RERG钾通道在大鼠肺泡巨噬细胞中的表达

目的:观察RERG钾通道在大鼠肺泡巨噬细胞中有无表达.方法:以大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383为研究对象,RT-PCR方法检测NR8383细胞膜rerg钾通道mRNA,并测序验证;免疫细胞化学方法检测NR8383细胞膜上RERG钾通道蛋白.结果:NR8383细胞中可以检测到rerg钾通道mR-NA,并经测序证实;NR8383细胞膜上可以检测到RERG蛋白.结论:从mRNA和蛋白水平证明RERG钾通道在大鼠肺泡巨噬细胞上有表达,为进一步探索RERG钾通道与肺泡巨噬细胞功能的关系提供了依据.     

人外周血淋巴细胞电压依赖性钾通道

目的:观察人外周血淋巴细胞膜上电压依赖性钾通道的特性.方法:膜片钳记录方法.结果:观察到该通道的最小激活电压为-38.6士2.1 mV.复极过程中通道关闭常数为109.25±8.5 ms,并可被10 mmol/L的TEA所阻断.结论:人外周血淋巴细胞膜上存在着电压依赖性钾电流,其特性与神经和肌肉细胞膜上的延迟整流性钾电流相类似.     

人外周血淋巴细胞电压依赖性钾通道电流的记录及其特性

目的：观察人外周血淋巴细胞膜上电压依赖性通道的特性，方法：膜片钳记录方法。结果：观察到该 最小激活电压为－３８．６±２．１ｍＶ。复极过程中通道关闭常数为１０９．２５±８．５ｍｓ，并可被１０ｍｍｏｌ／Ｌ的ＴＥＡ所阻断。结论：人外周血淋巴细胞膜上存在着电压依赖性钾电流，其特性与神经和肌肉细胞膜上的延迟整流性钾电流相类似。     

人外周血淋巴细胞电压依赖性钾通道电流的记录及其特性

目的：观察人外周血淋巴细胞膜上电压依赖性钾通道的特性。方法：膜片钳记录方法。结果：观察到该通道的最小激活电压为－38．6±2．1mV。复极过程中通道关闭常数为109．25±8．5ms,并可被10mmol／L的TEA所阻断。结论：人外周血淋巴细胞膜上存在着电压依整性钾电流,其物性与神经和肌肉细胞膜上的延迟整流性钾电流相类似。     

人外周血淋巴细胞膜电压依赖性钾通道特性分析及试分型

目的 :研究人淋巴细胞膜电压依赖性钾〔K(v)〕通道的特性 ,为某些疾病状态下该通道特性变化提供对照。并试观察该通道是否存在不同亚型。方法 :膜片钳全细胞电流记录方法。结果 :在记录到的 39个细胞中 ,K(v)通道的激活电压为 - (40 .3± 2 .5) m V,在重复去极化状态下通道无失活 ,复极过程中通道的关闭时间为 (116 .3± 8.2 ) ms,且通道电流可被 10 mmol/ L的四乙基铵 (TEA)所阻断。结论 :人外周淋巴细胞膜可能仅具有一种〔K(v)〕通道 ,其特性与鼠 n型〔K(v)〕通道基本一致。     

西地那非抑制低氧对人肺动脉平滑肌细胞电压依赖性钾通道的下调作用

目的探讨西地那非对低氧下调人肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)电压依赖性钾通道(voltage-dependent potassium channels,Kv)的干预作用。方法应用膜片钳技术记录PASMCs K+电流;观察低氧刺激前后钾离子(K+)电流的变化以及西地那非(sildenafil)的干预作用;通过特异性Kv1.5抗体透析,分析西地那非作用于人PASMCs Kv分子靶点即通道亚单位;运用Real-time PCR及Western blotting技术检测低氧刺激前后及西地那非对人PASMCs上的Kv1.5通道基因转录水平和蛋白表达水平的影响。结果低氧明显抑制了人PASMCs细胞膜上的全细胞K+电流;而西地那非则可以对抗低氧对全细胞K+电流的抑制作用;而且西地那非对低氧下人PASMCs Kv的调控作用靶点主要是Kv1.5;同时西地那非部分恢复了低氧抑制的细胞上的Kv1.5 mRNA和蛋白表达。结论西地那非能够抑制低氧对人肺动脉平滑肌细胞电压依赖性钾通道功能与表达的下调作用。     

电压依赖性钾通道与Miconazole在低氧性肺血管收缩中的作用

目的观察大鼠肺动脉平滑肌细胞(PaSMCs)膜上电压依赖性钾通道(Kv)与细胞色素P450氧化酶抑制剂Miconazole在低氧性肺血管收缩中的作用。方法采用急性酶分离法分离出大鼠肺动脉平滑肌细胞(PaSMCs),利用全细胞膜片钳技术记录PaSMCs的Kv通道的电流特性;用低氧液体灌流PaSMCs造成急性低氧模型,记录低氧作用前后Kv通道的电流变化;用不同浓度的Miconazole作用于PaSMCs,记录加药前后的电流变化。结果低氧液体灌流以及不同浓度的Miconazole对Kv均有明显的抑制作用,且Miconazole的抑制作用具有一定的浓度依赖性,在加用Kv的特异性的阻断剂4氨基吡啶(4AP)后再加用该药不能进一步抑制Kv电流。结论低氧和Miconazole均作用于Kv通道的同一部位,支持PaSMCs膜上的Kv通道在低氧性肺血管收缩中起重要作用,而细胞色素P450氧化酶可调节细胞内的氧化还原状态,可能系一重要的氧感受器。     

哮喘反应大鼠肺泡巨噬细胞产生IL-1增加

目的 :探讨哮喘反应大鼠肺泡巨噬细胞 (AM )产生白细胞介素 1(IL 1)的情况 ,明确IL 1在哮喘发病中的意义。方法 :用卵白蛋白致敏并激发大鼠 ,建立大鼠哮喘反应模型。致敏大鼠于激发后即刻、1h、4h和 16h行支气管肺泡灌洗 ,分离支气管肺泡灌洗液 (BALF)中AM ,在含或不含脂多糖 (LPS)条件下培养AM ,收集其上清液 ,用小鼠胸腺细胞增殖法测定AM上清液中IL 1活性。结果 :致敏大鼠在抗原激发后 1h和 4h的BALF中AM自发产生IL 1活性显著增加 (与对照组和即刻组相比 ,均P <0 .0 1) ;而LPS刺激后对照组和致敏大鼠抗原激发后不同时刻组间IL 1产生无明显差异 (均P >0 .0 5 )。结论 :哮喘反应大鼠AM在体内已被活化并释放IL 1增加。     

钾通道特性的研究进展

目的 介绍钾通道生理特性的研究进展。方法 根据钾通道生理特性及其与疾病关系的最新资料加以整理。结果 揭示不同离子通道的特性和作用，以及某些神经性疾病、心血管疾病的发生可能与离子通道的编码基因突变有密切关系。结论 由于大量各异的钾通道在脑内、心血管内丰富表达，但其所具有的作用大部分尚属未知，对于钾通道及其亚单位的研究还有待于进一步深入。     

Voltage-dependent K+-channel Responses during Activation and Damage in Alveolar Macrophages Induced by Quartz Particles

nflammatory response during damage and necrosis in AMs induced by exposure to quartz particle. K+ channels do not contribute to the membrane damage of AMs.     

肺癌患者肺泡巨噬细胞表现HLA-DR的表达

目的 了解肺癌患者肺泡巨噬细胞表面人白细胞抗原-DR(HLA-DR)的表达。方法 经支气管肺泡灌洗获肺泡巨噬细胞，贴壁分离及培养，免疫组化方法检测HLA-DR表达的阳性细胞百分率。结果 ① 肺癌及良性肺病患者，其肺泡巨噬细胞未经刺激，均已有部分表达HLA-DR，但前者明显高于后者；② 干扰素-α(IFN-α)或脂多糖(LPS)刺激后，HLA-DR的表达均增加，且两者联合刺激优于单独刺激；③ 无论刺激与否，肺癌组荷瘤侧肺与非荷瘤侧肺比较，肺泡巨噬细胞表达HLA-DR的阳性细胞率明显增高。结论 肺癌患者，尤其是肿瘤局部，肺泡巨噬细胞可能通过表达HLA-DR提高抗原递呈功能。IFN-α、LPS均能明显增强肺癌患者肺泡巨噬细胞的抗原提呈功能，且两者有协同作用。     

纳米氧化铈对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的增殖影响

目的：研究纳米氧化铈对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的毒性作用和对细胞的增殖影响;考察纳米氧化铈作用于细胞的生物效应是否存在剂量和粒径效应。方法：不同终浓度200、100、50、20、10、5、2.5、1.25、0.625μg/m L的20.8 nm Ce O2-NPs体外作用于96孔板中NR8383细胞24 h,采用CCK-8试剂盒检测细胞活力;四种粒径20nm、50-100 nm、300-500 nm、1-5μm Ce O2分别以四种终浓度100、50、20、10μg/m L作用于NR8383细胞24 h,采用CCK-8试剂盒检测检测细胞活力。结果：不同浓度20.8 nm Ce O2-NPs作用于NR8383细胞,与对照组相比,除1.25、2.5、5μg/m L外,其他浓度下细胞存活率随浓度增大而升高,100、200μg/m L最明显;有剂量效应。四种粒径四种浓度的纳米氧化铈作用于NR8383细胞,50-100 nm的20μg/m L浓度和1-5μm的50、10μg/m L浓度Ce O2-NPs抑制细胞增殖,但不明显;其他各组均促进细胞增殖,其中20 nm的20μg/m L,50-100 nm的50μg/m L、100μg/m L最明显。剂量尺寸效应不明显。结论：小粒径纳米氧化铈对NR8383细胞增殖有促进作用,无明显毒性;微米级氧化铈有些浓度下细胞存活率降低,可能对细胞造成毒性。     

地塞米松对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响

目的：通过研究地塞米松对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响,探讨地塞米松治疗急性肺损伤的作用机理。方法：健康雄性Wistar大鼠放血处死后全肺灌洗获取肺泡巨噬细胞（PAMs）,贴壁纯化,在预培养20h后重悬PAMs,分3组分别处理4h。正常对照（C）组：不做任何干预;脂多糖（LPS）组：按10μg／ml。的剂量加入LPS刺激;脂多糖加地塞米松（LPS＋Dex）组：将含Dex终浓度1×10mmol／L～1×6mmol／L的RPMI 1640培养基加入LPS。收集PAMs,与1％鸡红细胞悬液培育后制片,瑞氏染色观察并计算吞噬率和吞噬指数,对两者做相关回归分析并采用单因素方差分析比较组间差异。结果：各组AM的吞噬率和吞噬指数呈线性相关性关系．从高到低依次为：C组（12．50±2．07）％,2．29±0．08;LPS＋DeX组（8．25±1．67）％,1．73±0．18;LPS组（3．50±1．20）％,1．16±0．19;各组间的差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论：LPS可抑制体外培养PAMs的吞噬活性;Dex对LPS抑制的PAMS吞噬活性有一定的活化作用。     

764—3对大鼠肺泡巨噬细胞膜ConA受体的影响

用辣根过氧化物酶-胶体金标记技术(HRP-Gold),观察肺泡巨噬细胞(AM)膜刀豆素球蛋白受体(ConA-R)的变化。结果发现:正常大鼠肺泡巨噬细胞表面胶体金颗粒平均为1.985±0.097个/μm,分布较均匀;博来霉素A_6(BLMA_6)体外激活的AM表面金颗粒为3.909±0.314个/μm,与正常组比较差异显著,P<0.001;预先与764-3培养的AM,其表面金颗粒平均为1.577±0.090个/μm,较单纯BLMA_6组明显降低。提示764-3对BLMA_6激活的AM膜ConA-R表达有一定的抑制作用。     

博莱霉素致大鼠肺纤维化肺泡巨噬细胞氧化和抗氧化损伤的动态研究

动态观察了博莱霉素（ＢＬＭ）致大鼠肺纤维化过程中巨噬细胞氧化和抗氧化损伤的变化。结果表明：ＢＬＭ气管内灌注后肺泡巨噬细胞（ＡＭ）中ＭＤＡ含量第一天即明显增高，第三天达高峰，并明显高于对照组。同时，ＧＳＨ－Ｐｘ含量极低，于１４天、２８天逐渐上升始接近正常水平。认为ＡＭ脂质过氧化损伤在肺纤维化形成中发挥一定作用。     

大鼠急性酸损伤时肺泡内液体清除与钠通道关系

目的　制备盐酸吸入性急性肺损伤动物模型 ,研究肺泡内液体清除与肺泡上皮钠通道的关系。方法　6 0只大鼠分为对照组和钠通道阻滞剂组 ,分别向大鼠肺内滴注等渗酸溶液和 1× 10 -4mol/L的钠通道阻滞剂Benzamil,机械通气 1h后 ,测定其动脉血气、肺泡液体清除率。结果　肺泡液体清除率随着滴注液 pH值的降低而降低 ,当滴注液的 pH值 >2 .5时 ,Benzamil组的肺泡液体清除率和动脉血氧分压低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;当滴注液的 pH值≤ 2 .5时 ,Benzamil组的肺泡液体清除率和动脉血氧分压与对照组相似 (P >0 .0 5 )。 结论　钠通道抑制Benzamil通过抑制肺泡上皮对钠离子的主动吸收 ,从而抑制肺泡对液体清除。     

组胺拮抗剂在小鼠ATP-敏感性钾离子通道上的影响

目的：观察比较3种组胺拮抗剂对缺血性心肌细胞的ATP-敏感性钾离子通道中的影响。方法：利用急性酶解法分离小鼠心室肌细胞。结果：pyrilamine、chlorpheniramine及diphenhydramine均可抑制ATP-敏感性钾离子通道的活性,抑制程度为pyrilamine > chlorpheniramine > diphenhydramine。组胺对KATP通道活性无影响。结论：第一代的组胺拮抗剂（pyrilamine 、 chlorpheniramine 及 diphenhydramine）对KATP通道活性有抑制作用,其抑制作用与膜上H1受体无关。     

乙醇对大鼠延髓神经元钾离子通道活动的影响

在用急性机械分离法获得的新生大鼠延髓神经细胞上，用膜片钳技术的细胞贴附式方法，研究乙醇对大鼠延髓神经细胞膜延迟整流型钾离子通道（Ｉｋ）活动的影响．结果表明，低药理浓度的乙醇不抑制Ｉｋ通道的活动；高药理浓度乙醇对Ｉｋ通道的开放概率和平均开放时间等动力学特性均显示浓度相关的抑制作用．这可能是高浓度乙醇所致中枢神经系统损伤的重要机制之一．