两种方法建立人胃癌裸鼠移植瘤模型的比较

目的采用两种不同方法建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法人胃癌细胞悬液直接注射法:将处于对数生长期的人胃癌细胞悬液接种于裸鼠皮下;胃癌裸鼠瘤转瘤法:将胃癌细胞悬液接种入裸鼠,待肿瘤生长直径在8 mm左右时,处死裸鼠并取其肿瘤组织边缘新鲜的组织,接种于裸鼠皮下,形成皮下移植瘤。观察并比较两种方法所建立的模型肿瘤移植成功率及瘤体生长速度,实验结束后MSP法检测移植瘤组织中Reprimo基因的甲基化水平并采用免疫组织化学法检测移植瘤的Ki-67和CD31分子表达。结果细胞悬液直接注射组的瘤体成瘤速度较瘤转瘤组慢(P<0.05);瘤转瘤组的Reprimo基因甲基化水平及Ki-67和CD31的表达均高于细胞悬液直接注射组(P<0.05)。结论胃癌裸鼠皮下瘤转瘤法的瘤体生长状况优于胃癌细胞悬液直接注射法。     

超声引导瘤内注射凝血酶对兔VX2皮下移植瘤的影响

目的探讨超声引导下瘤内注射凝血酶对实体肿瘤生长的影响。方法48只新西兰大白兔建立VX2皮下移植瘤模型,随机平均分为6组：对照组（0．9％生理盐水）;超声引导下瘤内注射凝血酶50U／ml、100U／ml、150U／ml、200U／ml和250U／ml组。在实验前1d,实验第3、14天监测凝血功能变化情况,同时三维超声观测肿瘤生长情况及肿瘤血管生成变化;处死瘤兔后,肿瘤组织行用TUNEL法检测细胞凋亡指数。结果随着浓度增高,抑瘤率及凋亡指数均增加（P〈0．05）,200U／ml与250U／ml组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,凝血功能中纤维蛋白原（FIB）先升高后降低,凝血酶原时间（PT）、活化的部分凝血活酶时间（APTT）无明显变化。结论超声引导下瘤内注射凝血酶可抑制肿瘤生长,且具有一定的浓度依赖性,凝血功能不发生显著改变。     

基于细胞支架大鼠原位移植肝癌模型的制备

背景:超声引导下瘤细胞注射法已应用于制备大鼠原位移植肝癌模型,但成瘤率不高,且易形成腹腔种植.目的:实验拟采用细胞基质胶Matrigel包裹瘤细胞,超声引导下注射到大鼠肘内制各肝癌模型,以提高成瘤率,减少腹腔种植.设计、时间及地点:验证性实验,于2007-12/2008-03在福建医科大学药学院药理系动物实验室完成.材料:取Wistar大鼠20只,按随机数字表法分为瘤细胞悬液注射组和瘤细胞Matrigel注射组,每组10只.方法:取大鼠皮下移植的Walker-256肿瘤组织匀浆制备细胞悬液,在超声引导下注射到10只瘤细胞悬液组大鼠肝实质内,每只2×108个细胞.瘤细胞与Matrigel混合后,超声引导下注射到瘤细胞Matrigel组10只大鼠肝内.主要观察指标:定期超声监测大鼠肝脏移植肿瘤生长情况,移植后第21天麻醉处死动物进行人体解剖,取肿瘤行病理组织学检查.结果:瘤细胞Matrigel组10只大鼠有9只形成了肝脏移植肿瘤灶,仅1只大鼠发生腹腔种植.瘤细胞悬液组10只大鼠仅6只出现肝脏移植肿瘤灶,而发生腹腔种植达6只.大鼠原位移植肝癌病理切片显示典型的肿瘤组织形态学特征.结论:采用Matrigel作为细胞支架制各大鼠肝癌模型可提高成瘤率,明显降低腹腔种植的发生率,是一种较为理想的大鼠原位移植肝癌模型制备方法.     

超声评估人乳腺癌原位移植裸鼠模型的初步研究

目的超声评估并选择最佳的MDA-MB-231细胞系裸鼠人乳腺癌模型。方法 54只裸鼠随机分为2组,每组27只,分别采用乳腺区皮下细胞悬液注射法、组织悬液注射法制作小鼠乳腺癌原位移植模型,比较两组的成瘤时间、出瘤率、肿瘤表面坏死出现时间,并用超声观察肿瘤的部分生物学形态改变。结果组织悬液注射法操作简便经济,成瘤时间短,肿瘤大小不规则,但有坏死和溃疡;细胞悬液注射法成瘤时间长,肿瘤形态规则,血管丰富。结论超声可以作为一种检测动物成瘤模型的手段,操作直观、立体,可视化。两种原位种植建立的裸鼠乳腺癌模型各有特点适合不同的实验需求。     

SD大鼠皮下移植瘤模型的建立

目的建立SD大鼠W256细胞皮下移植瘤模型。方法将W256细胞冻融后传代,调整细胞浓度后接种于大鼠腹腔,建立大鼠腹腔积液模型;以浓缩的腹腔积液接种于大鼠右侧后腿皮下,建立大鼠皮下移植瘤模型,定期测量肿瘤大小;接种2周后切取长势良好肿瘤2个,并于试验结束后切取所有肿瘤,行组织病理学检查。结果所有接种SD大鼠全部接种成功,生长良好,肿瘤周围无感染病灶;肿瘤接种后第4天可触及皮下小结节,接种后第3周肿瘤平均体积2.0cm×2.5cm×3.2cm,最大肿瘤长径达5.5cm;2周后切取肿瘤结节,大体观察可见多个灰白色结节,质软;光学显微镜下瘤细胞排列密集,细胞间无间质,瘤细胞呈团状或片状排列,核大,核仁明显,核分裂相多见,肿瘤内可见丰富的小血管;实验结束时肿瘤内均见不同程度片状坏死。结论采用浓缩腹腔积液注射法制作SD大鼠W256皮下移植瘤模型方法简单、成瘤率高,能为实验提供理想的动物模型。     

SD大鼠皮下移植瘤模型的建立

目的建立SD大鼠W256细胞皮下移植瘤模型。方法将W256细胞冻融后传代,调整细胞浓度后接种于大鼠腹腔,建立大鼠腹腔积液模型;以浓缩的腹腔积液接种于大鼠右侧后腿皮下,建立大鼠皮下移植瘤模型,定期测量肿瘤大小;接种2周后切取长势良好肿瘤2个,并于试验结束后切取所有肿瘤,行组织病理学检查。结果所有接种SD大鼠全部接种成功,生长良好,肿瘤周围无感染病灶;肿瘤接种后第4天可触及皮下小结节,接种后第3周肿瘤平均体积2.0cm×2.5cm×3.2cm,最大肿瘤长径达5.5cm;2周后切取肿瘤结节,大体观察可见多个灰白色结节,质软;光学显微镜下瘤细胞排列密集,细胞间无间质,瘤细胞呈团状或片状排列,核大,核仁明显,核分裂相多见,肿瘤内可见丰富的小血管;实验结束时肿瘤内均见不同程度片状坏死。结论采用浓缩腹腔积液注射法制作SD大鼠W256皮下移植瘤模型方法简单、成瘤率高,能为实验提供理想的动物模型。     

宫颈癌移植瘤大鼠动物模型的建立

目的:应用瘤细胞悬液移植法和静脉注射方法将人宫颈癌HELA细胞接种于具有正常免疫功能的大鼠体内建立人的宫颈癌移植瘤模型,观察成瘤时间,肿瘤进行性生长情况和其他实质性器官转移情况.方法:实验于2004-10/2005-06在中国医科大学盛京医院实验动物部及超声科进行.①实验动物:成年雌性Wistar大鼠35只,随机分为皮下注射组10只、腹腔注射组10只、静脉注射组10只、阴性对照组5只.②实验方法:取对数生长期的人宫颈癌HELA细胞.皮下注射组接种2.5×1010L1细胞悬液于大鼠右后肢及背部皮下.腹腔注射组接种2.5×109L-1细胞悬液于腹腔内.静脉注射组由大鼠尾静脉注入2.5×108L1的细胞悬液.没有进行免疫抑制的5只大鼠做阴性对照.⑨实验评估:接种后观察成瘤率、肿瘤生长及播散情况及动物生存期,行超声检查观察肿瘤的二维灰阶表现和肿瘤的血供情况.结果:①皮下注射组7只成瘤,腹腔注射组8只成瘤,静脉注射组10只,在肿瘤生长过程中3只死亡,其余7只全部成瘤.总体成瘤率67%.腹腔种植组及静脉注射组的肿瘤较早出现腹腔脏器转移.皮下注射组成瘤时间较晚,约种植后40 d左右.②3组平均生存时间分别为静脉注射组62.5 d,腹腔注射组78.9 d和皮下注射组84.4 d,差异有显著性意义(P<0.01).③超声检查皮下生长的肿瘤组织呈低回声,椭圆形,内部回声均匀,边界清晰,彩色多谱勒扫查未见彩色血流信号显示.转移较明显的腹腔种植组及静脉注射组大鼠超声检查可见,2周后,肝区内结节表现为椭圆形或不规则形的低或略高回声,内部质地欠均匀,边缘尚清晰,但不是很规则.4周左右于肝区内见异常低回声结节或强回声结节,大小约0.4cm×0.5 cm.肿瘤内部未见明显血流信号,外周可见少许滋养血管.结论:人宫颈癌HELA细胞接种于具有正常免疫功能的大鼠体内建立人的宫颈癌移植瘤模型,具有与人宫颈肿瘤的组织学形态及生物学行为相似的特点,且移植瘤的生长状况、回声类型及血供变化大体符合宫颈癌的一般超声表现特点.     

超声引导下组织块接种制作兔肾VX2瘤模型及传代保存

目的　探讨术中组织块包埋和超声引导下穿刺组织块接种制作兔肾VX2 瘤模型的方法 ,并对这两种方法进行比较。方法　采用剪切法制备兔VX2 瘤组织块悬液 ,应用超声引导下经皮组织块推注法建立 5 8只兔肾VX2 肿瘤模型 ,应用术中组织块包埋法建立 8只兔肾VX2 肿瘤模型 ,应用自然组织谐波技术观察肿瘤生长 ,并观察浅表淋巴结转移及动物的一般情况 ;3周内自然死亡者立即行尸体解剖 ,未死者种植后 3周处死行尸体解剖 ,获得兔肾VX2 肿瘤标本 ,进行HE切片染色。结果　两种方法建立的兔肾VX2 瘤模型组织学表现与传代种兔相同 ;术中包埋组种植成功率 5 0 % ,超声引导下穿刺组种植成功率 96.5 5 % ;术中包埋组腹壁种植率 2 5 % ,超声引导下穿刺组腹壁种植率 5 .17%。结论　超声引导下穿刺法建立兔肾VX2 肿瘤模型方法简便 ,成功率高 ,更适用于各种研究的需要     

多西环素对大肠癌裸鼠移植瘤的影响

目的观察金属蛋白酶组织抑制剂（多西环素）对大肠癌裸鼠皮下移植瘤的影响，为大肠癌的治疗寻求一个新的可能治疗途径。方法将10只BALB／C（nu／nu）裸鼠随机分为对照组和实验组，每组5只，将人大肠癌细胞系LoVo细胞种植入裸鼠皮下，建立裸鼠皮下人大肠癌移植瘤模型。对照组应用生理盐水瘤内多点直接注射；实验组应用多西环素瘤内多点直接注射。记录2组裸鼠肿瘤大小，观察肿瘤生长曲线，计算生长抑瘤率。结果第26天肿瘤体积大小和肿瘤生长抑制率：实验组分别为（889．8±80．8）mm^3和49．7％，对照组分别为（1755．8±203．8）mm^3和0，2组比较，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论多西环素可以抑制大肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长，有可能腐用于大肠痛的治疗。     

兔VX2肝癌模型的建立及超声监测

目的探讨兔VX2肝癌模型建立的方法及超声技术对肿瘤的监测。 方法采用瘤块肝内种植法建立起兔VX2肝癌模型,病理解剖验证VX2瘤株在兔肝脏的成瘤情况;用2D、CDFI及超声造影观察肿瘤的大小、回声、血流灌注及生长特点,从而评估超声在兔VX2肝癌模型监测中的应用价值。 结果采用瘤块移植法成功建立起稳定的兔VX2肝癌模型,成瘤率为93.33%;超声能准确测量肿瘤的大小,能实时、准确地监测肝内肿瘤的回声变化及肿瘤血管的分布情况;超声造影肿瘤为典型的“快进快出”表现。 结论瘤块移植法是一种操作简单、成瘤率高的建立兔VX2肝癌模型的方法;超声技术能准确、方便、无创地监测肝脏肿瘤及肿瘤血管;采用超声影像技术对兔VX2肝癌生长特征的监测结果为临床利用该模型来评价诊治肝癌的新技术、新疗法的疗效提供了监测方法。     

ICSI- ET黄体中期应用GnRHa对妊娠结局的影响

目的 单精子卵胞浆内显微注射-胚胎移植周期中黄体中期应用促性腺素释放激素激动剂(GnRHa)是否提高临床妊娠率.方法 300个单精于卵胞浆内显微注射-胚胎移植周期的病例,随机分为实验组及对照组,移植日为单数日做为实验组,移植后3d单次皮下注射GnRHa 0.1 mg,对照组不予以注射GnRHa,比较2组患者在GnRHa用药前后血清激素水平、种植率及临床妊娠率的变化.结果 实验组临床妊娠率为51.25%,对照组为45.00%;GnRHa组和对照组激素水平、种植率及临床妊娠率相当.结论 单精子卵胞浆内显微注射-胚胎移植周期中黄体中期应用GnRHa,其种植率、临床妊娠率、流产率、活胎出生率、卵巢过度刺激综合征(OHSS)没有显著改善.     

ICSI-ET黄体中期应用GnRHa对妊娠结局的影响

目的单精子卵胞浆内显微注射-胚胎移植周期中黄体中期应用促性腺素释放激素激动剂（GnRHa）是否提高临床妊娠率。方法 300个单精子卵胞浆内显微注射-胚胎移植周期的病例,随机分为实验组及对照组,移植日为单数日做为实验组,移植后3 d单次皮下注射GnRHa 0.1 mg,对照组不予以注射GnRHa,比较2组患者在GnRHa用药前后血清激素水平、种植率及临床妊娠率的变化。结果实验组临床妊娠率为51.25%,对照组为45.00%;GnRHa组和对照组激素水平、种植率及临床妊娠率相当。结论单精子卵胞浆内显微注射-胚胎移植周期中黄体中期应用GnRHa,其种植率、临床妊娠率、流产率、活胎出生率、卵巢过度刺激综合征（OHSS）没有显著改善。     

大鼠原位肾脏移植模型的建立

背景：目前已有多种大鼠肾移植模型建模方式,但在移植时间、移植效果等方面都存在各种问题。目的：探讨建立稳定、可靠的大鼠原位肾脏移植模型的方法。方法：以SD大鼠为供体Wistar大鼠为受体行原位肾移植术。供体肾动脉、肾静脉在自制橡胶垫片上分别与受体的肾动脉、肾静脉端端吻合,供体输尿管膀胱瓣与受体膀胱吻合。将实验动物随机分为2组,对照组移植后每日腹腔内输注1mLD-hanks液;环孢素A组移植后每日皮下注射环孢素A15mg/kg。记录大鼠生存时间并于移植后第3,5,10天测定血肌酐值,移植后第10天,光镜下观察移植肾病理改变。结果与结论：大鼠原位肾脏移植成功率为85%。移植后第5,10天环孢素A组血清肌酐值显著低于对照组（P〈0.05）。环孢素A组大鼠肾移植后存活天数明显长于对照组（P〈0.05）,移植肾病理可见排斥明显减轻。提示该模型稳定性强、重复性好,具有较高的成功率。     

肝动脉化疗栓塞联合重组人血管内皮抑制素对兔VX2肝癌生长和转移的抑制

目的探讨肝动脉化疗栓塞联合重组人血管内皮抑制索对肝癌生长和转移的抑制。方法经皮穿刺瘤块推送法建立VX2肝癌模型。将建模成功的60只荷瘤兔随机分为3组：G1组接种后第2l天行TACE,术后每天静脉推注生理盐水,连续7d;（32组接种后第2l天行TACE,术后每天静脉推注重组人血管内皮抑制素．连续7d。G3组接种后第21天行肝动脉造影,术后每天静脉推注生理盐水,连续7d。比较各组干预后体积与干预前体积之比（V2／V1）、肿瘤转移率、微血管密度（MVD）的差异。结果13只瘤兔因干预后7d之内死亡而被剔除,各组完成所有指标观察的瘤兔只数：14,15,18。各组平均V2／V1：1．216±0．304,1．211±O．314,4．723±1．562,单因素方差分析示差异有显著性（P=0．000）,LSD法两两比较,G3组与Gl组、G3组与G2组差异有显著性,而G2组与GI组差异无显著性。各组转移率分别为：78．57％,33．33％,77．78％,卡方检验示差异有显著性（P=0．012）,卡方分割示G2组与Gl组、G2组与G3组差异有显著性,而Gl组与G3组差异无显著性。各组平均MVD：75．2．4-11．0,21．7±10．1．61．34-12-3,单因素方差分析差异有显著性（P=0．000）,LSD法两两比较各组差异皆有显著性（P〈0．01）。结论TACE联合重组人血管内皮抑制素治疗肝癌对肿瘤生长的抑制并不优于单纯TACE,但可抑制血管新生,抑制肿瘤转移。     

兔VX2肝移植瘤模型制作改良及MSCT评价

目的探讨建立兔VX2肝移植瘤模型的改进方法,并采用多层螺旋CT进行效果观察。方法选取40只兔分组建立肝移植瘤模型。对瘤块植入模型进行多方面的改良,并采用传统的肿瘤细胞注射法进行对照。于术后7、14、21d分别进行多层螺旋CT扫描及病理学检查观察成瘤效果。结果改良瘤块植入法建立兔VX2肝移植瘤模型术后7d成瘤率为100％,表现为肝内类圆形的肿块,肿瘤直径随术后时间逐渐增大。而瘤细胞注射法术后21d成瘤率60％,且形状不规整,多伴有转移。结论相比传统的注射法,改进的移植瘤模型方法成瘤形状规则、速度快、成瘤率高、手术难度低,可更好地用于影像学及放射介入学的基础研究。     

超声监护下免疫抑制大鼠肝癌模型的建立

目的　用超声监测免疫抑制大鼠肝癌模型的建立情况。方法　将CBRH 7919大鼠肝癌细胞注入经60 Co照射和氢化可的松联合免疫抑制的 1只大鼠皮下 ,2周后将生成的肿块接种于免疫抑制的 2 0只大鼠肝内。超声下观察肝内肿块的灰阶和彩色多普勒表现。 2周后处死动物 ,并对肝内肿块做常规病理检查。结果　 3只肝内接种的大鼠在实验中死亡 ,余 17只接种 2周后超声检查均可见肝内肿块生成 ,肿块直径平均为 (1.0 2± 0 .15 )cm。大鼠肝癌原位模型成功率为85 %。病理证实肿块均为肝细胞癌。结论　通过免疫抑制可建立大鼠CBRH 7919肝细胞癌模型 ,超声可监测此模型的生长状况。这为肝癌影像学诊断和局部治疗提供了一种较理想的肝细胞癌模型。     

多烯磷脂酰胆碱对奥沙利铂治疗人胃癌裸鼠模型效果影响及其机制

目的探讨人胃癌裸鼠模型中不同剂量多烯磷脂酰胆碱（易善复）对奥沙利铂治疗效果的影响及其机制。方法将人胃癌细胞SGC-7901接种于裸鼠皮下,建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型。随机分为6组：葡萄糖对照组、奥沙利铂组、易善复组及高、中、低剂量易善复联合奥沙利铂组。连续给药2周,停药24 h后处死裸鼠,称取瘤质量,计算抑瘤率,并检测用药后裸鼠的血常规及肝肾功能,检测瘤组织中超氧化物歧化酶（SOD）含量,流式细胞仪测定细胞周期,免疫组化法测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、错配切除修复蛋白1（ERCC-1）和谷胱甘肽巯基转移酶（GST-π）的表达。结果与对照组比较,奥沙利铂有明显抑制肿瘤生长的作用,易善复不能抑制肿瘤生长,各剂量易善复联合奥沙利铂组可抑制肿瘤生长,但与奥沙利铂组比较抑瘤率低;各剂量易善复联合奥沙利铂组随易善复浓度升高,SOD水平升高,caspase-3、ERCC-1和GST-π的表达下降。结论易善复对奥沙利铂化疗疗效有拮抗作用,且呈剂量依赖性,可能与调节caspase-3、ERCC-1和GST-π表达有关。