壳聚糖相对分子量对壳聚糖膜与角膜基质细胞相容性的影响

以脱乙酰度为95％，相对分子量分别为130KDa、220KDa、300KDa和500KDa的壳聚糖制备不同的壳聚糖膜。以各种壳聚糖膜作为基质，体外培养兔角膜基质细胞，通过观察角膜基质细胞在不同壳聚糖膜上的生长状态、贴附情况、生长曲线以及乳酸脱氢酶的活性，研究壳聚糖相对分子量对壳聚糖膜与角膜基质细胞生物相容性的影响。实验结果表明壳聚糖相对分子量对壳聚糖膜与角膜基质细胞的相容性具有重要的影响，相对分子量过高或过低的情况下，壳聚糖膜与角膜基质细胞相容性较差，对细胞损伤程度较大，细胞在膜上的贴附、生长能力较差；以相对分子量在200KDa～300KDa之间的壳聚糖制备出的膜与角膜细胞具有较好的相容性，细胞可在膜上长成密集单层，适合作为角膜培养的支架材料。     

犬平滑肌样细胞和胶原包埋PGA支架组织的相容性

目的 研究骨髓间充质干细胞所诱导的犬平滑肌样细胞和胶原包埋聚羟基乙酸（PGA）支架的组织相容性。方法 胶原包埋PGA构建复合支架,犬骨髓间充质干细胞诱导血管平滑肌样细胞,评价组织相容性。结果 HE染色见胶原包埋PGA组有平滑肌样细胞生长;甲苯胺蓝染色见平滑肌样细胞被染成浅蓝色,胶原包埋PGA组较单纯PGA组明显增多;电镜观察,胶原包埋PGA组可见到细胞在支架上贴附和生长良好。结论 细胞和胶原包埋PGA的支架组织相容性良好。     

医用丝素蛋白皮肤再生膜的细胞相容性评价

评价医用丝素蛋白皮肤再生膜的细胞相容性。其方法是采用细胞增殖度试验和溶血试验,对医用丝素蛋白皮肤再生膜进行细胞毒性和溶血反应的实验研究。结果表明：该再生膜无明显细胞毒性存在,溶血率为1.15%。医用丝素蛋白皮肤再生膜具有良好的细胞相容性。     

不同脱乙酰度对壳聚糖膜与角膜基质细胞相容性的影响

以分子量为30万．脱乙酰度分别为63．3％、73．7％、83％和97％的壳聚糖制备不同的壳聚糖膜，在不同脱乙酰度的壳聚糖膜上培养兔角膜基质细胞．通过观察角膜基质细胞在不同壳聚糖膜上的生长状态、贴附情况、生长曲线以及乳酸脱氢酶的活性，研究壳聚糖分子脱乙酰度对壳聚糖膜与角膜基质细胞生物相容性的影响。实验结果表明壳聚糖脱乙酰度越高。壳聚糖膜对细胞的损伤越小。越有利于细胞在膜上的生长和贴附，反之．低脱乙酰度的壳聚糖膜与角膜细胞的相容性较差。     

静电纺胶原/丝素复合微纳米纤维的制备及细胞相容性研究

采用静电纺丝技术制备胶原/丝素复合微纳米纤维,对其理化性能进行表征并观察其细胞相容性。以六氟异丙醇(HFIP)为溶剂,将胶原和丝素以 100:0.70:30.50:50.30:70.0:100的质量比共混进行电纺。制备的五种材料经戊二醛蒸汽交联12 h。采用扫描电镜、红外光谱、X射线衍射、热重分析和拉伸力学性能测试等方法对其理化性能进行表征。材料种植成纤维细胞后,通过扫描电镜和噻唑兰(MTT)比色法观察其细胞相容性。结果显示制备的纤维平均直径在550~1 100 nm之间,随着丝素含量的增加纤维平均直径增加。交联后纤维的β化程度、结晶度和热稳定性均有一定提高,且随着丝素含量的增加提高越明显;交联后材料的力学性能优于交联前;当丝素含量为70%时,纤维膜的平均断裂强度为(8.70±1.05) MPa,高于其它配比的纤维膜。细胞在材料表面生长状态良好;丝素含量为70%组的细胞粘附和增殖高于其它组,与细胞培养板相比无显著性差异,表明其细胞相容性良好,可望成为一种新型的组织工程支架材料。     

脱细胞胶原基质双层材料与骨髓间充质干细胞的生物相容性研究

目的 对脱细胞胶原基质双层材料和骨髓间充质干细胞（BMSCs）间的生物相容性进行研究.方法 将BMSCs与脱细胞胶原基质双层材料共培养作为实验组,单独培养的BMSCs为对照组,对BMSCs的生长和增殖情况进行研究,扫描电镜下观察细胞在材料上的贴附生长情况,并采用CCK-8法测定细胞活性.结果 扫描电镜结果显示BMSCs在脱细胞胶原基质双层材料上生长良好.CCK-8法测得的BMSCs与脱细胞胶原基质双层材料共培养的生长曲线显示,实验组与对照组间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 脱细胞胶原基质双层材料具有较好的生物相容性,这为脱细胞胶原基质组织工程支架双层材料下阶段在体内动物中的应用提供了科学依据.     

地塞米松对大鼠肾小球系膜细胞增殖和合成胶原物质的影响

本文采用大鼠肾小球系膜细胞体外培养技术，用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入和羟脯氨酸测定方法，观察了地塞米松对大鼠肾小球系膜细胞增殖及合成细胞外基质－胶原的影响。结果显示：地塞米松可抑制大鼠肾小球系膜细胞的增殖。     

新型壳聚糖-胶原支架与牙周膜细胞的生物相容性

背景：目前胶原作为牙周组织工程支架材料仍具有机械强度差、降解速度快等缺点,将其与壳聚糖复合可改善上述问题。 目的：评估新型壳聚糖-胶原支架材料的体外生物相容性。 方法：通过MTT法评估100%,75%,50%,25%壳聚糖-胶原支架材料浸提液对人牙周膜细胞的毒性。选择第4-6代生长状态良好的人牙周膜细胞与壳聚糖-胶原支架共培养,观察细胞在支架上的生长情况,并检测与壳聚糖-胶原支架复合培养前后人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的变化。 结果与结论：新型壳聚糖-胶原支架具有双层结构,一侧表面致密,一侧表面疏松多孔。MTT法检测不同浓度材料浸提液毒性评级为0或1级。扫描电子显微镜及组织学观察可见细胞在壳聚糖-胶原支架上增殖良好,且致密层可起屏障膜作用,阻挡细胞进入支架内部;复合培养24 h后,人牙周膜细胞的碱性磷酸酶活性与复合培养前无明显差异(P > 0.05),复合培养48,72 h后人牙周膜细胞的碱性磷酸酶活性高于复合培养前(P < 0.05)。以上结果提示新型壳聚糖-胶原支架具有良好的生物相容性及屏障功能,可进一步应用于牙周组织工程的研究。     

壳聚糖-镁膜与PC12细胞在体外的生物相容性

目的 研究壳聚糖镁膜与PC12细胞体外生物相容性，初步探讨壳聚糖/镁复合物作为组织工程材料的可行性。方法 合成壳聚糖-镁膜，应用扫描电镜观察复合膜的表面形态，并用X线能谱仪分析壳聚糖-镁复合膜中镁的含量；在体外将复合膜与PC12细胞共培养，用MTT方法检测细胞活力。光镜及扫描电镜观察PC12细胞在材料上的形态学变化。结果 单纯壳聚糖(CS)与壳聚糖镁膜(CM)组相比，前者表面较为光滑致密，而复合膜中可见均匀排列的小孔；络合物中镁元素的含量与投入的硫酸镁量呈一定的剂量依赖。形态学观察表明，PC12细胞在CM上生长良好，至7d时，可见微绒毛丰富并有较长突起，部分细胞之间形成突触状结构；MTT检测结果表明，培养5d后实验组细胞活力超过对照组（p<0.05）。结论 壳聚糖/镁膜与PC12细胞在体外有良好的生物相容性。     

胶原/透明质酸膜与明胶海绵支架材料力学及组织相容性的比较

背景：课题组前期实验证明胶原/透明质酸膜具有良好的力学性能和组织相容性。 目的：观察复合材料胶原/透明质酸膜及明胶海绵的生物学性能。 方法：应用材料复合交联的实验方法构建胶原/透明质酸膜并测定胶原/透明质酸膜、明胶海绵支架的力学性能。将支架材料种植于兔皮下,按照2,4,6,8,12周不同时间点评价材料在体内的降解情况和组织相容性。 结果与结论：①成功制备了胶原/透明质酸膜。②胶原/透明质酸膜具有较好的韧性和抗张强度,明胶海绵的力学性能不够理想。③两种材料在体内的降解均符合生物材料的组织反应过程,胶原/透明质酸膜在体内12周可完全降解,明胶海绵约6周完全降解。④胶原/透明质酸膜与平滑肌细胞的黏附率高,细胞的增殖和代谢状况较好,而明胶海绵的细胞黏黏附和增殖率相对较低。说明胶原/透明质酸膜具有较好的生物学性能。     

胶原-纳米羟基磷灰石复合支架的细胞相容性

背景：观察成骨细胞在生物材料上的形态、增殖和分化等项目,可评估生物支架材料的生物相容性。 目的：观察复合支架材料纳米羟基磷灰石/胶原对成骨细胞增殖、分化的影响。 方法：取新生24 h内Wistar大鼠的颅盖骨,采用改良胶原酶消化法进行成骨细胞原代培养,取第3代细胞与纳米羟基磷灰石/胶原支架或普通羟基磷灰石材料体外复合培养。培养3,6,9 d后,观察材料周边的细胞形态及支架材料对细胞分化、增殖的影响。 结果与结论：纳米羟基磷灰石/胶原材料较普通的羟基磷灰石材料更有利于成骨细胞的黏附、生长、分化、增殖,证实其生物相容性更好,有望成为一种新型的骨组织工程支架材料。     

血管组织工程支架材料的细胞相容性

背景：胶原与透明质酸均有利于组织培养中细胞的黏附、增殖和分化。 目的：观察血管内皮细胞、平滑肌细胞与胶原/透明质酸膜、明胶海绵的细胞相容性,并筛选最佳种植方法。 方法：将第3-5代兔血管平滑肌细胞种植在胶原/透明质酸膜(或明胶海绵)材料上,连续培养2周后将兔内皮细胞接种在平滑肌细胞-胶原/透明质酸膜(或明胶海绵)复合体上,并设置单纯平滑肌细胞与内皮细胞共同接种组。 结果与结论：①光镜和扫描电镜观察：细胞在两种材料上均随着培养时间,接种次数增加而生长加快,其中在胶原/透明质酸膜上的细胞生长更好,细胞连接更致密。②WST-1法检测：胶原/透明质酸膜组平滑肌细胞的黏附率及增殖率均高于明胶海绵组(P < 0.05),且细胞在材料上的生长随着接种次数的增加有不同程度提高。③³H-TDR掺入法检测DNA合成率：在胶原/透明质酸膜上的细胞DNA合成最高,明胶海绵上的较差。表明胶原/透明质酸膜具有较理想的细胞相容性,采用适当间隔、反复接种的方法可提高细胞的黏附和增殖。     

内皮细胞条件培养液对平滑肌细胞合成胶原的影响

本实验采用胶原酶消化法分离、培养兔主动脉内皮细胞(EC)及平滑肌细胞(SMC),以[~3H]-脯氨酸掺入SMC合成的[~3H]-羟脯氨酸中的量作为测定胶原的指标,观察了兔主动脉内皮细胞条件培养液(EC-CM)对动脉SMC合成胶原的影响,结果发现融合的EC-CM能促进SMC的胶原合成,但SMC数无明显变化;1:2稀释的EC-CM促进SMC合成胶原的作用最大。可见EC通过促进SMC的胶原合成而参与了动脉粥样硬化过程。     

壳聚糖-镁膜与PCI2细胞在体外的生物相容性

目的 研究壳聚糖镁膜与PC12细胞体外生物相容性,初步探讨壳聚糖/镁复合物作为组织工程材料的可行性.方法 合成壳聚糖-镁膜,应用扫描电镜观察复合膜的表面形态,并用X线能谱仪分析壳聚糖-镁复合膜中镁的含量;在体外将复合膜与PC12细胞共培养,用MTT方法 检测细胞活力.光镜及扫描电镜观察PC12细胞在材料上的形态学变化.结果单纯壳聚糖(CS)与壳聚糖镁膜(CM)组相比,前者表面较为光滑致密,而复合膜中可见均匀排列的小孔;络合物中镁元素的含量与投入的硫酸镁量呈一定的剂量依赖.形态学观察表明,PC12细胞在CM上生长良好,至7 d时,可见微绒毛丰富并有较长突起,部分细胞之间形成突触状结构;MTT检测结果表明,培养5 d后实验组细胞活力超过对照组(P<0.05).结论 壳聚糖/镁膜与PC12细胞在体外有良好的生物相容性.     

γ射线辐照对单采血小板活化及输注效果的影响

目的：研究γ射线辐照对单采血小板活化及输注效果的影响。方法：单采血小板20袋分为对照组和辐照组,辐照组采用35Gyγ射线辐照。测定保存前及保存第1d、3d、5d时血小板活化标志物CD62P的表达。62例接受辐照和未辐照血小板输注的病例,检测其输注血小板前后活化血浆凝固时间（APCT）的变化。结果：保存前及保存第1d、3d、5d时CD62P的表达在对照组和辐照组之间无显著差异（P〉0.05）。输注血小板前后,患者APCT在对照组和辐照组之间比较亦无显著差异（P〉0.05）。结论：γ射线辐照对保存期内血小板活化及血小板输注效果均无明显影响。     

羊膜上皮细胞胶原海绵复合体的构建及其细胞特性变化

目的:构建羊膜上皮细胞(AECs)胶原海绵复合体,并研究其细胞生长及特性.方法:将大鼠AECs接种于胶原海绵支架中,一般贴壁培养细胞作对照,用CM-Dil及Hoechest33342标记细胞膜和细胞核、HE染色、扫描电镜等观察细胞的生长和形态,CCK-8法检测细胞活力,免疫细胞化学、实时荧光定量PCR检测细胞表型.结果:与一般贴壁培养AECs相比,AECs在胶原海绵中粘附生长良好,增殖能力强,直径变小,细胞表型变化不明显,仅Nestin mRNA表达上调.结论:胶原海绵支架与AECs生物相容性良好,能维持细胞原特性并促进其生长和增殖.     

壳聚糖-透明质酸共混膜对兔角膜基质细胞生长的影响

观察各种壳聚糖-透明质酸共混膜对角膜基质细胞生长的影响作用,研究透明质酸混入比例对共混膜与细胞相容性的影响.以共混膜为载体培养兔角膜基质细胞,通过光学和电子显微镜,观察细胞在膜上的生长情况;通过MTT法,检测细胞在共混膜上的贴附率和生长活性;通过检测培养基中乳酸脱氢酶的活性,预示壳聚糖-透明质酸共混膜与角膜基质细胞的相容性.以低于1:0.1的比例混入透明质酸.可以提高细胞在共混膜上的贴附率、生长速度,细胞在共混膜上的生长状态好于在壳聚糖膜上的生长状态.结果提示,以低于1:0.1的比例混入透明质酸,可以提高壳聚糖膜与角膜基质细胞的相容性,促进细胞生长;而以高于1:0.1的比例混入透明质酸,则不利于细胞在共混膜上的生长,降低了壳聚糖膜与角膜基质细胞的相容性.     

低剂量γ射线辐照外周血单个核细胞对细胞因子表达的影响

目的:探讨低剂量辐射对外周血单个核细胞细胞因子表达的刺激效应.方法:人外周血单个核细胞采用1 Gyγ射线照射,吸收剂量率为17 Gy/min,并在培养过程中不同时间采用ELISA方法检测上清液中IL-2、TNFα及IFN-γ含量.结果:经γ射线照射24 h后培养上清中IL-2、TNFα及IFN-γ含量明显升高,与对照组比较有明显差异(P<0.05),并随培养时间延长,各细胞因子含量会进一步升高.结论:低剂量辐射对外周血单个核细胞中IL-2、TNFα及IFN-γ表达具有刺激效应.     

氧化膜对TiNi合金形状记忆效应及生物相容性的影响

本文用Ｘ射线光电子谱、原子吸收谱、电化学阳极极化及细胞培养等方法研究了Ｔｉ－５０ａｔ％Ｎｉ合金的氧化膜及其对耐腐蚀性能和生物相容性的影响。研究表明，在３００℃～４００℃之间形成的氧化膜薄而致密，不影响试样的形状记忆效应，但可有效地减慢合金在１％ＮａＣｌ溶液中的Ｎｉ离子释放速度及减小阳极极化维钝电流。氧化膜的存在使合金的细胞毒性明显降低。     

犬骨髓基质细胞和蚕丝丝素的体外生物相容性

目的 探讨体外培养的犬骨髓基质细胞(BMSCs)与蚕丝丝素材料的生物相容性,寻找BMSCs组织工程化神经的支架材料.方法 通过差速贴壁法体外分离、培养犬骨髓基质细胞,与丝素共培养后,通过光镜(经免疫荧光染色)、扫描电镜观察细胞在丝素上黏附和生长情况.利用丝素浸出液培养BMSCs后,通过透射电镜观察细胞内部超微结构,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测丝素、羟基磷灰石、有机锡浸出液和普通IMDM完全培养基培养细胞12、24、48、72h和7d的细胞活力,每组重复12次.流式细胞术检测丝素浸出液培养BMSCs的细胞周期及表型,实验重复3次.结果 通过光镜、扫描电镜观察,发现BMSCs 紧紧黏附于丝素材料,并沿着丝素纤维延伸,黏附于丝素纤维的细胞呈圆形、椭圆形及呈梭形.与普通IMDM完全培养基培养的细胞相比,透射电镜下可见丝素浸出液培养后的BMSCs内部结构未见异常;MTT检测丝素和羟基磷灰石浸出液对骨髓基质细胞的活力无显著性影响(P＞0.05);流式细胞术检测丝素浸出液对骨髓基质细胞周期和表型无明显影响.结论 蚕丝丝素材料与犬BMSCs生物相容性好,且未见丝素对BMSCs有毒性作用,可作为BMSCs组织工程化神经的支架材料.