Synphilin-1在帕金森病模型鼠脑内的表达

[目的] 利用动物模型探讨 Synphilin-1与帕金森病( PD)的关系以及 Synphilin-1反义寡核苷酸对 PD的可能的治疗作用.[方法] 50只 SD大鼠随机分成 5组,每组 10只,第 1组立体定向将 6-羟多巴注入右侧黑质制作 PD模型,术后每周用阿朴吗啡诱发旋转 30 min,至第 4周旋转大于 6次 /min者定为成功的 PD模型,第 2至第 4组利用立体定向将 Synphilin-1反义、同义、错义寡核苷酸分别注入到各组大鼠的右侧黑质,取成功的模型鼠的术侧中脑黑质利用免疫组化 (IH)、 Westernblot、原位杂交 (ISH)检测 Synphilin-1的表达,第五组注入生理盐水作为对照组.[结果] IH、 ISH Synphilin-1蛋白和 mRNA表达,与正常对照组比较, PD组显著增加,与 PD组比较,反义组表达显著下降. Western blot表明,与正常对照组比较, PD组 Synphilin-1表达量显著增多 45%,与 PD组比较,反义组 Synphilin-1表达量显著减少 50%.[结论] Synphilin-1的异常聚集可能是 PD的重要发病机制之一, Synphilin-1反义寡核苷酸可能对 PD具有治疗作用.     

Synphilin-1在帕金森病模型鼠脑内的表达

【目的】利用动物模型探讨Synphilin-1与帕金森病(PD)的关系以及Synphilin-1反义寡核苷酸对PD的可能的治疗作用。【方法】50只sD大鼠随机分成5组，每组10只，第1组立体定向将6-羟多巴注入右侧黑质制作PD模型，术后每周用阿朴吗啡诱发旋转30min，至第4周旋转大于6次／min者定为成功的PD模型，第2至第4组利用立体定向将Synphilin-1反义、同义、错义寡核苷酸分别注入到各组大鼠的右侧黑质，取成功的模型鼠的术侧中脑黑质利用免疫组化(IH)、Westemblot、原位杂交(ISH)检测Synphilin-1的表达，第五组注入生理盐水作为对照组。[结果]IH、ISH Synphilin-1蛋白和mRNA表达，与正常对照组比较，PD组显著增加，与PD组比较，反义组表达显著下降。Westernblot表明，与正常对照组比较，PD组Synphilin-1表达量显著增多45％，与PD组比较，反义组Synphilin-1表达量显著减少50％。【结论】Synphilin-1的异常聚集可能是PD的重要发病机制之一，Svnohilin-1反义寡核苷酸可能对PD具有治疗作用。     

Synphilin-1寡核苷酸对帕金森病caspase-8表达影响的实验研究

目的利用动物模型探讨Synphilin-1对帕金森病(PD)caspase-8蛋白表达的影响。方法50只SD大鼠随机分成5组,每组10只,第一组立体定向将6-羟多巴注入右侧黑质制作PD模型,术后每周用阿朴吗啡诱发旋转30 min,至第四周旋转大于6次/min者定为成功的PD模型,第二至第四组利用立体定向将Synphilin-1反义、同义、错义寡核苷酸分别注入到各组大鼠的右侧黑质,然后用与第一组相同的方法制作PD模型,第五组注入生理盐水作为对照组,取鼠的术侧中脑黑质利用免疫组化(IH)检测Synphilin-1,利用IH、原位杂交(ISH)检测caspase-8的表达。结果IH检测Synphilin-1蛋白,与正常对照组比较,PD组显著增加;IH、ISH检测caspase-8蛋白和mRNA表达,与正常对照组比较,PD组显著增多,与PD组比较,反义组表达显著减少。结论Synphilin-1在PD的重要发病机制之一可能通过影响caspase-8的表达来实现。     

Synphilin-1寡核苷酸对6-羟多巴胺诱导帕金森病大鼠黑质Caspase-3表达影响

目的 观察Synphilin-1寡核苷酸对6-羟多巴注(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)大鼠黑质Caspase-3蛋白表达的影响,从而探讨Synphilin-1在帕金森病发病机制中的作用.方法 Wistar大鼠60只随机分成5组,PD组、假手术组、反义组、正义组、错义组,每组12只大鼠.PD组立体定向将6-OHDA注入左侧黑质制作PD模型,反义组、正义组及错义组分别立体定向将反义、正义、错义寡核苷酸注入到各组鼠的左侧黑质,然后用与PD模型组相同的方法 注入6-OHDA,假手术组注入生理盐水作为对照.术后4周取大鼠的术侧中脑黑质,应用免疫组化方法 检测Synphilin-1及Caspase-3阳性细胞的表达.结果 与假手术组比较,PD组Synphilin-1、Caspase-3 阳性细胞表达显著增加(F=16.6、9.4,q=4.21、6.79,P<0.05、0.01);与PD组比较,反义组Synphilin-1、Caspase-3阳性细胞表达显著减少(q=5.43、 4.92,P<0.01);正义和错义组Synphilin-1、Caspase-3阳性细胞的表达与PD组比较未见明显差异(q=3.31、3.52,P>0.05).结论 Synphilin-1 反义寡核苷酸对6-OHDA诱导的PD大鼠旋转行为有明显的改善作用,提示Synphilin-1反义寡核苷酸对黑质神经元损伤具有保护作用,这种保护作用可能至少部分是通过调节Caspase-3 的表达来实现的.     

Synphilin-1 siRNA对6-OHDA诱导的帕金森病大鼠黑质神经保护作用的研究

目的:观察synphilin-1 siRNA对6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)大鼠黑质多巴胺能神经元保护作用,从而探讨synphilin-1siRNA在帕金森病治疗中潜在的应用价值.方法:40只Wistar大鼠随机分成4组,假手术组、模型组、siRNA组、siRNA对照组,每组10只.模型组立体定向将6-OHDA注入左侧黑质制作PD模型,siRNA组、siRNA对照组立体定向将synphilin-1siRNA、阴性对照synphilin-1 siRNA分别注入到各组大鼠的左侧黑质,然后用与第一组相同的方法注入6-OHDA,假手术组注入生理盐水作为对照组,术后2周用阿朴吗啡(APO)(0.5 mg/kg)诱发旋转,进行大鼠行为学检测.术后4周取大鼠的术侧中脑黑质利用免疫组化检测synphilin-1,酪氨酸羟化酶(TH)免疫阳性细胞(ir)的表达.结果:与假手术组比较,模型组synphilin-1-ir阳性细胞表达显著增加,而TH-ir阳性细胞显著减少;与模型组比较,siRNA组synphilin-1-ir阳性细胞表达显著减少,而TH-ir阳性细胞显著增加.结论:Synphilin-1在6-OHDA诱导的PD大鼠黑质神经元损伤机制中起一定作用,synphilin-1 siRNA具有神经保护作用,能为帕金森病的治疗提供新的思路和方法.     

帕金森病大鼠Caspase-8及TH蛋白表达的相关性实验研究

目的利用动物模型探讨Caspase-8和TH蛋白表达与帕金森病(Parkinson disease,PD)的关系。方法60只SD大鼠随机分为两组,大鼠帕金森病模型组:随机分3、7、14、21、28d五组,均通过脑立体定向注入6-羟多巴,均在处死前腹腔注入阿卟吗啡观察30分钟大鼠旋转的次数,连续至第四周每分钟大于6次者为成功的帕金森氏病模型;正常对照组:立体定向注入抗坏血酸生理盐水。处死后制作石蜡切片用免疫组化法检测Caspase-8、酪氨酸羟化酶(TH)蛋白的阳性细胞数。结果纹状体和黑质神经细胞存在细胞凋亡,与对照组存在显著性差异,且Caspase-8蛋白表达在大鼠纹状体和黑质中细胞3d组为最高,其后很快下降,但显著高于对照组。而TH蛋白表达在大鼠纹状体和黑质细胞中对照组为最高,在PD组很快下降,但显著低于对照组。TH蛋白表达减少及Caspase-8蛋白表达增加呈正相关。结论6-OHDA能诱发大鼠黑质细胞凋亡,Caspase-8蛋白表达是帕金森病动物模型发病机制的重要启动因素。     

帕金森病模型黑质Caspase 3的表达

目的研究帕金森病(PD)动物模型黑质Caspase 3的表达,以探讨帕金森病的凋亡机制。方法40只SD大鼠随机分为两组,PD组:立体定向注入6-羟多巴,术后1周腹腔注入阿朴吗啡观察30 min大鼠旋转的次数,连续至第四周每分钟大于6次者为成功的帕金森氏病模型;正常对照组:立体定向注入黑质抗坏血酸生理盐水。处死后制作快速冰冻切片用免疫组化检测Caspase 3阳性细胞数,用原位杂交法检测Caspase 3 mRNA的阳性细胞数。结果免疫组化显示PD组术侧黑质Caspase 3阳性神经元数量较正常对照组明显升高,原位杂交显示PD组术侧黑质Caspase 3 mRNA阳性神经元数量较正常对照组明显升高。结论PD动物模型Caspase 3的表达显著提高,提示Caspase 3参与PD的发病机制。     

反义IL-6寡核苷酸对实验性系膜增生性肾炎IL-6、IL-6mRNA表达的影响

[目的]观察反义IL-6寡核苷酸经左肾动脉注入系膜增殖性肾小球肾炎SD大鼠后对肾小球系膜区IL-6 mRNA及蛋白水平的影响。[方法]30只SD大鼠接受葡萄球菌内毒素静脉注射、牛血清白蛋白隔日口服、完全弗氏佐剂及不完全弗氏佐剂皮下注射,并加做肝左叶切除术,制作系膜增生性肾小球肾炎动物模型。经FAM标记的反义寡核苷酸肾小球定位后,将IL-6反义、正义、及错义寡核苷酸由左肾动脉注入肾脏,并用右肾作对照,分别作常规组织病理,免疫组织化学及原位杂交检测。[结果]FAM标记的IL-6反义寡核苷酸经左肾动脉注入后1h,系膜区可检测到少量表达,6 h后肾系膜区表达明显增加。反义寡核苷酸治疗组的SD大鼠IL-6。IL-6 mRNA表达被显著抑制(P<0.01),但IL-6正义及错义寡核苷酸对IL-6、IL-6 mRNA表达无明显影响(P>0.05)。3组蛋白尿及病理改变均无显著差异(P>0.05)。[结论]脂质体介导的反义寡核苷酸(IL-6)能在肾小球表达。IL-6反义寡核苷酸治疗显著抑制系膜增生性肾炎SD大鼠IL-6、IL-6 mRNA表达,但IL-6正义、及错义寡核苷酸无此作用。     

高压氧结合抗震颗粒对帕金森病大鼠黑质细胞凋亡表达的影响

目的 研究高压氧(HBO)结合抗震颗粒对实验性帕金森病(PD)大鼠黑质细胞凋亡表达的影响.方法 通过右侧中脑黑质腹侧被盖区注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)的方法建立PD模型.免疫组化法测定治疗后假手术组、模型组及HBO结合抗震颗粒组PD大鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)及Bcl-2、...     

高压氧结合抗震颗粒影响帕金森病大鼠黑质细胞凋亡表达

目的 研究高压氧(HBO)结合抗震颗粒对实验性帕金森病(PD)大鼠黑质细胞凋亡表达的影响。方法 通过右侧中脑腹侧被盖区注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)的方法建立PD模型。免疫组化法测定治疗后假手术组、模型组及HBO结合抗震颗粒组PD大鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元、胶原纤维酸性蛋白（GFAP）及Bc1-2、Bax蛋白的表达。结果 PD模型组进行HBO结合抗震颗粒治疗后TH阳性细胞数量及Bcl-2蛋白表达均明显升高（P< 0.05)、GFAP平均光密度及Bax蛋白的表达明显降低（P< 0.05)。 结论 HBO结合抗震颗粒能明显抑制黑质神经元细胞凋亡的表达,对PD大鼠有保护性治疗作用。