HPV6,11型女性生殖器尖锐湿疣和乳头瘤样增生中的分布

从３４２名上海地区患者的外阴、阴道和宫颈的病变部，采集４８７你活检标本。５种病理诊断类型，经斑点杂交法检测，ＨＰＶ６、１１ＮＤＡ部队性率：尖锐湿疣８５％、乳头瘤样增生１０．１０％、慢性宫颈炎７．１４％、鳞状上皮增生５％、生殖器正常粘膜２．６５％。５１例尖锐湿疣和１０例乳头瘤样增生，ＨＰＶ６、１１＋１１感染阳性率分别为：１５．５９％、２５．４９％、５８．８２％和２０％、３０％、５０％。Ｓｏｕｔｈｅｒ     

地高辛配基人乳头瘤病毒DNA探针的制备和应用

采用非同位素标记物地高辛配基（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ），通过随机引物法制成地高辛配基人乳头瘤病毒ＤＮＡ（Ｄｉｇ－ＨＰＶＤＮＡ）探针。用斑点杂交法检测宫颈组织中的ＨＰＶＤＮＡ。经试验证明，该探针检测ＨＰＶＤＮＡ的灵敏度与（３２）Ｐ－ＨＰＶＤＮＡ探针相近。经与（３２）Ｐ－ＨＰＶＤＮＡ探针同时对６５份临床标本进行比较，结果附合率达９５％以上。３５份宫颈癌组织中ＨＰＶ１６／１８型检出率为３４．２９％。Ｄｉｇ标记的探针检测ＨＰＶＤＮＡ特异性高，重复性好，背景显色低。     

从尖锐湿疣中克隆人乳头瘤病毒基因组的初步研究

为了探讨人乳头瘤病毒在重庆地区尖锐湿疣组织中的存在情况,本实验将数个尖锐湿疣标本DNA混合抽提7～9kb DNA片段,并使之与pUC19载体相连。然后利用快速细胞破碎法及α-互补原理筛选重组子,以HPV6b DNA为探针进行斑点杂交,获得pHPV-CA阳性克隆。以HPV-CADNA为探针与尖锐湿疣DNA进行Southern印渍杂交,结果显示HPV-CA在重庆地区尖锐湿疣组织中的存在具有普遍性,并发现HPV-CA以游离形式存在于宿主细胞中。     

重组人乳头瘤病毒6型病毒样颗粒的免疫原性分析

目的　研究重组人乳头瘤病毒 6型 (humanpapillomavirustype 6 ,HPV 6 )病毒样颗粒(virus likeparticle ,VLP)的免疫原性。方法　重组杆状病毒在昆虫细胞中表达制备的HPV 6L1VLP(L1 VLP)和HPV 6L1+L2VLP(L1+2 VLP)经鉴定后 ,用于免疫BALB/c小鼠 ,对诱导的体液免疫和细胞免疫反应进行了检测。结果　电镜观察显示L1 VLP和L1+2 VLP二者形态上无明显差异 ,为圆形颗粒 ,直径约 5 0nm ,SDS PAGE和Westernblot分析表明 ,L1+2 VLP中L1和L2蛋白摩尔比例为 4∶1。用ELISA法测定免疫小鼠血清抗体滴度 ,加佐剂L1 VLP免疫组和加佐剂L1+2 VLP免疫组血清针对HPV 6L1VLP的滴度在 1∶10 0 0 0以上 ,高于未加佐剂组免疫血清滴度 (1∶2 0 0 0 ) ,L1+2 VLP免疫诱导出了特异于L2抗原的抗体。血清抗体主要识别HPV 6构象依赖性抗原表位 ,与HPV 11抗原显示出一定的交叉反应 ,而与HPV 16无明显交叉反应。免疫小鼠脾淋巴细胞体外经HPV 6L1VLP再激活后出现了特异性增殖反应 ,3H TdR掺入值与未免疫组之间差异有显著性 (P <0 .0 1) ,L1 VLP和L1+2 VLP两组间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,L1 VLP和L1+2 VLP免疫组刺激指数 (SI)分别为 6 .4和 6 .2 ,阴性对照组SI为 1.1。HPV 6L1VLP再刺激特异地诱导免疫组脾淋巴细胞IL 2和IL 10分     

金华地区女性感染人乳头瘤病毒基因类型分析

目的：了解金华地区各年龄段与不同生殖道疾病女性感染人乳头瘤病毒（humanpa pilloma virus,HPV）基因类型分布状况,为金华地区HPV分子流行病学研究提供依据。方法：利用反向杂交技术分别对2006年1月～2007年12月来医院就诊的236例可疑患者进行23种HPV基因亚型检测,其中包括18种高危亚型（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4）及5种低危亚型（HPV6、11、42、43、44）。结果：HPV阳性检出率为13.6%（32/236）,其中高、低危型检出率分别为13.1%（31/236）与3.4%（8/236）,高危型中主要为HPV16、18、58感染,低危型主要为HPV6、11感染。不同生殖道疾病[尖锐湿疣、宫颈上皮内瘤变（CIN）]与正常对照组比较差异有显著性意义（P〈0.05）。（20～30）岁,（31～40）岁,（41～50）岁和〉50岁各年龄组中HPV阳性的比率为33.3%,38.5%,2.31%和5.1%。结论：HPV6、11、16、18、58是金华地区HPV感染的主要型别,（20～50）岁为感染的高峰人群,对HPV阳性者进行定期的跟踪,是防治尖锐湿疣与宫颈癌的重点。     

人乳头瘤病毒(HPV)感染与子宫颈癌的早期筛查

子宫颈癌是严重危害妇女健康的恶性肿瘤。人乳头瘤病毒(HPV)感染是诱发宫颈癌的直接原因,也是目前人类所有癌症中唯一病因明确的恶性肿瘤。我们用高危型HPV-DNA杂交捕获试验,对907例高危人群进行筛查,检出HPV-DNA阳性315例,并对阳性患者进行随访,自然转阴率为67%,阳性患者中,经阴道镜宫颈活检,病理诊断,发现宫颈癌3例。提示HPV-DNA定期筛查,发现异常情况早诊断早治疗是降低宫颈癌发生的关键。     

嘉兴地区女性感染人乳头瘤病毒基因亚型分析

目的:了解嘉兴地区妇女宫颈感染人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)基因型的分布情况,为嘉兴地区HPV亚型流行病学研究提供依据。方法:取妇女宫颈的脱落细胞,利用导流杂交基因芯片技术,对标本进行HPV分型检测,包括13种高危型、5种低危型和3种中国人群常见亚型。结果:933例标本经HPV分型检测,筛查出398例阳性,感染率42.66%。其中高危型327例,感染率35.05%;低危型272例,感染率29.15%:中国人群常见亚型26例,感染率2.78%。结论:嘉兴地区HPV感染率较高,HPV6、11、16、58是嘉兴地区HPV感染的主要亚型。了解HPV亚型的分布特点对流行病学的调查,降低HPV相关肿瘤的发生和特异性疫苗的研制都有重要意义。     

人乳头瘤病毒基因型在湘潭地区女性下生殖道感染中的分布特点

了解人乳头瘤病毒(HPV)基因型在本地区女性下生殖道感染的分布及特点.采用快速分子导流杂交分型技术对2009年5月至2010年6月间本院妇产科就诊的2682例女性进行生殖道21种HPV分型检测.结果显示:HPV阳性率为23.8%(639/2682),21种HPV亚型均有检出,其中单一型感染率为18.3%(490/268...     

HPV mRNA检测在宫颈癌诊断中的研究

根据国际癌症研究机构(IARC)报道,仅在2012年全世界就有超过25万女性死于宫颈癌,这是女性相关癌症的第四大死因[1].不管是生物学研究还是流行病学研究都已经证实宫颈癌与人乳头瘤病毒(HPV)感染息息相关[2]l.单独的HPV感染可能会引起大约5％的病毒相关的癌症发生,但是却是宫颈癌发病的全部因素[3].目前已经有120多种不同基因型的HPV,根据其临床表现可分为低风险型和高风险型,然而只有少数的HPV能够导致癌症的发生[4].本文就HPV致宫颈癌的发生和HPV的实验室检查以及HPV mRNA的相关进展做一些简要论述.     

13452例HPV亚型感染检测结果分析

目的通过对13452例人乳头瘤病毒(HPV)亚型感染检测结果的分析,了解检测样本的HPV感染状况及年龄分布特点。方法采用导流杂交技术检测21种HPV亚型,包括14种高危型和7种低危型HPV,分析受检妇女中常见的HPV亚型感染及分布规律。结果 HPV亚型感染总阳性率为36.98%,21种亚型被检出。高危型以HPV16最为常见,低危型最常见为HPV53。HPV多重感染比例为24.08%,以二重感染最为多见。结论 13452例受检妇女HPV亚型感染总阳性率为36.98%,常见的3种高危型为HPV16、HPV58、HPV52,2种低危型为HPV53和HPVcp8304。19～29岁年龄组,≥60岁年龄组的HPV亚型感染阳性率和HPV多重感染阳性率表现出较弱的高峰,HPV多重感染以二重感染最多见。     

Cloning of E6 and E7 Genes of Human Papilloma Virus Type 18 and Transformation Potential of E7 Gene and its Mutants

E6 and E7 genes of human papilloma virus type 18 have been subcloned from plasmid pC7, carrying an insert of DNA from squamous cell carcinoma of cervix. Both genes in comparison to prototype variant contain one mutation that changes asparagine to leucine. In the case of E6 gene this mutation is mapped in codon 129, in the case of E7 the same change AAC to AAA mapped in codon 92. In addition both genes contain few point mutations that do not change the aminoacid sequences of the protein. Two mutants of E7 gene have been constructed by site directed mutagenesis based on PCR technology—one in codon 10 (change Asp to Asn) and one in codon 24 (change Asp to Gly). The first type of mutation did not influence the transformation potential of the E7 gene in comparison to the parental one with mutation in codon 92. The mutation in codon 24 (region responsible for the interaction with Rb protein) eliminate the transformation potential of the gene. The cells transformed with E7 mutants in codons 10 and 92 were tumorigenic for syngenic rats.     

人乳头瘤病毒HPV6b重组减毒沙门菌粘膜免疫的效果测定

为观察人乳头瘤病毒 6b型 (HPV6b )的重组减毒沙门菌载体疫苗粘膜免疫小鼠的免疫效果及探讨研制治疗尖锐湿疣的治疗性粘膜疫苗的机制 ,我们用构建的HPV6b重组减毒沙门菌粘膜免疫BALB/c小鼠 ,检测了阴道冲洗液中特异的SIgA、血清中IgG、T淋巴细胞增殖以及载体疫苗在机体内的稳定性。结果表明 ,粘膜免疫后 ,实验组与对照组相比较 ,阴道冲洗液中抗HPV6bL1的SIgA差异显著 ,实验组血清中抗HPV6bL1IgG水平低 ,T淋巴细胞增殖明显 ,疫苗在小鼠体内持续存在4 0d以上。研究结果提示我们所构建的重组减毒沙门菌粘膜免疫小鼠后 ,阴道粘膜局部能分泌特异的抗人乳头瘤病毒HPV6bSIgA ,也能激发细胞免疫 ,且此疫苗在小鼠体内能稳定存在。     

TCT技术与HPV分型技术在子宫颈病变筛查中的应用价值

为探讨液基薄层细胞检测法（TCT）与人乳头状瘤病毒（HPV）分型检测在子宫颈病变筛查中的应用价值,对18534例妇科宫颈刷检标本进行TCT检测,其中257例标本采用导流杂交技术（FTH）检测HPV分型。结果表明,257例标本中,108例HPV病毒检测结果为阳性（阳性率42.1%）,包括93例高危亚型感染,15例低危亚型感染,20例感染两种以上HPV亚型,149例HPV为阴性（57.9%）。HPV是诱发女性宫颈癌及生殖器病变的主要病源。TCT检测技术联合HPV分型应用于宫颈癌早期防治以及确诊子宫颈病变具有着重要意义。     

地高辛标记探针原位杂交检测肝内HDV RNA

本研究采用随机引物法用地高辛标记ＨＤＶ　ｃＤＮＡ全基因片段作为探针，通过原位杂交方法检测了５８例慢性乙型肝炎患者的肝组织石蜡切片中的ＨＤＶ　ＲＮＡ，发现ＨＤＶ　ＲＮＡ阳性者９例，检出率为１５．５％。ＨＤＶ　ＲＮＡ阳性物质在肝细胞内的分布方式有胞浆型、核膜型、核仁型、核膜核仁型和全核型等。ＨＤＶ　ＲＮＡ阳性肝细胞在显微镜下多数正常或只显示轻微病变。本文结果提示ＨＤＶ的致病性并非由于ＨＤＶ的直接细胞毒作用，而是宿主细胞和病毒共同作用结果，但其确切生物学意义还有待进一步探索。     

广东登革3型病毒株的分离培养和鉴定

目的对2009年发生于广东地区的3例家庭聚集性登革热患者血清进行登革病毒的鉴定和病毒株的培养分离。方法用胶体金法检测患者血清中登革病毒特异性IgM、IgG抗体;C6／36细胞培养患者血清中登革病毒;RT—PCR扩增C．PrM基因序列的片段以检测患者血清中登革病毒RNA,PCR产物经序列测定后进行生物信息学分析。结果3例患者血清学检测均为登革病毒特异性IgM阳性、IgG阴性;特异性RT—PCR产物长约290bp,经琼脂糖电泳和测序分析,证实3例患者血清中均存在登革3型病毒;从1例患者血清中培养分离到了登革病毒株,经RT—PCR和测序证实为登革3型病毒。结论2009年发生于广东地区的3例登革热患者经病毒培养和分子生物学鉴定,证实均为登革3型病毒感染。