IL-4对脂多糖激活的小鼠小胶质细胞炎症相关因子表达的影响

目的探讨白细胞介素4（IL-4）对脂多糖（LPS）诱导激活的小鼠小胶质细胞分泌的肿瘤坏死因子仪（TNF-α）、白细胞介素1β（IL—1β）、白细胞介素6（IL-6）和基质金属蛋白酶（MMP9）表达的影响。方法用IL-4处理经LPS激活的小鼠小胶质细胞24h以酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6和MMP9的浓度,同时通过RT—PCR技术检测小胶质细胞各种细胞因子mRNA水平的表达。结果LPS能够激活小胶质细胞,使TNF-α、IL—1β、IL-6和MMP9的表达量与对照组相比明显升高;IL-4能够降低LPS激活的小胶质细胞分泌TNF—α、IL-1β、IL-6和MMP9及其mRNA表达的水平。结论小鼠实验结果提示：IL-4可能通过抑制活化的小胶质细胞炎症相关因子的产生而发挥神经保护作用。     

川芎嗪对骨髓移植后小鼠LFA-1和ICAM-1表达的影响

本研究探讨川芎嗪对骨髓移植 (BMT)后小鼠骨髓中LFA 1和ICAM 1表达水平的影响及其促进骨髓造血重建的机制。 15 0只BALB/c小鼠随机分为正常组、生理盐水组和川芎嗪组。正常组未作任何处理 ,生理盐水组和川芎嗪组在BMT后分别喂饲相同剂量的生理盐水 ( 0 .2毫升 /只 ,每天 2次 )和川芎嗪 ( 2毫克 /只 ,每天 2次 ) ,并分别于BMT后第 7,14 ,2 1,2 8天统计存活率 ,计数脾集落形成单位 (CFU S)、外周血细胞、骨髓单个核细胞 (BMM NC) ,分析骨髓组织学变化及LFA 1和ICAM 1表达水平。结果表明 :川芎嗪组小鼠在BMT后第 10天CFU S计数和BMT后第 7,14 ,2 1,2 8天存活率、外周血白细胞、血小板、BMMNC计数、骨髓造血组织容量以及LFA 1表达水平均显著高于生理盐水组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,成熟红细胞容量和ICAM 1表达水平均明显低于生理盐水组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。川芎嗪组小鼠脂肪组织容量在BMT后第 7、14天明显高于生理盐水组 (P <0 .0 1) ,在第 2 1,2 8天明显低于生理盐水组 (P <0 .0 1)。结论 :川芎嗪改善骨髓微环境 ,促进造血重建。     

高压氧预处理对体外大鼠脑小胶质细胞产生细胞因子的影响

背景：高压氧可以减轻脑组织的缺血再灌注损伤，这种作用与高压氧对小胶质细胞的调节作用有着密切的联系。目的：探讨高压氧对体外大鼠脑小胶质细胞活性、分泌产生白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和一氧化氮的影响。设计：完全随机分组设计，对照实验。单位：上海第二军医大学海医系潜水医学教研室、免疫教研室、病理教研室、实验动物中心。材料：实验于1999—05／2000—01在解放军第二军医大学潜水医学实验室及免疫教研室完成。实验选用新生1日龄SD大鼠30只。方法：①用消化法培养新生SD大鼠的脑组织小胶质细胞。非特异性酯酶染色及细胞免疫化学染色鉴定小胶质细胞。②原代小胶质细胞按2&;#215;10^5/孔浓度接种于48孔培养板，将小胶质细胞随机分以下5组：对照组未经高压氧处理；高压氧（0．2MPa 1h）预适应3，7，10，14d组。经各时程高压氧处理后，随机分成2大组，其中一组细胞培养液添加细菌脂多糖（激活小胶质细胞）1mg／L，另一组则不添加。③白细胞介素1活性测定采用胸腺细胞增殖法。肿瘤坏死因子α活性测定采用L929细胞的细胞毒性试验。以Griess法测定亚硝酸的含量代表一氧化氮含量。④两样本比较采用未配对计量资料t检验。主要观察指标：不同时程高压氧预处理后大鼠脑小胶质细胞在静息和激活不同状态下白细胞介素1、肿瘤坏死因子α活性和一氧化氮含量。结果：SD大鼠30只均进入结果分析。①静息小胶质细胞细胞外液白细胞介素1、肿瘤坏死因子α活性和一氧化氮含量：各组间差异不明显。②脂多糖激活的小胶质细胞细胞外液白细胞介素1活性和一氧化氮含量：高压氧预处理10和14d组明显低于对照组[10d组：0．409&;#177;0．014，（5．21&;#177;0．77）μmol／L；14d组：0．381&;#177;0．004，（4．93&;#177;1．02）μmol／L，P〈0．05]。③脂多糖激活的小胶质细胞细胞外液肿瘤坏死因子活性：高压氧预处理14d组明显低于对照组[（51.20&;#177;1．13）％，（70．10&;#177;2．26）％，P〈0．05]。结论：0.2MPa的高压氧预处理可抑制活化小胶质细胞分泌产生白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和一氧化氮，但对于静息小胶质细胞无明显作用。     

ICAM-1在红斑狼疮小鼠NZB/NZW F1肾脏中的表达

目的研究细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在红斑狼疮小鼠与正常小鼠的肾脏组织中的表达有何不同.方法:新西兰黑色品系(NZB)与新西兰白色品系(NZW)杂交的子一代NZB/NZW F1小鼠可自发地发生类似人的系统性红斑狼疮,用RT-PCR方法和蛋白印迹的方法检测在狼疮性肾炎小鼠肾脏组织中I-CAM-1在mRNA和蛋白水平的表达.结果用ICAM-1 cDNA/GAPHD cDNA的荧光强度比值作为ICAM-1 mRNA的表达量的指针,红斑狼疮小鼠肾脏组织中ICAM-1 cDNA/GAPHD cDNA的荧光强度的比值在0.3-0.6之间,平均0.34;而未发生红斑狼疮的小鼠肾脏组织中ICAM-1 cDNA/GAPHD cDNA的荧光强度的比值在0.1～0.2之间,平均0.16,两者有明显差异t检验(P＜0.05).用Western Blotting法在红斑狼疮小鼠肾脏组织中可检测出ICAM-1蛋白条带,而未发生红斑狼疮的小鼠肾脏组织中不能测得.结论ICAM-1的表达在红斑狼疮小鼠肾脏组织中明显增高,说明ICAM-1在小鼠狼疮性肾炎的发病过程中起了促进作用.     

ICAM-1在红斑狼疮小鼠NZB／NZW F1肾脏中的表达

目的研究细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在红斑狼疮小鼠与正常小鼠的肾脏组织中的表达有何不同。方法:新西兰黑色品系(NZB)与新西兰白色品系(NZW)杂交的子一代NZB/NZWF1小鼠可自发地发生类似人的系统性红斑狼疮,用RT-PCR方法和蛋白印迹的方法检测在狼疮性肾炎小鼠肾脏组织中I鄄CAM-1在mRNA和蛋白水平的表达。结果用ICAM-1cDNA/GAPHDcDNA的荧光强度比值作为ICAM-1mRNA的表达量的指针,红斑狼疮小鼠肾脏组织中ICAM-1cDNA/GAPHDcDNA的荧光强度的比值在0.3-0.6之间,平均0.34;而未发生红斑狼疮的小鼠肾脏组织中ICAM-1cDNA/GAPHDcDNA的荧光强度的比值在0.1～0.2之间,平均0.16,两者有明显差异t检验(P<0.05)。用WesternBlotting法在红斑狼疮小鼠肾脏组织中可检测出ICAM-1蛋白条带,而未发生红斑狼疮的小鼠肾脏组织中不能测得。结论ICAM-1的表达在红斑狼疮小鼠肾脏组织中明显增高,说明ICAM-1在小鼠狼疮性肾炎的发病过程中起了促进作用。     

局部亚低温对脑梗死患者血清IL-8和细胞间粘附分子-1的影响

目的研究局部亚低温对脑梗死患者白细胞介素-8（IL-8）和细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的影响。方法随机将60例急性脑梗死患者分为局部亚低温组和常规治疗组,同时设健康对照组22例;常规治疗组应用药物治疗,局部亚低温组在药物治疗基础上加用局部亚低温治疗,观察两组患者发病第1、3、7天血清IL-8和ICAM-1的变化。结果两组患者发病第1天血清IL-8和ICAM-1水平均高于健康对照组;第3天常规治疗组IL-8和和ICAM-1水平达高峰,局部亚低温组下降,明显低于常规治疗组;在发病第7天,局部亚低温组血清IL-8和ICAM-1仍明显低于常规治疗组。结论颅脑局部亚低温治疗可显著降低急性脑梗死患者血清IL-8和ICAM-1浓度,减轻脑梗死后炎症反应,保护缺血脑组织。     

脑梗死后单个核细胞凋亡与IL-1β、ICAM-1的关系研究

[目的]观察急性脑梗死(ACI)患者单个核细胞(MNCs)凋亡的变化,并检测周围血中细胞因子白细胞介素(IL)-1β和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平的变化,以探讨细胞因子和黏附分子对MNCs凋亡的影响.[方法]采用流式细胞术检测58例ACI患者和30名健康对照者MNCs的凋亡情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-1β和ICAM-1水平.[结果]ACI患者MNCs凋亡率明显高于健康对照组,随病情进展呈逐渐升高趋势;58例ACI患者在发病的72 h内血清中IL-1β和ICAM-1显著高于健康对照组(P＜0.01),第1周达到最高值,至d14呈逐渐下降趋势,且与MNCs凋亡率均呈正相关.[结论]ACI患者MNCs凋亡增加,可能与炎性细胞因子产生过多密切相关,通过适度调控细胞因子的分泌和MNCs凋亡有可能会改善ACI预后.     

高压氧预处理对体外大鼠脑小胶质细胞产生细胞因子的影响

背景高压氧可以减轻脑组织的缺血再灌注损伤,这种作用与高压氧对小胶质细胞的调节作用有着密切的联系.目的探讨高压氧对体外大鼠脑小胶质细胞活性、分泌产生白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和一氧化氮的影响.设计完全随机分组设计,对照实验.单位上海第二军医大学海医系潜水医学教研室、免疫教研室、病理教研室、实验动物中心.材料实验于1999-05/2000-01在解放军第二军医大学潜水医学实验室及免疫教研室完成.实验选用新生1日龄SD大鼠30只.方法[1]用消化法培养新生SD大鼠的脑组织小胶质细胞.非特异性酯酶染色及细胞免疫化学染色鉴定小胶质细胞.[2]原代小胶质细胞按2×105/孔浓度接种于48孔培养板,将小胶质细胞随机分以下5组对照组未经高压氧处理;高压氧(0.2 MPa 1 h)预适应3,7,10,14 d组.经各时程高压氧处理后,随机分成2大组,其中一组细胞培养液添加细菌脂多糖(激活小胶质细胞)1 mg/L,另一组则不添加.[3]白细胞介素1活性测定采用胸腺细胞增殖法.肿瘤坏死因子α活性测定采用L929细胞的细胞毒性试验.以Griess法测定亚硝酸的含量代表一氧化氮含量.[4]两样本比较采用未配对计量资料t检验.主要观察指标不同时程高压氧预处理后大鼠脑小胶质细胞在静息和激活不同状态下白细胞介素1、肿瘤坏死因子α活性和一氧化氮含量.结果SD大鼠30只均进入结果分析.[1]静息小胶质细胞细胞外液白细胞介素1、肿瘤坏死因子α活性和一氧化氮含量各组间差异不明显.[2]脂多糖激活的小胶质细胞细胞外液白细胞介素1活性和一氧化氮含量高压氧预处理10和14 d组明显低于对照组[10 d组0.409±0.014,(5.21±0.77)μmol/L;14 d组0.381±0.004,(4.93±1.02)μmol/L,P＜0.05].[3]脂多糖激活的小胶质细胞细胞外液肿瘤坏死因子活性高压氧预处理14 d组明显低于对照组[(51.20±1.13)%,(70.10±2.26)%,P＜0.05].结论0.2 MPa的高压氧预处理可抑制活化小胶质细胞分泌产生白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和一氧化氮,但对于静息小胶质细胞无明显作用.     

维甲酸对小鼠骨髓基质细胞粘附分子表达和粘附功能的影响

探讨体外维甲酸 (RA)对小鼠骨髓基质细胞 (BMSC)粘附分子ICAM 1和VCAM 1的表达及人脐血单个核细胞 (UCBMNC)对BMSC粘附率的影响。用流式细胞术方法检测 0 .1 ,1 .0和 1 0 .0 μmol/LRA处理后BMSC粘附分子ICAM 1和VCAM 1的表达 ,以MTT方法检测 3种浓度RA处理后UCBMNC对BMSC粘附率的改变。结果显示 ,1 .0和 1 0 .0 μmol/LRA能增加BMSC上ICAM 1的表达及UCBMNC对BMSC的粘附率。RA对VCAM 1的表达无明显影响 ;RA上调ICAM 1的表达与增加UCBMNC对BMSC的粘附率呈正相关 (r =0 .7883 ,P <0 .0 5)。结论 :体外RA能上调小鼠BMSC上ICAM 1的表达和增加UCBMNC对BMSC的粘附率 ,两者呈正相关 ,为阐明BMSC粘附分子与造血干细胞归巢的相关关系及RA促进脐血造血干细胞归巢提供了体外实验依据     

短发夹RNA对肝癌细胞细胞间粘附分子-1基因表达的影响

目的利用小片段干扰RNA（siRNA）在肝癌细胞内诱导RNA干扰（RNAi），抑制细胞间粘附分子-1（ICAM-1）基因表达，在体外进行RNAi对肝癌治疗的实验研究。方法根据ICAM-1基因设计shRNA片断，构建pGenesil-1／ICAM-1表达载体，转入E．coli菌，并用Lipofectamine tm2000转染HepG2细胞，通过MTT方法检测细胞活性状态，应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞中ICAM-1基因蛋白质表达抑制情况。结果本实验已成功构建了针对ICAM-1基因的pGenesil-1／ICAM-1质粒，免疫组织化学结果显示：RNA干扰（RNAi）能特异而有效地抑制HepG2细胞中ICAM-1基因的表达。结论构建的pchlesd-1／ICAM-1重组质粒能有效抑制ICAM-1基因在肝癌细胞株HepG2中的表达和瘤细胞增殖。     

ICAM-1-GFP的构建及其与Molt-4细胞的结合

本研究构建人细胞间黏附分子1（ICAM-1）全长基因的真核表达载体pEGFP—CI—ICAM—1,转染中国仓鼠卵巢细胞（CHO—K1）细胞株,并检测其在cH0细胞中的表达及与Molt-4细胞的结合。采用RT—PCR法从健康人外周血中分离单个核细胞,钓取ICAM-1全长基因（1622bp）,与pMD18-T载体连接做全自动序列测定。将测序正确的克隆质粒pMD18-T—ICAM-1和表达载体pEGFP—C1分别用HindⅢ和Ⅰ进行双酶切,应用基因重组技术构建ICAM-1全长基因真核表达载体pEGFP—C1-ICAM-1,质粒经Hindm和SacⅡ双酶切和PCR电泳鉴定后,采用脂质体转染法转染CHO细胞,并进行G418筛选。用RT—PCR、流式细胞术和荧光显微术检测ICAM-1-GFP的表达及亚细胞的定位,用检测ICAM-1-GFP／CHO细胞与Molt-4细胞的结合能力评价ICAM．1-GFP融合蛋白的功能。结果表明：重组质粒经限制性酶切鉴定得到与ICAM—1全长基因长度-致（1622bp）的酶切产物;测序分析证实,PCR产物与GenBank上登录的ICAM-1基因（NM-000201）序列完全-致,表明成功地完成了ICAM-1的扩增和表达载体的构建;荧光显微镜下可见转染的CHO细胞有绿色荧光蛋白的表达,表达的融合蛋白较均匀地分布于整个细胞：FACS检测ICAM．1-GFP的荧光转染率为（13±5．5）％,表明ICAM—1—GFP基因进入到CHO细胞并获得了有效表达,成功构建了ICAM-1-GFP／CHO细胞,并且ICAM-1-GFP／CHO细胞能够结合PMA处理的Molt-4细胞。结论：成功构建了ICAM-1-GFP真核表达载体,构建的ICAM—1—GFP真核表达载体在CHO细胞内稳定表达,／CAM—1—GFP／CHO细胞能与M0lt-4细胞结合,这为进-步研究ICAM-1分子的功能打下基础。     

青蒿琥酯通过抑制ICAM-1治疗鼠狼疮性肾炎的研究

目的探索青蒿琥酯对狼疮模型鼠-MRL/lpr鼠狼疮性肾炎(LN)的疗效及作用机制。方法分别以青蒿琥酯50mg/(kg.d)和相同体积生理盐水灌胃治疗MRL/lpr鼠,治疗16周后检测小鼠24 h蛋白尿、血肌酐水平,检测小鼠外周血血清中ICAM-1浓度及淋巴细胞表面CD54阳性率,检测小鼠肾组织中ICAM-1表达。结果青蒿琥酯能够显著减少狼疮鼠的蛋白尿(P0.01)及血肌酐水平(P0.05),显著降低狼疮鼠的血清中可溶性ICAM-1浓度(P0.05)及淋巴细胞表面CD54的阳性率(P0.05),导致肾组织中ICAM-1的表达明显下降。结论青蒿琥酯显著缓解MRL/lpr鼠LN病情,此作用可能与抑制ICAM-1的表达有关。     

山莨菪碱对脑微血管内皮细胞缺氧-复氧时细胞间黏附分子-1的影响

目的：探讨山莨菪碱（Ani）对缺氧－复氧时脑微血管内皮细胞间黏附分子－1（ICAM－1）表达的影响。方法：采用流式细胞仪检测脑微血管内皮细胞在缺氧、缺氧－复氧及加入Ani后ICAM－1的阳性细胞百分率。结果：缺氧12h，脑微血管内皮细胞ICAM－1的表达与常氧时差异无显著意义，缺氧12h再给氧12h，ICAM－1的表达明显增加，加入Ani后，ICAM－1的阳性细胞百分率明显降低。结论：Ani可减少缺氧－复氧时脑微血管内皮细胞ICAM－1的表达。     

CORM-3介导小胶质细胞ICAM-1抑制放射性脑损伤炎症反应

目的本研究旨在探讨水溶性一氧化碳分子释放剂(CORM-3)对放射性脑损伤炎症反应的影响及其分子机制。方法 BV2系小胶质细胞,随机分为正常对照组、单纯照射组和照射加CORM干预组,通过ELISA法测定各组照射后24 h炎症因子TNF-α、IL-1β的表达情况;采用免疫荧光法判断各组小胶质细胞激活形态,TUNEL染色比较各组共培养后原代神经元凋亡情况,并用Western blot法检测P38 MAPK通路对CORM干预放射后细胞间黏附分子1(ICAM-1)蛋白表达的影响。结果 BV2细胞放射后24 h TNF-α、IL-1β表达明显增高;CORM-3可减轻放射后小胶质细胞活化程度及炎症表达,降低了放射后TUNEL阳性细胞百分比;CORM-3抑制了放射后BV2细胞磷酸化P38及ICAM-1蛋白的表达增加,而P38抑制剂进一步下调放射后BV2细胞ICAM-1的表达。结论 CORM-3通过P38 MAPK-ICAM-1通路抑制内源性小胶质细胞活化和外源性白细胞趋化的双重调控方式改善放射后脑损伤炎症反应,进而减轻放射后炎症所致神经元损伤,这为改善鼻咽癌放疗后脑损伤的治疗提供了有潜在前景的新途径。     

雷公藤对哮喘的治疗作用及对痰液中嗜酸细胞IL4和IL-5mRNA表达的影响

目的 探讨雷公藤对哮喘的治疗作用及对痰液中嗜酸细胞(EOS)IL-4和IL-5mRNA表达的影响.方法 12例哮喘患者的诱导痰标本,与雷公藤内酯醇(10-7 mol/L)共同培养48小时设为雷公藤组(12例),单独培养48小时设为空白组(12例),健康自愿者痰液为正常对照组.采用斑点分子杂交检测EOS IL-4、IL-5mRNA表达.结果 哮喘患者痰液中EOS浸润密度与正常对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01);雷公藤组与空白组EOS IL-4、IL-5mRNA表达水平比较,差异有显著性意义(P<0.01),空白组与正常对照组EOS IL-4、IL-5mRNA表达水平比较,差异有显著性意义(P<0.01);雷公藤组与正常对照组EOS IL-4、IL-5mRNA表达水平比较,差异无显著性意义(P>0.01).结论 IL-4、IL-5mRNA表达增加可能是导致哮喘嗜酸气道炎症的原因,雷公藤内酯醇能抑制IL-4、IL-5mRNA表达,可能为哮喘抗炎治疗的机制之一.     

青蒿琥酯通过抑制ICAM-1治疗鼠狼疮性肾炎的研究

目的探索青蒿琥酯对狼疮模型鼠-MRL/lpr鼠狼疮性肾炎（LN）的疗效及作用机制。方法分别以青蒿琥酯50mg/（kg.d）和相同体积生理盐水灌胃治疗MRL/lpr鼠,治疗16周后检测小鼠24 h蛋白尿、血肌酐水平,检测小鼠外周血血清中ICAM-1浓度及淋巴细胞表面CD54阳性率,检测小鼠肾组织中ICAM-1表达。结果青蒿琥酯能够显著减少狼疮鼠的蛋白尿（P〈0.01）及血肌酐水平（P〈0.05）,显著降低狼疮鼠的血清中可溶性ICAM-1浓度（P〈0.05）及淋巴细胞表面CD54的阳性率（P〈0.05）,导致肾组织中ICAM-1的表达明显下降。结论青蒿琥酯显著缓解MRL/lpr鼠LN病情,此作用可能与抑制ICAM-1的表达有关。     

肿瘤坏死因子-α和细胞粘附分子-1在脑缺血再灌注损伤中的表达规律

Objective To detect the expression of TNF α and ICAM 1 in cerebral ischemia reperfusion injury. To explore their probable modulation mechanism.Methods Immunohistochemistry was used to examine the expression of TNF α and ICAM 1.The MPO activity was determined by spectrophotometry.Result The expression of TNF α and ICAM 1 were obviously rised after cerebral ischemia reperfusion (P< 0.05).Conclusion The up regulation of TNF α and ICAM 1 after cerebral ischemia reperfusion induced the accumulation of leukocytes, which involved in ischemia reperfusion injury mechanism. TNF α play an important role in expression of ICAM 1.     

肝细胞肝癌survivin、ICAM-1表达相关性及其临床意义

目的探讨肝细胞肝癌(HCC)survivin与细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达相关性及其临床意义。方法应用链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学(SP)法检测36例HCC中survivin与ICAM-1的表达,同时用逆转录聚合酶链反应测定HCC癌组织及癌旁组织中survivin、ICAM-1mRNA的表达。结果HCC中survivin、ICAM-1表达阳性率分别为58.3%(21/36),66.7%(24/36),高于癌旁组织(P<0.05),survivin的表达与HCC门静脉癌栓发生密切相关(P<0.05)。HCC中survivin、ICAM-1 mRNA的表达水平分别为(2.69±1.27、3.21±1.41)高于癌旁组织(1.21±1.01、1.56±1.20,P<0.05)。相关性检验示survivin与ICAM-1之间有相关性(χ2=4.629,P<0.05)。结论HCC中sur-vivin、ICAM-1蛋白表达均上调,共同参与HCC发生和发展,survivin与ICAM-1有协同表达关系。