蚊虫携带HBV模型的PCR研究

利用ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性血清喂饲中华按蚊，淡色库蚊及白纹伊蚊，分别在吸血后０、２、４、６、１２、２４和４８ｈ将蚊制成匀浆，用经典和粗提法提取ＨＢＶ－ＤＮＡ模板。经聚合酶链反应后，电分析扩增产物：结果；３种蚊虫各时点匀浆的扩增说物中的ＨＢＶ－ＤＮＡ均为阴性。     

PCR法测定HBV—DNA的临床意义

ＰＣＲ法测定ＨＢＶ－ＤＮＡ的临床意义杨蓉芳刁端勤胡林华上海梅山集团公司医院免疫室（２１００３９聚合酶链反应（ＰＣＲ）是一种体外由引物介导的特异基因组或克隆序列的酶促扩增技术，具有极高的特异性和灵敏度。我科于１９９６年用ＰＣＲ法测定２３７例乙肝患者血清...     

PCR反应检测血清HBV—DNA的临床价值

<正> 聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种体外DNA扩增技术,本文采用PCR技术检测乙型肝炎病毒(HBV—DNA),并与乙肝病毒标志物进行对比,以探讨HBV感染状态及与乙肝标志物(HBV—M)之间的关系。1.资料与方法1.1 研究对象 80例乙型肝炎患者均为1997年我院门诊及住院病人,男56例,女24例,年龄分布13～66岁,平均34.5岁,诊断符合1995年5月第五次全国传染病,寄生虫会议修订的病毒性肝炎防治方案(试行)。     

应用PCR技术及ELISA法检测HBV的结果分析

本文报道用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）及聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测６４６例似肝火患者血清乙肝病毒标志物（ＨＢＶ－Ｍ）－乙肝二对半及乙肝病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）的分析结果。用ＥＬＩＳＡ法检出ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋）及ＨＢｅＡｇ（＋）ＨＢｃＡｂ（＋）这两种模式ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）检出率分别高达９５．６％（４４／４６）及９１．１％（１２３／１３５），在虽然有ＨＢｓＡｇ（＋）出现，无（或     

用PCR法检出心包积液中HBV DNA阳性1例

我们从 1例患者心包积液中连续 3次用ＰＣＲ法检测到ＨＢＶＤＮＡ阳性 ,现报告如下。1病历摘要女患 ,12岁。因持续性低热、胸痛、心前区不适、心悸气短、咳嗽收入院。入院后检查 ,血白细胞 7.2× 10 9/Ｌ ,中性粒细胞 0 .83 ,淋巴细胞 0 .16 ,单核细胞 0 0 1;肝功正常 ,心肌酶谱正常 ,胸水培养无细菌生长。心包积液 :白细胞 2 .76×10 9/Ｌ ,中性粒细胞 0 .0 6 ,淋巴细胞 0 .94,比重 1.0 2 2 ,蛋白定性阳性 ,蛋白定量 40ｇ/Ｌ ;ＰＣＲＴＢＤＮＡ阴性 ,连续 3次ＰＣＲＨＢＶＤＮＡ阳性。心包积液病理诊断未见瘤细胞 ,心电图窦性心动过速。胸…     

应用荧光定理PCR测定肝移植受者HBV—DNA

血清中乙肝病毒脱氧核糖核酸 (ＨＢＶ -ＤＮＡ)的存在一直被认为是病毒复制的标志 ,且与传染性有关。以前主要应用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术检测 ,但由于ＰＣＲ只能定性 ,对病毒基因无法定量 ,且检测过程中染色剂溴乙锭具有较强的致癌作用且污染环境。随着分子诊断学的发展 ,新技术不断被开发 ,荧光定量ＰＣＲ检测具有定量、高灵敏度、高速循环及高重复性等优点。本文采用荧光定量法和酶联免疫方法对７例肝移植患者进行术前、术后的血清ＨＢＶ -ＤＮＡ和乙肝标志物的检测 ,共９５例次 ,以评价荧光定量ＰＣＲ测定ＨＢＶ -ＤＮＡ在肝移植术中…     

HBV血清学标志物与PCR HBV-DNA 检测结果的比较

聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ,ＰＣＲ）是一种体外快速扩增待检ＤＮＡ序列的酶促反应,自Ｓａｉｋｉ（１９８５）首先报道以ＰＣＲ检测镰刀状贫血病以来,在传染病、遗传病及肿瘤等疾病诊断中发挥日益重要的作用。本文应用ＰＣＲ技术和ＥＬＩＳＡ方法对２２９例乙型病毒性肝炎（ＶｉｒａｌＨｅｐａｔｉｔｉｓＢ,ＶＨＢ）患者进行ＰＣＲＨＢＶ—ＤＮＡ和血清学标志物检测,并将结果加以比较,报道如下。１　对象与方法１１　对象　受检者为１９９７年１０月～１９９８年３月间本院传染科的住院病人、…     

聚合酶链反应检测HBV—DNA的意义探讨

对肝功能试验正常的149例HBV感染者用PCR技术检测血清HBV－DNA，结果HB－sAg,HBeAg、抗HBc均阳性者，HBV－DNA全部阳性，HBsAg,HBeAg、抗HBe,抗HBc或抗HBs单项或合并其它项阳性者，HBV－DNA阳性率分别为79．4％，94．6％、50％、81％和8．7％，这些结果与文献报告相类似。     

PCR检测HBV—DNA及其临床意义探讨

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测肝炎患者血清中的乙肝病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ），以探讨ＰＣＲ技术在乙肝病毒感染诊断中的应用，及ＨＢＶ－ＤＮＡ与血清ＨＢＶ标记ＨＢＶ－Ｍ之间的关系。结果表明１１５例ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率与ＨＢＶ活动复制情况相一致，认为ＰＣＲ方法灵敏度高，特异性强，为早期发现病人的ＨＢＶ的隐性感染提供了可靠的手段。     

PCR证明肝癌细胞有HBV—DNA复制

用恰跨过HBV-DNA的DR1、DR2两个缺刻的特制引物对21例肝癌及其癌旁组织作巢式PCR。其目的基因为HBV的复制模板cccDNA。同时作HBsAg、HBcAg免疫组化。结果4例癌组织、6例癌旁组织呈cccDNA阳性，其PCR产物在335bp处，条带清晰；阴性对照呈阴性，首次发现肝癌细胞内有cccDNA，证明了肝癌细胞有HBV复制模板，有复制。该4例cccDNA阳性中其癌细胞的HBsAg、HBcAg阳性率亦显著高于cccDNA阴性者。此外。HBV复制可发生于各种不同分化的肝癌细胞。     

聚合酶链反应检测HBV－DNA的意义探讨

对肝功能试验正常的１４９例ＨＢＶ感染者用ＰＣＲ技术检测血清ＨＢＶ─ＤＮＡ，结果ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｓ、抗ＨＢｃ均阳性者，ＨＢＶ─ＤＮＡ全部阳性，ＨＢｓＡｓ、ＨＢｅＡｓ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃ或抗ＨＢｓ单项或合并其它项阳性者，ＨＢＶ─ＤＮＡ阳性率分别为７９．４％、９４．６％、５０％、８１％和８．７％。这些结果与文献报告的相类似。     

荧光定量PCR检测HBV DNA与HBV血清标志物的对比监测和分析

目的：探讨荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA与HBV血清免疫学标志物(HBVM)的相互关系。方法：801例血清标本采用ELISA方法对其免疫学标志物进行检测，并用实时荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测血清HBV DNA。结果：HBV DNA的总检出率为67.0％，在模式HBsAg( )，HBeAg( )，HBcAb( )中，HBV DNA的含量明显高于HBsAg( )，HBeAb( )，HBcAb( )及HBsAg( )，HBcAb( )模式。在HBsAg(-)模式中HBV DNA亦有检出。结论：HBVM能提供乙肝感染的间接证据，而荧光定量PCR法检测HBV DNA准确灵敏，能真实反映HBV感染、复制及病程变化，在乙型肝炎的诊断治疗中具有重要的临床指导价值。     

PCR热启动及稀释法与常规法检测血清HBV—DNA的结果比较

采用常规ＰＣＲ、热启动ＰＣＲ、稀释后热泪动ＰＣＲ三种方法，对经ＥＬＩＳＡ检测为ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ或抗ＨＢｅ阳性的血清标本，检测其乙型肝炎病毒ＵＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）。结果显示热启动ＰＣＲ、稀释后热启动ＰＣＲ能提高ＨＢＶ－ＤＮＡ的阳性检出率。     

实时荧光定量PCR检测HBV DNA与ELISA检测HBV M结果的关系

目的:探讨实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA与ELISA检测HBV M结果的关系.方法:采用实时FQ-PCR和ELISA方法分别对240例乙肝患者进行HBV DNA定量测定和HBV M检测.结果:240例HBsAg阳性血清中HBV DNA阳性率为74.58%.HbsAg、HbeAg、HBcAb和HbsAg、HbeAg阳性组的HBVDNA含量及HBV DNA阳性率均明显高于HbsAg、HbeAb、HBcAb和HbsAg、HBcAb组(P＜0.05,P＜0.01).122例HBeAg阳性的血清中97.54%的HBV DNA阳性;118例HBBeAg阴性的血清中有50.85%HBV DNA阳性.结论:实时FQ-PCR检测HBV DNA准确灵敏,是HBV感染及复制的直接证据.HBV M和HBV DNA的检测各有其独特的临床检测意义,在乙型肝炎的诊断治疗中均具有重要的临床价值.     

PCR和ELISA法在检测HBV—DNA、HCV—RNA和结核分杆杆菌中的作用

目的；探讨PCR技术和ELISA法在检测HBV-DNA、HCV-RNA和结核分枝杆菌中的作用，以及与直接涂片法的对比结果。方法：分别用两法对临床确诊的感染病例和非感染者同时进行检测，并进行对比分析。结果：HBeAg阳性者HBV-DNA阳性，检出率为96.8%，HCV-RNA阳性检出率为19.4%。不同标本TB-DNA平均阳性检出率为39.98%。结论：PCR法灵敏度和特异度分别高于ELISA法和涂片查菌法。     

荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎HBV—DNA的临床应用

目的探讨血清HBV-DNA检测在慢性乙型肝炎病程中的临床价值及重叠HCV感染时的影响。方法采用荧光定量PCR技术检测89例慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA含量及与血清乙肝标志物的检测结果相比较。结果89例慢性HBV感染者中最高为3.65×108cop ies/m l,6例阴性。全部病例若按<105、105~107、>107等将病毒量分为低、中、高三度,则低滴度占16.87%、中滴度占56.63%和高滴度占26.50%。HBeAg阳性的慢性肝炎及ASC病毒血症水平较高,抗-HBe阳性的慢性肝炎及肝硬化病人血清HBV-DNA水平较低;重叠HCV感染者血清HBV-DNA水平显著低于单纯HBV感染者。结论HBV-DNA定量可作为估计肝脏炎症程度的间接指标并指导抗病毒治疗时机的选择。