抑制hIAP-2在MCF-7乳腺癌细胞中的表达增强抗肿瘤药物的抑癌作用

目的探讨抑制hIAP-2在MCF-7乳腺癌细胞中的表达增强对肿瘤化疗药物抑癌作用的影响。方法采用MTT法检测mU6/hIAP-2质粒与多种常规肿瘤化疗药物对乳腺癌MCF-7细胞增殖的联合作用。结果比较单纯化疗药物作用组的各相应浓度点,siRNA表达质粒mU6/hIAP-2与化疗药物顺铂、环磷酰胺或5-氟尿嘧啶合用组对乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖抑制率均明显提高,差异有统计学意义(P<0.01),但与秋水仙碱合用组对乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖抑制率明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);对靶向DNA药物如顺铂、环磷酰胺和5-氟尿嘧啶的抗癌性能具有协同增强作用(二者合用效应Q值均≥1),但对靶向微管的药物秋水仙碱具有拮抗作用(Q值<1)。结论在敲除乳腺癌细胞中人凋亡抑制蛋白-2功能的基础上进行药物化疗,可能是乳腺癌治疗的一个新的可行方向。     

Thr187磷酸化p27kip1与人乳腺癌MCF-7细胞化疗敏感性的关系

目的探讨人乳腺癌MCF-7细胞中第187位苏氨酸（Thr187）磷酸化的细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p27kip1（P-p27Thr187）与化疗药物敏感性的关系。方法人乳腺癌MCF-7细胞常规培养,采用MTT法测定其对5种常用化疗药物[表柔比星（EPI）、多西他赛（DOC）、5-氟尿嘧啶（5-Fu）、环磷酰胺（CTX）、顺铂（CDDP）]的敏感性;采用Westernblot检测经化疗药物作用后P-p27Thr187、p27kip1表达水平;采用免疫共沉淀方法检测P-p27Thr187与S期激酶相关蛋白2（Skp2）相互结合情况。结果5种常用化疗药物对人乳腺癌MCF-7细胞均有抑制作用,5-Fu的抑制率随浓度增加而增高,而其他4种化疗药物的抑制率开始随浓度增加而增高,但达到理论最高药物浓度（PPC）后降低（均P＜0.01）;在PPC下作用48h,抑制率从大到小的化疗药物依次为EPI、DOC、5-Fu、CTX、CDDP。Westernblot结果显示化疗药物作用48h后,P-p27Thr187表达水平明显增加,以EPI、DOC增加最为明显（均P＜0.01）;p27kip1表达水平明显降低（均P＜0.01）。免疫共沉淀结果显示,经EPI0.25滋g/ml、DOC6.80滋g/ml作用48h后,P-p27Thr187与Skp2结合明显增加。结论P-p27Thr187与人乳腺癌MCF-7细胞化疗敏感性有关,可作为预测化疗敏感性及选择药物的一项新指标。     

hIAP-2 siRNA表达质粒的构建及其对乳腺癌细胞MCF-7的作用

目的:构建人凋亡抑制蛋白2(hIAP-2)基因的小分子干扰RNA(siRNA)的表达质粒,并检测其对乳腺癌细胞MCF-7的作用.方法:利用含U6启动子的mU6pro载体构建hIAP-2 siRNA表达质粒,RT-PCR和Western印迹法检验其对MCF-7细胞的RNA干扰(RNAi)效果.用MTT法分析其对细胞增殖,流式细胞仪检测其对细胞周期,以及Hoechst染色法观察其对细胞形态的影响.同时,用胱天蛋白酶-3(caspase-3) Ac-DEVD-pNA底物法检测caspase-3活性的变化,Western印迹法检测一些相关蛋白质的表达变化.结果:hIAP-2 siRNA表达质粒高效而特异地剔降MCF-7细胞中hIAP-2的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01),阻断MCF-7细胞在G1期.随着hIAP-2基因被沉默,MCF-7细胞变得多核化和巨核化,caspase-3酶原表达升高并被激活(P<0.01).此外,IκBα和p21waf1蛋白表达升高,NF-κB(p65)则降低,Cyt C维持不变.结论:RNA干扰hIAP-2对MCF-7细胞增殖和细胞周期调控有重要影响,细胞裂亡可能是导致其细胞死亡的主要原因,DNA受损后其细胞周期阻滞在G1期可能与上调p21waf1有关.     

维生素C与顺铂联合用药对人乳腺癌细胞MCF-7的杀伤作用及机制研究

目的探讨维生素C与顺铂联合用药对人乳腺癌细胞MCF-7的杀伤作用及机制。方法将不同浓度的维生素C和顺铂单独用药或联合加入对数生长期的人乳腺癌细胞MCF-7,以不加药同期培养的细胞作为对照组。采用四氮唑盐比色法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白[胱天蛋白酶3(caspase-3)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)]的表达。结果随着顺铂和维生素C(> 1 mmol/L)药物浓度升高,其对MCF-7细胞增殖的抑制率逐渐增大。1 mmol/L的维生素C与1. 25～10μg/m L的顺铂有协同效应。所有单独用药或联合用药组内高剂量用药后MCF-7细胞的凋亡率均明显高于对应低剂量用药,且维生素C和顺铂联合用药的MCF-7细胞凋亡率明显高于维生素C或顺铂单独用药。5μg/m L顺铂单独用药或与0. 5 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L维生素C联合用药后MCF-7细胞的促凋亡蛋白caspase-3表达增加,而凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达减少。结论维生素C和(或)顺铂可抑制MCF-7细胞增殖并促进其凋亡,且联合用药效果优于单独用药。维生素C对顺铂抑制MCF-7细胞增殖有增敏作用,顺铂和维生素C单独用药或联合诱导MCF-7细胞凋亡的机制可能通过促进caspase-3和抑制Bcl-2表达实现。     

SGC7901细胞对化疗药物的敏感性研究

目的 了解胃腺癌细胞株SGC7901细胞对不同化疗药物的敏感性,为临床选择化疗药物提供信息. 方法 分别用5氟尿嘧啶、阿霉素、顺铂、表阿霉素、丝裂霉素、环磷酰胺的常规用药峰浓度孵育SGC7901,采用MTT法,测量孵育前后细胞的吸光度,计算各化疗药物对SGC7901细胞的抑制率. 结果 在常规峰浓度时对SGC7901细胞的抑制率分别为: 5氟尿嘧啶57.4%、阿霉素56.4%、顺铂39.8%、表阿霉素38.0%、丝裂霉素92.2%、环磷酰胺15.0%. 结论 SGC7901对化疗药物的敏感性依次为丝裂霉素、5氟尿嘧啶、阿霉素、顺铂、表阿霉素及环磷酰胺.达到50%以上抑制率的药物只有丝裂霉素、5氟尿嘧啶、阿霉素.     

多西紫杉醇和顺铂联合用药对人乳腺癌MCF-7细胞hTERT及C-myc基因表达的影响

目的研究多西紫杉醇和顺铂联合应用对人乳腺癌MCF-7细胞的作用及其机制。方法MCF-7细胞传代培养后分组加药：第1组加入多西紫杉醇（多西紫杉醇组）；第2组加入顺铂（顺铂组）；第3组加入多西紫杉醇和顺铂（联合用药组）；对照组为未加药的MCF-7细胞。加药24、48、72 h后收集细胞，MTT法检测各组细胞生长抑制率，PCR-ELISA法检测各组细胞端粒酶活性，RT-PCR法检测端粒酶逆转录酶hTERT mRNA的表达，Western blot技术检测C-myc蛋白的表达。结果联合用药组人乳腺癌MCF-7细胞的生长和增殖受到明显抑制，多西紫杉醇联合顺铂对端粒酶活性、hTERT mRNA及转录调控基因C-myc表达的抑制呈明显的时效和效量相关性。结论多西紫杉醇和顺铂联合应用对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制具有协同加强作用，其机制可能是对MCF-7细胞的端粒酶活性及其端粒酶转录调控基因C-myc有较强的抑制作用。     

阿司匹林对MCF-7细胞uPA表达的影响

目的观察阿司匹林对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,探讨阿司匹林新的抗肿瘤作用机制。方法MTT法检测不同浓度的阿司匹林（2．5、5．0和10．0mmol／L）作用于人乳腺癌细胞株MCF-7不同时间（24、48和72h）的细胞增殖抑制率;应用Western blot检测阿司匹林对MCF-7乳腺癌细胞尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂（urokinase type plasminogen activator,uPA）表达。结果阿司匹林各剂量组细胞增殖抑制率随药物浓度的增加、作用时间的延长而提高（P〈0．01）;MCF-7细胞uPA的蛋白表达量随药物浓度的增加、作用时间的延长而降低。结论阿司匹林有抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖的作用,并且呈时间依赖性和剂量依赖性;阿司匹林可以抑制MCF-7细胞的uPA表达,这可能是阿司匹林抗乳腺癌的分子机制之一。     

化疗药物对舌癌细胞增殖能力的影响

目的：观察紫杉醇、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂4种化疗药物对舌鳞状细胞癌细胞增殖能力的影响,以指导临床合理用药,减少药物的副作用。 方法：收集手术切除的舌癌组织,制备单细胞悬液进行培养。选择紫杉醇、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂4种化疗药物进行药物敏感性实验,以不加药物为对照组,通过MTT比色法和流式细胞术法观察舌癌细胞增殖抑制率和细胞周期各时相的变化。 结果：紫杉醇、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶对舌癌细胞增殖抑制率分别为45.3%、37.3%和36.2%,明显高于对照组（2.1%）（P<0.01）;顺铂与对照组比较差异无显著性。流式细胞术测定结果显示,紫杉醇、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶组与对照组比较,其G₀/G₁期细胞增多,S期细胞减少,G₂/M期细胞相对增多(P<0.01）。结论：紫杉醇、丝裂霉素和5-氟尿嘧啶能明显抑制舌癌细胞的生长,临床上应优先考虑使用。     

紫杉醇联合顺铂对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖抑制作用及其机制

目的:研究紫杉醇联合顺铂对人乳腺癌细胞MCF-7增殖抑制作用,探讨药物作用过程中与MAPK通路?Bcl-2基因家族关系及相关机制?方法:采用CCK-8试剂盒检测不同浓度紫杉醇?顺铂单独或联合作用MCF-7细胞48 h后对细胞增殖的50%抑制浓度(IC50),以及紫杉醇?顺铂分别联合ERK通路阻断剂(U0126)?JNK通路阻断剂(sp600125)对细胞增殖的抑制率;采用流式细胞仪检测紫杉醇?顺铂作用细胞48 h后的细胞周期分布情况;应用Western blot分别检测紫杉醇?顺铂及两药联合作用MCF-7细胞48 h后MAPK通路蛋白及Bcl-2?Bax蛋白表达?结果:紫杉醇(0.025~0.400 μmol/L)?顺铂(1~16 μmol/L)联合作用细胞时呈协同作用(CI < 0.95)?sp600125对MCF-7细胞增殖具有明显的抑制作用,sp600125联合紫杉醇?顺铂的抑制作用强于紫杉醇?顺铂单独作用细胞时的抑制作用?两药联合时处于G2期的细胞较紫杉醇单独作用时减少,较顺铂单独作用增加?紫杉醇?顺铂联合作用细胞48 h后p-ERK?Bcl-2蛋白表达较两药单独作用时降低,p-JNK/SAPK?p-p38蛋白表达较对照组明显增加?结论:紫杉醇联合顺铂作用MCF-7细胞时具有协同作用,两药与JNK通路阻断剂联用时对细胞的抑制作用强于单独用药时?紫杉醇联合顺铂时可以减少细胞在G2/M期的积聚,同时可以激活JNK?p38通路,抑制ERK通路的激活?     

乳腺癌细胞药敏试验临床应用价值探讨

目的探讨采用组织块培养、终点染色、计算机图像分析法（TECTA）在乳腺癌化疗中的临床意义及应用价值。方法选用10种常用乳腺癌化疗药物及临床常用的五组联合化疗方案,我们TECIA对75例乳腺癌改良根治术标本,评估肿瘤细胞对化疗药物的敏感性及联合化疗方案选择的合理性。结果化疗药物对乳腺癌的杀伤作用具有较强的个体差异性,10种化疗药物的敏感性分别为5-氟尿嘧啶（5-Fu）33．3％、顺铂（DDP）37．5％、环磷酰胺（CTX）29．2％、足叶已甙（VP-16）16．7％、丝裂霉素（MMC）22．0％、表阿霉素（EPI）41．7％、诺维本（NVB）45．8％、阿霉素（ADM）41．7％、泰素（PTX）54．2％、氨甲喋呤（MTX）25．0％。五组联合化疗方案的敏感性分别为CAF：环鳞酰胺（CTX）＋阿霉素（ADM）＋5-氟尿嘧啶（5-FU）33．2％;CMF：环鳞酰胺（CTX）＋氨甲喋呤（MTX）＋5-氟尿嘧啶（5-FU）26．6％;TA：泰素（PTX）＋阿霉素（ADM）31．2％;NP诺维本（NVB）＋顺铂（DDP）45．2％;TP：泰素（PTX）＋顺铂（DDP）40．1％。结论体外肿瘤药敏试验在乳腺癌的临床用药及个体化化疗方面具有重要的指导意义,其检测结果与临床实际疗效具有良好相关性,可用于指导乳腺癌术后化疗。     

Survivin siRNA协同5-FU抑制MCF-7细胞的增殖

目的 研究以survivin为靶标的小干扰RNA（siRNA）与化疗药5-FU联合应用抑制MCF-7细胞增殖的作用。方法 利用T7RNA聚合酶体外转录合成siRNA并筛选出一条RNA干扰survivin基因的靶序列。以脂质体为载体,将survivin siRNA转染至人乳腺癌MCF-7细胞中,用四氮唑盐（MTT）法染色并计算siRNA联用5-FU对MCF-7细胞的抑制率,用SAS统计软件及金正均9值法进行统计分析。结果 单用5-FU处理细胞,其IC50为4．42μg／ml,而加入5nmoFLsiRNA后,其IC50降为1．18μg/ml,siRNA与5-FU联用对MCF-7细胞的抑制作用较单用5-FU明显增强（F=26．74,P〈0．01）;Q值分析表明survivin siRNA与中低浓度的5-FU联用,有较好的协同作用（0≥1．15）。结论 survivin siRNA可显著增强5-FU对MCF-7细胞增殖的抑制,提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,克服耐药性的产生。     

质粒介导靶向c-myc的siRNA对MCF-7乳腺癌细胞增殖的影响

目的观察靶向原癌基因c-myc的siRNA对MCF-7人乳腺癌细胞c-myc/c-Myc表达及细胞增殖的影响。方法以原癌基因c-myc mRNA 589-609位碱基为靶序列构建靶向c-myc的siRNA真核表达质粒p-Mat01-1及其错配质粒p-Mis09-1,空质粒pEGFP-C1为对照,用脂质体Lipo2000包裹转染MCF-7细胞。采用RT-PCR、Western blot检测c-myc mRNA及蛋白表达,MTT法检测MCF-7细胞增殖。结果与pEGFP-C1及p-Mis09-1比较,转染p-Mat01-1能够特异性抑制MCF-7细胞c-myc mRNA(24h:P<0.01)及蛋白(5d:P<0.01)表达,显著降低MCF-7细胞增殖能力(3d:P<0.05,5、7d:P<0.01)。结论采用siRNA表达质粒技术能够有效抑制MCF-7乳腺癌细胞c-myc/c-Myc表达,初步证实下调c-myc/c-Myc表达能够抑制MCF-7细胞增殖,为RNA干扰技术在乳腺癌生物治疗中的应用打下一定实验基础。     

硼替佐米联合表阿霉素对乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米单药及与表阿霉素联合应用对乳腺癌细胞生物学活性的影响。方法采用含10%小牛血清的RPMI-1640培养基培养MCF-7乳腺癌细胞,分别加入终浓度为0.01、0.10、1.00、5.00、10.00μg/mL的硼替佐米,终浓度为0.05、0.25、0.50、1.00、5.00μg/mL的表阿霉素,MTT法测细胞生长抑制率;选择药物浓度为0.10μg/mL硼替佐米+0.50μg/mL表阿霉素联合作用于MCF-7细胞,碘化丙啶(PI)染色法测细胞周期变化。结果单独应用硼替佐米可一定程度的抑制MCF-7细胞的生长,其抑制作用未呈现出明显的量效关系和时间效应关系,可使细胞大量停滞在G2-M期;表阿霉素单药对MCF-7细胞具有明显的抑制作用,并呈现出较明显的量效关系和时间效应关系,可使细胞大量停滞在S期;硼替佐米与表阿霉素联合应用时可以明显提高对MCF-7细胞的抑制作用,且在较低剂量和较短时间产生明显的抑制效果。结论硼替佐米与表阿霉素联合应用可增强表阿霉素的化疗敏感性,降低表阿霉素的使用剂量,为临床增强化疗效果、降低化疗不良反应提供了一定的依据。     

重组复合高效干扰素抗人乳腺癌细胞的体外实验研究

目的 了解重组复合高效干扰素(rSIFN-co)在体外抗乳腺癌细胞的作用,以及与抗肿瘤药物合用的协同抗肿瘤作用,并初步探讨其可能的作用机理.方法 采用MTT比色法和流式细胞仅技术,检测rSIFN-co、干扰素(干复津)、抗肿瘤药物(盐酸表柔比星),以及联合用药对人乳腺癌MCF-7细胞及人乳腺癌阿霉素耐药MCF-7/ADR细胞增殖、凋亡的影响,采用免疫组化SABC法检测经过各药物处理的MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞中P53、Bcl-2、CerbB-2蛋白的表达.结果 rSIFN-co对MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞均具有增殖抑制、促进凋亡作用,作用强于干复津,且有剂量依赖性及时间依赖性倾向;rSIFN-co与盐酸表柔比星联用具有协同增效的作用;rSIFN-co可下调MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞P53、CerbB-2蛋白及上调Bcl-2蛋白的表达水平.结论 rSIFN-co诱导MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞凋亡、抑制其增殖作用可能与下调肿瘤细胞P53、CerbB-2蛋白及上调Bcl-2蛋白的表达水平有关.     

多西他赛对乳腺癌细胞中Cav-1表达及细胞增殖的影响

目的 研究多西他赛对乳腺癌细胞中Cav-1(Cav-1)表达及细胞增殖的影响.方法 通过Real-time PCR和Western-blot检测不同浓度多西他赛作用下乳腺癌细胞MCF-7中Cav-1的表达情况;野生型MCF-7细胞株为对照组,通过基因转染技术建立Cav-1 过表达的MCF-7细胞株(转染组)及空载体的MCF-7细胞株(空载体组),利用CCK-8比色法分析多西他赛对各组细胞增殖的影响.通过Western-blot分别检测多西他赛作用下各组细胞中凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达情况以及PI3K/AKT 信号转导通路的活化情况.结果 在5~40 μg/mL浓度范围内,随着多西他赛作用浓度的增大,MCF-7细胞中Cav-1的蛋白表达量逐渐增加.不同浓度多西他赛对MCF-7细胞的增殖均有明显的抑制作用;在同一浓度多西他赛作用下,转染Cav-1组细胞的增殖抑制率明显高于对照组和空载体组(P<0.01).与对照组和空载体组相比,20 μg/mL多西他赛作用后转染组细胞中Bax的表达升高(P<0.01),而Bcl-2的表达降低(P<0.01),并且磷酸化AKT (p-AKT)蛋白的表达水平下降(P<0.01),而对照组和空载体组之间Bax、Bcl-2以及p-AKT蛋白的表达则无明显差异(P>0.05).结论 多西他赛可以通过促进Cav-1的表达影响PI3K/AKT 信号转导通路,进而调节凋亡相关蛋白的表达抑制MCF-7 细胞的增殖.     

吗啡对乳腺癌MCF-7细胞生存素及livin表达的影响

目的:探讨吗啡对人乳腺癌MCF-7细胞生存素(survivin)和livin的表达及细胞增殖与凋亡的影响。方法:人乳腺癌MCF-7细胞以1×103个/ml密度接种在6孔板内,随机分为对照组,0.1μmol/L吗啡组,1.0μmol/L吗啡组。于吗啡孵育24 h时,分别采用RT-PCR法和蛋白质印迹法测定细胞内生存素及livin mRNA及蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡改变;于吗啡孵育24,48及72 h时采用MTT法检测细胞增殖改变情况。结果:与对照组比较,0.1μmol/L吗啡组及1.0μmol/L吗啡组生存素和livin蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P<0.01),0.1μmol/L吗啡组及1.0μmol/L吗啡组细胞增殖降低而细胞凋亡增加(P<0.01)。结论:吗啡通过下调MCF-7细胞生存素和livin的表达,从而抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。     

pEgr1-TRAIL重组质粒联合电离辐射对乳腺癌MCF-7细胞死亡受体通路相关基因和蛋白表达的影响

目的: 将Egr1-TRAIL重组质粒转染人乳腺癌MCF-7细胞且加X线照射,探讨MCF-7细胞中死亡受体通路相关基因和蛋白表达的变化。方法: 将MCF-7细胞分为对照组、空质粒组、pEgr1-TRAIL质粒组、4.0GyX射线组、空质粒+4.0GyX射线组和pEgr1-TRAIL+4.0GyX射线组。Real-timePCR法检测各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6mRNA表达水平;Western blotting法检测各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白相对表达水平。结果: 经4.0GyX射线照射后4h,与对照组比较,各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6mRNA表达水平升高(P<0.01),8h达最高值,之后开始降低,到24h恢复到照射前水平;各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6mRNA表达由高到低的顺序为pEgr1-TRAIL+4.0GyX射线组> 空质粒+4.0GyX射线组> pEgr1-TRAIL质粒组> 空质粒组> 4.0GyX射线组> 对照组,其中pEgr1-TRAIL+4.0GyX射线组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6mRNA表达水平明显高于其他各组(P<0.01)。MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白在照射后6h开始表达,12h达高峰,48h后细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白表达水平仍高于6h时蛋白表达水平。与对照组比较,其他各组MCF-7细胞中蛋白相对表达水平由高到低的顺序为pEgr1-TRAIL+4.0GyX射线组> 空质粒+4.0GyX射线组> 4.0GyX射线组> pEgr1-TRAIL质粒组> 空质粒组> 对照组,其中pEgr1-TRAIL+4.0GyX射线组MCF-7细胞中蛋白相对表达水平明显高于其他各组。结论: pEgr1-TRAIL重组质粒联合放疗对MCF-7细胞具有杀伤和诱导凋亡的作用,其效果优于单纯质粒或单纯照射。     

Effects of Mitofusin-2 Gene on Cell Proliferation and Chemotherapy Sensitivity of MCF-7

In order to evaluate the effect of mitofusin-2 gene （mfn2） on proliferation and chemotherapy sensitivity of human breast carcinoma cell line MCF-7 in vitro, pEGFPmfn2 plasmid carrying full length of mitofusin-2 gene was transfected, by using sofast, into MCF-7 cells. Mitofusin-2 gene expression in MCF-7 cells transfected by sofast after 48 h was detected by PCR and Western blotting, and the stable expression of GFP protein in MCF-7 cells by Western blot analysis. The proliferation of MCF-7 cells was assayed by MTT and cell counting. By using PI method, the effects of mfn2 on the cell cycle distribution of MCF-7 were measured. Annexin-Ⅴ/PI double labeling method was employed to detect the changes in apoptosis induced by chemotherapeutics before and after transfection. The results showed that the MCF-7 cells transfected with mfn2 gene could stably and highly express GFP protein. MTT assay revealed that after transfection of mfn2 cDNA, the proliferation of MCF-7 cells was significantly inhibited. DNA histogram showed that cells arrested in S phase, and the percentage of S phase cells was 42.7, 17.2 and 19.6 in mfn2 cDNA transfection group, blank plasmid transfection group and blank control group, respectively （P〈0.05）. The apoptosis ratio of the cells transfected with mfn2 gene was increased from 3.56% to 15.95%, that of the cells treated with camptothecin （CAMP） followed by mfn2 gene transfection was 69.6%, and that in blank plasmid transfection group and blank control group was 31.0% and 23.4% respectively （P〈0.05）. It was suggested that transfection of mfn2 gene could significantly inhibit the proliferation of MCF-7 cells and promote their sensitivity to CAMP with a synergic effect.     

不同方式加热联合甲基莲心碱对耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞γH2AX及mdr-1/P-gp表达的影响

目的:检测不同模式加热联合甲基莲心碱(neferine,Nef)对耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞的增殖抑制及γH2AX和mdr-1/P-gp表达的影响.方法:采用MTT法检测金属模块加热、培养基加热、烤箱加热及水浴加热等不同模式加热联合10μg/mL Nef对经阿霉素培养的MCF-7/Adr细胞的增殖抑制,实时定量P...