，以乙腈-5 mmol·L^-1醋酸铵(60∶40，v/v)为流动相，Capcell Pak C₁₈ MG柱分离；采用电喷雾电离源，以多反应监测(MRM)方式进行负离子检测，用于定量分析的离子反应分别为m/z 489→m/z 357(布地奈德)和m/z 493→m/z 413(内标，曲安奈德)。测定血浆中布地奈德方法的线性范围为25.0～2 000 pg·mL^-1，定量下限为25.0 pg·mL^-1，日内、日间精密度(RSD)均小于15%，准确度(RE)在-8.1%～-1.7%。应用本法研究6只比格犬单次和多次给予布地奈德缓释胶囊9 mg后的药代动力学结果显示：单次给药后T_max为(3.5±3.3) h，C_max为(786±498) pg·mL^-1；多次给药后C_max为(2 142±1 515) pg·mL^-1。该法选择性强、灵敏度高、操作简便，适用于布地奈德缓释制剂的药代动力学研究。     

LC-MS／MS法测定右溴苯那敏的血药浓度及其药动学特征评价

目的建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定人血浆中右溴苯那敏的浓度,并评价右溴苯那敏在健康受试者体内的药动学特征。方法血浆经参有氯苯那敏为内标的甲醇沉淀后在Inertsil ODS-3柱（150mm×2．1mm,5μm）上分离,流动相采用含10mmol·L^-1甲酸铵的甲醇／sic／甲酸（60：40：0．1,V／V／V）溶液。串联质谱sciex API 3000采用正电喷雾离子源和多反应监测的扫描模式。结果右溴苯那敏在0．1—40μg·L^-1内线性良好,定量下限为0．1μg·L^-1。方法的准确度为87％～113％,批内、批间的RSD均〈15％。右溴苯那敏的主要药动学参数ρmax、tmax、t1/2、AUC0→t。和AUC0→∞在单剂量给药后分别为：（3．58±1．14）μg·L^-1、（9．42±2．94）h、（18．46±9．48）h、（108．4±53．97）μg·L^-1和（126．3±73．91）μg·L^-1;在多剂量给药后分别为：（14．59±6．75）μg·L^-1,（6．35±2．09）h、（21．40±7．74）h、（487．9±316．2）μg·L^-1和（578．0±437．3）μg·L^-1。稳态时的药动学参数AUC^88、ρmax、tmax和DF分别为：（153．0±74．47）μg·L^-1、（12．07±5．84）μg·L^-1、（12．75±6．21）μg·L^-1和（21．2±7．7）％。结论本方法专属性强,精确,灵敏度高,操作简单,快速。结果表明单剂量和多剂量给药后ρmax、tmax和AUC^88之间的差异有统计学意义,右溴苯那敏在体内有蓄积。     

LC-MS/MS法测定人血浆中氯马斯汀浓度

目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中氯马斯汀浓度,并进行其药代动力学和生物等效性研究。方法:血浆样品以苯海拉明为内标,经提取溶剂[正己烷-二氯甲烷-异丙醇(30∶20∶1)]萃取后进行LC-MS/MS分析。采用高效液相色谱分离系统,色谱柱为Inertsil Hilic C18柱(150 mm×3.0 mm,5μm),流动相为乙腈10 mmo·lL-1醋酸铵溶液)-甲酸(40∶60∶1)。采用质谱检测系统,ESI离子源,正离子模式,多级反应监测(MRM)方式,m/z344→215(氯马斯汀),m/z256→167(内标,苯海拉明)。结果:在0.01～5.0 ng·mL-1范围内,氯马斯汀血药浓度呈良好的线性关系(r=0.9972),精密度RSD%均小于10%,准确度在90.8%～102%。结论:本测定方法灵敏准确,适用于人血浆中氯马斯汀浓度的测定。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中阿魏酸的血药浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中阿魏酸的血药质量浓度。方法色谱柱采用Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),仪器采用API 4000三重四极杆串联质谱仪,采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式检测,采用沉淀蛋白法处理样品,用于定量分析的离子对为m/z 193.1→m/z 134.1(阿魏酸)和m/z 121.2→m/z 77.0(苯甲酸,内标)。结果该方法的线性范围在5.0～2 000.0μg.L-1,定量下限为5.0μg.L-1,且血浆中内源性物质不干扰阿魏酸的测定;日内和日间精密度RSD均小于15%;阿魏酸的平均提取回收率为91.0%～100.5%,基质效应在87.8%～89.7%。结论该方法适用于阿魏酸在大鼠体内的药物动力学研究。     

LC-MS/MS法测定舒肝平胃丸中厚朴酚在大鼠体内的血药浓度及其药动学研究

目的:建立舒肝平胃丸中厚朴酚在大鼠体内血药浓度的LC-MS/MS测定方法,并研究其在大鼠体内的药动学。方法:以1,8-二羟基蒽醌为内标,血浆样品经甲醇沉淀蛋白。以Agilent ZOBAX SB-C18柱(2.1 mm×50 mm,3.5μm)进行分离;采用电喷雾离子源(ESI源)以正离子方式检测;扫描方式:多反应离子监测(MRM)方式。结果:厚朴酚血药浓度在0.0166～1.66μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9996);平均提取回收率在83.3%～86.1%之间,日内、日间RSD均≤7.2%。结论:本方法快速、简便、准确、灵敏,适用于舒肝平胃丸中厚朴酚的药动学研究。