ELISA试验操作过程中应注意的两个问题

在传染病防治工作中，应用最多的实验室诊断方法是血清学试验。血清学试验是基于抗原抗体结合的高度特异性原理，用已知抗体检测抗原，或用已知抗原检测抗体的方法。目前，血清学试验的最常用方法是酶联免疫吸附试验（ELISA法），用ELISA法进行血清学试验，操作过程中有一些易被人们忽视但对试验结果会产生直接影响的问题，应引起检验人员注意。[第一段]     

从红细胞上提取抗体的方法及其应用

红细胞表面吸附的抗体能够用几种方法检测出来,如直接抗球蛋白试验等。但是,为了确定抗体的血清学特性,必须先提取它,然后用已知抗原成分的红细胞来检测。这在免疫学方面,研究红细胞表面的血型抗原及研究和诊断某些血液病,常常必不可少。从致敏红细胞表面提取抗体的方法,最早     

定性免疫测定的试剂性能评价方法

检测病原体感染的定性免疫测定方法根据其检测目的物可分为两类,第一类直接检测病原体的抗原,可以直接反映病原体感染;第二类检测机体对病原体的免疫应答所产生的抗体等替代性标志物,可以间接反映病原体感染[1].检测感染性疾病的抗原和抗体有多重作用,包括健康人群中病原携带者与亚临床感染患者的筛查、疾病进程的监视、流行病学研究、治疗有效性的评价及对药物耐受的监测等.定性检测通常只提供两种反应结果(如阳性/阴性、是/否、有反应性/无反应性等),检测结果是否准确常常会影响临床医师对疾病的诊断及是否能尽早采取适当的治疗措施.因此,定性免疫测定方法必须准确、简便,并且能够及时提供检测结果[2].     

两种结核分枝杆菌抗原在结核病血清学诊断中应用价值的比较

目的研究结核分枝杆菌脂多糖抗原(LAM)和结核分枝杆菌重组38KD蛋白抗原(r38KD)在结核病血清学检测中的效果,探索更有价值的结核血清学诊断方法。方法应用酶联免疫吸附试验对100例结核病患者血清、100例健康人血清中的抗结核抗体进行检测,并对检测结果进行统计分析。结果结核组中抗LAM抗体和抗38KD抗体均显著高于非结核对照组(P0.05),且两种抗原对结核病检测具有互补性。结论将LAM和38KD两种不同的结核分枝抗原进行组合可提高检测的特异度,有利于结核病的血清学诊断。     

用同时检测血清中伤寒杆菌抗原和抗体的对流免疫电泳法进行伤寒的早期快速诊断

血清学诊断试验有助于诊断恢复期伤寒,由于急性期病人血清尚不存在相当滴度的扰体,所以很难作出早期诊断.作者介绍了一种同时检测血清中伤寒杆菌抗原和抗体的对流免疫电泳方法,能早期、快速诊断伤寒.方法 (1)CIE试验抗原:用伤寒杆菌对照菌株的超声波溶解产物经离心后作抗原,取已知滴度的抗血清滴定,确定最佳抗原稀释度.(2)CIE试验抗血清:制备抗伤寒杆菌血清,用付伤寒杆菌A和大肠杆菌E广泛吸收,取标准的伤寒杆菌超声波溶解抗原滴定,确定最佳抗血清稀释度.(3)CIE试验:按照Fossieck等人方法加以改进,即缓     

性病患者携带多种病原体的统计分析

为了摸清性病患者携带病原体的规律,做好性病的防治工作,对近期来我院就诊患者的部分资料进行了统计分析,现将结果报告如下:1内容与方法1.1诊断方法完全按照国家性病诊断标准进行诊断。1.2病原体检验方法淋球菌、霉菌、杜克雷氏嗜血杆菌,采用革兰氏染色后镜检法:梅毒螺旋体采用UST法(上海荣昌试剂厂生产)定性,用TPPA法确认;支原体检测抗原用培养法,检测抗体用金标法;衣原体检测抗原用进口的美国试剂合方法,检测抗体用金标法;HIV抗体用进口的试剂金标法检测。2统计结果经对检验确定的病原体携带情况进行的统计,感染单种病原体患者的结果…     

小儿肺炎支原体血清学与病原学检测的对比分析

肺炎支原体(MP)是小儿呼吸道感染的重要病原之一.肺炎支原体分为血清学检测和病原学检测,血清学检测有两种方法,一种是特异性IgM、IgG及IgA抗体及分泌型IgA抗体,另一种是非特异性抗体,即与支原体无直接关联的抗原的抗体,如冷凝集抗体IgM,病原学检测主要是用荧光定量(FQ-PCR)法,该方法特异性强,敏感性高.     

血型基因型分析用于提高红细胞试剂的质量

背景和目标作为抗体检测用试剂的红细胞应该表达一定的重要抗原,并且是双倍剂量的,也就是说,供者相应的等位基因必须是纯合子。传统意义上讲,剂量测定是通过血清学定型及已知等位基因的频率来进行的。然而,由于对偶抗原的缺失,致使RHD接合子型不能通过血清学来预测。而且FY接合     

呼吸系统感染性疾病快速诊断技术的应用

目的为临床提供快速准确的呼吸道常见感染性疾病病因诊断依据，以便尽快诊断、正确治疗、预防传播，协助临床排除SARS(严重急性呼吸综合征)及禽流感诊断。方法用酶免疫方法对呼吸道感染病人鼻咽喉分泌物、血清及尿液标本进行检测，得到A群链球菌抗原、流感病毒A型和B型抗原、呼吸道合胞病毒抗原、肺炎支原体抗体IgM、嗜肺军团菌I型抗原的定性结果。每项试验操作简单并可在30min内完成。结果一年半时间共检测来自879位病人的1152份标本，阳性结果共124个，总感染率为14．1％。A群链球菌抗原检测标本446份，阳性率为11．9％；流感病毒A型和B型抗原266份，阳性率为11．7％；呼吸道合胞病毒抗原116份，阳性率为21．6%；肺炎支原体抗体227份，阳性率为5．3％、嗜肺军团菌1型抗原97份，阳性率为3．1％。SARS流行期间这五种病原体的感染率为20．2％，阳性结果中未发现一例SARS病人。SARS流行前一年多的时间里所检测病原体感染率仅为12．0%。结论采用酶免疫法检测呼吸道病原体，结果快速可靠，为临床提供了早期诊断和正确治疗的依据，可以尽早有效地排除SARS诊断，并减少抗生素滥用现象。     

56例梅毒感染者病原与血清学试验结果分析

梅毒螺旋体(TP)是引起性传播疾病梅毒的病原体。梅毒的诊断依据病史、症状、体征、暗视野显微镜检查TP和血清学试验。血清学试验包括非特异性类脂质抗原试验即以心磷脂等为抗原,检查患者血清中的反应素,如RPR,TRU ST等,常用作筛查试验;另一种为TP抗原试验,即以纯化TP抗原检测特