Apelin和APJ在绒毛及胎盘组织中的表达及意义

目的探讨血管活性肽Apelin及其受体APJ在早期妊娠绒毛和晚期妊娠胎盘组织中的表达和定位。方法分别取10例妊娠7-9w妇女（早孕组）的绒毛组织和15例妊娠37-41w妇女的胎盘组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法（FO-RT-PCR）及免疫组织化学染色分析法检测两组孕妇胎盘Apelin mRNA及其蛋白的表达情况,并用高清晰度彩色图文分析系统（HPIAS-1000）对其进行定量分析。结果FQ-RT-PCR结果显示,足月妊娠胎盘Apelin mRNA显著高于早孕绒毛组织（P〈0.05）。免疫组化及高清晰度彩色图文分析系统结果显示,Apelin-36和APJ蛋白在早孕绒毛组织和足月妊娠胎盘组织中均有表达,二者在早孕绒毛组织中的表达部位主要位于绒毛内滋养细胞：在足月妊娠胎盘组织中,主要表达于胎盘合体滋养细胞及血管内皮细胞Apelin在足月妊娠胎盘组织中的表达强度要高于早孕绒毛组织,有极显著性差异（P〈0.01）,而APJ在早孕绒毛组织和足月妊娠胎盘组织中的表达强度无明显差异（P〉0.05）。结论Apelin在晚孕胎盘组织中表达增强,Apelin/APJ可能在子宫-胎盘血管的发育及功能调控过程中发挥重要作用。     

FcγRⅢ在乙型肝炎病毒胎盘感染中作用的研究

目的研究FCγRⅢ在乙型肝炎病毒胎盘感染中的作用。方法收集早孕、中孕,足月胎盘各15例,进行免疫荧光检测FcγRⅢ的表达情况;并随机选取经免疫组化PV-9000法检测为HBsAg( )的足月胎盘15例,进行免疫荧光双标检测HBsAg/FcγRⅢ的分布。结果早孕绒毛组织未见FcγRⅢ表达,中孕胎盘有11例表达,其中最早的为孕17w,足月胎盘均有明显表达;HBsAg/FcγRⅢ在胎盘屏障各层细胞上可分布于同一部位。结论孕17w后胎盘组织开始表达FCγRⅢ,使胎盘具有转运IgG的功能:HBV可能是以免疫复合物的形式经由滋养细胞表面FCγRⅢ的介导而感染胎盘的。     

滋养细胞疾病雌、孕激素受体的研究

滋养细胞疾病有无ER、PR存在及其变化情况如何?尚未见文献报道。本文采用酶联亲和组化法对正常早孕绒毛、足月妊娠胎盘各10例,滋养细胞疾病28例的ER、PR进行测定,结果表明:①早孕绒毛、胎盘、葡萄胎、恶葡、绒癌ER、PR均可被测知,滋养细胞疾病较正常早孕绒毛、足月胎盘ER、PR为低。②滋养细胞     

MDR3(ABCB4)、BSEP(ABCB11)和FIC1(ATP8B1)基因在人绒毛和正常妊娠胎盘组织表达的研究

目的 检测肝脏胆盐载体FIC1(ATP8B1)、BSEP(ABCB11)和MDR3(ABCB4)在正常绒毛和胎盘组织中转录水平和蛋白水平的表达情况,探讨肝脏胆盐载体在人类胎盘胆汁酸排泌过程中的作用和功能.方法 选择正常妊娠6～12周的孕妇(早孕组)15例和妊娠38～40周的孕妇(晚孕组)20例,采用实时定量逆转录-聚合酶链反应技术(real time RT-PCR)检测绒毛和胎盘组织中上3种载体的mRNA,采用免疫组织化学(S-P)法分别榆测后两种载体蛋白在上述35例胎盘组织中的表达,并通过免疫印迹技术分析这两种载体在胎盘组织中的含量.结果 在所有绒毛和胎盘组织中均检测到3种载体的mRNA.MDR3mRNA在正常绒毛中的表达量较低为(0.15±0.04),正常晚期妊娠胎盘中表达量为(0.58±0.06),两者比较有显著性差异(P<0.05).与早孕组相比,HC1 mRNA表达水平明显由(0.65 ±0.03)下降至(0.23±0.04),差别有非常显著意义(P<0.01).而BSEP mRNA表达无改变(0.06 ±0.01和0.05 ±0.01)(P>0.05).MDR3蛋白、BSEP蛋白在正常绒毛和胎盘组织中均有表达,且两种载体在正常早孕绒毛及晚期妊娠胎盘分布范围基本一致,主要分布在绒毛合体滋养细胞母体面游离缘.MDH3、BSEP蛋白在绒毛和晚期妊娠胎盘中的表达趋势与其mRNA相似,MDR3蛋白Western印迹条带的光密度值为(11 357±3618)(早孕组)和(46 753±2834)(晚孕组),两组比较有显著性差异(P<0.05).BSEP蛋白早孕组Western印迹条带的光密度值为(1 296±436),晚孕组为(1 798 ±575),两组比较差异无显著性(P>0.05).结论 3种肝脏胆盐载体FIC1、MDR3和BSEP在正常绒毛和胎衙组织中均有表达,可能参与了胎盘胆汁酸的排泌功能.妊娠期间MDR3、FIC1和BSEP mRNA和蛋白表达发生变化,可能与胎儿生长发育的需要有关.     

复发性自然流产患者绒毛滋养细胞FasL的表达

目的探讨复发性自然流产患者(RSA)绒毛滋养细胞FasL的表达与正常者有无差异。方法应用免疫组化和RT-PCR法,检测RSA患者和正常早孕妇女的绒毛滋养细胞FasL在蛋白水平和mRNA水平的表达,并进行图象分析和比较。结果免疫组化结果显示,绒毛合体滋养细胞和细胞滋养细胞的胞浆和胞膜上均有FasL表达,FasL在2组的定位无差异,但正常组绒毛滋养细胞FasL表达(PU=18.03±4.69)强于RSA组(PU=13.59±3.73),P<0.050。RT-PCR结果表明RSA组绒毛组织FasL在mRNA水平的表达为0.18±0.05,低于正常组0.27±0.06,差异有显著性意义(P<0.01)。结论不明原因RSA患者的绒毛滋养细胞FasL表达弱于正常者,滋养细胞FasL的表达减少可能在复发性自然流产中起重要作用。     

Bcl—2蛋白在正常、妊高征及胎儿宫内发育迟缓胎盘中的表达

目的 通过检测Bcl-2蛋白在正常各期胎盘、妊高征胎盘和胎儿宫内发育迟缓胎盘中的表达，探讨Bcl-2蛋白在胎盘的发育过程中的功能及妊高征和胎儿宫内发育迟缓的病理机制。方法 取正常的8－10周、20－22周、足月胎盘以及妊高征和胎儿宫内发育迟结的胎盘组织固定，石蜡包坦，用ABC法抗Bcl-2免疫组织化学染色，光镜观察。结果 正常早孕绒毛合体细胞滋养怪、细胞滋养层细胞核、绒毛吵轴细胞阳性，细胞滋养层的胞质、绒毛中轴基质阴性。正常中期和足月胎盘滋养层细胞、血管内皮细胞阳性。与正常足月胎盘相比，妊高征、台儿宫内发育迟缓胎盘几科不着色。结论 Bcl-2蛋白在正常各期胎盘中均有表达，而在妊高征和胎儿宫内发育迟缓胎盘几乎不表达，Bcl-2蛋白表达异常与妊高征与胎儿宫内发育迟缓的发病机制有关。     

AnnexinⅤ/PI法定量检测胎盘细胞凋亡

目的:探讨AnnexinⅤ/PI法检测细胞凋亡较PI法的优越性。方法:三十份正常足月胎盘的滋养细胞标本同时进行AnnexinⅤ/PI法和PI法染色,经流式细胞仪检测分析细胞凋亡的百分数。结果:AnnexinⅤ/PI法和PI法检测的结果分别为3.71±1.86%、0.69±0.48%,二者有显著性差异(P<0.01)。结论:AnnexinⅤ/PI法可检测出细胞早期的凋亡,其灵敏、准确,是目前检测细胞凋亡较好的方法。     

AnnexinⅤ在低氧滋养细胞中的表达下调

目的探讨膜联蛋白Ⅴ(AnnexinⅤ)在体内低氧滋养细胞中的表达及其意义。方法采用免疫组化、流式细胞术等实验技术测定低氧滋养细胞内膜联蛋白Ⅴ的表达。结果 1)体内低氧状态下滋养细胞AnnexinⅤ的表达显著低于正常滋养细胞。2)体外实验显示随着AnnexinⅤ浓度的增加,其抗凝功能呈梯度性变化。结论低氧滋养细胞中AnnexinⅤ表达呈明显下调,可能影响胎盘滋养细胞的生理功能,导致多种不良妊娠结局。     

Galectin-3基因在人孕早期绒毛和蜕膜中的表达及与妊娠的关系

目的 研究人早孕绒毛和子宫蜕膜中galectin-3基因mRNA和蛋白的表达，探讨其与滋养细胞浸润的关系。方法 采用半定量RT—PCR和Western-blot分别对70例（分为7个孕周组，每组10例）正常早孕绒毛和蜕膜中gal-3mRNA和蛋白表达水平进行检测 结果 在整个孕早期绒毛和子宫蜕膜中均有gal-3基因表达，且在绒毛和蜕膜中随着孕周的增加其表达总体呈上升趋势，两者表达趋势一致。结论 gal-3基因在滋养细胞和蜕膜表达中随孕龄增长而呈上调趋势，提示该基因在调控早孕滋养细胞的浸润行为中起重要的作用。     

FAS蛋白在子痫前期胎盘中的表达及意义

目的检测子痫前期胎盘的FAS蛋白表达水平,探讨子痫前期的发病机制。方法采用免疫组织化学方法结合病理图像分析技术,定量分析10例正常妊娠组、17例轻度子痫前期组和13例重度子痫前期组胎盘FAS蛋白表达。结果 FAS蛋白主要表达与胎盘绒毛滋养细胞的胞膜及胞浆内。与正常妊娠组比较,子痫前期组胎盘FAS蛋白表达显著增加,轻度、重度子痫前期组比较,有显著性差异。结沦子痫前期患者胎盘滋养层细胞FAS蛋白表达增加可能是子痫前期的发病机制之一,从而为临床治疗子痫前期提供新的方向。     

紧密连接蛋白Occludin在早孕绒毛组织中的表达及其意义

背景：Occludin蛋白是否在人早孕期胚泡植入中发挥作用,目前尚不能确定。 目的：探讨紧密连接蛋白Occludin在早孕绒毛组织中的表达及意义。 方法：早孕的正常人流绒毛组织和稽留流产绒毛组织各30例,用半定量RT-PCR,Western blot和免疫组化表达等各方法验证紧密连接蛋白Occludin在各组绒毛组织中的表达。 结果与结论：紧密连接蛋白Occludin主要表达在于绒毛外的合体滋养细胞的胞浆,胞核和少许间质,细胞滋养细胞Occludin表达低。半定量RT-PCR,Western blot和免疫组化表达等各方法验证紧密连接蛋白Occludin在正常人流和稽留流产绒毛组织中均有表达,前者的表达低于后者,但差异无显著性意义(P > 0.05)。说明紧密连接蛋白Occludin在绒毛组织有表达,细胞滋养细胞Occludin低表达可能是细胞滋养细胞极性消失的原因之一,参与细胞滋养细胞浸润能力形成,但胚胎发育停滞并不单是细胞滋养细胞侵润能力不足引起。     

米非司酮对早孕绒毛滋养层细胞Bcl-2和caspase-3表达的影响

探讨米非司酮对人早孕绒毛滋养细胞中Bcl—2和caspase-3表达的影响及其在滋养细胞凋亡中的作用。方法：将105例自愿要求终止妊娠的早孕妇女随机分成两组，即米非司酮流产组(55例)及人工流产组(50例)。采用免疫组化染色方法检测早孕妇女的绒毛组织中Bcl—2和caspase-3的表达。结果：米非司酮组与人流组绒毛滋养细胞中Bcl—2的表达率分别为54．6％和88．0％；caspase-3的表达率分别为89．1％和42．0％。米非司酮组与人流组相比较绒毛滋养层细胞Bcl—2呈低表达(P＜0．01)，caspase-3呈高表达(P＜0．01)。结论：Bcl—2和caspase-3在米非司酮诱导的早孕绒毛滋养层细胞凋亡的信号传导中起关键作用。     

子痫前期患者胎盘上HO-2及TNF-α表达的研究

目的探讨妊娠高血压疾病子痫前期患者胎盘中HO-2及TNF-α表达及其与妊高病发病机制之间的关系。方法采用免疫组织化学方法测定24例子痫患者和24例正常妊娠妇女(对照组)胎盘中HO-2、TNF-α表达水平,并分析两者相关性。结果 1.HO-2主要表达于血管内皮细胞、平滑肌细胞胞浆及胞膜上、而滋养细胞及间质细胞中表达较少。且HO-2在轻度及重度子痫前期患者表达均低于正常妊娠妇女,两者分别与正常晚孕组比较,轻度子痫前期与正常对照组相比差别无显著性,而重度子痫前期与正常对照组比较,差别有显著性。2.TNF-α主要表达于滋养细胞、血管内皮细胞胞膜中,而间质细胞内表达最少。且TNF-α在轻度及重度子痫前期患者表达均低于正常妊娠妇女,两者分别与正常晚孕组比较,差别均有显著性。3.正常组、PIH组HO-2及TNF-α存在负相关关系(r=-0.536、-0.574)。结论 HO-2可能是胎盘血管内皮细胞的保护性因素,而TNF-α可能引起胎盘血管内皮细胞损伤,可导致血管调节因子失衡,两者存在负相关关系,在妊高病发病过程中起一定作用。     

胎盘生长因子及受体在妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘中的表达及其意义

目的探讨胎盘生长因子(PLGF)及受体(F lt-1)在妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学方法测定30例妊娠肝内胆汁淤积症患者(ICP组)和30例正常晚期妊娠妇女(对照组)的胎盘组织及8例早孕绒毛组织中PLGF及F lt-1的表达。同时还用抗FⅧRA抗体标记ICP组和对照组孕妇胎盘中的血管密度。结果PLGF及F lt-1在早孕绒毛中主要分布于滋养叶细胞,在ICP患者和对照组胎盘中分布基本一致,主要分布于合体滋养细胞、细胞滋养细胞、血管内皮细胞和绒毛间质细胞。在ICP胎盘中PLGF、F lt-1表达强度及胎盘血管密度均明显低于对照组(P<0.01)。相关分析显示,胎盘组织中PLGF表达强度与胎盘血管密度呈正相关。结论妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘PLGF及F lt-1表达下降与胎盘滋养叶细胞侵入异常、胎盘血管形成异常、胎盘血管密度降低有关,可能是ICP胎儿妊娠结局不良的原因。     

HBV感染孕妇胎盘绒毛Hofbauer细胞并与HBV复制水平有关

目的探讨胎盘Hofbauer细胞在乙型肝炎病毒(HBV)垂直传播中的作用。方法以酶消化法、机械法、FicollHypaque分离法等多种方法分离纯化HBV感染孕妇流产绒毛Hofbauer细胞,CD163免疫组织化学染色鉴定Hofbauer细胞,PCR法检测绒毛Hofbauer细胞内HBV-DNA,实时定量PCR(qRT-PCR)检测Hofbauer细胞内CD16(FcγRⅢ)mRNA表达,免疫组织化学染色检测Hofbauer细胞CD16蛋白表达。结果 HBV感染孕妇流产绒毛Hofbauer细胞内HBV-DNA阳性率为31.67%(19/60),其中乙型肝炎e抗原阳性(HBe Ag+)和HBe Ag-孕妇绒毛Hofbauer细胞内HBV-DNA阳性率分别为46.4%(13/28)和18.75%(6/32)。qRT-PCR检测发现在HBV-DNA+的Hofbauer细胞内CD16 mRNA表达增加,其表达水平与HBV-DNA载量明显相关。免疫组织化学染色显示HBV-DNA+患者Hofbauer细胞胞膜和胞质CD16着色较HBV-DNA-者明显增强。结论 Hofbauer细胞作为胎盘巨噬细胞可被HBV感染,其感染率与体内病毒复制水平密切相关。     

晚期正常妊娠和子痫前期胎盘中组织蛋白酶B的表达

目的探讨组织蛋白酶B(cathepsin B)在晚期妊娠胎盘绒毛的表达及在子痫前期发病中可能的作用。方法分别取正常足月胎盘36例和子痫前期胎盘30例,免疫组化方法检测胎盘绒毛cathepsin B的表达情况,同时观察胎盘组织的病理变化。结果 cathepsin B在晚期妊娠胎盘绒毛细胞滋养细胞的细胞质中有高表达。正常足月胎盘cathepsin B表达阴性(-)1例(2.7%),弱阳性(+)16例(43.2%),阳性(～)20例(54.1%);子痫前期胎盘cathepsin B表达阴性(-)5例(16.7%),弱阳性(+)16例(53.3%),阳性(～)9例(30.0%),cathepsin B在子痫前期胎盘阴性率表达较正常足月胎盘高,而阳性率表达较低,两组比较差异有显著性(P0.05);结论cathepsin B在晚期妊娠胎盘中仍然有高表达,cathepsin B在正常足月妊娠和子痫前期胎盘表达的差异提示cathepsin B不仅参与了正常妊娠的维持,cathepsin B表达降低导致的滋养细胞侵袭能力下降,可能与子痫前期的发病有关。     

TGFβ1在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGFβ1)在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其临床意义。方法选取2010年10月至2011年12月在广州医学院第二附属医院和广州医学院第三附属医院产科住院的子痫前期患者30例,其中足月妊娠9例,未足月妊娠21例;对照组选取同期住院分娩的正常足月妊娠孕妇30例(对照组)。采用HE染色和免疫组化SP法检测子痫前期患者和正常孕妇胎盘的组织学变化和其TGFβ1的表达。结果子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞及蜕膜细胞TGFβ1的阳性表达率为86.67%,明显高于对照组36.60%,P<0.01;TGFβ1的表达与胎盘重量及新生儿体重呈负相关。结论胎盘TGFβ1表达异常引起滋养细胞浸润不足,可能是子痫前期的发病因素之一。     

HBV感染胎盘乳腺癌耐药蛋白的表达及意义

目的探讨乳腺癌耐药蛋白在HBV感染胎盘组织中的表达及其意义。方法选取HBV感染足月胎盘20例;选择无HBV感染足月胎盘20例作为正常对照组。实时荧光定量RT-PCR分别检测两组胎盘中ABCG2mRNA的表达。蛋白免疫印迹法分别检测两组胎盘中乳腺癌耐药蛋白的表达。结果各组荧光定量PCR检测ABCG2 mRNA的相对表达量为乙肝组(0.424±0.358),正常组(0.144±0.116),两组相比,差异有显著性(P0.005)。蛋白免疫印迹法检测乳腺癌耐药蛋白表达量为乙肝组(0.4250±0.3106),正常组(0.1129±0.1045),两组相比,差异有显著性(P0.001)。结论乳腺癌耐药蛋白在HBV感染胎盘组织中表达的升高,可能与乙型肝炎病毒感染有关。     

HBV感染孕妇胎盘绒毛Hofbauer细胞并与HBV复制水平有关北大核心CSCD

目的探讨胎盘Hofbauer细胞在乙型肝炎病毒(HBV)垂直传播中的作用。方法以酶消化法、机械法、FicollHypaque分离法等多种方法分离纯化HBV感染孕妇流产绒毛Hofbauer细胞,CD163免疫组织化学染色鉴定Hofbauer细胞,PCR法检测绒毛Hofbauer细胞内HBV-DNA,实时定量PCR(qRT-PCR)检测Hofbauer细胞内CD16(FcγRⅢ)mRNA表达,免疫组织化学染色检测Hofbauer细胞CD16蛋白表达。结果 HBV感染孕妇流产绒毛Hofbauer细胞内HBV-DNA阳性率为31.67%(19/60),其中乙型肝炎e抗原阳性(HBe Ag+)和HBe Ag-孕妇绒毛Hofbauer细胞内HBV-DNA阳性率分别为46.4%(13/28)和18.75%(6/32)。qRT-PCR检测发现在HBV-DNA+的Hofbauer细胞内CD16 mRNA表达增加,其表达水平与HBV-DNA载量明显相关。免疫组织化学染色显示HBV-DNA+患者Hofbauer细胞胞膜和胞质CD16着色较HBV-DNA-者明显增强。结论 Hofbauer细胞作为胎盘巨噬细胞可被HBV感染,其感染率与体内病毒复制水平密切相关。     

肾上腺髓质素和内皮素-1在妊娠高血压疾病患者胎盘绒毛组织中表达的研究

目的研究胎盘绒毛组织肾上腺髓质素(ADM)和内皮素-1(ET-1)在妊娠高血压疾病发病中的作用。方法用免疫组化法检测ADM和ET-1在正常晚孕妇女(20例)和妊娠高血压疾病患者(60例)胎盘绒毛膜组织中的表达情况,结果用计算机软件分析处理。结果ADM和ET-1在胎盘绒毛组织合体滋养细胞和毛细血管内皮细胞中均有表达,位于胞浆和胞膜。与正常晚孕期胎盘组织相比,妊高征患者组织中ADM平均灰度值增高,而ET-1平均灰度值降低(113.45±3.24vers 131.55±5.68,135.48±3.21 vers 119.05±5.41,P<0.05);随着妊高征病情加重,ADM增高和ET-1降低的幅度更加显著,轻、重度子痫前期组患者胎盘组织中ADM平均灰度值高于妊娠高血压组,而ET-1平均灰度值低于妊娠高血压组(135.48±4.96,141.52±5.37 vers 117.64±5.36;116.64±6.75,109.27±4.98 vers 131.24±4.39,P<0.05),而轻、重度子痫前期组之间比较无显著性差异(P>0.05)。结论胎盘绒毛组织ADM表达减弱,ET-1表达增强可能在妊娠期高血压疾病发病中起重要作用。